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“La dosis hace al veneno“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE CONTROL DE MEDICAMENTOS
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Román Mayra
Curso: Quinto Paralelo: B
Grupo N° 5
Fecha de Elaboración de la Práctica:Martes 24 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 01 de Julio del 2014
PRÁCTICA N° 4
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL.
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Parenteral.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación.
2. Distinguir la sintomatología de la intoxicación por etanol con relación a otras sustancias toxicas.
4. Identificar la presencia de etanol en sangre mediante pruebas de reconocimiento.
MATERIALES SUSTANCIAS
 Bata de laboratorio
 Equipo de destilación
 Mechero
 Guantes de látex
 Gorro
 Campana
 Zapatones
 Espátula
 Mascarilla
 Pipetas
 Erlenmeyer
 Tubos de ensayo
 Vasos de precipitación
 Jeringuilla de 10cc
 Instrumentos de disección
10
Permanganato de potasio
Ácido sulfúrico
Acido oxálico
Fushina bisulfatada
Cloruro de fenilhidracina
Hidróxido de sodio
Ácido clorhídrico
Ferrocianuro de potasio
Hidróxido de potasio
Ácido cromotropico
Cloruro férrico
Etanol
EQUIPOS
Balanza analítica
“La dosis hace al veneno“ Página 2
PROCEDIMIENTO
Para la realización de ésta práctica se efectúan los siguientes pasos:
1.- Primeramente BIOSEGURIDAD
2.- A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo
3.- Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (vía parenteral)
4.- Colocamos el cobayo en la campana
5.- Observar la sintomatología del toxico en el animal de experimentación.
6.- Esperamos el tiempo de defunción.
7.- Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de disección.
8.- Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y procedemos a
rasurar al cobayo.
9.- Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con una
jeringa aspirar la sangre.
10- Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de
precipitación.
11.- Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras.
12.- Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar además una
pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua destilada.
13.- Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer.
14.- Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante 30 minutos y
con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos circulares.
15-Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de identificación:
 Reacción de SCHIFF
 Reacción de RIMINI
 Reacción con la fenilhidracina
 Reacción con el Ac.Cromotropico
 Reacción de HEHNER
Reacciones:
1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al
1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3
minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore
la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de
Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si es
positivo
“La dosis hace al veneno“ Página 3
Pesamos Administración- vía peritoneal Observamos sintomatología Deceso
Colocamos al cobayo en la Realizamos una incisión Sacamos las vísceras - sangre Picamos finamente
tabla de disección
Colocamos en una balón preparamos el NaOH al 20% Destilamos Obtenemos destilado y
realizamos las
reacciones de identificación.
2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una
coloración azul intensa si es positivo.
3. Con la fenilhidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y
agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil
hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto
añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo
grosella en caso de ser positivo.
4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de
ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de
calentarla a la llama si es positivo.
5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico
concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es
positivo.
GRÁFICOS
“La dosis hace al veneno“ Página 4
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Muestra inicial
ó destilado
 Reacción de Schiff
Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial
ANTES DESPUÉS
 Reacción de Rimini
Reacción Positivo característico Coloración azul intensa
ANTES DESPUÉS
“La dosis hace al veneno“ Página 5
 Reacción con Fenilhidracina
Reacción positivo característico Coloración rojiza
ANTES DESPUÉS
 Reacción con el Ácido cromotropico
Reacción Negativo No hubo coloración roja
ANTES DESPUÉS
 Reacción de Hehner
Reacción Negativo No hubo coloración violeta
ANTES DESPUÉS
“La dosis hace al veneno“ Página 6
OBSERVACIONES
 En la realización de ésta práctica al haber administrado los ml de etanol por vía
peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal después de 50
minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y
seguidamente la muerte por la intoxicación con etanol.
 Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de
identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo
cual corroboro para determinar la presencia del etanol (toxico) en el cobayo.
CONCLUSIONES
En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos
o síntomas provocados por la administración del toxico (etanol) al organismo de un
animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de
etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento
de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como
se ha demostrado en esta práctica.
RECOMENDACIONES
 Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma
logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando
así una intoxicación.
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones,
guantes, mascarilla.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
 Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
 Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera
obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica.
GLOSARIO
ETANOL
El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en
pleno auge en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus
cualidades como combustible alternativo.
“La dosis hace al veneno“ Página 7
Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el Vino y el brandy.
Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para
medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como
anticongelante en radiadores de automóviles.
Es muy utilizado en la realización de bebidas alcohólicas, en los sectores farmacéuticos e
industriales, la industria química lo utiliza como compuesto de partida en la síntesis de
diversos productos, como el acetato de etilo, el éter dietílico también se utiliza en la
elaboración de perfumes y ambientadores.
MAREO
El mareo es un término que a menudo se utiliza para describir dos síntomas diferentes:
sensación de mareo y vértigo. El mareo es una sensación como que uno se podría
desmayar.Un mareo se presenta cuando al cerebro no está llegando suficiente sangre, lo
cual puede suceder si:
 Se presenta una disminución repentina en la presión arterial.
 Su cuerpo no tiene suficiente agua (deshidratado) a causa del vómito, la diarrea, la
fiebre y otras afecciones.
 Usted se levanta demasiado rápido después de sentarse o acostarse (esto es más
común en personas mayores).
AGONÍA
La agonía se caracteriza habitualmente por un largo deterioro general, marcado por
episodios de complicaciones y efectos secundarios como sucede en algunos casos de
cáncer. En general, durante el mes anterior a la muerte disminuyen de forma sustancial la
energía, la actividad y el bienestar. Se observa un visible debilitamiento del paciente y para
todos resulta evidente que la muerte se aproxima.
La agonía también sigue otro curso; a veces, un paciente tratado en el hospital con una
terapia agresiva a consecuencia de una enfermedad grave, puede empeorar de repente y
sólo se sabe que se está muriendo algunas horas o días antes de fallecer. Sin embargo, es
cada vez más común agonizar con una lenta disminución de las capacidades y durante un
largo período de tiempo, a veces con episodios de síntomas graves.
TÓXICO
Es una complicación potencialmente mortal de otras afecciones intestinales que ocasiona
un ensanchamiento (dilatación) del intestino grueso en cuestión de 1 hasta unos cuantos
días. El megacolon tóxico ocurre como una complicación de una enfermedad intestinal
inflamatoria, como la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn e infecciones del colon.
“La dosis hace al veneno“ Página 8
El término "tóxico" significa que esta complicación ocurre con infección o inflamación y es
muy peligrosa. Síntomas:
El rápido ensanchamiento del colon puede ocasionar los siguientes síntomas:
 Dolor abdominal
 Distensión abdominal
 Sensibilidad abdominal
 Fiebre
 Frecuencia cardíaca rápida
 Shock
INTOXICACIÓN
Una intoxicación es la entrada de un tóxico en el cuerpo en cantidad suficiente como para
producir un daño. Entendemos por tóxico aquella sustancia que cuando se encuentra en una
determinada concentración en el organismo de los seres vivos provoca un daño. No se debe
confundir una intoxicación con una reacción alérgica, ya que ésta va a depender de una
reacción exagerada del organismo ante un agente que no necesariamente es dañino. El
grado de intoxicación dependerá tanto de la cantidad de veneno/tóxico ingerido como de las
características propias de la persona (edad, peso, obesidad…).
La mayoría de las veces las intoxicaciones ocurren por accidente, sin embargo, una
actuación rápida puede llegar a salvar la vida. Si se sospecha de una intoxicación, no hay
que esperar a que aparezcan los síntomas, sino tomar medidas activas.
CUESTIONARIO
¿Cuáles son las sinonimias del Etanol?
Alcohol etílico
Metilcarbinol
Alcohol potable.
¿Cuáles son los tipos de contacto con Etanol?
Ingestión del Etanol
Síntomas en caso de ingestión: Confusión, vértigo, somnolencia, dolor de cabeza y pérdida
de conocimiento.
“La dosis hace al veneno“ Página 9
Inhalación del Etanol
Síntomas en caso de inhalación: tos, dolor de garganta, somnolencia y dolor de cabeza.
Piel del Etanol
Síntomas en caso de contacto con piel: piel seca.
Ojos del Etanol
Síntomas en caso de contacto con ojos: Enrojecimiento y dolor.
¿Cuáles son los primeros auxilios en caso de contacto con Etanol?
1)Inhalación: respirar aire fresco, reposo, de ser necesario respiración artificial y atención
médica inmediata.
2)Ingestión: No provocar vómito y si la persona esta consciente dar a beber agua, llamar a
un médico de manera inmediata.
3)Contacto con piel: quitar la ropa contaminada y lavar con abundante agua, pedir
asistencia médica si los síntomas empeoran.
4) Contacto con los ojos: lave con cuidado (de tener lentes de contacto, quitarlos), no poner
ninguna sustancia sin indicación del médico, pedir asistencia médica aún en ausencia de
síntomas.
¿Cuáles son las propiedades físico-químicas del Etanol?
Estado físico: Liquido
Color: Incoloro
Punto de fusión: -117 ºC
Temperatura de inflamación: 13 ºC
Olor: Característico
Punto de ebullición: 79 ºC
Solubilidad: Miscible
Temperatura de autoignicción: 363 ºC
“La dosis hace al veneno“ Página 10
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
 LIBRO
Fundamentos de toxicología, Editorial: McGraw-Hill, Edición: 1a ED.2005
 Etanol.2014 EcuRed
de: http://www.ecured.cu/index.php/Etanol
 Biblioteca de recursos. Agoníar. MSD salud
de: https://www.msdsalud.es/manual-merck-hogar/seccion-1/muerte-agonia.html
 Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Mareo,
MedlinePlus de:
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003093.htm
 Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Tóxico,
MedlinePlus de:
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000248.htm
 Tu centro médico online. Intoxicacion, Webconsultas , 2014 de:
http://www.webconsultas.com/salud-al-dia/intoxicaciones/intoxicacion-10743
AUTORIA
BQF. Carlos García
Machala 01 de Julio del 2014
 FIRMA
______________ ______________ _________________
Mayra Román Katherine Barros Geanina Machuca
“La dosis hace al veneno“ Página 11
ANEXOS:
ANEXO 1.
NOTICIAS INTERNACIONALES
Libia: 51 muertos en envenenamiento por alcohol
Lunes, 11 de marzo de 2013
Al menos 51 personas han muerto tras ingerir alcohol contaminado. Más de 300 personas,
además, están siendo tratadas por envenenamiento desde el pasado sábado.
Las autoridades de salud libias dicen que las bebidas contenían altos niveles de metanol,
que daña los riñones. Un funcionario del hospital le dijo a la BBC que varios pacientes
estaban recibiendo diálisis.
Según cifras oficiales libias, 38 personas habrían muerto en los hospitales de la capital libia,
Trípoli, y otros 13 cuando se dirigían a la vecina Túnez para recibir tratamiento.
El estado de emergencia ha sido declarado en los hospitales de la capital.
La producción o el consumo de alcohol es ilegal en Libia, pero está disponible en el
mercado negro.Un vocero del gobierno dijo que se había rodeado a un número de lugares
sospechosos de destilar alcohol y advirtió que la fuerza sería utilizada si fuese necesario.
ANEXO 2.
METANOL
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo
es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Fuentes de exposición.
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de
plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia
cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se
han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
“La dosis hace al veneno“ Página 12
Toxicocinética.
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los niveles
en la sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de la
presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo
de lactancia (40 minutos a 72 horas), durante el cual se observan síntomas. Esta fase se
sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación
catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que
el metanol, pero es rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6 veces más toxico que
el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la
magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan
con el grado de acidosis.
Mecanismo de acción.
El metanol se absorbe por vía oral a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de
distribución es de 0.6 L/Kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble
en la grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte a través del alcohol-deshidrogenasa,
hacia formaldehido, que es rápidamente convertido a ácido fórmico por el aldehído-
deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por
el pulmón y el 12% por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a
2.5 mediante hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de primer orden a baja dosis y
durante la hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis.
Se piensa que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la
intoxicación por metanol, por inhibición de la citocromo oxidasa en el nervio óptico. Tanto
el ácido fórmico, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis
metabólica y del descenso del bicarbonato.
El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de conciencia,
convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10 a 30ml, considerándose potencialmente letal
una dosis de 60 a 240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y
potencialmente mortales los que superan 1g/l.
Cuadro clínico.
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede
ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o
retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y
síntomas son:
“La dosis hace al veneno“ Página 13
a. Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus
(movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es
de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y
alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión
y ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico.
b. Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita.
c. Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos,
acompañados, a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos.
d. Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo,
convulsiones, cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
e. Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión
miocárdica.
f. La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe
principalmente al ácido fórmico. También está aumentado el anión gap.
Diagnóstico.
El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los
acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es
amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia
subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina.
Además, es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica.
El diagnóstico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
Tratamiento.
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario
asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación
del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido
entre la ingestión del tóxico y el inicio del tratamiento. También depende del grado de
acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o
en las 4 primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón activado y los
catárticos son ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la
metabolización hepática del metanol por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa,
y forzar la eliminación del tóxico por rutas extra hepáticas. Para conseguir los niveles
plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2 g/l), se administra un bolo vía intravenosa de 1.1
ml/Kg disuelto en 100 ml de suero glucosado al 5% a pasar en 15 minutos; a continuación
0.1 ml/Kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al 5%; si se trata de un
alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/Kg/h. La perfusión de etanol
“La dosis hace al veneno“ Página 14
debe hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse periódicamente
los niveles de etanol, y ajustar la dosis de perfusión.
Es necesario el aporte de volumen para la deshidratación y la inhibición de la hormona
antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la
acidosis. Se debe administrar ácido fólico que se aumenta la oxidación de ácido fórmico a
dióxido de carbono y agua.
La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el
metanol como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis
serian cualquiera de los siguientes: metanol >0.5g/l, acidosis metabólica con pH <7.20,
trastornos visuales o disminución de nivel de conciencia. Si se indica diálisis deben
mantenerse durante varias horas, y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para
controlar las convulsiones se utiliza diazepan y fenitoína.
Reacciones de reconocimiento
Reconocimiento en medios biológicos
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe por
lo ques es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue mediante
un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y
otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la
lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos
indica que hemos conseguido el propósito de transformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento de formaldehído, así:
1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta
2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.
3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.
4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.
5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.
6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.

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Practica 4 intoxicacion por etanol

  • 1. “La dosis hace al veneno“ Página 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE CONTROL DE MEDICAMENTOS Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Román Mayra Curso: Quinto Paralelo: B Grupo N° 5 Fecha de Elaboración de la Práctica:Martes 24 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 01 de Julio del 2014 PRÁCTICA N° 4 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL. Animal de Experimentación: Cobayo Vía de Administración: Vía Parenteral. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación. 2. Distinguir la sintomatología de la intoxicación por etanol con relación a otras sustancias toxicas. 4. Identificar la presencia de etanol en sangre mediante pruebas de reconocimiento. MATERIALES SUSTANCIAS  Bata de laboratorio  Equipo de destilación  Mechero  Guantes de látex  Gorro  Campana  Zapatones  Espátula  Mascarilla  Pipetas  Erlenmeyer  Tubos de ensayo  Vasos de precipitación  Jeringuilla de 10cc  Instrumentos de disección 10 Permanganato de potasio Ácido sulfúrico Acido oxálico Fushina bisulfatada Cloruro de fenilhidracina Hidróxido de sodio Ácido clorhídrico Ferrocianuro de potasio Hidróxido de potasio Ácido cromotropico Cloruro férrico Etanol EQUIPOS Balanza analítica
  • 2. “La dosis hace al veneno“ Página 2 PROCEDIMIENTO Para la realización de ésta práctica se efectúan los siguientes pasos: 1.- Primeramente BIOSEGURIDAD 2.- A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 3.- Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (vía parenteral) 4.- Colocamos el cobayo en la campana 5.- Observar la sintomatología del toxico en el animal de experimentación. 6.- Esperamos el tiempo de defunción. 7.- Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de disección. 8.- Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y procedemos a rasurar al cobayo. 9.- Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con una jeringa aspirar la sangre. 10- Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de precipitación. 11.- Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras. 12.- Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar además una pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua destilada. 13.- Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer. 14.- Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante 30 minutos y con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos circulares. 15-Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de identificación:  Reacción de SCHIFF  Reacción de RIMINI  Reacción con la fenilhidracina  Reacción con el Ac.Cromotropico  Reacción de HEHNER Reacciones: 1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3 minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si es positivo
  • 3. “La dosis hace al veneno“ Página 3 Pesamos Administración- vía peritoneal Observamos sintomatología Deceso Colocamos al cobayo en la Realizamos una incisión Sacamos las vísceras - sangre Picamos finamente tabla de disección Colocamos en una balón preparamos el NaOH al 20% Destilamos Obtenemos destilado y realizamos las reacciones de identificación. 2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una coloración azul intensa si es positivo. 3. Con la fenilhidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo grosella en caso de ser positivo. 4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de calentarla a la llama si es positivo. 5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es positivo. GRÁFICOS
  • 4. “La dosis hace al veneno“ Página 4 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Muestra inicial ó destilado  Reacción de Schiff Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial ANTES DESPUÉS  Reacción de Rimini Reacción Positivo característico Coloración azul intensa ANTES DESPUÉS
  • 5. “La dosis hace al veneno“ Página 5  Reacción con Fenilhidracina Reacción positivo característico Coloración rojiza ANTES DESPUÉS  Reacción con el Ácido cromotropico Reacción Negativo No hubo coloración roja ANTES DESPUÉS  Reacción de Hehner Reacción Negativo No hubo coloración violeta ANTES DESPUÉS
  • 6. “La dosis hace al veneno“ Página 6 OBSERVACIONES  En la realización de ésta práctica al haber administrado los ml de etanol por vía peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal después de 50 minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con etanol.  Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del etanol (toxico) en el cobayo. CONCLUSIONES En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (etanol) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica. RECOMENDACIONES  Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.  Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla.  Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.  Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.  Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida  Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica. GLOSARIO ETANOL El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en pleno auge en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus cualidades como combustible alternativo.
  • 7. “La dosis hace al veneno“ Página 7 Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el Vino y el brandy. Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como anticongelante en radiadores de automóviles. Es muy utilizado en la realización de bebidas alcohólicas, en los sectores farmacéuticos e industriales, la industria química lo utiliza como compuesto de partida en la síntesis de diversos productos, como el acetato de etilo, el éter dietílico también se utiliza en la elaboración de perfumes y ambientadores. MAREO El mareo es un término que a menudo se utiliza para describir dos síntomas diferentes: sensación de mareo y vértigo. El mareo es una sensación como que uno se podría desmayar.Un mareo se presenta cuando al cerebro no está llegando suficiente sangre, lo cual puede suceder si:  Se presenta una disminución repentina en la presión arterial.  Su cuerpo no tiene suficiente agua (deshidratado) a causa del vómito, la diarrea, la fiebre y otras afecciones.  Usted se levanta demasiado rápido después de sentarse o acostarse (esto es más común en personas mayores). AGONÍA La agonía se caracteriza habitualmente por un largo deterioro general, marcado por episodios de complicaciones y efectos secundarios como sucede en algunos casos de cáncer. En general, durante el mes anterior a la muerte disminuyen de forma sustancial la energía, la actividad y el bienestar. Se observa un visible debilitamiento del paciente y para todos resulta evidente que la muerte se aproxima. La agonía también sigue otro curso; a veces, un paciente tratado en el hospital con una terapia agresiva a consecuencia de una enfermedad grave, puede empeorar de repente y sólo se sabe que se está muriendo algunas horas o días antes de fallecer. Sin embargo, es cada vez más común agonizar con una lenta disminución de las capacidades y durante un largo período de tiempo, a veces con episodios de síntomas graves. TÓXICO Es una complicación potencialmente mortal de otras afecciones intestinales que ocasiona un ensanchamiento (dilatación) del intestino grueso en cuestión de 1 hasta unos cuantos días. El megacolon tóxico ocurre como una complicación de una enfermedad intestinal inflamatoria, como la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn e infecciones del colon.
  • 8. “La dosis hace al veneno“ Página 8 El término "tóxico" significa que esta complicación ocurre con infección o inflamación y es muy peligrosa. Síntomas: El rápido ensanchamiento del colon puede ocasionar los siguientes síntomas:  Dolor abdominal  Distensión abdominal  Sensibilidad abdominal  Fiebre  Frecuencia cardíaca rápida  Shock INTOXICACIÓN Una intoxicación es la entrada de un tóxico en el cuerpo en cantidad suficiente como para producir un daño. Entendemos por tóxico aquella sustancia que cuando se encuentra en una determinada concentración en el organismo de los seres vivos provoca un daño. No se debe confundir una intoxicación con una reacción alérgica, ya que ésta va a depender de una reacción exagerada del organismo ante un agente que no necesariamente es dañino. El grado de intoxicación dependerá tanto de la cantidad de veneno/tóxico ingerido como de las características propias de la persona (edad, peso, obesidad…). La mayoría de las veces las intoxicaciones ocurren por accidente, sin embargo, una actuación rápida puede llegar a salvar la vida. Si se sospecha de una intoxicación, no hay que esperar a que aparezcan los síntomas, sino tomar medidas activas. CUESTIONARIO ¿Cuáles son las sinonimias del Etanol? Alcohol etílico Metilcarbinol Alcohol potable. ¿Cuáles son los tipos de contacto con Etanol? Ingestión del Etanol Síntomas en caso de ingestión: Confusión, vértigo, somnolencia, dolor de cabeza y pérdida de conocimiento.
  • 9. “La dosis hace al veneno“ Página 9 Inhalación del Etanol Síntomas en caso de inhalación: tos, dolor de garganta, somnolencia y dolor de cabeza. Piel del Etanol Síntomas en caso de contacto con piel: piel seca. Ojos del Etanol Síntomas en caso de contacto con ojos: Enrojecimiento y dolor. ¿Cuáles son los primeros auxilios en caso de contacto con Etanol? 1)Inhalación: respirar aire fresco, reposo, de ser necesario respiración artificial y atención médica inmediata. 2)Ingestión: No provocar vómito y si la persona esta consciente dar a beber agua, llamar a un médico de manera inmediata. 3)Contacto con piel: quitar la ropa contaminada y lavar con abundante agua, pedir asistencia médica si los síntomas empeoran. 4) Contacto con los ojos: lave con cuidado (de tener lentes de contacto, quitarlos), no poner ninguna sustancia sin indicación del médico, pedir asistencia médica aún en ausencia de síntomas. ¿Cuáles son las propiedades físico-químicas del Etanol? Estado físico: Liquido Color: Incoloro Punto de fusión: -117 ºC Temperatura de inflamación: 13 ºC Olor: Característico Punto de ebullición: 79 ºC Solubilidad: Miscible Temperatura de autoignicción: 363 ºC
  • 10. “La dosis hace al veneno“ Página 10 BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA  LIBRO Fundamentos de toxicología, Editorial: McGraw-Hill, Edición: 1a ED.2005  Etanol.2014 EcuRed de: http://www.ecured.cu/index.php/Etanol  Biblioteca de recursos. Agoníar. MSD salud de: https://www.msdsalud.es/manual-merck-hogar/seccion-1/muerte-agonia.html  Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Mareo, MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003093.htm  Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Tóxico, MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000248.htm  Tu centro médico online. Intoxicacion, Webconsultas , 2014 de: http://www.webconsultas.com/salud-al-dia/intoxicaciones/intoxicacion-10743 AUTORIA BQF. Carlos García Machala 01 de Julio del 2014  FIRMA ______________ ______________ _________________ Mayra Román Katherine Barros Geanina Machuca
  • 11. “La dosis hace al veneno“ Página 11 ANEXOS: ANEXO 1. NOTICIAS INTERNACIONALES Libia: 51 muertos en envenenamiento por alcohol Lunes, 11 de marzo de 2013 Al menos 51 personas han muerto tras ingerir alcohol contaminado. Más de 300 personas, además, están siendo tratadas por envenenamiento desde el pasado sábado. Las autoridades de salud libias dicen que las bebidas contenían altos niveles de metanol, que daña los riñones. Un funcionario del hospital le dijo a la BBC que varios pacientes estaban recibiendo diálisis. Según cifras oficiales libias, 38 personas habrían muerto en los hospitales de la capital libia, Trípoli, y otros 13 cuando se dirigían a la vecina Túnez para recibir tratamiento. El estado de emergencia ha sido declarado en los hospitales de la capital. La producción o el consumo de alcohol es ilegal en Libia, pero está disponible en el mercado negro.Un vocero del gobierno dijo que se había rodeado a un número de lugares sospechosos de destilar alcohol y advirtió que la fuerza sería utilizada si fuese necesario. ANEXO 2. METANOL El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos. Fuentes de exposición. Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar. La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
  • 12. “La dosis hace al veneno“ Página 12 Toxicocinética. Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los niveles en la sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de la presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo de lactancia (40 minutos a 72 horas), durante el cual se observan síntomas. Esta fase se sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales. El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que el metanol, pero es rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6 veces más toxico que el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan con el grado de acidosis. Mecanismo de acción. El metanol se absorbe por vía oral a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de distribución es de 0.6 L/Kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte a través del alcohol-deshidrogenasa, hacia formaldehido, que es rápidamente convertido a ácido fórmico por el aldehído- deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por el pulmón y el 12% por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a 2.5 mediante hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de primer orden a baja dosis y durante la hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis. Se piensa que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la intoxicación por metanol, por inhibición de la citocromo oxidasa en el nervio óptico. Tanto el ácido fórmico, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis metabólica y del descenso del bicarbonato. El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de conciencia, convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10 a 30ml, considerándose potencialmente letal una dosis de 60 a 240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y potencialmente mortales los que superan 1g/l. Cuadro clínico. La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y síntomas son:
  • 13. “La dosis hace al veneno“ Página 13 a. Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus (movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión y ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico. b. Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita. c. Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos, acompañados, a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos. d. Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo, convulsiones, cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc. e. Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión miocárdica. f. La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe principalmente al ácido fórmico. También está aumentado el anión gap. Diagnóstico. El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc. En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina. Además, es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica. El diagnóstico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre. Tratamiento. El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido entre la ingestión del tóxico y el inicio del tratamiento. También depende del grado de acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo. Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o en las 4 primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón activado y los catárticos son ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la metabolización hepática del metanol por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa, y forzar la eliminación del tóxico por rutas extra hepáticas. Para conseguir los niveles plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2 g/l), se administra un bolo vía intravenosa de 1.1 ml/Kg disuelto en 100 ml de suero glucosado al 5% a pasar en 15 minutos; a continuación 0.1 ml/Kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al 5%; si se trata de un alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/Kg/h. La perfusión de etanol
  • 14. “La dosis hace al veneno“ Página 14 debe hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse periódicamente los niveles de etanol, y ajustar la dosis de perfusión. Es necesario el aporte de volumen para la deshidratación y la inhibición de la hormona antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la acidosis. Se debe administrar ácido fólico que se aumenta la oxidación de ácido fórmico a dióxido de carbono y agua. La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el metanol como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis serian cualquiera de los siguientes: metanol >0.5g/l, acidosis metabólica con pH <7.20, trastornos visuales o disminución de nivel de conciencia. Si se indica diálisis deben mantenerse durante varias horas, y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para controlar las convulsiones se utiliza diazepan y fenitoína. Reacciones de reconocimiento Reconocimiento en medios biológicos Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe por lo ques es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el propósito de transformar el metanol en metanal. En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de formaldehído, así: 1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta 2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso. 3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella. 4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta. 5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo. 6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.