10. 2. Rappel sur la mitose : place de la mitose dans le cycle cellulaire

11. 3. Réalisation d’un caryotype : prélèvement et recueil des cellules amniotiques Centrifugeuse -> recueil des cellules

12. 3. Réalisation d’un caryotype : étape de culture cellulaire Hotte à flux laminaire milieu stérile nutritif Incubation à 37°C et 5% CO2 étuve

14. 2.Rappel sur la mitose : Les quatre phases de la mitose 1 4 2 3

17. 3. Réalisation d’un caryotype : Vérification de la richesse des mitoses mitose

19. 3. Réalisation d’un caryotype : analyse des mitoses au microscope à contraste de phase

21. 3. Réalisation d’un caryotype : classement des chromosomes après giemsa grands à centromères presque médian grands à centromère distaux Chromosomes de taille moyenne grands acrocentriques petits à centromères médian petits acrocentriques Chomosomes sexuels

22. 3. Réalisation d’un caryotype : banding des chromosomes: 400-550 bandes

25. Dans le LA Après culture clones issus de cellules différentes Culture A Culture B Pseudo-mosaïcisme Mosaïcisme vrai Caryotype du liquide amniotique avec une mosaïque

31. Origine des VC Cytotrophoblaste = direct Tissu extra-embryonnaire = culture caryotype de 2 tissus d’origine différente

32. Problème des mosaiques sur VC  mosaïque retrouvée aussi chez le fœtus  mosaïque confinée au placenta = non retrouvée dans le LA ou le sang foetal : 1 à 2% des VC

34. 5.1. Anomalies de nombre du caryotype : triploidie 69,XXXou XXY ou XYY 69,XXX ou XYY 69,XXX ou XXY

35. 5.2. Anomalies de nombre du caryotype : trisomie

37. 5.4 . Anomalies de structure du caryotype Les anomalies de structure équilibrées les plus fréquentes : les translocations Translocation réciproque Translocation Robertsonienne

38. 5.5 . Anomalies de structure du caryotype 45,XX,t(13;14)(q10;q10)

39. 5.6 . Anomalies de structure du caryotype Des anomalies de structure équilibrées moins fréquentes : les inversions et les insertions Inversion paracentrique insertion Inversion péricentrique

40. 5.7. Anomalies du caryotype : Les anomalies de structure déséquilibrées délétion duplication chromosome en anneau isochromosome

41. 5.6 . Anomalies de structure du caryotype RCIU post natal + CIA : 46,XX,del(13)(q21.1)

42. 5.8 . Anomalies de structure du caryotype 46,XX,r(14)(p11.2q32)

44. trisomie 13 45,XX,t(13;14) méïose trisomie 14 fécondation Gamete normal Der(13;14) Disomie 14 Disomie 13

55. 2.3. application de la FISH Identification d’un petit marqueur surnuméraire

56. 2.3. application de la FISH : Identification d’un petit marqueur surnuméraire par FISH centromérique

57. 4. application de la FISH Identification d’un petit chromosome 15 surnuméraire

58. 2.3. application de la FISH Identification d’un petit chromosome 15 surnuméraire FISH spécifique de la région Willy-Prader-Angelman

59. 2.3. application de la FISH : identification d’un isodicentrique du chromosome 15 CEP 15 CEP 15 SNRPN, D15S10 SNRPN, D15S10 47,XX,+idic(15;15)(q13;q13).ish15q11-q13 (SNRPN++,D15S10++)

60. 2.4. application de la FISH délétion

61. 2.4. application de la FISH délétion délétion du gène du rétinoblastome RB1

62. 2.4. application de la FISH délétion interstitielle une délétion interstitielle du chromosome 13

65. ( 1) Les techniques de base de la biologie moléculaire la PCR : amplification exponentielle Anomalie ciblée pour le choix des amorces

66. (1) Les techniques de base de la biologie moléculaire électrophorèse sur gel après PCR Séparation selon la taille visualisation des bandes avec le bromure d'éthidium sous UV but : séparer l’ADN chargé négativement au travers d'un gel sous l'effet d'un champ électrique

67. (1) Les techniques de base de la biologie moléculaire électrophorèse sur capillaire après PCR Le nombre de paires de bases (pb)

70. (2) Les applications de la biologie moléculaire diagnostic direct / recherche d’une mutation ponctuelle Enzyme de restriction 1.Hétérozygote (noir) : site de restriction 2.Homozygote normal (noir) Amorce en bleue d’un témoin de digestion hétérozygote

71. ( 2) Les applications de la biologie moléculaire diagnostic direct / séquençage : principe H OH H liaison diester H di dNTP incorporé dans l’ADN -> arrêt de la PCR

73. ( 2) Les applications de base de la biologie moléculaire diagnostic direct / séquençage Mutation de la CF Mise en évidence directe de la mutation Mutation unique Mutation localisées Mutation familiale déjà identifiée

75. (2) Les applications de la biologie moléculaire amplification de microsatellites : principe

76. (1) Les techniques de base de la biologie moléculaire amplification de microsatellites : principe Migration selon la taille des microsatellites amplifiés Migration sur gel Migration dans un capillaire

80. FCS due à la trisomie 14 correction de la trisomie 14 après fécondation DUP14 mat 45,XX,t(13;14) 23,Y méïose fécondation Disomie 14 45,XY,t(13;14) 45,XY,t(13;14) Trisomie 14

81. (2) application de la biologie moléculaire : amplification de microsatellites : anomalies du nombre de chromosomes PCR fluorescente multiplexe quantitative sur des microsatellites sur les chromosomes 21

84. ( 3) Les puces à ADN principe ADN cible et ADN de référence Marquage direct des ADN par deux fluorochromes différents(cyanines) cohybridation compétitive Sur une lame de verre ADN cible ADN de référence

85. ( 3) Les puces à ADN principe Lecture des signaux d’hybridation par un scanner de fluorescence Analyse des signaux par logiciel - gain d’ADN : spot rouge - perte d’ADN : spot vert

87. ( 3) Les puces à ADN identification d’un marqueur

89. ( 3) Les puces à ADN intérêts - pangénomique -anomalie non connue - Invisible au caryotype