2. Reino: Hongo División : Deuteromycota Clase: Blastomycetes Familia: Cryptococcaceae Género: Candida Especies: albicans (como la más frecuente y virulenta) y otras especies. CA SAS RINCON, G. (1989): Micología General. Caracas. Universidad Central de Venezuela. Ediciones de la Biblioteca, pp. 243-247. TAXONOMIA .
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6. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151 C. Rugosa C. Dubliniensis C. Lusitaniae C. Krusei 5% C. Tropicalis Lactantes y niños C. Parapsilosis Adultos mayores. Emergente x resistencia intrinseca y adquirida a los azoles C. Glabrata Todas las infecciones genitales, cutáneas, bucales. Lactantes y niños. 25-50% cavidad oral de: hospitalizados, infectados con VIH, dentadura postiza, DM, sometidos a terapia anti-neo y ABTerapia. C. Albicans 15-95%
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8. Perspectiva de la candidemia nosocomial Neoplasia Hematológica Neutropenia Cirugía AD Edades extremas ABT 2 veces por cada uno, Catéter central 7 veces Hemodiálisis 18 veces, Colonización por Cándida 10 veces UCI >3 días 10 veces Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
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13. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Núcleo Citosol Plasmalema Rodeado por membrana (Eucariótico); multicromosómico; haploide o diploide según conjugación; contiene área rica en ARN (nucleolo) Complejo; varias organelas: núcleo, mitocondrias, AdeG, endosomas, RE bien definido... Glucoproteínas, lípidos y ergosterol; = membranas células mamiferos, contienen colesterol
14. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Pared Celular Forma y tamaño Fisiología Múltiples capas; composición: quitina, PS glicanos, mananos, glicomananos; péptidos; algunos producen cápsula PS extracelular Levaduras: ovales o redondas; 2-10 ﺳ m diametro y varios cientos de micras de longitud Respiración oxidativa; capacidad limitada anaerobiosis (fermentación); metabolismo heterotrófico; producen metabolitos primarios (citrato y etanol) y 2os (amanitina, aflatoxina); tiempo duplicaión largo
15. ESTRUCTURA CELULAR FUNGI Propiedades de tinción Gram positivos; Cortes histopatológicos: pared célula micótica puede teñirse con procedimientos especiales (metenamina-plata o ácido periódico Schiff)
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26. MECANISMOS DE DEFENSA DEL HUÉSPED Pte sano alto grado de resistencia innata a la colonización. Poca virulencia intrínseca Huésped deprimido : SIDA, VIH(+) MNT Irradiados Tto cititóxico (Neo y tranplantes) DEBILIDAD: los comensales se vuelvan patógenos Pérdida de las barreras naturales Fuga hacia la circulación de levaduras y seudohifas Fagocitósis Estimulación de Eosinófilos, Neutrófilos y Monocitos C3 ↑ IgG -Ag glucoprotéicos de la pared -Inhibir aglutinación levaduras
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28. Cutáneas: intertrigo, paroniquia, onicomicósis. Muco-cutáneas: boqueras, muguet, perianal. Crónicas: candidiásis muco-cutánea, Enfermedad granulomatosa. Sistémicas: Fungemia, endocarditis, Inf Pulmonar, GU, meningitis, endoftalmitis MICÓSIS OPORTUNISTAS: CÁNDIDA C. Albicans C. Stellatoidea C. Tropicalis C. Parapsilosis C. Kefyr (Pseudotropicalis) C. Guillermondii C. Krusei C. Glabrata (Torulopsis Glabrata) C. Viswanathii C. Lusitaniae Causas variables: mecánicas (trauma, oclusión); ABT de amplio espectro, ACO. SIDA, avitaminosis; embarazo. Defectos de LT y macrófagos. Inmunodepresión: endocrinopatías, DM, quemaduras; catéteres IV, abuso drogas IV. Condiciones subyacentes Categorías Clínicas Agente Etiológico
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30. DIAGNÓSTICO Demostración directa a partir de muestras Cx Demostración en medios de cultivo Costras Exudados Cortes de tejidos Lavado con OH de Potasio 10-20% + Blanco de calco-flúor (quitina) Tinciones Biológicas Cultivos Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 44, 486-489. Stuar T. W. Microbiología Medica. 150-151
31. Stuar T. W. Microbiología Medica. 739 Dx CARACTERISTICAS EN MUESTRAS CLÍNICAS Y CULTIVO Tubo germinal CA, CD, CS). Asimilacion de CHO. Morfo en agar de harina de maíz. Grupos de blastoconidias, seudohifas, clamidiosporas terminales Morfología variable. Colonias pálidas, blancas, marrones y opacas. Lisas o rugosas. Levaduras de gemación ovaladas, 2-6micm. Hifas y seudohifas Otras pruebas de identificación Micro Macro Morfo microscópica y en muestra Cx Características morfo en cultivo (Sabouraud)
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33. Fuente: Pumarola, A. 1999. Microbiología y Parasitología Médica., 784 - - + + + C. Stellatoidea - - - + + C. Parapsilósis - + - + + C. Tropicalis - + + + + C. Álbicans Cápsula Filamentación Clamidiosporas Seudomicelio Crec 37C ID CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
34. S (+) - + - - + + + + - - - + - - + + + + CT R - - (+) - - - + + + - - - - - - - + - + CS R - - + - - + + + + - - - - - - + + (+) + CA S - - + - - + + + + - - - - - - (+) (+) (+) + CP Act Cel Mal Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu Ino O Mel Tre Raf Lac Sac Mal Gal Glu UTILIZACIÓN FERMENTACIÓN ID CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS DE CÁNDIDA spp
35. Blastosporas y tubos germinales de Candida albicans teñidos con blanco de calcoflúor, x1.000
38. b) Medios con antibacterianos y/o cicloheximida SDA o BHIA con uno o varios de los compuestos siguientes: cloranfenicol (> 16 µg/ml), Gentamicina (5-100 µg/ml), penicilina (20 U/ml), Estreptomicina (40 µg/ml), ciprofloxacino (5 µg/ml) y Cicloheximida (500 µg/ml).
39. c) Medios selectivos y diferenciales • CHROMagar Candida (CHROMagar Co.): se trata de medios diseñados para aislar e identificar simultáneamente spp Candida, tras 24-48 h de incubación a 35-37ºC. El fundamento es la capacidad de hidrolizar sustratos cromogénicos en presencia de un indicador • Candiselect (BioRad): medio selectivo que permite la identificación de C. Albicans (colonias lisas azules). Candida tropicalis puede desarrollar un color similar, pero con una morfología muy diferente. Colonias verdes de Candida albicans en el medio cromógeno CHROMagar Candida. a: Junto a colonias de otras especies de levaduras de interés médico
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42. • Chromalbicans agar (Biolife). Aspecto desarrollado por colonias crecidas en Chromalbicans Agar (37 °C, 24h). Las colonias de C. albicans desarrollan una pigmentación azul uniforme; las de C. tropicalis son blancas y de tamaño menor mientras que las de otras especies de Candida son blancas y pequeñas.
43. Stuar T. W. Microbiología Medica. 742 Gen de Actina Gen de quitina sintetasa Gen p450 Genes de ARNr D-arabinitol CLG/FID enzimático Espectroscopía de masas Enolasa Ac AntiEnolasa EIA, IF Mananos LA, RIA, EIA Β -(1-3) glucanos Quitina Espectrofotometría Sec de ADN genómico Metabolitos Ag citoplasmáticos Componentes de la pared o cápsula MARCADORES ANTIGÉNICOS, BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES
44. El (1-3) ß-D-glucano es un componente de la pared celular de la mayoría de los hongos, exceptuando C. neoformans y zigomicetos, que es capaz de activar la vía de la c oagulación de los amebocitos de Limulus