Este documento resume las características de varios medios de cultivo comúnmente usados para el aislamiento y diferenciación de microorganismos. Describe los ingredientes, propósitos y microorganismos que pueden crecer en cada medio. Algunos medios como el agar sal manitol y el agar MacConkey son selectivos y diferenciales para identificar especies de estafilococos y enterobacterias respectivamente. Otros como el caldo nutritivo y el agar sangre son de uso general para cultivar una amplia variedad de bacterias.

1. Medio de cultivo
Tipo de
medio
Ingredientes Fundamento Para que sirve
Ejemplos de
microorganismos
Interpretación
Inicial
Nombre del
medio
Positivo Negativo
ASM
Agar sal
manitol
Selectivo
Diferencial
-Alta
concentración
de NaCl (7.5%)
-Manitol
-Rojo de fenol
Fermentación del manitol,
causa de la producción de
ácido
Detectar la
capacidad de los
microorganismos
de utilizar el manitol
como fuente
carbono
Estafilococos
Sthaphylococcus aureus
(+)
Colonias
rodeadas de
un halo
amarillo
Colonias rojas
sin presencia
de halo
EMB
Agar de
eosina y
azul de
metileno
Selectivo
Diferencial
-Lactosa
-Sacarosa
-Eosina
-Azul de
metileno
-Cristal violeta
Nutritivo por la presencia de
petona
La eosina y el azul de
metileno son inhibidores de
sobre las bacterias Gram
positivas
Identificación y
diferenciación de
enterobacterias de
acuerdo a su
capacidad de
degradar distintos
carbohidratos
Escherichia coli presenta
brillo metálico (azul
oscuro- negro)
Candida spp colonia
rosada puntiforme
Enterococcus spp colonia
transparente puntiforme
-Lactosa:
centro oscuro
orilla rosada-
azul
Bacterias
incapaces de
acidificar
lactosa :azules
BHI
Agra
infusión de
cerebro y
corazón
Rico
-Infusión de
cerebro y
corazón de
ternera
La infusión de sangre y
corazón proporciona los
nutrientes necesarios para
que casi cualquier
microorganismo pueda
desarrollarse
De uso general, se
puede cultivar una
amplia variedad de
microorganismos (a
partir de muestras
clínicas)
Para
microorganismos
exigentes
Casi todo tipo de
microorganismos
____________ ___________
MAK
Agar Mac
Conkey
Diferencial
-Lactosa
-Rojo neutro
(indicador)
-Sales biliares
-Cristal violeta
Las sales biliares y el cristal
violeta inhiben bacterias
Gram positivas.
Contiene lactosa como
único carbohidrato, por lo
que momento de que el
micro
Identificar bacterias
fermentadoras de
lactosa
Colonias rojas,
rojo-fucsia,
incoloras con
centro rosado
Colonias
incoloras
SS
Agar
salmonella
- shigella
Selectivo
Diferencial
- Sales biliares
- Citrato ferrico
-Tiosulfato de
sodio
-Verde brillante
-Sales de hierro
Las sales biliares y el verde
brillante inhiben el
desarrollo de Gram +.
Diferencial debido a la
presencia de lactosa, esta
al ser fermentado acidifica
el medio.
Formación de ácido
sulfhídrico a partir del
tiosulfato de sodio
-Aislamiento de
Salmonella y
Shigella
- detección de la
producción de H2S
Shigella sp
(Lactosa –H2S +)
Salmonella sp
(Lactosa –H2S +)
Lactosa:
Colonias
rosadas
H2S: colonias
con centro
negro
Lactosa:
Colonias
incoloras
H2S: colonias
incoloras

2. AB
Agar
sangre
Enriquecido
Diferencial
Sangre
La infusión de sangre y
corazón proporciona los
nutrientes necesarios para
que casi cualquier
microorganismo pueda
desarrollarse
Para
microorganismos
exigentes
Detección de ɑ-
hemolíticos, β -
hemolíticos y γ-
hemolíticos
Staphylococcus aureus
(+)
ɑ- hemolíticos:
halo verde
amarillento
β- hemolíticos:
halo
transparente
γ- hemolíticos:
sin presencia
de halo
TSN
Agar
triptona
sulfito
neomicina
+ sello de
aceite
Diferencial
Selectivo
Citrato férrico
Sulfito de sodio
Caseína
El citrato férrico y el sulfito
de sodio son indicadores de
la producción de H2S
La neomicina inhibe el
crecimiento de la mayoría
de las enterobacterias
Identificación o
enumeración de
clostridium
perfringens en
alimentos u otros
materiales,
especialmente de
muestras
provenientes de
una flora mixta
Clostridium (H2S +)
H2S: Colonias
negras
H2S: Colonias
incoloras
Caldo
tioglicolato
con
resarzurina
Selectivo
- Cisteina
- Resarzurina
(indicador)
- Agar
- Sulfito de
sodio
El sulfito de sodio,
tigolicolato de sodio y
cisteína disminuyen el
potencial oxido reducción y
proporciona una
anaerobiosis.
El bajo contenido de agar
otorga la propiedad de un
medio fluido, lo que retarda
la dispersión del CO2 Y O2
El eventual aumento del
contenido en Oxígeno se
pone de manifiesto por un
viraje a rojo del Indicador
Redox Resazurina Sódica.
Medio con
potencial REDOX
reducido para el
cultivo de
anaerobios
(Estrictos,
facultativos y
aerotolerantes)
Para anaerobios estrictos,
facultativos y
aerotolerantes
Caldo
carne
Enriquezido
Diferencial
-Carne cocida
(tejido cardiaco
en granulos)
Contiene sustancias
reductoras, la disponibilidad
de grupos sulfhidrilos que
aumentan el efecto reductor
es mayor en proteínas
desnaturalizadas, por ellos
se utiliza la carne cocida
Medio de uso
general para el
cultivo de
anaerobios,
especialmente los
del genero
Clostridium
Clostridium sporogenes
(+)

3. Leche
hierro
Selectivo
-Leche
-Clavo de hierro
El hierro del clavo
proporciona un ambiente
reductor debido a que este
es un aceptor de
electrones, además la
presencia de un sello de
aceite hace aún más
retardada la dispersión del
CO2
La leche es una fuente de
proteínas (caseinato de
calcio)
Medio de uso
general para el
cultivo de
anaerobios
exigentes
Para anaerobios estrictos,
facultativos y
Caldo
nutritivo
Rico
-Pluripeptona
-Extracto de
carne
Contiene pluripeptona (una
mezcla de partes iguales de
peptona de carne y de
caseína) y extracto de
carne que constituyen la
fuente de carbono y
nitrógeno necesarias para
el adecuado desarrollo
bacteriano
.
De uso general
para el cultivo de
bacterias
Casi todo tipo de
microrganismos
____________ ____________
G
Agar
gelatina
Diferencial
Gelatina
Agar
HgCl2 para
revelar
Hidrólisis de la gelatina
Detectar la
capacidad de
producir proteasas
(gelatinasa)
Escherichia coli (-)
Proteus vulgaris (+)
Staphylococcus aureus
(+)
Se observa la
presencia de
un halo
No hay halo
Gelatina en
tubo
Diferencial
Gelatina
Hidrólisis de la gelatina,
esta es una proteína capaz
de gelificar, que cuando es
hidrolizada en los
aminoácidos que la
componen, pierde esta
característica
Detectar actividad
de proteasas
(gelatinasa)
Escherichia coli (-)
Proteus vulgaris (+)
Staphylococcus aureus
(+)
El medio se
mantiene
líquido a bajas
temperaturas
El medio se
solidificará a
bajas
temperaturas
Agar leche
descremad
a
Diferencial
Caseinato de
calcio (leche)
Las proteasas son
excretadas al medio para la
degradación de proteínas,
la caseína es la proteína de
la leche que le confiere el
color blanco, cuando la
caseína es hidrolizada
desaparece el color blanco
alrededor del crecimiento
microbiano.
Determinar la
capacidad de
hidrolizar la
caseína
(caseinasa)
Bacillus subtlis (+) Halo de
transparencia
No hay halo

4. A
Agar
almidón
Diferencial
-Almidón
-Yodo (se
agrega para
“revelar”)
Las moléculas de yodo que
se encuentran atrapadas
dentro de la hélice del
almidón son liberadas
cuando este se hidroliza por
lo que se pierde el complejo
yodo-amilasa y en
consecuencia el color azul-
purpura
Determinar la
capacidad de un
microorganismo de
hidrolizar almidón
por medios
enzimáticos
(amilasa)
Bacillus subtilis (+)
Escherchia coli (-)
Halo de
transparencia
El medio se
torna purpura,
ausencia del
halo
H
Agar yema
de huevo
Selectivo
Yema de huevo
(Lectina)
La lectina (fosfoglicérido) es
un componente de la yema
de huevo, algunas bacterias
son capaces de producir
lectinasa C, la cual es
capaz de hidrolizar a la
lectina
Determinar la
capacidad de
hidrolizar
fosfolípidos por
medio de
fosfolipasas
(lectinasa)
Staphylococcus aureus
(+)
Bacillus sp (+)
Doble halo
Zona opaca
alrededor de la
colonia
Ausencia de
halo
Caldo rojo
de fenol +
campana
de Durham
+
Carbohidrat
o
Diferencial
-Carbohidrato
-Rojo de fenol
(indicador)
Produccion de acidos a
partir de la fermatacion de
un carbohidrato y la
producción de gases debido
a esto
Determinar que
carbohidratos
puede utilizar un
microorganismo
como fuente
carbono
Producción de gas
------------------------------
Fermentacion:
vire del medio
a amarillo
Gas:
Acumulacion
de gas en la
campana de
Durham
Fermentacion:
El medio no
sufre cambios,
o se alcaliniza
por la
utilización de
peptonas
Gas:Ausencia
de gas en la
campana de
Durham
KIA
Hierro
Kliger
Rico
Diferencial
-Lactosa
-Glucosa
Tiosulfato de
sodio
-Citrato de
hierro y amonio
-Rojo de fenol
(indicador)
Fermentación de distintos
hidratos de carbono, ya que
el medio contiene poca
glucosa permite observar la
fermentación de este o
ambos carbohidratos. Si el
organismo fermenta
lactosa, el medio se
acidificara en el pico y si
fermenta glucosa se
acidificara en el fondo
-Determinar la
capacidad de un
organismo de
atacar un hidrato
de carbono
específico
incorporado en un
medio, con
producción o no de
gases y la posible
producción de
ácido sulfhídrico.
-Para identificar a
los miembros de la
familia
enterobacteriaceae
--------------------------------
K/A: Alcalino/acido para indicar
solo la fermentación de la
glucosa
A/A: acido/acido para indicar la
fermentación de la lactosa y
glucosa
K/K: alcalino/alcalino el medio
no presenta cambios
H2S: Fondo oscuro

5. VP
Caldo
Voges-
Proskauer
Diferencial
-Glucosa
- naftol
-KOH 40%
Se oxida la acetoína a
diacetilo
Se obtiene el complejo
diacetilo-peptona de color
rojo o rosado
Detectar la
capacidad de
producir
acetilmetilcarbinol
(AMC, acetoína) a
partir de la
fermentación de la
glucosa
Escherichia coli (-)
VP(+): vire en
la superficie
del medio s
color rojo-
rosado
VP (-): Color
amarillo en la
superficie del
medio (igual al
color del
reactivo)
COLOR
COBRIZO es
negativo
MP
Caldo rojo
de metilo
Diferencial
-Rojo de metilo
(indicador)
-Glucosa
-Las bacterias RM positivas
producen ácidos estables
manteniendo una alta
concentración y entonces
se calma toda la actividad.
-Los organismos RM
negativos también producen
ácidos pero tienen una
mejor concentración de
iones hidrogeno porque hay
una reversión hacia la
neutralidad debida ala
nueva degradación de los
ácidos orgánicos en
carbonos.
Determinar la
concentración de
iones hidrogeno
presentes cuando
un organismo
fermenta glucosa.
Escherichia coli (+)
MR(+): Vire a
rojo brillante
en la superficie
del medio
MR (-): Color
amarillo en la
superficie del
medio
Citrato de
Simmons
Diferencial
-Citrato de sodio
-Azul de
bromotimol
(indicador)
Un microorganismo que
puede utilizar el citrato
como única fuente de
carbono también utiliza las
sales de amonio del medio
como única fuente de
nitrógeno. La extracción de
nitrógeno de las sales de
amonio produce amoniaco
por se alcaliniza el medio
virando el indicador al
alcalino.
Identificación de
microorganismos
capaces de
emplear el citrato
como única fuente
de carbono
Klebsiella pneumoniae (+)
Escherichia coli(-)
Citrato (+) vire
del medio a
azul intenso
Citrato (-):
ausencia de
crecimiento,
ningún cambio
en el medio
Acetoína + ɑ-naftol
Fermentación
Glucosa Acetoína
Diacetilo
KOH
Diacetilo + Peptona
Condensación

6. Caldo
malonato
Diferencial
-Malonato de
sodio
-Azul de
bromotimol
(indicador)
El malonato inhibe la acción
catalítica de la enzima
succinato- deshidrogenasa
por medio de la “inhibición
competitiva” bloqueándose
la oxidación del ácido
succínico.
Determinar la
capacidad de un
microorganismo de
utilizar el malonato
de sodio como
única fuente de
carbono
Klebsiella pneumoniae(+)
Escherichia coli (-)
Vire del medio
a color azul
oscuro
El medio se
mantiene sin
cabios de
color
Puede
cambiar a
amarillo por la
fermentación
de la poca
glucosa
presente
Caldo
triptona
Diferencial
-Peptona de
caseína
(triptófano)
Determinar si la
bacteria a través
de Triptofanasa
puede degradar el
Triptófano a indol.
Escherichia coli (+)
-Indol:
Coloración roja
en la superficie
del medio
después de
agregar el
reactivo
revelador
-Indol:
Coloración
amarilla en la
superficie del
medio
después de
agregar el
reactivo
revelador
SIM
Sulfhídrico
indol
movilidad
Diferencial
-Peptona de
caseína
(triptófano)
-Sulfato de
amonio ferroso
-Tiosulfato de
sodio
-Agar
-Reactivo Kovac
(revelador)
Adición del reactivo de
Kovac (p-dimetil
aminobenzaldehido) que
forma un complejo colorido
con el indol
Precipitado negro
Presencia o ausencia de
estructuras de movimiento
en bacterias (flagelos)
- Determinar si la
bacteria a través
de Triptofanasa
puede degradar
el Triptófano a
indol.
- Determinar si hay
producción
de H2S a partir de
aminoácidos
azufrados
- Determinar si la
bacteria es móvil
Proteus vulgaris (+, +, +)
Escherichia coli (+,-,+)
-Indol:
Coloración roja
en la superficie
del medio
después de
agregar el
reactivo
revelador
-H2S: El medio
se oscurece
-Movilidad:
Turbidez del
medio,
crecimiento
fuera del área
de picadura
-Indol:
Coloración
amarilla en la
superficie del
medio
después de
agregar el
reactivo
revelador
-H2S: El medio
se mantiene
del mismo
color
-Movilidad:
Crecimiento
sobre el área
de picadura
z
Triptofanasa
Bacteria + Triptófano Indol
Bacteria + Tiosulfato
Sulfato de
amonio ferroso
FeS
(Sulf uro f erroso)
Triptofanasa
Bacteria + Triptófano Indol

7. LIA
Lisina
hierro agar
Diferencial
-Lisina
-Citrato de
hierro y amonio
-Tiosulfato de
sodio
-Purpura de
bromocresol
(indicador)
Las
descarboxilasas,
son útiles en la
diferenciación de
enterobacterias
Utilizado para
diferenciar
microorganismos,
especialmente
Salmonella spp.
--------------------------------
K/K: descarboxila lisina
K/A :No descaboxila lisina
no glucosa
R/A: Desamina glicina
H2S: Ennegrecimiento del
medio en el fondo
Caldo
nitrato
Diferencial
-Nitrato de
potasio
-Reactivo de
Nessler
Determinar la
capacidad de un
microorganismo de
reducir los nitratos
a nitritos o gas
nitrógeno libre
Escherichia coli (+)
Pseudomonas aeruginosa
(+)
N2: Burbujas
en el medio
El medio se
vuelve rojo
N2: Ausencia
de gas
El medio se
queda igual
OFBM
OF de
Hugh y
Leifson
Diferencial
-Azul de
bromotimol
(indicador)
-Caseína
(triptona)
-Agar
Las bacterias que
fermentan hidratos de
carbono requieren como
paso incial la fosforilacion
de dichas moléculas, lo que
produce acido, por lo
general estas bacterias son
anaerobios facultativos.
Algunas otras bacterias son
capaces de oxidar hidratos
de carbono lo cual es un
proceso anaerobio, estas
últimas por lo común son
aerobias estrictas y para
llevar a cabo este proceso,
no se requiere una
fosforilacion previa del
hidrato de carbono
Determinar el
metabolismo
oxidativo o
fermentativo de un
hidrato de carbono
Produccion de gas,
movilidad,
Estaphylococcus aureus
(F)
Micrococcus luteus (O)
Hidratos de
carbono:
Acido=A
(medio
amarillo)
Acido gas =AG
OF:
Fermentativo=
F
Oxidativo=O
Movilidad:
crecimiento
fuera del área
de punción
Hidratos de
carbono: Sin
cambios = NC
(Azul)
OF: Ni
fermentativo ni
oxidativo =NR
Movilidad:
Crecimiento
dentro del
área de
punción
2NO3 + 10e + 12H+
NO3 + 2e + 2H+ NO2 + H2O
N2 + 6H2O
Bacteria + Tiosulfato
Sulfato de
amonio ferroso
FeS
(Sulf uro f erroso)
Aminoácido
Descarboxilación
Amina + CO2
Aminoácido
Desaminacón
+ NH3

8. Leche
tornasolada
Diferencial
-Polvo tornasol
- Leche
descremada
deshidratada
-
Fermentación de lactosa: Si un microorganismo
fermenta la lactosa se produce (sobre todo) ácido
láctico por lo que el medio se alcaliniza. En
ocasiones el producto final de la fermentación de
la lactosa es el ácido butírico
Bacterias que NO fermentan lactosa, pero actúan
sobre las sustancias nitrogenadas presentes en la
leche (aa) generación de NH3
-El tornasol es un indicador de pH y de óxido
reducción, algunos microrganismos tienen la
capacidad de reducir el tornasol a una leucobase
blanca
- Coagulo (ácido)
-Coagulo por renina
-Peptonización :Hidrólisis de la caseína por
actividad enzimática (enzima proteolítica
caseinasa)
-Formación de gas: como resultado final de la
fermentación de la lactosa
Diferencia los
microorganismos en base
a sus múltiples
reacciones metabólicas.
-Fermentación de la
lactosa
-Reducción del tornasol
- Coagulación de la
caseína
- Peptonización
(caseólisis)
- Formación de gas
Lactosa: vire
del medio a
rosa-rojo
CO2 e H2 : gas
Reducción del
tornasol:
Incoloro
(blanco)
Lactosa: Vire
del medio
purpura
azulado
Glucosa + GalactosaLactosa
Glucosa Ácido
pirúvico
ác. láctico
ác. butírico
CO2 + H2