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INMUNOTERÁPICOS
Inmunología de Farmacia
Dra. Marisa Castro
2015
Definición
Compuesto que se administre como apoyo de un
tratamiento o tratamiento en sí mismo y que
fundamente su mecanismo de acción en la
modulación de la Respuesta Inmune (RI) o que
sea en sí mismo un componente de la RI
1- Fuentes naturales de proteínas
(Ag extractivos)
Ag idéntico al de interés
2- Técnicas de ADN
recombinante
.
FORMAS DE OBTENCIÓN
Proteína heteróloga
o recombinante
De fuentes naturales Por tecnología del ADN recombinante
Sistemas de expresión PROCARIOTAS
Ventajas
1) Tiempo de replicación bajo.
2) Alcanza alta densidad en
cultivo usando sustratos baratos.
3) Sistemas genéticamente bien
caracterizados.
4) Amplia disponibilidad de
plásmidos y cepas mutantes.
Desventajas
1) Pueden carecer de actividad
biológica (falta modificaciones
post-traduccionales).
2) Presencia de pirógenos en
proteínas de uso terapéutico.
3) Formación de cuerpos de
inclusión.
Sistemas de expresión EUCARIOTAS
Ventajas
1) Realizan algunas
modificaciones post-
traduccionales.
2) Fácil manejo microbiológico
y genéticos.
3) Las levaduras son
huéspedes GRAS (seguros).
4) No aportan toxinas.
Desventajas
1) Mayor tiempo de
replicación que los
procariontes.
2) Bajo rendimiento
3) Glicosilación no
exactamente igual que en las
proteínas nativas.
Proteína
heteróloga
Sistema de
expresión
Niveles de
producción
Altos
Bacterias
Células de
insecto
Bajos
Levaduras
Células de
mamíferos
Aspectos a considerar:
1- ubicación de la proteína recombinante en el sistema de
expresión.
a. Sistema celular : citoplasmática o secretada.
b. Sistema in vitro: presente en el medio de
reacción.
2- Debemos conocer: PM, PI.
3- Podemos introducir tags durante su producción para
facilitar la purificación empleando columnas de afinidad.
PURIFICACIÓN
Según la
localización
Intracelular
Ruptura
celular
Métodos
Químicos Biológicos Físicos
Medio de
cultivo
Métodos de
concentración
Recuperación de la proteína
Métodos de Purificación: Cromatografías
Métodos Adsortivos Métodos No Adsortivos
 Afinidad.
 Pseudoafinidad.
 Interacción hidrofóbica.
 Interacambiadores iónicos.
 Concentran la muestra
 Primeros pasos de
purificación
 Exclusión molecular.
 Diluyen la muestra.
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purificación.
Anticuerpos monoclonales
terapéuticos
Método tradicional de Obtención:
Técnica de hibridoma
Anticuerpos quiméricos y humanizados
Nomenclatura Anticuerpos monoclonales
Sufijos:
“omab”: murinos. [Munomomab, Ac anti-CD3].
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“zumab”:humanizados.[Trastuzumab, Ac anti-HER-2].
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  • 2. Definición Compuesto que se administre como apoyo de un tratamiento o tratamiento en sí mismo y que fundamente su mecanismo de acción en la modulación de la Respuesta Inmune (RI) o que sea en sí mismo un componente de la RI
  • 3. 1- Fuentes naturales de proteínas (Ag extractivos) Ag idéntico al de interés 2- Técnicas de ADN recombinante . FORMAS DE OBTENCIÓN Proteína heteróloga o recombinante
  • 4. De fuentes naturales Por tecnología del ADN recombinante
  • 5. Sistemas de expresión PROCARIOTAS Ventajas 1) Tiempo de replicación bajo. 2) Alcanza alta densidad en cultivo usando sustratos baratos. 3) Sistemas genéticamente bien caracterizados. 4) Amplia disponibilidad de plásmidos y cepas mutantes. Desventajas 1) Pueden carecer de actividad biológica (falta modificaciones post-traduccionales). 2) Presencia de pirógenos en proteínas de uso terapéutico. 3) Formación de cuerpos de inclusión.
  • 6. Sistemas de expresión EUCARIOTAS Ventajas 1) Realizan algunas modificaciones post- traduccionales. 2) Fácil manejo microbiológico y genéticos. 3) Las levaduras son huéspedes GRAS (seguros). 4) No aportan toxinas. Desventajas 1) Mayor tiempo de replicación que los procariontes. 2) Bajo rendimiento 3) Glicosilación no exactamente igual que en las proteínas nativas.
  • 8. Aspectos a considerar: 1- ubicación de la proteína recombinante en el sistema de expresión. a. Sistema celular : citoplasmática o secretada. b. Sistema in vitro: presente en el medio de reacción. 2- Debemos conocer: PM, PI. 3- Podemos introducir tags durante su producción para facilitar la purificación empleando columnas de afinidad. PURIFICACIÓN
  • 9. Según la localización Intracelular Ruptura celular Métodos Químicos Biológicos Físicos Medio de cultivo Métodos de concentración Recuperación de la proteína
  • 10. Métodos de Purificación: Cromatografías Métodos Adsortivos Métodos No Adsortivos  Afinidad.  Pseudoafinidad.  Interacción hidrofóbica.  Interacambiadores iónicos.  Concentran la muestra  Primeros pasos de purificación  Exclusión molecular.  Diluyen la muestra.  Últimos pasos de la purificación.
  • 12. Método tradicional de Obtención: Técnica de hibridoma
  • 14. Nomenclatura Anticuerpos monoclonales Sufijos: “omab”: murinos. [Munomomab, Ac anti-CD3]. “ximab”: quiméricos. [Rituximab, Ac anti-CD20 ]. “zumab”:humanizados.[Trastuzumab, Ac anti-HER-2]. “umab”: totalmente humanos. [Figitumumab, Ac monoclonal experimental, de secuencia humana, anti- IGF-R].