Auxinas, AIA, IBA, ANA, Auxinas, Citoquinina, reguladores in vitro, BAP, CPPU, Brasinoesteroides, Ácido Abscisico, Carbo activado, Etileno, Nitrogeno, Urea, Agua de coco, Extracto de malta. Preparación de medios de cultivo.

1. Cultivo de Tejidos Vegetales
presentación de
FITOHORMONAS

2. ¿Qué son ?
• Compuestos naturales que poseen la
propiedad de regular procesos fisiológicos
en concentraciones muy por debajo de la
de otros compuestos (nutrientes,
vitaminas) y que en dosis más altas los
afectarían.

3. ¿Qué son ?
factores
externos: luz,
nutrientes, agua
y temperatura,
entre otros,
Factores
internos:
hormonas.
Desarrollo
normal de
una planta
• Depende de la
interacción de:

4. ¿Qué actividades cumplen ?
Regulan
procesos
de
correlación
recibido el
estímulo
en un
órgano
lo
amplifican
Traducen
generan una
respuesta en
otra parte de
la planta.

5. ¿Qué actividades cumplen ?
Interactúan
entre ellas
por distintos
mecanismos:
Sinergismo: la acción de una
determinada sustancia se
ve favorecida por la
presencia de otra.
Antagonismo: la presencia de una
sustancia evita la acción
de otra.
Balance
cuantitativo:
la acción de una
determinada sustancia
depende de la
concentración de otra

6. ¿Qué actividades cumplen ?
Se Diferencian
de las
hormonas
animales por
su efectos
Pleiotrópicos
Actua en diversos
procesos fisiológicos
Síntesis
no se relaciona con una
glándula, sino que están
presentes en casi todas las
células y existe una
variación cualitativa y
cuantitativa según los
órganos.

7. ¿Cuáles son y sus efectos?

8. ¿Sus estructuras?

9. Auxinas
Grupo de compuestos que estimulan la elongación
de las células.
Del griego
'crecer'
•ácido indolacético (AIA) es la forma natural predominante, actualmente se sabe que también son
naturales
•IBA (ácido indol butírico),
•ácido feniácetico,
•ácido 4 cloroindolacético
•ácido indol propiónico (IPA),
las más conocidas:
Auxinas
sintéticas
•ANA (ácido naftalenacético)
•IBA (ácído indolbutírico)
•2,4-D (ácido 2,4 diclorofenoxiacético)
•NOA (ácido naftoxiacético)
•2,4-DB (ácido 2,4 diclorofenoxibutilico)
•2,4,5,-T (ácido 2,4,5 triclorofenoxiacético)

10. Auxinas
Ubc. en toda la planta ↑ [] en las regiones meristemáticas
Su síntesis puede derivar de:
•triptofano, que por transaminación y descarboxilación da
origen al AIA o de la triptamina por oxidación.
Se le encuentra tanto como:
•Forma activa, molécula libre
•Forma inactiva, en formas conjugadas (con proteínas
solubles)
•transporte, almacenamientoen semillas en reposo, y de
evitar la oxidación por acción de la AIA oxidasa.
[] auxina libre en plantas varía de 1 a 100 µg/kg peso
fresco.
[] de auxina conjugada + ↑

11. Efectos Auxinas
Actúan en la
Mitosis.
Alargamiento
celular.
Formación de
raíces adventicias.
Dominancia Apical
Herbicida Partenocarpia Graviotropismo
Diferenciación de
xilema
Regeneración del
tejido vascular en
tejidos dañados
Inhibición del
crecimiento radical
en concentraciones
bajas
Floración senectud
Geotropismo
Retardan la caída
de hojas, flores y
frutos jóvenes
dominancia apical

12. Giberelinas
El Acido giberélico GA3
•Japon hongo Giberella
fujikuroi
•producía en crecimiento
inusual de las plantas de arroz

13. Giberelinas
Biosíntesis
Terpenos
Estructura:
•por ciclación de estas
unidades, formando
kaureno.
Sintetizado en el
camino
metabólico del
ácido
mevalónico.
Síntesis se
produce en todos
los tejidos de los
diferentes
órganos.
Mov. a través de
floema y xilema
No es polar como
en el caso de las
auxinas.

14. Citocinas
Derivan de adeninas
sustituidas
Promueven la división
celular en tejidos NO
meristemáticos.
Inicialmente fueron
llamadas cinetinas
En musgos, algas café,
rojas y en algunas
Diatomeas. .

15. EstructuradeCitocinas

16. Síntesis de Citocinas
En los órganos en crecimiento y en el
meristema de raíz.
A partir del isopentenil adenosina
fosfato (derivado de la ruta del ácido
mevalónico)
por perdida de un fosfato, eliminación
hidrolítica de la ribosa y oxidación de
un protón origina la zeatina
es una citocinina natural que se
encuentra en el maíz (Zea mays L.) de
allí su nombre.

17. Etileno
De estructura
más simple,
gaseoso.
Hidrocarburo, es
muy diferente a
otras hormonas
vegetales
naturales.
geotropismo y
abscisión
1960

18. Síntesis de Citocinas
Deriva de los C3 y C4
de la metionina
con gasto de ATP, a
S-adenosilmetionina
(SAM)
por acción de una
enzima pasa a ácido
aminociclopropano-
1 carboxílico (ACC)
por oxidación de
este y por la acc
oxidasa se forma
etileno.
Posee acción
autocatalítica
•La presencia de etileno
activa la acción del gen
que codifica la enzima
que pasa de ACC a
etileno

19. Escuela Politécnica de las Fuerzas Armadas
Departamento de Ciencias de laVida
Ingeniería en Biotecnología
Cultivo deTejidosVegetales
Msc. Mónica Jadan
AUXINAS
Esteban Caiza

20. AUXINAS
Hormonas
vegetales
“auxein” = crecer
1928 - Frits Went
1881 - Charles
Darwin.
Elongación
celular
Ácido
Indolacético
(AIA)

21. AUXINAS
NATURALES SINTÉTICAS
Ac. Indolacético (AIA) Ac. Naftalenacético (ANA)
Ac. 4-cloro-indolacético (4-Cl-IAA) Ac. Naftoxiacético (NOA)
Ac. fenilacético (PAA) Ac. 2, 4 diclorofenoxibutílico (2,4-DB )
Ac. diclorofenoxiacético (2,4,D)
Ac. 2,4,5-triclorofenoxiacético (2,4,5-T)
Clasificación:
Tabla 1. Clasificación de las auxinas

22. AUXINAS
Fig 1. Estructura de algunas auxinas naturales y sintéticas.

23. AUXINAS
Biosíntesis:Meristemas
apicales, hojas jóvenes, frutos en
desarrollo.
Efectos: Alargamiento (tallos),
abscisión (hojas, flores, frutos),
formación de raíces adventicias,
Floración y fructificación,
dominancia apical,
extensibilidad pared celular,
diferenciación vascular.

24. AUXINAS
AIB y ANA son frecuentemente usados para
enraizamiento, 2,4-D para inducción de callos
Se disuelven en etanol diluido
o solución de Na(OH)
2,4-D,ANA,
AIA,AIB
[ ] mM o uM
(1mM = 10-3
mol/L)
pH: 5,5 – 6,0
De Fossard
(1976) AIB
0.01-0.5-5 mg/L

25. AUXINAS
Fig 2. Formación de callo por efecto de la auxina 2,4-D

26. AUXINAS
Fig 3. Efecto de las auxinas y citoquininas

27. Fig 4. Efecto de la composición del medio de cultivo sobre la las células de tabaco.
AUXINAS

28. 2,4 D
ALEXANDRACHASIQUIZA

29. HISTORIA
Usado en la
guerra de
Vietnam por
EEUU.
50 % de 2,4-
D
50 % de
2,4,5-T
Herbicida

30. 2,4 D
Ácido 2,4
Diclorofenoxi-
acético
Auxina
Sintetizada
Químicamente
Regulador de crecimiento
Formador de
callo
Concentraciones de
0.01 y 6.0 mg/L
PM: 221

31. Almacenaje Líquido:
2-8°C
pH: 5.5-6
Etanol
Dimetil-
sulfóxido
Eficaz
Soluble
Callo
Efectos tóxicos
Almacenaje del polvo: RT
Coautoclavable
con otros
componentes de
los medios

32. EFECTOS
TÓXICOS

33. BIBLIOGRAFÍA:• Sigma- Aldrich, 2013, Productos y servicios, recuperado el: 09/09/2013.
disponible en
[http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d7299?lang=en&reg
ion=EC]
• Almeida, F., 1974, “Aspectos tóxicos de los herbicidas 2,4 D y 2,4,5 T”,
Universidad de Buenos Aires, recuperado el 09/09/2013, disponible en
[http://www.produccion-
animal.com.ar/sanidad_intoxicaciones_metabolicos/intoxicaciones/34-
toxicologia_herbicidas.pdf]

34. UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
CULTIVO DETEJIDOSVEGETALES
JAVIER DONOSO

35. AIA
AIA: Ácido indolacético
Fórmula: C10H9NO2
Auxina natural.
Produce alargamiento y
agrandamiento celular.
In vitro: Promueve la
división celular.
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/d/d3/Indol-3-
ylacetic_acid.svg/200px-Indol-3-ylacetic_acid.svg.png

36. FUNCIONES DEL AIA
Promueve
el fototropismo positivo.
Promueve y provoca el
desarrollo de raíces
laterales y adventicias.
Estimula el desarrollo
de los frutos

37. Cultivo in vitro:
Importante en el
enraizamiento.
Tiene la
capacidad de
generar raices
adventicias.
http://revista.ibp.co.cu/component/docman/doc_view/1435-v5-n2-2005289-94.html

38. CONCENTRACIÓN
No es posible
establecer
una
concentració
n de auxina
particular.
Varia desde
0.001 – 10
mg/L
Punto óptimo:
0.1- 1 mg/L

39. ADICIÓN AL MEDIO
Se agrega el
AIA al MB
Se ajusta el
pH a 5.8
Adición y
dislución del
agar.
Esterilización
por
autoclavado.
Se agregan
sustancias
termolábiles
esterilizadas
por filtración

41. Peso Molecular: 203.3 gramos
Fórmula Molecular: C12-H13-N-O2

42. AUXINAS SINTÉTICAS MÁS ACTIVAS
- IBA (Acido indol butírico)
- NAA (Acido naftaleno acético)
- 2,4-D (Acido 2,4
diclorofenoxiacético)

43. ACIDO INDOL
3-BUTIRICO
Mas eficiente:
IAA (Acido Indol
Acetico)
Promover
formacion de
raices laterales
Comercial

44. IBA
Diluyente: Agua
Solvente:
Alcohol diluido -
Solucion de Na(OH)
USO: Aerosol - Polvo

46. Concentración de trabajo 000.1- 10 (mg/L)
Almacenaje:
Esterilización: Autoclavado y filtrado
Polvo: 2 – 8 °C
Líquido: 0°C

47. - Elongación celular
- Expansión de los tejidos
- División celular (formación de callo)
- Formación de raíces adventicias
- Tropismos
- Dominancia apical (Inhibición de la
formación de vástagos axilares y
adventicios)
- Baja concentración: Formación de
raíces adventicias.

48. NOMBRE DESARROLLADO
FORMULA

49. FAMILIA
UTILIZACION
CONDICIONES pH
TIPO

50. EFECTOS IN VITRO
EFECTOS EN LA PLANTA
DOSIS Y FRECUENCIA DE APLICACION ALTAS

51. COMO ACTUA?

52. COMO SUMINISTRAR EN EL MEDIO DE CULTIVO?
Disminución actividad

53. Auxinas
Citoquininas

54. Citoquininas
Auxinas

55. Auxina Citoquinina

56. Citoquinina
Nombre :Paola Iturralde

57. Definición
Constituyen un grupo
de
hormonas vegetales
Promueven
la división celular
En tejidos no
meristematicos

58. Estructura química
Derivados de adenina
•Cadena lateral unida al grupo amino 6
del anillo purinico
Isoprenoide
Aromatico
Zeatina ,
isopenteniladenina y
dihidrozeatina
Benciladenina,
kinetina y topolina

59. Biosíntesis
Asociada a los meristemos
Apicales y cambium
Semillas, frutos y raíces
En cultivo in vitro se prefiere
las sintéticas gracias a su
Gran estabilidad

60. Citoquininas

61. Preparación y usos
 Medios esterilizados en polvo
 Filtrados en 0,2 µm de un doble filtro
dentro de una botella esteril
PROTOCOLO
Para preparar
una 1 mg / ml de
solución madre
Añadir 100 mg
de medio a un
matraz aforado
,Y 2-5 ml de
disolvente
Añadir 1,0 ml de
la solución
madre a 1 litro
de medio
Se utiliza
concentraciones
A un intervalo
de 0,1-10,0 mg / L

62. Tabla de Molar Preparación
Equivalencia y Solución

63. Funciones
 Pueden regular la división celular
 Estimular la proliferación de
brotes axilares y adventicias.
 regular la diferenciación.
 inhiben la formación de raíces.
 activar la síntesis de ARN y
proteínas.
 estimular la actividad enzimatica.

64. Función
citoquinina/auxina

65. NOM B RE: FRED D Y M OPOSIT A
FEC HA : 1 0/ 09/ 201 3
REGULADORES IN VITRO
ESCUELA POLITECNICA DEL
EJERCITO
INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA

66. Citocininas
Son derivados de la
adenina que promueven
la división celular.
incrementan la tasa de
división celular, el
transporte de
solutos hacia las hojas,
semillas, flores y frutos y
producen un retardo de la
senescencia
de las hojas.

67. 6 - (y, y-DIMETHYLALLYLAMINO) purina
(2-Isopentenyl) adenina, 2iP,
N6-[2-amilo] adenina
CARACTERISTICAS
Este es un regulador in vitro
que promueve la división
celular en las raíces y brotes,
también es un regulador para el
desarrollo de microinjertos

68. 6 - (y, y-DIMETHYLALLYLAMINO) purina
CARACTERISTICAS
Cultivo de células de plantas
ensayadas
Son de origen natural
Soluble en NaOH 1 N
Pertenece a la familia de la
citocininas.

69. 6 - (y, y-DIMETHYLALLYLAMINO) purina
CARACTERISTICAS
Peso molecular: 203.24
Almacenamiento : De -20 a 0 º C
Punto de fusión: 212-214 ° C

70. BIBLIOGRAFIAS
 http://www.ecuaquimica.com/pdf_agricola/CYTOK
IN.pdf
 http://www.phytotechlab.com/detail.aspx?ID=242
 http://www.plantmedia.com/index.php?main_page
=product_info&products_id=126165

71. UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS-ESPE
CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES
BAP
Bencilaminopurina
Giovanna C. Móran Marcillo

72. Fórmula
empírica • C 12 H 11 N 5
Peso
molecular
• 225,25
g/mol
Estructura
Bencilaminopurina

73. Características
Regulador de
crecimiento
sintético
Pertenece a
la familia de
las
citoquininas
junto con las
auxinas
provoca
crecimiento
de las plantas

74. Características
BPA retrasa
la
senescencia
foliar
Reduce la
degradación
de
pigmentos
proteínas
fotosintéticas
y membranas
cloroplásticas
Mantiene el
equilibrio
hídrico del
tejido

75. In vitro
Xanthosoma sagittifolium L (ocumo)
determinar la
concentración de
citoquinina para
inducción de
brotes
concentraciones de 0,
2, 3, 4 mg.L-1 (BAP)
longitud y
biomasa de los
brotes,biomasa
fresca total e
índice de
crecimiento

76. 2 mg.L-1 de BAP en los
medios de cultivo fue
determinante para la
inducción de brotes
Se concluyó que el uso de
6-BAP mejora la
multiplicación y calidad
de los brotes
citoquinina más
efectiva y empleada es
BAP
para la inducción de
yemas axilares.
frecuencia de 75%

77. Preparación
Murashige and Skoog Gamborg’s
(Toledo, 1998)

78. Tabla de equivalencia molar y preparación de soluciones
SIGMA-ALDRICH
http://www.sigmaaldrich.com/life-science/molecular-biology/plant-biotechnology/tissue-culture-protocols/growth-regulators.html

79. Usos
Prolongan la
vida de flores
cortadas
Aumentar la
productividad de
cultivos
Prolongar el
almacenamiento
postcosecha

80. Yanara Naranjo Rojas
Escuela Superior Politécnica del Ejército
Departamento de Ciencias de la Vida
Facultad de Ingeniería en Biotecnología
Cultivo de Tejidos Vegetales

81. CPPU
1- (2- cloro - 4- piridil) 3- fenilurea)
Regulador de crecimiento
Citoquininica
Diámetro y peso
- Uvas
- Kiwi
0,1% p/v SL
Concentración soluble
M.Acción: Sistémico
Fenilurea
Citoqunina sintético

82. Meneses, 2002
Efectos de CPPU y GA en vitícolas “Italia” en región
Submedio San Francisco, Noreste de Brasil
CarlosAgusto Meneses Feitosa (2002)

83. “In vitro”
Mora, 2010
Explante deArándano en medioWPM
(Woondy plant medium)
Usadas como Citocininas
- Organogénesis
- Desdiferenciación
Auxinas/Citocininas
- Alta: Raices
- Baja: vástago
Producción de hojas (2mg/L)
Mora, 2010: "ORGANOGÉNESIS in vitro DE
ARÁNDANO Vaccinium
corymbosum L."
"ORGANOGÉNESIS in vitro DE ARÁNDANO Vaccinium
corymbosum L."
Explantes de
epicotilo

85. Bibliografia
 Meneses, C. 2002. Efectos de CPPU y GA en vitícolas “Italia” en
región Submedio San Francisco, Noreste de Brasil. Revista RBF,
ISSN 0100-2945.
 Ormedo,A. (S/A). Influencia de cppu (n-(2-cloro-4-piridil)-
infenilurea) sobre producción y calidad de fruta de arándanos.
Universidad deTalca.
 http://www.anasac.cl/agropecuarios/opensite_det_2009081012
4855.aspx
 http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2211/4_-
_Cultivo_in_vitro.pdf?sequence=6
 http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2211/4_-
_Cultivo_in_vitro.pdf?sequence=6

86. DANIELA NAVARRETE

87. GENERALIDADES
ESTEROIDAL
En muy bajas
cantidades
únicas
hormonas
vegetales
con una
estructura
química
crecimiento
crecimiento
Compuestos
que actúan
como
reguladores de
crecimiento
vegetal
PAPEL
IMPORTANTE

88. Sustancias
vegetales
fabricadas en
un determinado
lugar de una
planta
se transladan a
otro donde
actúan
regulando el crecimiento,
desarrollo o metabolismo
del vegetal

89. En los tejidos jóvenes de las
plantas en crecimiento:
procesos de
expansión
división
diferenciación
celular
Incrementar el
rendimiento de los
cultivos

90. AUSENCIA o cambios en la
concentración:
enanismo
severo
cambios
drásticos
del
fenotipo
cambios
en la
morfología
de las
hojas
poco
desarrollo
de las
raíces

91. ESTRUCTURA
cuatro anillos (A,
B, C y D) y una
cadena lateral
condensación de
bloques de cinco
átomos de
carbonos
isoprenos
esteroides con 27,
28 o 29 átomos de
carbono
diferentes
sustituyentes en
los anillos A y B y
en la cadena
lateral

92. EFECTOS
incremento en la
tasa de
elongación del
tallo
aumento en la
expansión de las
hojas
crecimiento del
tubo polínico
desenrollamiento
de las hojas
reorientación de
las microfibrillas
de celulosa
adaptación al
estrés 
aumenta
tolerancia al frío
organogénesis y
embriogénesis
somática

93. BRASINOLIDO
Es el más activo y el primero en
aislarse de Brassca napus en 1979
Biosintéticamente provienen del
cicloartenol, obtenido desde el
escualeno (triterpeno)

94. EFECTOS
 Favorecen la elongación y división celular en
segmentos de tallos.
 Favorecen el desenrrollamiento de las hojas.
 Favorecen el crecimiento de tubos polínicos.
 Promueven la diferenciación del xilema.
 Favorecen la germinación.
 Inhiben el crecimiento de las raíces.
 Retardan la abscisión de hojas.
 Aumentan la sensibilidad a las auxinas

95.  Estimula la actividad fotosintética
acelerando la fijación de CO2
 Incrementa la biosíntesis de proteínas y
el contenido de azúcares reductores.

96. COMO ACTÚA
 Su mecanismo involucra la unión a
receptores LRR (enriquecidos en leucina)
ligados a la membrana plasmática,
miembros de la familia de receptores tipo
kinasa.

97. BIBLIOGRAFÍA
 http://www.revistaciencia.amc.edu.mx/in
dex.php?option=com_content&task=vie
w&id=47
 http://fisiohorticola.files.wordpress.com/2
008/09/clase_5_otras_fitohormonas.pdf
 http://www.biologia.edu.ar/plantas/regula
dores.htm#Brasinoesteroides y
turgorinas

98. ESCUELA POLITÉCNICA DEL
EJÉRCITO
CARRERA DE INGENIERÍA EN
BIOTECNOLOGÍA
CULTIVO DE TEJIDOS
VEGETALES
ABSCÍSINAS
ALEJANDRA OVIEDO

99. ¿Qué es el Ácido Abscísico?
(García, Roselló & Santamarina.,2006).
Se les denomino dorminas.
Puede ser sintetizada por células de
hojas maduras, tejidos estresados,
semillas y el ápice de raíz.
 Se transporta principalmente por el
floema pero también por el xilema .
Concentración en plantas 0.01 y 1
mg/L
En plantas marchitas puede
incrementarse hasta 40 veces
http://www.barrameda.com.ar/botanica/images/botanic79.jpg

100. Funciones biológicas
• Estimula el cierre estomático .
• Inhibe el crecimiento del tallo pero no el de las raíces;
en algunos casos puede incluso inducirlo.
• Induce en las semillas las síntesis de proteínas de
almacenamiento.
• Inhibe el efecto de las giberelinas.
• Induce y mantiene la latencia.
• Induce la senescencia en hojas.
• Induce indirectamente la defensa contra patógenos.

101. ABA (-) ABA (+)
Efecto de ABA en
latencia de semillas
http://www.flickr.com/photos/mdecena/5867155322/

102. Efecto en plantas in vitro
- Produce efecto negativo en los
cultivos in vitro.
- Es un inhibidor del crecimiento
(antagonista de auxinas,
citoquininas y giberelinas)
- Tolerancia al estrés ambiental
(estrés hídrico):
- Dormición: retraso en el tiempo de
dormición de la semilla
- Induce senescencia mediante
inducción de etileno.
mejorvendedor.wordpress.com
3.bp.blogspot.com

103. GRACIAS

104. Bibliografía
• García J., Roselló J. & Santamrina P. (2006) Introducción al funcionamiento de las plantas.
Editorial de la UPV. Valencia.
Imágenes:
ABA en semillas. [Extraído el 09/09/2013].
http://www.flickr.com/photos/mdecena/5867155322/
Xilema y floema. [Extraído el 09/09/2013].
http://www.barrameda.com.ar/botanica/images/botanic79.jpg
Cultivo in vitro. [Extraído el 09/09/2013].
http://mejorvendedor.wordpress.com/2011/01/03/seminario-cultivo-plantas-in-vitro/
http://3.bp.blogspot.com/-
IGkGY5dt0W8/Tl5aHAXi2KI/AAAAAAAAFnM/orRr5vfmz5g/s320/Cultivos%2Bin%2Bvitr
o%2Blibres%2Bde%2Bpat%25C3%25B3genos.jpg

105. David Ramírez

106. 
Adsorbente
altamente
cristalino
Porosidad
interna
desarrollada
Microporos
menor a 1
nanometro
1 gramo
puede poseer
un area de
500 metros
cuadrados

107. 
auxinas y citocininas
se liberan
progresivamente en el
medio favoreciendo
embriogénesis
somática.
Adsorbe sustancias
químicas en general
Limita los problemas
de
oxidación(compuestos
fenólicos)

108. 
Desarrollo de
cultivos
inhibidos
Induce a la
sinteisis de
compuestos
(benzoquinonas
en
lithospermum)
El clima
luminoso del
cultivo cambia
(se obscurece) y
forma raíces.
Efecto
estimulador del
crecimiento y la
organogénesis
de las especies
leñosas.

109. 
Promueve la embriogénesis
somática y la embriogénesis
en cultivo de anteras
Ayuda a estabilizar el PH
Concentración 0,2 – 3 % P/V

110. Nombre químico (IUPAC): carbono activado
Fórmula química: C
Estructura química
Combinados en forma
grafitica
Placas separadas con
distintas orientaciones
(poro)

111. 
 http://www.cnf.org.pe/secretaria_conflat/memoria
s/DOCUMENTO%20MESAS/MESA%201/Graciela
%20Castillo.pdf
 http://www.carbonactivo.com/web/index.php?Ite
mid=81&id=50&option=com_content&task=view
 http://books.google.com.ec/books?id=yLLONP5TP
LIC&pg=PA16&dq=citoquinina&hl=es&sa=X&ei=1Z
guUtnnOZHO9gStkID4BA&ved=0CFUQ6AEwCA#
v=onepage&q&f=false
Bibliografía

112. ETILENO
• Promueve la maduración de los
frutos y la senescencia (flores y
hojas).
• Inducen la abscisión de las hojas.
• Promueve el crecimiento lateral
(pérdida de gravitropismo).
• Respuestas ambientales,
patógenos, heridas, estrés
abiótico.

115. • Es una de las fitohormonas más ampliamente
utilizadas en la agricultura.
• Las auxinas y el ACC pueden disparar la
biosíteis natural del etileno.
• Debido a su alta velocidad de difusión, es
difícil de aplicar como gas, pero esta limitación
se soslaya utilizando algún compuesto que
libere etileno: ethephon (ácido 2-
cloroetilfosfónico) nombre comercial (Etherel)

117. • Componente esencial
(estructural,formación de aa,
clorofila, enzimas, etc)
• Estimular al crecimiento,
especialmente en la etapa inicial
de crecimiento vegetativo.
• Genera un alto índice de área
foliar.
• Incrementa el número de flores, #
y peso de la vaina (rendimiento).
• Regulador de fitohormonas.
NITRÓGENO

118. • El N en general destaca por sus
concentraciones relativamente altas en los
medios de cultivo.
• Puede ser suministrado en forma de amonio
y/o nitrato, también en forma de úrea,
glutamina y caseína hidrolizada.

120. ÚREA
• En la tierra entre el 8 y 10 %

121. UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE
CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
CULTIVO DE TEJIDOS
Jéssica Villarreal
Máster
Mónica Hadan 10 – Sep – 2013
Quito - Ecuador
10/09/2013 122

122. 12310/09/2013
1942, Van Overbeek mostró que embriones se
podían cultivar in vitro hasta la madurez
Utilizando el endosperma líquido del
Coco
Como suplemento de un medio
de cultivo estándar
1948, Caplin: potencial
AC induce la división
celular en tejidos
diferenciados
Observaron 1era vez en el parénquima
del floema secundario de la raíz de
zanahoria
Se sabía que el AC era sólo uno de los líquidos que, al ser
nutritivos para los embriones inmaduros, podía producir el
mismo efecto en tejidos y en células explantadas.

123. 12410/09/2013
Substancias
Naturales
• Termoestablles
En relación a sus
componentes se
dividió
• Mezcla de aa y amidas
• Fracción neutral (mio inositol y d – sorbitol
• Fracción Activa (difenil urea y leuco
antocianina)
Resultado total
de los 3
• AC mezcla
compleja cuyos
componentes y [ ]
Unidas por
carbonos
activos
En Coco se desarrolla gran cantidad de endosperma líquido donde se almacenan
nutrientes para el embrión en desarrollo, mientras el embrión siga latente el endosperma
inducirá la división celular
5 – 10% interactúan con auxinas y
promueven el crecimiento

124. 12510/09/2013
Medio complejo con gama de
componentes orgánicos e inorgánicos
Buena capacidad de
amortiguación
Mg, P, Azúcar 2,5%
N2 no proteico soluble
en forma de aa

125. 126
Fuente de N
reducido (tejidos
se oscurecen y
mueren)
Precursor de adenil
citocinina
Ac.
Aspártico y
glutámico.
Malta de
Ragi
0.1% y
como un
suplemento
Diversos tejidos responden de manera
diferente a varios compuestos

126. 127
 El uso del AC se justifica no solo por ser un líquido amortiguador sino
también porque sus cualidades promotoras del crecimiento
frecuentemente son superiores en su totalidad a las de otros medios
conocidos.
 En aquellas áreas donde crece, el coco es significativamente más
barato que compuestos purificados o sintéticos tales como la zeatina o
el inositol.

127. 10/09/2013 128

128. Preparación de medios
y otros compuestos que
se añaden
Marco Viteri

129. Preparación del medio de
cultivo
Es necesario preparar el medio utilizando agua
bidestilada o agua desmineralizada-destilada.
Se debe evitar el almacenamiento prolongado
para evitar contaminantes, todas las sustancias
deben ser de alto grado de pureza.
La preparación dependerá del tipo de medio, su
consistencia y componentes termolábiles.

130. a. Medios semisólidos sin sustancias
termolábiles
Incorporación del
medio basal (MB), de
los reguladores y
otros compuestos,
ajustar el pH.
Adición y disolución
del agar, distribución
en los recipientes de
cultivo (cajas Petri,
tubos de ensayo,
etc.).
Esterilización en el
autoclave

131. b. Medios líquidos con o sin sustancias
termolábiles.
Se realiza el mismo
procedimiento de a,
pero sin adicionar
agar, y esterilizando
por filtración en
caso de que existan
sustancias
termolábiles.

132. c. Medios semisólidos con una o mas
sustancias termolábiles.
Incorporación de
compuestos que pueden
ser esterilizados en
autoclave, ajustar pH.
Adición y dilución del
agar.
Incorporación de las
sustancias termolábiles
esterilizadas por
filtración. Componentes
esterilizados a
temperatura de 40-50°C.
Distribución del medio en
los recipientes
previamente esterilizados
en el autoclave.

134. Se adicionan como fuentes de nitrógeno
reducido, factores de crecimiento,
carbohidratos, y otros. Entre ellos están el
agua de coco, AC, (5-15%, v/v)m el jugo de
frutos de tomate, extracto de levadura y
extracto de tubérculos de papa.
El jugo de frutos de tomate se lo utiliza
como inhibidor de crecimiento de semillas.
El Carbón activado incorporado al medio
(0.1-5%), ha demostrado ser de utilidad en
el cultivo de diferentes explantes,
posiblemente por absorber metabolitos
tóxicos.

135. Se añaden ácidos orgánicos como el
cítrico, el málico, el succínico y el
piruvato, como precursores de
aminoácidos.
Sustancias antioxidantes (ácido ascórbico,
L-cisteinam polivinilpirrolidona) puede ser
de utilidad para el cultivo de explantes
con alto contenido de polifenoles.

136. 2,3,5 TIBA (Ácido
triiodobenzoico)Esterilizable
por filtro
Concentración
0.05-5.0 mg/L
Solvente:
NaOH 1N
Diluyente:
Agua
Auxina
Peso molecular 499.8
es un inhibidor de transporte de auxina, para
estudiar el papel de flujo de auxina durante
el crecimiento y desarrollo de plantas.

137. Bibliografía
 Roca, W.,(1993), Cultivo de tejidos en agricultura, cap 2,
Medios de cultivos: generalidades, composición y
preparación.
 Sigmaaldrich, (en línea), recuperado el: 06/09/2013,
disponible en: http://www.sigmaaldrich.com/us-
export.html