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Violeta rojo y bilis glucosa agar

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  1. 1. Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar. Medio de cultivo utilizado para la detección y el recuento de enterobacterias totales, a partir de alimentos. Fundamento En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano,las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora acompañante Gram positiva, la glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. Todas las enterobacterias fermentan la glucosa, esto produce la acidificación del medio y el viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada. Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones Peptona de carne 7.0 Extracto de levadura 3.0 Cloruro de sodio 5.0 Suspender 41,5 g del polvo por litro de agua Glucosa 10.0 destilada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar a Mezcla de sales biliares 1.5 ebullición hasta disolución total. NO AUTOCLAVAR. Rojo neutro 0.03 Violeta cristal 0.002 Agar 15.0 pH final: 7.3 ± 0.2 Siembra - Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestra directa o de la dilución apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45 ºC, agitar por rotación y dejar solidificar. Luego, agregar una sobrecapa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp. - Para propósitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con gas de un medio para coliformes. Incubación A 35-37 ºC durante 18-24 horas, en aerobiosis. Resultados Microorganismos Crecimiento Producción de pigmento Escherichia coli ATCC 25922 Bueno Rojo púrpura Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno Rojo púrpura Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido --- Características del medio Medio preparado: púrpura rojo. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 ºC. Presentación x 100g :Código: B02-172-05 x 500g :Código: B02-172-06

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