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UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRÁCTICA BF.8.01-02
ESTUDIANTE: Erick Miguel García Matute.
DOCENTE: Dr. Carlos García
CARRERA: Bioquímica y Farmacia.
FECHA DE REALIZACIÒN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 5 de junio del 2017.
CURSO: Octavo Semestre
PARALELO: “A”
Título de la práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de experimentación: Gallina (vísceras)
Vía de administración: Vía intraperitoneal
Volumen de administración: 10 ml de cloroformo
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 8:30 am
Hora de disección: 8:38 am
Hora inicio de destilado: 8:52 am
Hora finalización de destilado: 9:00 am
Hora finalización de la práctica: 11:29 am
1. OBJETIVOS:
1.1 Observar la sintomatología que presenta el pollo luego de la intoxicación
producida por el cloroformo.
1.2 Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de
cloroformo en el destilado de las vísceras del animal de experimentación
(gallina).
2. FUNDAMENTO TEÓRICO:
El cloroformo o triclorometano (CHCl3) es un líquido incoloro de aroma agradable no
irritante y de sabor ligeramente dulce. En el pasado, el cloroformo fue usado como
anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso se ha abandonado debido a su gran
toxicidad hepática y renal. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros
productos químicos. Pequeñas cantidades de cloroformo se forman cuando se
añade cloro al agua.
La intoxicación por cloroformo origina una profunda depresión del SNC. Entra en el
organismo por vía respiratoria, digestiva o dérmica. En humanos puede producir la
10
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO)
UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 2
muerte con la ingestión oral de tan solo 10 ml. Exposiciones prolongadas o repetidas
a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se caracteriza por
necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el
riñón y el corazón.
3. INSTRUCCIONES
 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
 Mantener las mesas de trabajo, limpias y sin productos, libros, cajas o
accesorios innecesarios para el trabajo que se está realizando.
 Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes,
mascarilla, gorro, zapatones.
 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRA
- Vasos de
precipitación
- Pipetas
- Erlenmeyer
- Tubos de
ensayo
- Probeta
- Perlas de
vidrio
- Agitador
- Embudo
- Guantes
- Mascarilla
- Gorro
- Mandil
- Estuche de
disección
- Cronómetro
- Fósforo
- Pinzas
- Cocineta
- Espátula
- Gradillas
- Aparato de
destilación
- Balanza
- Baño María
- Campana de
extracción
- Alcohol 95%
- Nitrato de plata
- Potasa alcohólica
1:10
- Percloruro de
hierro
- B- naftol
- Piridina
- Clorhidrato de
piperazina
- Yodo
- Reactivo de
Benedict
- Destilado de
vísceras de
animal de
experimenta
ción (gallina).
5. ACTIVIDADES A REALIZAR
5.1 Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse.
5.2 Preparar 10 ml de cloroformo.
5.3 Agarrar al animal de experimentación (pollo) por sus patas y mediante una
aguja hipodérmica administrar 8 ml de cloroformo.
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO)
UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 3
5.4 Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los
efectos de la intoxicación.
5.5 Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el animal de
experimentación (pollo) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas
posibles en un vaso de precipitación.
5.6 Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 ml de ácido
tartárico al 4 % y perlas de vidrio.
5.7 Destilar, recoger el destilado en 20 ml de NaOH 0.1 N.
5.8 Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las
reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
6.1 Reacción de Dunas:
Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de
potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCL3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H2O
Se neutraliza la mezcla, y se separan en dos porciones, a una porción se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
6.2 Reacción de Lustgarten:
Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica
concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de
alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es amarillo más o menos oscuro; con
resorsinol la coloración es roja – violácea y con la piridina roja.
6.3 Reacción de Fujiwara:
En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2 mm de
piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos
instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible
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para unos pocos microgramos de cloroformoy es aplicable en la orina de algún sujeto
que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
6.4 Reacción de Rose boom:
Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución de muestra y se agregan unos
pocos miligramos de clorhidrato de piperazina; si el cloroformo está presente en la
muestra,la coloración violeta inicial cambiaa amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
6.5 Reacción de Benedict:
Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de
acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van
desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
7. GRÁFICOS
8. RESULTADOS OBTENIDOS
REACCIÓN DE DUNAS
(Positivo característico)
REACCIÓN DE LUSTGARTEN
(Positivo característico)
1. Cogemos la
muestra.
2. Aplicamos
el tóxico
3. Trituramos las
vísceras y la
llevamos a
destilación
4.
Obtenemos
la solución
madre.
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UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 5
REACCIÓN DE FUJIWARA
(Positivo característico)
REACCIÓN DE ROSEBOOM
(Positivo característico)
REACCIÓN DE BENEDICT
(Positivo característico)
9. CONCLUSIONES
Luego de finalizada la práctica podemos concluir diciendo que se pudo intoxicar las
vísceras de la gallina aplicando una determinada cantidad de cloroformo, para luego
proceder a obtener un destilado de la muestra con la cual se logró realizar las
diferentes reacciones de identificación de cloroformo, dando positivo característico
en todas.
10. RECOMENDACIONES
 Usar el equipo de protección adecuado al momento de manipular ácidos
concentrados ya que podrían sufrir quemaduras.
 Es necesario usar las cámaras de gases para evitar intoxicaciones con los
gases que expulsan los ácidos.
 Lavarse las manos luego de salir del laboratorio.
 Aplicar las normas de bioseguridad para evitar accidentes.
11. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es el cloroformo?
El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente
anestésico, pero poco después se abandonó este uso por su gran toxicidad
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO)
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hepática y renal. Es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón,
extremadamente volátil y muy liposoluble. (Ruiz, 2012)
2. ¿Qué síntomas produce la inhalación de cloroformo?
La inhalación de cloroformo produce irritación de la nariz y la garganta, sequedad
en la boca, sed, una sensación de aturdimiento, desfallecimiento, alucinaciones,
deformación de la percepción, embriaguez, asombro, delirios, falta de aliento,
efectos gastrointestinales y dilatación de las pupilas con disminución de la
reacción a la luz. (Dirección General de Salud Pública, 2008)
3. ¿Cómo podría una persona estar expuesta al cloroformo?
 Tomando agua o bebidas manufacturadas usando agua contaminada con
cloroformo.
 Respirando aire interior o aire libre si el aire contiene cloroformo,
especialmente en el trabajo.
 Comiendo alimentos que contienen cloroformo.
 Por contacto de la piel con cloroformo o agua que contiene cloroformo,
por ejemplo en piscinas.
(Cárdenas, 2005)
4. ¿Qué cantidad ingerida de cloroformo puede dar lugar a una
intoxicación?
La intoxicación por cloroformo en el organismo puede ser por vía respiratoria,
digestiva o dérmica; en humanos puede producir la muerte con la ingestión oral
de tan solo 10 ml. (Ruiz, 2012)
12. ANEXOS
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO)
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13. BIBLIOGRAFÍA
Cárdenas,L. (21 de noviembre de 2005). Estrucplan.Obtenidode Estrucplan:
http://www.estrucplan.com.ar/Producciones/entrega.asp?IdEntrega=1083
DirecciónGeneral de SaludPública.(25de juliode 2008). Consejería de Sanidad.Obtenidode
Consejeríade Sanidad:https://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913-
CLOROFORMO.pdf
Ruiz,F. (2 de febrerode 2012). Uninet.Obtenidode Uninet:
http://tratado.uninet.edu/c100803.html
14. FIRMA
Erick Miguel García Matute
C.I. 0942106576

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Práctica de Laboratorio Nº2: Intoxicación por cloroformo

  • 1. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 1 UNIVERSIDAD TÉCNICADE MACHALA “Calidad, pertinencia y Calidez” D.I. Nº 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 19690 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA BF.8.01-02 ESTUDIANTE: Erick Miguel García Matute. DOCENTE: Dr. Carlos García CARRERA: Bioquímica y Farmacia. FECHA DE REALIZACIÒN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 5 de junio del 2017. CURSO: Octavo Semestre PARALELO: “A” Título de la práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO Animal de experimentación: Gallina (vísceras) Vía de administración: Vía intraperitoneal Volumen de administración: 10 ml de cloroformo TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:30 am Hora de disección: 8:38 am Hora inicio de destilado: 8:52 am Hora finalización de destilado: 9:00 am Hora finalización de la práctica: 11:29 am 1. OBJETIVOS: 1.1 Observar la sintomatología que presenta el pollo luego de la intoxicación producida por el cloroformo. 1.2 Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de cloroformo en el destilado de las vísceras del animal de experimentación (gallina). 2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El cloroformo o triclorometano (CHCl3) es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor ligeramente dulce. En el pasado, el cloroformo fue usado como anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso se ha abandonado debido a su gran toxicidad hepática y renal. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros productos químicos. Pequeñas cantidades de cloroformo se forman cuando se añade cloro al agua. La intoxicación por cloroformo origina una profunda depresión del SNC. Entra en el organismo por vía respiratoria, digestiva o dérmica. En humanos puede producir la 10
  • 2. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 2 muerte con la ingestión oral de tan solo 10 ml. Exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se caracteriza por necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón y el corazón. 3. INSTRUCCIONES  Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.  Mantener las mesas de trabajo, limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se está realizando.  Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones.  Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRA - Vasos de precipitación - Pipetas - Erlenmeyer - Tubos de ensayo - Probeta - Perlas de vidrio - Agitador - Embudo - Guantes - Mascarilla - Gorro - Mandil - Estuche de disección - Cronómetro - Fósforo - Pinzas - Cocineta - Espátula - Gradillas - Aparato de destilación - Balanza - Baño María - Campana de extracción - Alcohol 95% - Nitrato de plata - Potasa alcohólica 1:10 - Percloruro de hierro - B- naftol - Piridina - Clorhidrato de piperazina - Yodo - Reactivo de Benedict - Destilado de vísceras de animal de experimenta ción (gallina). 5. ACTIVIDADES A REALIZAR 5.1 Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse. 5.2 Preparar 10 ml de cloroformo. 5.3 Agarrar al animal de experimentación (pollo) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8 ml de cloroformo.
  • 3. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 3 5.4 Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5.5 Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el animal de experimentación (pollo) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 5.6 Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 ml de ácido tartárico al 4 % y perlas de vidrio. 5.7 Destilar, recoger el destilado en 20 ml de NaOH 0.1 N. 5.8 Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. 6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN 6.1 Reacción de Dunas: Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCL3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H2O Se neutraliza la mezcla, y se separan en dos porciones, a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido. 6.2 Reacción de Lustgarten: Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es amarillo más o menos oscuro; con resorsinol la coloración es roja – violácea y con la piridina roja. 6.3 Reacción de Fujiwara: En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2 mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible
  • 4. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 4 para unos pocos microgramos de cloroformoy es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. 6.4 Reacción de Rose boom: Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución de muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperazina; si el cloroformo está presente en la muestra,la coloración violeta inicial cambiaa amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. 6.5 Reacción de Benedict: Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. 7. GRÁFICOS 8. RESULTADOS OBTENIDOS REACCIÓN DE DUNAS (Positivo característico) REACCIÓN DE LUSTGARTEN (Positivo característico) 1. Cogemos la muestra. 2. Aplicamos el tóxico 3. Trituramos las vísceras y la llevamos a destilación 4. Obtenemos la solución madre.
  • 5. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 5 REACCIÓN DE FUJIWARA (Positivo característico) REACCIÓN DE ROSEBOOM (Positivo característico) REACCIÓN DE BENEDICT (Positivo característico) 9. CONCLUSIONES Luego de finalizada la práctica podemos concluir diciendo que se pudo intoxicar las vísceras de la gallina aplicando una determinada cantidad de cloroformo, para luego proceder a obtener un destilado de la muestra con la cual se logró realizar las diferentes reacciones de identificación de cloroformo, dando positivo característico en todas. 10. RECOMENDACIONES  Usar el equipo de protección adecuado al momento de manipular ácidos concentrados ya que podrían sufrir quemaduras.  Es necesario usar las cámaras de gases para evitar intoxicaciones con los gases que expulsan los ácidos.  Lavarse las manos luego de salir del laboratorio.  Aplicar las normas de bioseguridad para evitar accidentes. 11. CUESTIONARIO 1. ¿Qué es el cloroformo? El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, pero poco después se abandonó este uso por su gran toxicidad
  • 6. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 6 hepática y renal. Es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble. (Ruiz, 2012) 2. ¿Qué síntomas produce la inhalación de cloroformo? La inhalación de cloroformo produce irritación de la nariz y la garganta, sequedad en la boca, sed, una sensación de aturdimiento, desfallecimiento, alucinaciones, deformación de la percepción, embriaguez, asombro, delirios, falta de aliento, efectos gastrointestinales y dilatación de las pupilas con disminución de la reacción a la luz. (Dirección General de Salud Pública, 2008) 3. ¿Cómo podría una persona estar expuesta al cloroformo?  Tomando agua o bebidas manufacturadas usando agua contaminada con cloroformo.  Respirando aire interior o aire libre si el aire contiene cloroformo, especialmente en el trabajo.  Comiendo alimentos que contienen cloroformo.  Por contacto de la piel con cloroformo o agua que contiene cloroformo, por ejemplo en piscinas. (Cárdenas, 2005) 4. ¿Qué cantidad ingerida de cloroformo puede dar lugar a una intoxicación? La intoxicación por cloroformo en el organismo puede ser por vía respiratoria, digestiva o dérmica; en humanos puede producir la muerte con la ingestión oral de tan solo 10 ml. (Ruiz, 2012) 12. ANEXOS
  • 7. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS” (PARACELSO) UTMACH | PRÁCTICASDE TOXICOLOGÍA 7 13. BIBLIOGRAFÍA Cárdenas,L. (21 de noviembre de 2005). Estrucplan.Obtenidode Estrucplan: http://www.estrucplan.com.ar/Producciones/entrega.asp?IdEntrega=1083 DirecciónGeneral de SaludPública.(25de juliode 2008). Consejería de Sanidad.Obtenidode Consejeríade Sanidad:https://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913- CLOROFORMO.pdf Ruiz,F. (2 de febrerode 2012). Uninet.Obtenidode Uninet: http://tratado.uninet.edu/c100803.html 14. FIRMA Erick Miguel García Matute C.I. 0942106576