Лекция об артефактах гистологического процесса и методах борьбы с ними.

1. Артефакты
Причины и устранение

2. Гистологический процесс
2
Микротомия
Взятие
материала
ЗаливкаФиксация
Вырезка
Проводка
Транспорт
ировка
Окраска Заключение

3. 1. Ошибки на стадии взятия или
вырезки.
● Выглядят как сдавление, разрыв ткани,
деформация или фрагментация.
● Всегда необратимы, иногда ставят под
вопрос диагностическую ценность
материала!
3

4. Разновидности. Механическое травмирование.
Сдавление пинцетом,
использование тупого
режущего инструмента,
воздействие лазером и
прочее. Самый
распространенный вид.
4

5. Разновидности. Хранение, шовный материал.
● Хранение в таре, не
соответствующей по
размеру и вызванное
этим сдавление, а
также дефекты
фиксации.
● Фрагменты шовного
материала.
5

6. 2. Ошибки при фиксации
● Влияют на все последующие стадии
(плохо зафиксированный материал не
может быть хорошо проведен и хорошо
окрашен).
● При грубых ошибках фиксации материал
становится непригодным к исследованию!
6

7. Разновидности. Аутолиз.
Аутолиз тканей, происходящий при
нарушении правил взятия материала
и фиксации. Причиной аутолиза
помимо недостаточной фиксации
может быть фиксация формалином
высокой концентрации, приводящая к
переуплотнению материала по краям
и плохой фиксации в глубине.
Аутолиз является наименее
благоприятным, но достаточно
распространённым дефектом.
7

8. Разновидности. Формалиновый пигмент.
Артефакты, являющиеся следствием
химической реакции формальдегида
и фиксируемой ткани. Это, например,
появление чёрного пигмента при
образовании солей с гемоглобином,
что впоследствии потребует
дифференциальной диагностики с
меланином и гемосидерином, или
артефактоы рыжего цвета при
выпадении солей муравьиной
кислоты.
8

9. Разновидности. Неравномерная фиксация
Неравномерное окрашивание
из-за неравномерной
фиксации.
9

10. 3. Ошибки при проводке
● Встречаются чаще всего, но в большом
проценте случаев связаны изначально с
плохой фиксацией.
● Частично обратимы.
10

11. Разновидности. “Пересушенный материал”
● Избыточная длительность
пребывания в спирте.
● Излишнее использование
нагрева (слишком высокая
температура),
● Неправильный подбор сред и
прочее.
Помимо трещин, видных
невооруженным глазом, и больших
затруднений при получении среза,
микроскопически видно
уменьшение и деформация
тканевых структур.
11

12. Разновидности. Недостаточная проводка.
Чаще встречается при работе с
плотной тканью (опухоли,
связки) либо тканью,
содержащей значительное
количество жира.
● Любая ткань, вызывающая
затруднения в проводке,
требует выработки
отдельного протокола.
12

13. 13
Плохо проведенный образец.

14. 4.Ошибки при заливке
● Неправильная ориентация образца
● Термические повреждения
● Механические повреждения
14

15. 5. Ошибки при микротомии.
Наибольшие сложности возникают
в следующих случаях:
1) Избыточно твердый материал
(недостаточная
декальцинация,
переуплотнение при фиксации,
плотная ткань)
2) Избыточно мягкий, плохо
проведенный материал.
● Правильно подбирать тип
лезвия!
● Не допускать наличия в одном
блоке разных по плотности
тканей! 15

16. 16
Разновидности. Мех.повреждения.

17. 17
Разновидности. Контаминация.

18. 6. Ошибки при окраске
● На предварительных этапах:
плохое подсушивание или
пересушивание, неправильное
закрепление на стекле
● Редко: сильное
перекрашивание или
недокрашивание
● Часто: участки с артефактами
вследствие неправильно
подобранного протокола
● Часто: артефакты при
использовании старых или
некачественных красителей
18

19. Разновидности. Плохая депарафинация.
Неравномерность
окраски из-за
недостаточной
депарафинации.
Как избежать?
● Чистота реагентов
● Правильный
протокол и внешние
условия (t)
19

20. Разновидности. Использование белка.
● Появление
фоновой окраски
при использовании
адгезионных сред
● Пустая трата
времени и сил
● Низкая
технологичность
20

21. 7. Ошибки при заключении
● Инородные частицы (чаще
всего - чешуйки кожи с
пальцев, пыль)
● Воздушные пузыри
● Кристаллизация среды для
заключения
● “Паутина” (Sakura Film)
● Недостаточная
дегитратация иили
просветление.
21

22. Не получается? - зовите на помощь
На рынке появилась услуга консультаций для
гистологических лабораторий. БиоВитрум - первые (и
пока единственные), кто может это предложить.
22

23. Сообщество лаборантов-гистологов
23

24. Не получается? - зовите на помощь!
На сегодняшний день никто не может предложить
решение Ваших проблем у Вас в лаборатории:
●Решение поставленной задачи. Только практика.
●Повышение скорости и качества работы.
●Эргономика.
●Передовые Lean-технологии, 3D-моделирование.
●Введение точек контроля для закрепления
результата.
24

25. География
25

26. Спасибо за внимание!
Вопросы?
Предложения?
26

27. Контакты
Гистоклаб:
histoclub.ru
8 (800) 700-92-46 (бесплатный)
БиоВитрум:
biovitrum.ru 8 (495) 787-40-46
27