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Clase 3 tema 3 toxicología analítica

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Clase 3 tema 3 toxicología analítica

  1. 1. Toxicología Analítica Anabel G. Tatis R. CIIMET, Universidad de Panamá
  2. 2. Toxicología Analítica  Campo fundamental de la toxicología, pues en cualquiera de las ramas de ésta, se deben utilizar los métodos de análisis químicos, entre otros.  Es la aplicación de los instrumentos de la Química Analítica a la estimación cualitativa o cuantitativa de sustancias químicas que pueden ejercer efectos adversos sobre organismos vivos.
  3. 3. Toxicología Analítica  La sustancia química que se determina (analito) es un xenobiótico que puede haber quedado alterado o transformado por acciones metabólicas del organismo.  La muestra que va a analizarse tiene una matriz que consta de líquidos corporales o tejidos sólidos del organismo, y por lo tanto, la identidad del analito así como la matriz en la que se encuentra, representa un auténtico reto para el químico analítico.
  4. 4. Toxicología Analítica  Es la detección, identificación y medición de los xenobióticos o compuestos tóxicos en muestras biológicas y afines.  Los métodos analíticos están disponibles para una amplia gama de compuestos: estos pueden ser productos químicos, plaguicidas, productos farmacéuticos, drogas de abuso y toxinas naturales.
  5. 5. Aplicaciones  En el diagnóstico, la gestión, el pronóstico y la prevención de la intoxicación.  En la evaluación de la exposición tras incidentes con productos químicos, drogas terapéuticas de seguimiento, análisis forense, y el seguimiento de las drogas de abuso.  En la investigación, p.e. en la determinación de las propiedades farmaco- y toxicocinéticas de sustancias o la eficacia de nuevos regímenes de tratamiento.
  6. 6. Diferencia de la Toxicología Analítica con la Toxicología Experimental  La toxicología experimental es conocida también como la Evaluación de la Toxicidad.  Objetivo: Determinar el grado y tipo de toxicidad (aguda, crónica, acción irritante, neurotoxicidad, etc.) de una determinada sustancia, siguiendo protocolos estandarizados, generalmente para cumplir con requisitos legales para su registro, comercialización y utilización posterior.  Utiliza pruebas de toxicidad generales y específicas.
  7. 7. Recolección, conservación y envío de muestras
  8. 8. Introducción  La selección, preparación y remisión de la muestra debe hacerse en conformidad con la ley nacional o la normativa internacional.  Existen diversos protocolos que deben seguirse para llevar a cabo estos procedimientos.  Las muestras deben rotularse y sellarse correctamente, con datos apropiados mínimos y legibles, utilizando marcadores de tinta indeleble, iniciando inmediatamente cadena de custodia.
  9. 9. La Cadena de Custodia Es el procedimiento documental que pretende asegurar a través de un seguimiento trazable, fundado en la responsabilidad asumida por los intervinientes, que la muestra que se procesa en el laboratorio toxicológico no sea alterada, sustituida o cambiada, entre el momento en que ésta se recoge hasta el momento que finaliza el análisis.
  10. 10. Tipos de Muestras Sangre Orina Contenido gástrico Vísceras (hígado, cerebro, riñon, pared gástrica, etc.) Otros: humor vítreo, hisopado nasal, cabellos, uñas, restos óseos, hisopado de las manos, alimentos, etc.
  11. 11. Sangre  Desinfectar la piel (alcohol, solución jabonosa, agua oxigenada o solución de lugol).  La muestra de sangre en dos tubos, uno de ellos con anticoagulante (fluoruro de sodio al 1%, que también es preservador antibacteriano) y el otro sin anticoagulante.  El volumen mínimo recomendable en cada caso será de 10 mL.  Utilizar siempre material nuevo o virgen  La conservación de la muestra se hará en nevera a 4°C.
  12. 12. Muestra de Orina  Es idónea para screening en el caso de no conocer el origen de la intoxicación.  En la detección de consumo de sustancias ilícitas en trabajadores o en casos de dopaje en el deporte.  Un resultado positivo solo indicará el consumo de la sustancia detectada, independientemente del nivel obtenido.  Ventajas: está exenta de proteínas, con lo cual se tienen menos interferencias, y es una muestra abundante, fácil de recolectar y de conservar.
  13. 13.  Volumen de orina no inferior a Muestras de Muestras de 30 mL, en un frasco de polipropileno o similar con cierre Orina Orina hermético, de tapa rosca y sellado con cinta adhesiva.  Conservarla a -20ºC. Se acepta a 4ºC, si el análisis se practica dentro de las 24 a 48 horas posteriores a la toma de muestra.  No agregar ninguna sustancia como conservante.
  14. 14. Pelo  Determinación de metales pesados (As), de drogas (heroína, morfina, lidocaína) y de hidrocarburos aromáticos policíclicos, y recientemente para escopolamina.  Ventajas: permite la detección de las sustancias en una amplia franja de tiempo y es muy fácil de obtener.  Se toma aprox. 1 cm de mechón lo más próximo al cuero cabelludo, en el caso de vello pubiano o axilar se obtiene al ras de la piel, dicha muestra deberá ser colocada en sobre de papel a temperatura ambiente.
  15. 15. Humor vítreo  Forma novedosa para la búsqueda de ciertos tóxicos como el etanol, barbitúricos, benzodiazepinas, antidepresivos, opiáceos, cannabinoles, anfetaminas, LSD, anestésicos.  Ventajas: no se contamina fácilmente con otros fluidos y su descomposición es más retardada en el cadáver.
  16. 16. Lineamientos básicos en el manejo y envío de las muestras 1. Muestras identificadas con los datos relevantes del caso. 2. Frascos, viales, tubos, etc. tapados herméticamente, con sus tapas y tapones asegurados con cinta adhesiva. 3. Si son varios tubos se aseguran con ligas y se colocan en bolsas cerradas. 4. Si son órganos se colocan en papel aluminio dentro de una doble bolsa de plástico.
  17. 17. Continuación… 5. Las laminillas se deben enviar secas, envueltas individualmente en papel de China y cada una estar identificada. 6. Para el envío, las muestras se colocan en cajas térmicas resistentes, empaquetándolas con relleno de papel, plástico o madera (viruta). 7. Si se envían por avión, asegurarse que el paquete viaje en el área presurizada para evitar la pérdida (evaporación) de los especímenes.
  18. 18. Continuación… 8. Deben ir una carta que especifique qué tipo de prueba se solicita y otros parámetros. Y se colocan dentro del paquete en una bolsa de plástico sellada.  Los datos deben coincidir.  Escribir con letra de molde, de preferencia a máquina y enviar en original.  La cantidad de muestra enviada debe estar de acuerdo a los estudios solicitados.  Indicar en el paquete en un lugar visible si éste contiene muestras de cólera, rabia, poliomielitis, aguas residuales, citología, paludismo, VIH, etc..
  19. 19. Continuación… 9. Las muestras se deben remitir lo más pronto posible después de obtenidas para asegurar su adecuada preservación. 10. Es conveniente que se informe del envío al departamento de recepción de muestras del laboratorio toxicológico.
  20. 20. Sistemática Analítica Toxicológica  Conjunto de procedimientos analíticos, concisos, bien planeados, encaminados a poner de manifiesto la presencia o ausencia de sustancias de relevancia toxicológica en una muestra determinada.  Comprende varias etapas:  Pre-tratamiento de las muestras.  Extracción/Purificación.  Análisis instrumental.
  21. 21. Técnicas de análisis en laboratorios de toxicología  Pre-tratamiento de las muestras:  homogeneización,  desproteinización,  hidrólisis, de conjugados, etc.  Extracción/Purificación:  técnicas de extracción líquido- líquido (LLE),  extracción en fase sólida (SPE),  extracción de espacio de cabeza (HSE),  microextracción en fase sólida (SPME), etc.
  22. 22.  Análisis instrumental:  Cromatografía Líquida de alta presión (HPLC),  Cromatografía de Gases acopladas a diferentes detectores,  Espectrometría de Absorción Atómica con horno de grafito y de generación de hidruros,  Espectrometría de Emisión Atómica con acoplamiento de plasma inductivo.
  23. 23. Pruebas preliminares • Técnicas de screening (inmunoensayos y cromatografía en capa fina) de análisis rápido, no específico, para poner de manifiesto la presencia o ausencia de un grupo de analitos. • Son orientativas, por lo que hay que confirmar el resultado con técnicas analíticas confirmatorias que ofrecen un principio fisicoquímico diferente. • Se utilizan la absorción atómica para metales, HPLC y cromatografía de gases acoplada a detectores específicos.
  24. 24.  Las técnicas deben desarrollarse garantizando control de calidad a través de la calibración de equipos, validación de los métodos y controles externos.  En los países en desarrollo, debido a la falta de recursos, pudiera realizarse con la participación de laboratorios privados y centros de investigación de educación superior, asegurando en todo momento la cadena de custodia.
  25. 25. Muchas gracias por su atención!

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