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UNIVERSIDAD CATÓLICA
DE CUENCA
UNIDAD ACADEMICA DE
SALUD Y BIENESTAR
FACULTAD DE MEDICINA
CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA I
CATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO.
INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ
ANDREA ESCANDON
ANDRES FLORES
PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”
TINCIÒN
 Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+)
en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de los
colorantes básicos.
 Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizan
para teñir el material de fondo para proporcionar un contraste de
color
TINCIÒN DE GRAM
 Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-).
 Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento con
alcohol.
 Se expone ala muestra a violeta de cristal.
 Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal.
TINCIÒN DE GRAM
 En la decoloración con alcohol o acetona el complejo:
• Queda retenido en las bacterias Gram positivas y
• Se pierde en las Gram negativas.
 Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).
TINCIÒN DE GRAM
 El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de:
• Del microorganismo
• De las condiciones del cultivo.
• Habilidades tintoriales del microscopista.
TINCIÒN DE GRAM
TINCIÒN DE GRAM
TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida
y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos,
como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre
otros.
Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un
bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.
TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN
TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN
 Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de resistir a la decoloración por
ácidos y alcoholes, lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la pared
celular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.
 Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosis
Principal causante de la tuberculosis.
TINCIÒN DE ZIEHL
NEELSEN Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes.
 Se tiñen con carbolfucsina básica.
 Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol.
 Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno.
 Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.
Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:
ácido periódico 58% carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Preparar
mezclando en el orden dado:
0,5 g fucsina básica
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5 cc etanol absoluto
28,5 g cristales de fenol derretidos
hematoxilina
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alcohol de 35º
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Técnica
PROCEDIMIENTO
Etapa 1:
 PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO
Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a
otro del portaobjetos para lograr una película homogénea
Etapa 2
 CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA
Etapa 3
 CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS
Etapa 4
 LAVAR CON AGUA
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Solución decolorante: alcohol ácido
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 LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE
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 OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS
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Tinciones de GRAM y ZIEHL NEELSEN

  • 1. UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA UNIDAD ACADEMICA DE SALUD Y BIENESTAR FACULTAD DE MEDICINA CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA I CATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO. INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ ANDREA ESCANDON ANDRES FLORES PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”
  • 2. TINCIÒN  Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+) en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de los colorantes básicos.  Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizan para teñir el material de fondo para proporcionar un contraste de color
  • 3. TINCIÒN DE GRAM  Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-).  Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento con alcohol.  Se expone ala muestra a violeta de cristal.  Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal.
  • 4. TINCIÒN DE GRAM  En la decoloración con alcohol o acetona el complejo: • Queda retenido en las bacterias Gram positivas y • Se pierde en las Gram negativas.  Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).
  • 5. TINCIÒN DE GRAM  El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de: • Del microorganismo • De las condiciones del cultivo. • Habilidades tintoriales del microscopista.
  • 9. La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos, como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros. Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
  • 10. TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN  Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de resistir a la decoloración por ácidos y alcoholes, lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la pared celular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.  Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosis Principal causante de la tuberculosis.
  • 11. TINCIÒN DE ZIEHL NEELSEN Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes.  Se tiñen con carbolfucsina básica.  Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol.  Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno.  Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.
  • 12. Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes: ácido periódico 58% carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado: 0,5 g fucsina básica 50 cc agua destilada 5 cc etanol absoluto 28,5 g cristales de fenol derretidos hematoxilina alcohol ácido 1%: alcohol de 35º ácido clorhídrico Técnica
  • 14. Etapa 1:  PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una película homogénea
  • 15. Etapa 2  CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA
  • 16. Etapa 3  CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS
  • 17. Etapa 4  LAVAR CON AGUA
  • 18. Etapa 5  CUBRIR CON SOLUCIÓN DECOLORANTE DURANTE 3 MINUTOS Solución decolorante: alcohol ácido
  • 19. Etapa 6  LAVAR CON AGUA
  • 20. Etapa 7  CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE 1 MINUTO
  • 21. Etapa 8  LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE
  • 22. ETAPA 10  OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS
  • 23. INTERPRETACION DE RESULTADOS Células Color Bacilos y microorganismos Alcohol Acido-Resistentes. Rojo brillante Gérmenes, otros organismos y material de soporte. Diferentes tonalidades de azules