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CÁNDIDA Dra. ELIANA PATRICIA CORDERO DORIA R1 GINECO - OBSTETRICA   Revisión del docente
Reino: Hongo División :  Deuteromycota Clase:  Blastomycetes Familia:  Cryptococcaceae Género:  Candida Especies:  albicans  (como la más frecuente y virulenta) y otras especies. CA SAS RINCON, G. (1989): Micología General. Caracas. Universidad Central de Venezuela. Ediciones de la Biblioteca, pp. 243-247. TAXONOMIA .
HISTORIA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
HÁBITAT ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
EPIDEMIOLOGÍA ,[object Object],[object Object],[object Object],Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 SCOPE;  adaptado Pfaller MA et al:  Diagn Microbiol Infect Dis 31:327-332, 1998 5 Pseudomona Aeruginosa 7 5.3 Klebsiella 6 6.4 E.Coli 5 8 Cándida 4 11.7 Enteococcus 3 16.7 Staphilococcus Aureus 2 32.3 Estafilococcus Coag(-) 1 %Cepa Patógeno N.
Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 C. Rugosa C. Dubliniensis C. Lusitaniae C. Krusei 5% C. Tropicalis Lactantes y niños C. Parapsilosis Adultos mayores.  Emergente  x resistencia intrinseca y adquirida a los azoles C. Glabrata Todas las infecciones genitales, cutáneas, bucales.  Lactantes y niños. 25-50% cavidad oral de:  hospitalizados, infectados con VIH, dentadura postiza, DM, sometidos a terapia anti-neo y ABTerapia. C. Albicans 15-95%
FACTORES  DE RIESGO EDAD ↑ INMUNO SUPRESIÓN PKOs Anti  Fungicos Control Infecciones ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
Perspectiva de la candidemia nosocomial Neoplasia  Hematológica Neutropenia Cirugía AD Edades extremas ABT 2 veces por cada uno, Catéter central 7 veces  Hemodiálisis 18 veces, Colonización por  Cándida 10 veces UCI >3 días 10 veces Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
Formas  de Infección ENDÓGENA EXÓGENA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Stuar T. W. Microbiología Medica. 779-784
Biología - Morfología ,[object Object]
[object Object],[object Object],Macola, S. Candida. En: Llop, A., Valdés-Dapeno, M., Zuazo, J. L. (2001). Microbiología y parasitología médicas.  Vol I. Habana: Editorial  Ciencias  Médicas; . p. 501-7.
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Blastoconidias Clamidiosporas Hifas Seudohifas
ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Núcleo Citosol Plasmalema Rodeado por membrana (Eucariótico);  multicromosómico; haploide o diploide según conjugación;  contiene área rica en ARN (nucleolo) Complejo;  varias organelas:  núcleo, mitocondrias, AdeG, endosomas, RE bien definido... Glucoproteínas, lípidos y ergosterol;  =  membranas células mamiferos, contienen colesterol
ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Pared  Celular Forma y tamaño Fisiología Múltiples capas;  composición:  quitina, PS glicanos, mananos, glicomananos;  péptidos;  algunos producen cápsula PS extracelular Levaduras:  ovales o redondas;  2-10  ﺳ m diametro y varios cientos de micras de longitud Respiración oxidativa;  capacidad limitada anaerobiosis (fermentación);  metabolismo heterotrófico;  producen metabolitos primarios (citrato y etanol) y 2os (amanitina, aflatoxina); tiempo duplicaión largo
ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Propiedades de  tinción Gram positivos; Cortes histopatológicos:  pared célula micótica puede teñirse con procedimientos especiales (metenamina-plata o ácido periódico Schiff)
PATOGENICIDAD ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],> RIESGO > PROBABILIDAD > MULTIPLICACIÓN
[object Object],[object Object],[object Object],Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 779-785
FACTORES DE VIRULENCIA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Castrillón Laura, Palma Alejandro.  Factores de virulencia en  Cándida sp.   Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27
morfología celular ,[object Object],Castrillón Laura, Palma Alejandro.  Factores de virulencia en  Cándida sp.   Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27 ,[object Object],[object Object]
Actividad enzimática extracelular ,[object Object],[object Object],[object Object],Castrillón Laura, Palma Alejandro.  Factores de virulencia en  Cándida sp.   Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27 proteasas ,  fosfolipasas  y  lipasas .
proteasas ,[object Object],[object Object],Digestión de moléculas proteínicas para adquirir nutrientes Digestión de moléculas del sistema inmunitario del huésped para evitar o resistir el ataque antimicrobiano de éste. D igerir o distorsionar las membranas del huésped y facilitar la adhesión, la invasión a tejidos
fosfolipasas ,[object Object],[object Object],[object Object]
Factores de adhesión ,[object Object],[object Object],Castrillón Laura, Palma Alejandro.  Factores de virulencia en  Cándida sp.   Dermatología, RevMex 2005; 49:12-27
Als,  Hwp1p, Int1p y Mnt1p. ,[object Object],[object Object],[object Object]
Biopelícula ,[object Object],[object Object],[object Object]
MECANISMOS DE DEFENSA DEL HUÉSPED Pte sano alto grado de resistencia innata a la colonización. Poca virulencia intrínseca Huésped deprimido : SIDA, VIH(+) MNT Irradiados Tto cititóxico (Neo y tranplantes) DEBILIDAD: los comensales se vuelvan patógenos Pérdida de las barreras naturales Fuga hacia la circulación de levaduras y seudohifas Fagocitósis Estimulación de Eosinófilos,  Neutrófilos  y Monocitos C3 ↑ IgG -Ag glucoprotéicos de la pared -Inhibir aglutinación levaduras
CLASIFICACIÓN CLÍNICA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Cutáneas:   intertrigo, paroniquia, onicomicósis. Muco-cutáneas:   boqueras, muguet, perianal. Crónicas:   candidiásis muco-cutánea, Enfermedad granulomatosa. Sistémicas:   Fungemia, endocarditis, Inf Pulmonar, GU, meningitis, endoftalmitis MICÓSIS  OPORTUNISTAS:  CÁNDIDA C. Albicans C. Stellatoidea C. Tropicalis C. Parapsilosis C. Kefyr (Pseudotropicalis) C. Guillermondii C. Krusei C. Glabrata  (Torulopsis Glabrata) C. Viswanathii C. Lusitaniae Causas variables: mecánicas (trauma, oclusión);  ABT de amplio espectro, ACO. SIDA, avitaminosis;  embarazo. Defectos de LT y macrófagos. Inmunodepresión:  endocrinopatías, DM, quemaduras;  catéteres IV, abuso drogas IV. Condiciones subyacentes Categorías Clínicas Agente Etiológico
 
DIAGNÓSTICO Demostración directa a  partir de muestras Cx Demostración en  medios  de cultivo Costras Exudados Cortes de tejidos Lavado con OH de Potasio 10-20% + Blanco de calco-flúor (quitina) Tinciones  Biológicas Cultivos Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 486-489.  Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
Stuar T. W. Microbiología Medica. 739 Dx CARACTERISTICAS EN MUESTRAS CLÍNICAS Y CULTIVO Tubo germinal CA, CD, CS). Asimilacion de CHO. Morfo en agar de harina de maíz. Grupos de blastoconidias, seudohifas, clamidiosporas terminales Morfología variable. Colonias pálidas, blancas, marrones y opacas.  Lisas o rugosas. Levaduras de gemación ovaladas, 2-6micm.  Hifas y seudohifas Otras pruebas de identificación Micro Macro Morfo microscópica y en muestra Cx Características morfo en cultivo (Sabouraud)
[object Object],[object Object],[object Object]
Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 784 - - + + + C. Stellatoidea - - - + + C. Parapsilósis - + - + + C. Tropicalis - + + + + C. Álbicans Cápsula Filamentación Clamidiosporas Seudomicelio Crec 37C ID CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE  CÁNDIDA spp
S (+) - + - - + + + + - - - + - - + + + + CT R - - (+) - - - + + + - - - - - - - + - + CS R - - + - - + + + + - - - - - - + + (+) + CA S - - + - - + + + + - - - - - - (+) (+) (+) + CP Act Cel Mal Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu Ino O Mel Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu UTILIZACIÓN FERMENTACIÓN ID CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS DE  CÁNDIDA spp
Blastosporas y tubos germinales de  Candida albicans   teñidos con blanco de calcoflúor, x1.000
Hifas y blastosporas de  Candida albicans  en frotis oral   (Tinción de PAS, x   400)
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Colonias de  Candida albicans  en agar glucosado   de Sabouraud. Medios de cultivo apropiados para el aislamiento de  Cándida
b) Medios con antibacterianos y/o cicloheximida SDA o BHIA con uno o varios de los compuestos siguientes:  cloranfenicol (> 16 µg/ml),  Gentamicina (5-100 µg/ml),  penicilina (20 U/ml),  Estreptomicina (40 µg/ml),  ciprofloxacino (5 µg/ml) y  Cicloheximida (500 µg/ml).
c) Medios selectivos y diferenciales • CHROMagar Candida (CHROMagar Co.):   se trata de medios diseñados para aislar e identificar simultáneamente spp  Candida,  tras 24-48 h de incubación a 35-37ºC.  El fundamento es la capacidad de hidrolizar sustratos cromogénicos en presencia de un indicador • Candiselect (BioRad):   medio selectivo que permite la identificación de  C. Albicans  (colonias lisas azules).  Candida tropicalis  puede desarrollar un color similar, pero con una morfología muy diferente. Colonias verdes de  Candida albicans   en el medio cromógeno CHROMagar Candida. a: Junto a colonias de otras especies  de levaduras de interés médico
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
• Candida ID (bioMérieux).  •Albicans ID (bioMérieux) Medio cromógeno Candida ID (bioMérieux).  a:  Candida albicans  (colonias azules);  b:  Candida tropicalis  (colonias rosas).   ,[object Object],[object Object],[object Object]
• Chromalbicans agar (Biolife). Aspecto desarrollado por colonias crecidas en  Chromalbicans Agar (37 °C, 24h).  Las colonias de  C. albicans  desarrollan una pigmentación azul uniforme; las de  C. tropicalis  son blancas y de tamaño menor mientras que las de otras especies de  Candida  son blancas y pequeñas.
Stuar T. W. Microbiología Medica. 742 Gen de Actina Gen de quitina sintetasa Gen p450 Genes de ARNr D-arabinitol CLG/FID enzimático Espectroscopía de masas Enolasa Ac AntiEnolasa EIA, IF Mananos LA, RIA, EIA Β -(1-3) glucanos Quitina Espectrofotometría Sec de ADN genómico Metabolitos Ag citoplasmáticos Componentes de la pared o cápsula MARCADORES ANTIGÉNICOS, BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES
El (1-3) ß-D-glucano   es un componente de la pared celular de la mayoría de los   hongos, exceptuando  C. neoformans  y zigomicetos, que es capaz de activar la vía de   la  c oagulación de los amebocitos de  Limulus

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Candidiasis Factores Virulencia

  • 1. CÁNDIDA Dra. ELIANA PATRICIA CORDERO DORIA R1 GINECO - OBSTETRICA Revisión del docente
  • 2. Reino: Hongo División : Deuteromycota Clase: Blastomycetes Familia: Cryptococcaceae Género: Candida Especies: albicans (como la más frecuente y virulenta) y otras especies. CA SAS RINCON, G. (1989): Micología General. Caracas. Universidad Central de Venezuela. Ediciones de la Biblioteca, pp. 243-247. TAXONOMIA .
  • 3.
  • 4.
  • 5.
  • 6. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 C. Rugosa C. Dubliniensis C. Lusitaniae C. Krusei 5% C. Tropicalis Lactantes y niños C. Parapsilosis Adultos mayores. Emergente x resistencia intrinseca y adquirida a los azoles C. Glabrata Todas las infecciones genitales, cutáneas, bucales. Lactantes y niños. 25-50% cavidad oral de: hospitalizados, infectados con VIH, dentadura postiza, DM, sometidos a terapia anti-neo y ABTerapia. C. Albicans 15-95%
  • 7.
  • 8. Perspectiva de la candidemia nosocomial Neoplasia Hematológica Neutropenia Cirugía AD Edades extremas ABT 2 veces por cada uno, Catéter central 7 veces Hemodiálisis 18 veces, Colonización por Cándida 10 veces UCI >3 días 10 veces Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
  • 9.
  • 10.
  • 11.
  • 12.
  • 13. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Núcleo Citosol Plasmalema Rodeado por membrana (Eucariótico); multicromosómico; haploide o diploide según conjugación; contiene área rica en ARN (nucleolo) Complejo; varias organelas: núcleo, mitocondrias, AdeG, endosomas, RE bien definido... Glucoproteínas, lípidos y ergosterol; = membranas células mamiferos, contienen colesterol
  • 14. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Pared Celular Forma y tamaño Fisiología Múltiples capas; composición: quitina, PS glicanos, mananos, glicomananos; péptidos; algunos producen cápsula PS extracelular Levaduras: ovales o redondas; 2-10 ﺳ m diametro y varios cientos de micras de longitud Respiración oxidativa; capacidad limitada anaerobiosis (fermentación); metabolismo heterotrófico; producen metabolitos primarios (citrato y etanol) y 2os (amanitina, aflatoxina); tiempo duplicaión largo
  • 15. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Propiedades de tinción Gram positivos; Cortes histopatológicos: pared célula micótica puede teñirse con procedimientos especiales (metenamina-plata o ácido periódico Schiff)
  • 16.
  • 17.
  • 18.
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  • 20.
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  • 26. MECANISMOS DE DEFENSA DEL HUÉSPED Pte sano alto grado de resistencia innata a la colonización. Poca virulencia intrínseca Huésped deprimido : SIDA, VIH(+) MNT Irradiados Tto cititóxico (Neo y tranplantes) DEBILIDAD: los comensales se vuelvan patógenos Pérdida de las barreras naturales Fuga hacia la circulación de levaduras y seudohifas Fagocitósis Estimulación de Eosinófilos, Neutrófilos y Monocitos C3 ↑ IgG -Ag glucoprotéicos de la pared -Inhibir aglutinación levaduras
  • 27.
  • 28. Cutáneas: intertrigo, paroniquia, onicomicósis. Muco-cutáneas: boqueras, muguet, perianal. Crónicas: candidiásis muco-cutánea, Enfermedad granulomatosa. Sistémicas: Fungemia, endocarditis, Inf Pulmonar, GU, meningitis, endoftalmitis MICÓSIS OPORTUNISTAS: CÁNDIDA C. Albicans C. Stellatoidea C. Tropicalis C. Parapsilosis C. Kefyr (Pseudotropicalis) C. Guillermondii C. Krusei C. Glabrata (Torulopsis Glabrata) C. Viswanathii C. Lusitaniae Causas variables: mecánicas (trauma, oclusión); ABT de amplio espectro, ACO. SIDA, avitaminosis; embarazo. Defectos de LT y macrófagos. Inmunodepresión: endocrinopatías, DM, quemaduras; catéteres IV, abuso drogas IV. Condiciones subyacentes Categorías Clínicas Agente Etiológico
  • 29.  
  • 30. DIAGNÓSTICO Demostración directa a partir de muestras Cx Demostración en medios de cultivo Costras Exudados Cortes de tejidos Lavado con OH de Potasio 10-20% + Blanco de calco-flúor (quitina) Tinciones Biológicas Cultivos Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 486-489. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
  • 31. Stuar T. W. Microbiología Medica. 739 Dx CARACTERISTICAS EN MUESTRAS CLÍNICAS Y CULTIVO Tubo germinal CA, CD, CS). Asimilacion de CHO. Morfo en agar de harina de maíz. Grupos de blastoconidias, seudohifas, clamidiosporas terminales Morfología variable. Colonias pálidas, blancas, marrones y opacas. Lisas o rugosas. Levaduras de gemación ovaladas, 2-6micm. Hifas y seudohifas Otras pruebas de identificación Micro Macro Morfo microscópica y en muestra Cx Características morfo en cultivo (Sabouraud)
  • 32.
  • 33. Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 784 - - + + + C. Stellatoidea - - - + + C. Parapsilósis - + - + + C. Tropicalis - + + + + C. Álbicans Cápsula Filamentación Clamidiosporas Seudomicelio Crec 37C ID CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
  • 34. S (+) - + - - + + + + - - - + - - + + + + CT R - - (+) - - - + + + - - - - - - - + - + CS R - - + - - + + + + - - - - - - + + (+) + CA S - - + - - + + + + - - - - - - (+) (+) (+) + CP Act Cel Mal Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu Ino O Mel Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu UTILIZACIÓN FERMENTACIÓN ID CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
  • 35. Blastosporas y tubos germinales de Candida albicans teñidos con blanco de calcoflúor, x1.000
  • 36. Hifas y blastosporas de Candida albicans en frotis oral (Tinción de PAS, x 400)
  • 37.
  • 38. b) Medios con antibacterianos y/o cicloheximida SDA o BHIA con uno o varios de los compuestos siguientes: cloranfenicol (> 16 µg/ml), Gentamicina (5-100 µg/ml), penicilina (20 U/ml), Estreptomicina (40 µg/ml), ciprofloxacino (5 µg/ml) y Cicloheximida (500 µg/ml).
  • 39. c) Medios selectivos y diferenciales • CHROMagar Candida (CHROMagar Co.): se trata de medios diseñados para aislar e identificar simultáneamente spp Candida, tras 24-48 h de incubación a 35-37ºC. El fundamento es la capacidad de hidrolizar sustratos cromogénicos en presencia de un indicador • Candiselect (BioRad): medio selectivo que permite la identificación de C. Albicans (colonias lisas azules). Candida tropicalis puede desarrollar un color similar, pero con una morfología muy diferente. Colonias verdes de Candida albicans en el medio cromógeno CHROMagar Candida. a: Junto a colonias de otras especies de levaduras de interés médico
  • 40.
  • 41.
  • 42. • Chromalbicans agar (Biolife). Aspecto desarrollado por colonias crecidas en Chromalbicans Agar (37 °C, 24h). Las colonias de C. albicans desarrollan una pigmentación azul uniforme; las de C. tropicalis son blancas y de tamaño menor mientras que las de otras especies de Candida son blancas y pequeñas.
  • 43. Stuar T. W. Microbiología Medica. 742 Gen de Actina Gen de quitina sintetasa Gen p450 Genes de ARNr D-arabinitol CLG/FID enzimático Espectroscopía de masas Enolasa Ac AntiEnolasa EIA, IF Mananos LA, RIA, EIA Β -(1-3) glucanos Quitina Espectrofotometría Sec de ADN genómico Metabolitos Ag citoplasmáticos Componentes de la pared o cápsula MARCADORES ANTIGÉNICOS, BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES
  • 44. El (1-3) ß-D-glucano es un componente de la pared celular de la mayoría de los hongos, exceptuando C. neoformans y zigomicetos, que es capaz de activar la vía de la c oagulación de los amebocitos de Limulus