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Cromatografía

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Cromatografía

  1. 1. CROMATOGRAFÍACROMATOGRAFÍA
  2. 2. •En 1850 el químico alemánF.F.Runge, que trabajaba contintas, descubre que loscationes orgánicos se podíanseparar por migracióncuando se colocaba unasolución que los conteníasobre un material poroso,como papel .•En 1906 el botánico ruso M.Tsvet utilizó la cromatografíade columna para separarextractos vegetalescoloreados.
  3. 3. •A partir de 1940 los métodoscromatográficos adquieren extensiónmundial.•En 1940 Tiselius divide los métodoscromatográficos en cromatografía poranálisis frontal, desarrollo por elusión ydesarrollo por desplazamiento, obtuvoel premio Nóbel por sus trabajos en1948.•Para el mismo tiempo lacromatografía comienza a aplicarseen el campo de la bioquímica.
  4. 4. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retenciónselectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de unamezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades dedichos componentes.Fase MóvilFase MóvilFaseEstacionariaFaseEstacionariaConsiste en un liquido o gas que esarrastrado a través de la faseestacionariaConsiste en un liquido o gas que esarrastrado a través de la faseestacionariaConsiste en un solido o un liquidoanclado a un soporte solido pordonde el cual pasa la fase móvilConsiste en un solido o un liquidoanclado a un soporte solido pordonde el cual pasa la fase móvil
  5. 5. En Papel:•La fase estacionaria serepresenta por un papelfiltro y la móvil por undisolvente.•Análisis cualitativos.En Capa Fina:•Una fase móvil (normalmente undisolvente) y una fase estacionaria(la llamada capa fina que puedeser papel o gel de sílice).•Separar componentes puros.• Se analizan mezclas deaminoacidos.
  6. 6. Intercambio Iónico:•En este tipo decromatografía la faseestacionaria tiene gruposcargados queinteraccionanelectroestáticamentecon iones de signocontrario de la fase móvil.Intercambio Iónico:•En este tipo decromatografía la faseestacionaria tiene gruposcargados queinteraccionanelectroestáticamentecon iones de signocontrario de la fase móvil.
  7. 7. Por Exclusión Molecular:•Es un método por el cual lasmoléculas se separan en soluciónsegún su peso molecular.•Separa proteínas según sutamaño•La fase solida consiste enpequeñas perlas que contienenunos poros o cavidades detamaño calibrado.•La proteínas de mayor tamañono pueden entrar en lascavidades .•Las proteínas mas pequeñaspenetran en las cavidades.Por Exclusión Molecular:•Es un método por el cual lasmoléculas se separan en soluciónsegún su peso molecular.•Separa proteínas según sutamaño•La fase solida consiste enpequeñas perlas que contienenunos poros o cavidades detamaño calibrado.•La proteínas de mayor tamañono pueden entrar en lascavidades .•Las proteínas mas pequeñaspenetran en las cavidades.
  8. 8. Por Afinidad:Este método permite laseparación de lasmezclas proteicas porsu afinidad ocapacidad de unión aun determinadoligandoPor Afinidad:Este método permite laseparación de lasmezclas proteicas porsu afinidad ocapacidad de unión aun determinadoligando
  9. 9. Cromatografía de Participación:Es una de las técnicas que masse emplea en HPLC.La fase estacionaria es unsegundo liquido inmiscible conla fase móvil liquida. Este liquidose une a la superficie de unempaque solido finamentedividido mediante adsorción oenlaces químicos.Cromatografía de Participación:Es una de las técnicas que masse emplea en HPLC.La fase estacionaria es unsegundo liquido inmiscible conla fase móvil liquida. Este liquidose une a la superficie de unempaque solido finamentedividido mediante adsorción oenlaces químicos.
  10. 10. Se clasifica en dos tipos :Se clasifica en dos tipos :1. Cromatografía de partición defase normal: se emplean fasesestacionarias muy polarestrietilenglicol o agua; la fasemóvil es un disolvente no polarcomo el hexano o éteripropílico. En la fase normalsale primero el componentemenos polar; en el incrementoen la polaridad de la fase móvildisminuye, por tanto, el tiempode elución.2. Cromatografía de partición defase reversible: utiliza una faseestacionaria no polar que porlo general es un hidrocarburo.La fase móvil es un disolventepolar como agua, metanol oacetonitrilo. En la fase reversasale primero el componentemas polar; el tiempo de eluciónaumenta a medida queaumenta la polaridad de lafase móvil.
  11. 11. Graciaspor suAtención

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