Se ha denunciado esta presentación.
Utilizamos tu perfil de LinkedIn y tus datos de actividad para personalizar los anuncios y mostrarte publicidad más relevante. Puedes cambiar tus preferencias de publicidad en cualquier momento.

Lab progress report 2011-2015

5.691 visualizaciones

Publicado el

Основные результаты и текущее состояние исследований в лаборатории "Нейроинтеллекта и нейроморфных систем" Курчатовского НБИКС-центра.

Publicado en: Ciencias
  • Sé el primero en comentar

Lab progress report 2011-2015

  1. 1. ИССЛЕДОВАНИЯ ЛАБОРАТОРИИ НЕЙРОИНТЕЛЛЕКТА И НЕЙРОМОРФНЫХ СИСТЕМ 2010-2015 Михаил Бурцев
  2. 2. ЦЕЛЬ И ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ принципы обучения теоретические предпосылки • эволюционная эпистемология • теория функциональных систем • нейродарвинизм экспериментальные предпосылки • обучение в «плоских» нейронных сетях искусственный интеллект новые нейробиологические гипотезы клеточные нейроинтерфейсы с обратной связью
  3. 3. ПЛАН ИССЛЕДОВАНИЙ Исследование принципов обучения Моделирование Сети функциональных систем Предикторные нейронные сети Компьютерная модель нейрональной культуры in vitro Эксперименты Развитие нейронных сетей in vitro Обучение нейронных сетей in vitro
  4. 4. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ
  5. 5. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ Результат Действие  Элементарная ФС  Активируется в «проблемной» ситуации  Предсказывает целевое состояние  Деактивируется при достижении результата  Предсказывает время достижения результата Результат получен, действие не нужно. Результат не получен за ожидаемое время, действие было неэффективно. Активность поддерживается Сигнал о неэффективности действия
  6. 6. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Эффективность в задаче эволюционного синтеза контроллера локомоции перцептрон перцептрон, с сохранением активности, задержки одинаковые перцептрон, с сохранением активности, задержки случайные перцептрон, с сохранением активности, задержки мутируют сеть ФС, задержки отсутствуют сеть ФС с задержками Shirshova M., Burtsev M. Evolution of event and delay controlled neuronal network for locomotion //In proc.: Int’l Conf. Genetic and Evolutionary Methods GEM’14. – С. 41-47, 2014.
  7. 7. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Общая структура сети функциональных систем (ФС) агента СРЕДА АГЕНТ МОТИВАЦИИ (цели) ВТОРИЧНЫЕ ФС (обучение) ПЕРВИЧНЫЕ ФС (инстинкты)
  8. 8. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Обучение происходит за счет установления связи от мотивации к действиям посредством добавления вторичных ФС
  9. 9. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Обучение основано на добавлении вторичных ФС  Если для данного состояния не существует вторичной ФС, то случайным образом выбирается первичная ФС (элементарное действие).  Если неуправляемая активация первичной ФС привела в целевое состояние или состояние для которого существует вторичная ФС, то в сеть добавляется вторичная ФС, детерминирующая вызов успешного действия в данном состоянии для данной цели. G G G Случайный выбор действий Добавление вторичной ФС при достижении целевого состояния Добавление вторичной ФС при достижении состояния с уже существующей вторичной ФС
  10. 10. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Многоцелевая среда 0000 1000 0100 0010 0001 1111 1110 1101 1011 0111 1100 1010 1001 0110 0101 0011 «Жизнь мыши» FS1: 0000 – нора спать FS2: 0001 – нора размножаться FS3: 1010 – пища FS4: 0111 – вода Komarov M.A., Osipov G.V. and Burtsev M.S. Adaptive Functional Systems: Learning with Chaos // Chaos 20(4), 045119, 2010.
  11. 11. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Сравнение с обучением с подкреплением  Адаптация агента в нестационарной среде и конструкция альтернативных цепочек действий 50 % одно из красных ребер удалено в каждом опыте (переход не возможен, среда нестационарная) 1111 1101 0111 0011 0001 0000 1001 1111 1101 0111 0011 0001 0000 1001 1111 1101 0111 0011 0001 0000 1001 или Количество элементарных действий до цели в зависимости от номера попытки. DS – предложенная модель; Q – алгоритм обучения с подкреплением Q-learning при различных параметрах фактора обучения (LF) и дисконтирующего фактора (DF).
  12. 12. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Для достижения результата в условиях реальной среды необходимо выполнить последовательность действий  Обычно потенциально существует несколько альтернативных способов достижения цели  Каждый раз, когда агент реализует целенаправленное поведение те или иные способы достижения результата могут быть недоступны  Близкие постановки задачи  Canadian traveler problem  Stochastic Shortest Path Problem with Recourse (R-SSPPR) G B B S B
  13. 13. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ
  14. 14. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ
  15. 15. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ
  16. 16. СЕТИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СИСТЕМ  Выводы  Модель успешно обучается генерировать цепочки целенаправленных действий.  Сравнение модели динамических функциональных систем с типичным представителем семейства алгоритмов обучения с подкреплением показывает её преимущество в скорости обучения.  Эксперименты наглядно демонстрируют, что задачи, требующие переключения между альтернативными поведенческими стратегиями, и принципиально не решаемые обучением с подкреплением, могут быть эффективно решены предложенной моделью.  Планируемые исследования  Ускорение работы  Имплементация упрощенной версии алгоритма в виде сети правил  Исследование эффективности алгоритма в зависимости от топологии в стохастических дискретных пространствах поиска с одной целью. Исследование масштабируемости.  Исследование эффективности алгоритма в стохастических дискретных пространствах поиска с множественными целями.  Модификация алгоритма для непрерывных пространств. Исследование алгоритма в непрерывных пространствах поиска.
  17. 17. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ
  18. 18. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ  Попытка формализовать и проверить несколько различных гипотез, разработанных в рамках теории функциональных систем.  Основные свойства модели  Предикторные нейронные сети осуществляют распределенную оценку эффективности целенаправленного поведения на нейрональном уровне.  Механизм обучения, основан на постепенном включении новых функциональных групп нейронов, в случае если текущее поведение не позволяет достичь адаптивного результата. Lakhman K., Burtsev M. Evolution, development and learning with predictor neural networks //In proc.: ALIFE 14: The Fourteenth Conference on the Synthesis and Simulation of Living Systems. – Т. 14. – С. 457-464, 2014. Lakhman K., Burtsev M. Neuroevolution results in emergence of short-term memory in multi-goal environment // Proceeding of the fifteenth annual conference on Genetic and evolutionary computation conference GECCO ’13. New York, NY, USA: ACM, С. 703–710, 2013. Лахман К.В., Бурцев М.С. Механизмы кратковременной памяти в целенаправленном поведении нейросетевых агентов // Математическая биология и биоинформатика. 2013, T.8, №2, стр. 419-431. Лахман К.В., Бурцев М.С. Формирование целенаправленного поведения на основе кратковременной памяти в эволюции нейроморфных агентов // Сб. научных трудов Всероссийской научно-технической конференции “Нейроинформатика 2012″. М.: НИЯУ МИФИ, стр. 134-143, 2012.
  19. 19. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ  Первичный системогенез  построение полной нейроморфной сети;  изолированный от модельной среды обсчет стохастической версии сети отбор структурных элементов сети, которые будут обеспечивать первичный репертуар поведения  Вторичный системогенез  детекция рассогласования специализированными нейронами  специализация молчащих нейронов из пула с рассогласованными нейронами
  20. 20. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ Цель – последовательность действий   1 1 0 01 1 i j m   1 1 0 00   1 0 0 01   1 1 1 01
  21. 21. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ
  22. 22. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ
  23. 23. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ
  24. 24. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ
  25. 25. ПРЕДИКТОРНЫЕ НЕЙРОННЫЕ СЕТИ  Предложена новая модель адаптивного поведения, которая объединяет в себе этапы эволюции, развития и обучения.  отбор нейрональных групп в процессе развития для построения первичной структуры нейроконтроллера;  эволюция нейрональной анатомии, а не точной структуры связей между нейронами, с целью поддержать разнообразие частей сети для обучения в течение жизни;  распределенный механизм прогноза, который позволяет детектировать рассогласование между ожидаемыми и наблюдаемыми состояниями среды для начала обучения на нейрональном уровне;  алгоритм обучения, который реализован посредством специализации “молчащих” нейронов и осуществляет неразрушающие модификации нейронной сети.  Исследована динамика врожденного и приобретенного поведений в эволюции, динамика процесса обучения.  Исследование не завершено.
  26. 26. ЭВОЛЮЦИЯ НЕЙРОКОНТРОЛЛЕРА • Действие – достижение зоны определенного радиуса, построенной вокруг центра куба • Цель – определенная последовательность кубов разных цветов • Посещение куба, не входящего в целевую последовательность приводит к недостижению цели • Чем длиннее цель (чем больше кубов в последовательности) – тем выше награда за нее Muratov S., Lakhman K., Burtsev M. Neuroevolution of sequential behavior in multi-goal navigation task //In proc.: ALIFE 14: The Fourteenth Conference on the Synthesis and Simulation of Living Systems. – Т. 14. – С. 771-777, 2014. Муратов С.Т., Лахман К.В., Бурцев М.С. Нейроэволюционный синтез контроллера мобильного робота в задаче генерации последовательностей действий // Сб. научных трудов Всероссийской научно-технической конференции “Нейроинформатика 2014″. М.: НИЯУ МИФИ, стр. 117-127, 2014.
  27. 27. ЭВОЛЮЦИЯ НЕЙРОКОНТРОЛЛЕРА Показания камеры Сенсоры дальности Показания скорости колес ⋯ R G B 120-180 0-6060-120 ФРОНТАЛЬНАЯ КАМЕРА Приращение правого колеса Приращение левого колеса
  28. 28. ЭВОЛЮЦИЯ НЕЙРОКОНТРОЛЛЕРА
  29. 29. ЭВОЛЮЦИЯ НЕЙРОКОНТРОЛЛЕРА Агент достигает двух целей из разных иерархий сразу за один цикл: П-З-Г + Ж-Б
  30. 30. ЭВОЛЮЦИЯ НЕЙРОКОНТРОЛЛЕРА  Нейроэволюционный алгоритм с дупликацией нейронов успешно работает и в средах, смоделированных с учетом физических законов  Предложенный алгоритм позволяет находить поведенческие последовательности в многоцелевой среде  Найденное поведение устойчиво к изменению начального положения робота и взаимоположения кубов в пространстве  Преимущество нейроэволюционного алгоритма с дупликацией нейронов по сравнению с алгоритмом с фиксированной топологией возрастает с усложнением задачи
  31. 31. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
  32. 32. НЕЙРОНАЛЬНЫЕ КУЛЬТУРЫ Wagenaar, D. A, J. Pine, and S. M Potter. 2006. «An extremely rich repertoire of bursting patterns during the development of cortical cultures». BMC neuroscience 7 (1): 11.
  33. 33. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОНАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ Shahaf, Goded, and Shimon Marom. 2001. «Learning in Networks of Cortical Neurons». J. Neurosci. 21 (22): 8782-8788. Marom S., Shahaf G. Development, learning and memory in large random networks of cortical neurons: lessons beyond anatomy. // Quarterly reviews of biophysics. 2002. № 35. С. 63–87.
  34. 34. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОНАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ  Почему сеть обучается?  Гипотеза: Сеть в процессе развития формирует «виртуальную» функциональную систему, проявляющуюся в виде устойчивой аттракторной динамики спонтанной активности  внешняя стимуляция нарушает последовательность активаций нейронов в функциональной системе, это приводит к не получению результата и обучению  предсказание 1: результат обучения не должен стираться спонтанной активностью, т.к. при спонтанной активности обучения не происходит  предсказание 2: в процессе развития спонтанной пачечной активности должны формироваться фиксированные последовательности активаций
  35. 35. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ
  36. 36. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ  Пачечное событие описывается фронтом активации Пачка Спайки
  37. 37. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ Гистограмма (А) и карты расстояний (Б, В) между векторами в евклидовом пространстве. Б) исходные вектора, В) случайно перемешанные. На гистограмме синий линией отмечены исходные вектора, красной – случайно перемешанные. Гистограмма (А) и карты расстояний между векторами, рассчитанных методом корреляций Пирсона. Б) исходные вектора, В) случайно перемешанные. На гистограмме синий линией отмечены исходные вектора, красной – случайно перемешанные.
  38. 38. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ номер пачечного события номерпачечногособытия Красные лини разделяют события, зарегистрированные в разные дни.
  39. 39. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ Кластеризацияметодом ближайшегососеда. Кластеризацияметодом невзвешенногопопарногосреднего. Кластеризацияметодом дальнегососеда. Кластеризацияметодом взвешенногопопарного среднего.
  40. 40. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ Растрограммы основных кластеров, найденных методом дальнего соседа. Растрограммы основных кластеров, найденных методом взвешенного попарного среднего.
  41. 41. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗВИТИЯ СПОНТАННОЙ АКТИВНОСТИ  Выводы  Разработаны ПО и набор методов для анализа многоканальной активности  выделение популяционных пачек  расчет схожести паттернов активаций  кластеризация паттернов по похожести  В развитии спонтанной активности нейросетей in vitro формируется небольшое количество стереотипных паттернов активации  Планы  Доработка методов  устранение ошибки определения начала пачки  подбор более информативных признаков  сравнение полных пачек  Набор статистики  Исследование эволюции паттернов (нарастает или снижается сложность по мере развития культуры?)
  42. 42. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO
  43. 43. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Модели нейрональной культуры Основные параметры модели1: Количество нейронов: N Доля возбуждающих нейронов: R% Доля ингибирующих нейронов: (1-R)% Количество исходящих связей нейрона – распределено нормально в интервале (0, Kmax) Задержки распространения спайков по связям – (0, Dmax) Веса возбуждающих связей (0, x) мВ, веса ингибирующих связей (0, -x) мВ. Сеть с пуассоновским синаптическим шумом N = 5000 R = 70% Kmax = 1000 Dmax = 15 мс Веса связей: (0, 3) мВ Шум: пуассоновская последовательность спайков, частота 400 Гц, веса спайков: 4.3 мВ; 2.8, 0.8 мВ. Gritsun TA, le Feber J, Stegenga J, Rutten WLC (2010) Network bursts in cortical cultures are best simulated using pacemaker neurons and adaptive synapses. Biol Cybern 102:1–18
  44. 44. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO Схемы получения численных характеристик пачечной активности. А — общая длительность пачки (duration), длительность фаз увеличения (onset) и снижения (offset) активности. Нижняя пунктирная линия — уровень фоновой активности. Б — тонкие зеленые линии — отдельные пачки, выровненные по своим пиковым значениям активности. Основная фаза отдельной пачки (толстая синяя линия) характеризуется тремя параметрами: пиковой амплитудой (mFr – maximum firing rate), длительностью нарастающей части (Rs – rising slope) и длительностью спадающей части (Fs – falling slope).
  45. 45. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO Усредненные профили пачек для модели сети с синаптическим шумом (А, Б, В) и для модели с пейсмейкерами (Г, Д). пунктирная линия – среднее значение, сплошные линии – 7,5 и 92,5 перцентили. Б, В, Д – профили пачек, полученных при моделировании в NEST, для модели сети с шумом, весом шумовых спайков 4,3 мВ (Б) и весом шумовых спайков 2.8 мВ для активирующих нейронов и 0.8 мВ для тормозных нейронов (В). ссинаптическимшумомпейсмейкеры
  46. 46. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Модель синаптической пластичности Модель пластичности STDP (spike-timing-dependent plasticity). Закон изменения синаптического веса: где параметры: α = 1.1, τ+ = τ- = 20 мс
  47. 47. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Спонтанная активность сетей с пластичными синапсами СЕТИ С ПЛАСТИЧНЫМИ ВОЗБУЖДАЮЩИМИ СИНАПСАМИ Сеть с входным шумом. Параметры модели те же, вес спайков входного шума: E = 2.8 мВ, I = 0.8 мВ. Параметры модели STDP: α = 1.1, Wmax = 3.0 мВ, λ – различные значения λ mFr, Гц Duration, мс Onset, мс Offset, мс Rs, мс Fs, мс 0,0002 4318,65 (2838,42) 36,36 (4,03) 9,55 (1,78) 10,11 (3,19) 10,58 (3,91) 17,01 (5,72) 0,0002 4575,49 (824,95) 38,23 (4,86) 12,7 (2,6) 11,11 (2,91) 11,5 (1,7) 13,65 (4,33) 0,0003 5772,91 (1786,98) 38,97 (3,41) 9,09 (1,03) 16,74 (5,37) 8,48 (3,42) 21,71 (4,23) 0,0003 4260,02 (2575,01) 43,72 (3,77) 11,83 (2,68) 15,9 (8,7) 12,93 (5,07) 20,36 (7,52) 0,0004 3563,78 (1655,92) 40,60 (6,29) 11,6 (2,6) 12,85 (5,51) 13,08 (4,24) 16,55 (4,77) 0,0004 5306,38 (2799,14) 44,14 (3,68) 11,51 (3,44) 16,45 (7,55) 12,21 (5,80) 21,84 (7,12) 0,0005 8386,83 (2501,41) 61,11 (8,98) 8,64 (3,72) 8,71 (5,99) 12,56 (5,50) 39,46 (12,18) 0,001 9994,47 (134,89) 62,54 (0,63) 6,60 (0,95) 7,82 (0,42) 11,13 (1,50) 41,81 (1,86) Сеть с пейсмейкерами. Параметры модели те же. Параметры модели STDP: α = 1.1, Wmax = 4.0 мВ, λ – различные значения.
  48. 48. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Динамика распределения весов возбуждающих связей λ = 3∙10– 4 λ =10– 2 λ =10– 7
  49. 49. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Модель связей малого мира Замена модели связей со случайной величиной задержки распространения спайка на модель «тесных» связей между нейронами, время распространения спайка пропорционально длине связи. Слева вверху: распределение длительностей распространения спайков по аксонам Слева внизу: распределение межпачечных интервалов в модели Справа внизу: распределения межпачечных интервалов культур нейронов in vitro λ =10– 8
  50. 50. МОДЕЛИРОВАНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Выводы  Проведено масштабное исследование параметров модели нейросети in vitro с синаптической пластичностью  воспроизведение параметров спонтанной активности, наблюдаемых в эксперименте, вызывает сложности  подобрано значение интенсивности пластических перестроек и топология сети, позволяющее приблизится к параметрам, наблюдаемым в эксперименте  Планы  завершение подбора параметров  сопоставление характеристик спонтанной активности с экспериментом  моделирование обучения в нейросети in vitro  сопоставление результатов обучения с экспериментом
  51. 51. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO
  52. 52. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Разработка специализированного ПО  Захват и анализ данных электрической активности культуры 1. Фильтрация и анализ в режиме реального времени 2. Выделение определенных событий в активности 3. Графическая визуализация 4. Запись в БД или Файл  Реализация воздействия на культуру 1. Управление стимулятором 2. Подключение различных модулей «ClosedLoop» экспериментов  Поток данных 25.6 Мбит/с  Анализируются все возможные каналы без потери производительности  В реальном времени:  Выделяются пачечные события  Подавляются артефакты стимуляции  Подавляются шумы и низкочастотные наводки
  53. 53. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO
  54. 54. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO
  55. 55. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Примеры кривых обучения 0 20 40 60 80 100 120 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 времяреакции номер итерации 0 50 100 150 200 250 1 2 3 4 5 6 7 времяреакции номер итерации стимулы
  56. 56. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO типичный вид кривой обучения статистика по 5 культурам Le Feber, Joost, Jan Stegenga, and Wim L. C. Rutten. 2010. «The Effect of Slow Electrical Stimuli to Achieve Learning in Cultured Networks of Rat Cortical Neurons». PLoS ONE 5 (1): e8871. Стимуляция без обратной связи Обучение Тестирование через 12 часов
  57. 57. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO
  58. 58. ОБУЧЕНИЕ НЕЙРОННЫХ СЕТЕЙ IN VITRO  Выводы  разработано ПО для стимуляции с обратной связью, позволяющее реализовывать протоколы обучения нейрональных культур  разработана методика реализации протокола обучения на штатном ПО  проведены пилотные эксперименты по обучению культур  Планы  накопление статистики по обучению культур  упрощение и доработка протокола обучения  исследование изменения спонтанной пачечной активности до, во время и после обучения  исследование динамики полного паттерна вызванной пачки
  59. 59. В ПОИСКАХ МЕХАНИЗМОВ
  60. 60. ПОИСКИ С-FOS  ИГХ DIV17 гиппокамп после низкочастотной стимуляции одиночными импульсами в отсутствие электрической стимуляции после высокочастотной стимуляции пачками
  61. 61. ПОИСКИ С-FOS  ИГХ DIV20 гиппокамп после низкочастотной стимуляции одиночными импульсами в отсутствие электрической стимуляции после высокочастотной стимуляции пачками
  62. 62. ПОИСКИ С-FOS  Количественный анализ результатов ИГХ по трем посадкам (15 культур по 10 полей зрения в каждой) Суммарная интенсивность флуоресценции свечения в местах нахождения клеток по зеленому каналу (c-Fos) была нормализована на интенсивность флуоресценции по синему каналу (ядра), и среднее арифметическое рассчитано по всем полям зрения. Количество c-Fos+ клеток было нормализовано на общее количество ядер, и среднее арифметическое рассчитано по всем полям зрения. ** Звездочками отмечены достоверные различия с контрольной группой (** р = 0,0004, * р = 0,04). * *
  63. 63. ПОИСКИ С-FOS  Стимуляция культуры кортикальных нейронов, DIV 17 50mM KCl 20%FBS Время после стимуляции, ч 0 50 100 150 200 250 0 3 7 Количествоклетоквмм2 0 5 10 15 20 25 30 0 3 7 Количествоклетоквмм2 До стимуляции Через 3 часа после стимуляции Время после стимуляции, ч
  64. 64. ПОИСКИ С-FOS  Кора, DIV 20, НЧС при нормальной спонтанной активности До стимуляции Через 2 часа после стимуляции
  65. 65. ПОИСКИ С-FOS  Развитийная динамика КоличествоEGFP- положительныхклетокпо всемматрицам,шт 13 культур из коры и гиппокампа новорожденных мышей линии с B6.Cg- Tg(Fos/EGFP)1-3Brth/J были высажены на мультиэлектродные матрицы. Гиппокампальные клетки светились значительно ярче. Одна из высаженных гиппокампальных культур давала интенсивное свечение (более 10 клеток в нескольких полях зрения) за сутки до появления пачечной активности. Необходимо отметить, что за сутки до фотографирования данной культуре была заменена среда на недостаточно прогретую. Эта же культура интенсивнее светилась за сутки до исчезновения электрической активности. В двух из пяти гиппокампальных культур наблюдалось слабое свечение (1-2 клетки в одном из полей зрения) за сутки до появления пачек в культурах.
  66. 66. ПОИСКИ С-FOS  Развитийная динамика DIV 4 DIV 6 DIV 8 DIV 10
  67. 67. ПОИСКИ С-FOS  Выводы  Химическая и электрическая стимуляция приводят к индукции экспрессии c-Fos в первичной диссоциированной культуре нейронов  Не удалось получить определенных результатов по экспрессии c-Fos в процессе развития культуры  Стандартные матрицы не позволяют получить качество имиджинга достаточное для уверенной регистрации динамики c-Fos в культуре трансгенных мышей
  68. 68. ПОИСКИ АКТИВНОСТИ
  69. 69. КАЛЬЦИЕВЫЙ ИМИДЖИНГ
  70. 70. ОБУЧЕНИЕ ПО ОТДЕЛЬНОЙ КЛЕТКЕ Клетка №5 После стимуляции с нормализациейПосле стимуляции без нормализации До стимуляции с нормализацией До стимуляции без нормализации
  71. 71. ОБУЧЕНИЕ ПО ОТДЕЛЬНОЙ КЛЕТКЕ
  72. 72. ПОИСКИ СИНАПСОВ
  73. 73. ПОИСКИ СИНАПСОВ
  74. 74. ПОИСКИ СИНАПСОВ

×