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CETis 62
Practica 2
Cromatografía en papel
Bioquímica
Laboratorio clínico
Grado 6 grupo E
Integrantes
Gutiérrez Prieto Natali
López Villafaña Vanesa Michel
Macias Moreno Ana Isabel
Zavala Laguna Andrea
Zavala Quiroz Guadalupe Roberto
INTRODUCCION
Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con deferentes colores:
clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo) y xantofilas
(amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.
Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos
llamados pigmentos. El color que presenta un determinado órgano vegetal
depende generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación
de ellos. Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están
estrechamente ligados a las actividades fisiológicas del propio vegetal.
Estos pigmentos se encuentran en el interior de las células vegetales
específicamente en una organela llamada cloroplasto.
Los cloroplastos son simplemente plástidos que contienen pigmentos clorofílicos.
Los compuestos clorofílicos están ligados químicamente con las estructuras
internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado
coloidal.
FUNDAMENTO
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad es disolventes
apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas
asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de
cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un
disolvente orgánico (etanol), ya que las mas solubles se desplazaran a mayor
velocidad, pues acompañaran fácilmente al disolvente a medida que este
asciende.
Las menos solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro. Aparecerán, por
tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo dela
material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica
según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos.
Estas bandas poseerán diferente grosor dependiendo de la abundancia del
pigmento en la disolución.
MATERIALES
Mortero Éter etílico
Tijeras Alcohol metílico puro
Espinacas u hojas verdes Capsula de Petri o vaso de precipitados
Embudo con papel de filtro Capilar o micropipeta
Tira de papel cromatografico WathmAn
TECNICA
1. Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las
nervaduras más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter etílico.
Espinacas
Betabel
2. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde
intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica).
3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es
suficiente con 2 o3 cc. de solución de pigmentos).
4. Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta una
altura de 0.5 a 1cm.
5. Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y unos 10 a 15
cm de altura.
6. Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10 gotas de
solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya
secándose el éter etílico y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se
pondrán siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lápiz), situado
a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel.
7. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y colocarlo en la placa de petri con
la mancha de pigmento a 1 cm de la superficie del eluyente. Podemos
sustituir la placa petri por un vaso de precipitados y fijar el papel
cromatográfico con una pinza a un soporte horizontal colocado en el borde
del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio).
8. Espera unos 30 minutos y observar.
9. Repite el mismo procedimiento con otro vegetal.
RESULTADOS
La espinaca presenta los siguientes pigmentos :
 Clorofila B
 Clorofila A
 Xantofilas
 Caroteno
El betabel presenta el pigmento:
 Betanina
Observaciones
En esta práctica pudimos observar que fue más fácil obtener liquido de las
espinacas que del betabel ya que al betabel para obtener más liquido necesitamos
ponerle aún más de éter etílico pata poder obtener liquido de este y así poder
observar los pigmentos que poseían ambos vegetales.
Tuvimos que tomar en cuenta mucho la colocación de nuestros puntos de la
solución de pigmentos ya que teníamos que ponerlos debidamente para lograr
observar que tipo de pigmentos contenía cada vegetal.
Otro punto muy importante que tuvimos mucho en cuenta fue que nuestro papel
cromatografía no estuviese tocando ninguna de las paredes del vaso de
precipitado para que este no alterara nuestros resultados.
También pudimos observar que ninguno de los dos vegetales poseía cloroplastos
iguales por lo tanto ni pigmentos iguales.
Las espinacas poseía cloroplastos mezcla de pigmentos clorofila-b porque
observamos que al terminar tenía un color verde y el betabel poseía cloroplastos
mezcla de pigmentos xantofilas porque este tenía un color amarillo anaranjado.
Conclusiones.
Nuestra conclusión al terminar la práctica fue que obtuvimos unos resultados
correctamente ya que no hubo percances para terminar nuestro trabajo.
Llegando a la conclusión de que las gotas que habíamos puesto en el papel
cromatografía de los vegetales diluidos con el éter etílico se fueron expandiendo
debido a que el metanol alcanzo las gotas y fue este el que hizo que se
expandieran, esto era necesario de que pasara para así poder obtener los
resultados de los vegetales observando los cloroplastos y el color de los
pigmentos que cada uno poseía. Tomando en cuenta que:
Los cloroplastos son orgánulos que solo las células verdes las poseen y estas solo
están presentes en los vegetales.
CUESTIONARIO
1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor:
carotenos, clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento
corresponde a cada banda.
Carotenos: amarillo
Clorofila a: verde intenso
Clorofila b: verde
Xantofila: amarillo anaranjado
2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?
Porque la clorofila no es soluble en agua y si en solventes orgánicos por lo tanto
se utiliza el éter porque es un solvente económico y que no interactúa con la
clorofila.
3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?
Caroteno y xantofila
4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda ¿Qué significado
tiene?
CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico
llamado más específicamente β-caroteno (leáse beta-caroteno). Este es el
carotenoide más abundante en la naturaleza y el más importante para la dieta
humana, por lo que da su nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos.
XANTOFILAS: Se conoce como xantófilas (del griego xantos(ξανθος) = rubio y
filos(φυλλο) = hoja) (anteriormente "filoxantinas"). Estos pigmentos, más
resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y
parduzcos a las hojas secas.
5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.
Es la técnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior análisis,
basadas en que las distintas sustancias que forman los componentes de una
mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre un soporte.
6. Explica que es el beta-caroteno. Cuáles son los beneficios de su consumo.
El betacaroteno es la principal fuente de vitamina A segura, esencial para el
crecimiento y desarrollo normales, el funcionamiento de sistema inmunitario y la
vista. El betacaroteno tiene propiedades antioxidantes que pueden ayudar a
neutralizar los radicales libres, moléculas reactivas del oxígeno que pueden dañar
los lípidos de las membranas celulares y el material genético, lo cual puede
conducir al desarrollo de enfermedades cardiovasculares y cáncer
Bibliografías
Separacióndepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://ies.mariasarmie
nto.climantica.org/files/2011/12/imaxen7.pdf 26 febrero de 2016
separaciondepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://arcosyoly-
imaginacionsinlimites.blogspot.mx/ 26 febrero de 2016
cromatografiahttp://www.areaciencias.com/quimica/cromatografia.html 26 febrero
2016
betacartenohttp://www.nutri-facts.org/esp/carotenoides/betacaroteno/funciones-
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Practica bioquimica (2)

  • 1. CETis 62 Practica 2 Cromatografía en papel Bioquímica Laboratorio clínico Grado 6 grupo E Integrantes Gutiérrez Prieto Natali López Villafaña Vanesa Michel Macias Moreno Ana Isabel Zavala Laguna Andrea Zavala Quiroz Guadalupe Roberto
  • 2. INTRODUCCION Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con deferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones. Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos llamados pigmentos. El color que presenta un determinado órgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación de ellos. Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están estrechamente ligados a las actividades fisiológicas del propio vegetal. Estos pigmentos se encuentran en el interior de las células vegetales específicamente en una organela llamada cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plástidos que contienen pigmentos clorofílicos. Los compuestos clorofílicos están ligados químicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado coloidal.
  • 3. FUNDAMENTO Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad es disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol), ya que las mas solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues acompañaran fácilmente al disolvente a medida que este asciende. Las menos solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro. Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo dela material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.
  • 4. MATERIALES Mortero Éter etílico Tijeras Alcohol metílico puro Espinacas u hojas verdes Capsula de Petri o vaso de precipitados
  • 5. Embudo con papel de filtro Capilar o micropipeta Tira de papel cromatografico WathmAn
  • 6. TECNICA 1. Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las nervaduras más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter etílico. Espinacas Betabel
  • 7. 2. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica). 3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente con 2 o3 cc. de solución de pigmentos). 4. Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta una altura de 0.5 a 1cm. 5. Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y unos 10 a 15 cm de altura. 6. Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10 gotas de solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya secándose el éter etílico y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se
  • 8. pondrán siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lápiz), situado a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel. 7. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y colocarlo en la placa de petri con la mancha de pigmento a 1 cm de la superficie del eluyente. Podemos sustituir la placa petri por un vaso de precipitados y fijar el papel cromatográfico con una pinza a un soporte horizontal colocado en el borde del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio). 8. Espera unos 30 minutos y observar. 9. Repite el mismo procedimiento con otro vegetal. RESULTADOS La espinaca presenta los siguientes pigmentos :  Clorofila B  Clorofila A  Xantofilas  Caroteno El betabel presenta el pigmento:  Betanina
  • 9. Observaciones En esta práctica pudimos observar que fue más fácil obtener liquido de las espinacas que del betabel ya que al betabel para obtener más liquido necesitamos ponerle aún más de éter etílico pata poder obtener liquido de este y así poder observar los pigmentos que poseían ambos vegetales. Tuvimos que tomar en cuenta mucho la colocación de nuestros puntos de la solución de pigmentos ya que teníamos que ponerlos debidamente para lograr observar que tipo de pigmentos contenía cada vegetal. Otro punto muy importante que tuvimos mucho en cuenta fue que nuestro papel cromatografía no estuviese tocando ninguna de las paredes del vaso de precipitado para que este no alterara nuestros resultados. También pudimos observar que ninguno de los dos vegetales poseía cloroplastos iguales por lo tanto ni pigmentos iguales. Las espinacas poseía cloroplastos mezcla de pigmentos clorofila-b porque observamos que al terminar tenía un color verde y el betabel poseía cloroplastos mezcla de pigmentos xantofilas porque este tenía un color amarillo anaranjado.
  • 10. Conclusiones. Nuestra conclusión al terminar la práctica fue que obtuvimos unos resultados correctamente ya que no hubo percances para terminar nuestro trabajo. Llegando a la conclusión de que las gotas que habíamos puesto en el papel cromatografía de los vegetales diluidos con el éter etílico se fueron expandiendo debido a que el metanol alcanzo las gotas y fue este el que hizo que se expandieran, esto era necesario de que pasara para así poder obtener los resultados de los vegetales observando los cloroplastos y el color de los pigmentos que cada uno poseía. Tomando en cuenta que: Los cloroplastos son orgánulos que solo las células verdes las poseen y estas solo están presentes en los vegetales.
  • 11. CUESTIONARIO 1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor: carotenos, clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento corresponde a cada banda. Carotenos: amarillo Clorofila a: verde intenso Clorofila b: verde Xantofila: amarillo anaranjado 2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila? Porque la clorofila no es soluble en agua y si en solventes orgánicos por lo tanto se utiliza el éter porque es un solvente económico y que no interactúa con la clorofila. 3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes? Caroteno y xantofila 4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda ¿Qué significado tiene? CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico llamado más específicamente β-caroteno (leáse beta-caroteno). Este es el carotenoide más abundante en la naturaleza y el más importante para la dieta humana, por lo que da su nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos. XANTOFILAS: Se conoce como xantófilas (del griego xantos(ξανθος) = rubio y filos(φυλλο) = hoja) (anteriormente "filoxantinas"). Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas. 5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel. Es la técnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior análisis, basadas en que las distintas sustancias que forman los componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre un soporte. 6. Explica que es el beta-caroteno. Cuáles son los beneficios de su consumo.
  • 12. El betacaroteno es la principal fuente de vitamina A segura, esencial para el crecimiento y desarrollo normales, el funcionamiento de sistema inmunitario y la vista. El betacaroteno tiene propiedades antioxidantes que pueden ayudar a neutralizar los radicales libres, moléculas reactivas del oxígeno que pueden dañar los lípidos de las membranas celulares y el material genético, lo cual puede conducir al desarrollo de enfermedades cardiovasculares y cáncer Bibliografías Separacióndepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://ies.mariasarmie nto.climantica.org/files/2011/12/imaxen7.pdf 26 febrero de 2016 separaciondepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://arcosyoly- imaginacionsinlimites.blogspot.mx/ 26 febrero de 2016 cromatografiahttp://www.areaciencias.com/quimica/cromatografia.html 26 febrero 2016 betacartenohttp://www.nutri-facts.org/esp/carotenoides/betacaroteno/funciones- para-la-salud/ 26 febrero 2016