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Entamoeba histolytica




                            Entamoeba histolytica
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                                  Protozoarios
Entamoeba histolytica



                   E.nana         Rizhopodos:
      Entamoeba histolytica E. coli
   Y otras amebas no patógenas
               Dra. Hilda María Solís Acosta
    Profesora Principal del Departamento de
Entamoeba hartmanni Microbiología medica
                    Facultad de Medicina
                       2012 UNMSM            Iodamoeba
Definición:
Producen amebiasis
                Amebiasis
Infección del intestino grueso del
hombre por la ameba Entamoeba
histolytica que ocasionalmente puede
tener localizaciones extraintestinales e
invadir el hígado, pulmón, piel y
cerebro.
(amebiasis secundaria)
Entamoeba histolytica
               Antecedentes
En 1587 se reconoce la Disentería.

Sennert (1626) menciona la contagiosidad de
la enfermedad.

Pisonis en 1648 “Historia rerum naturalium”
base de la medicina tropical.
En 1875 Lösh descubre trofozoítos
móviles en heces de agricultor :
Amoeba coli.

En 1883 Koch en autopsias:
Entamoeba disenteriae .
En 1885 Kartulis describe las
amebas en abscesos hepáticos.

 En 1893 y 1894 Quink y Ross describen
 las formas quísticas como formas de
 resistencia de las amebas.

 En 1903 Schaudinn Entamoeba
 histolytica Entamoeba coli .
En 1908 Martin, noción de portador
asintomático.



En 1912 Rogers acción curativa de la
emetina.
Biologia de Entamoeba histolytica
   Presenta 2 estadios evolutivos:
   Trofozoito

   y



   Quiste.
Caracteres morfológicos y fisiológicos
             De E. histolytica
Formas vegetativas (trofozoítos)

 La forma magna mide 20 a 30 μm .
 La forma minuta mide 10 a 20 μm.
 Se movilizan emitiendo psudopodos
 A 37° movimientos lentos, emisión de
 seudópodos con desplazamientos amplios
 de citoplasma.
 A 20° desplazamientos mínimos, se
 forman seudópodos de manera explosiva.
Imágenes de
 trofozoitos

Entamoeba
 histolytica
Caracteres morfológicos y fisiológicos
             Formas quísticas
Enquistamiento únicamente en la luz del
                intestino

El quiste maduro es esférico
12 a 16 μm.

Núcleo único (prequiste) :
quiste maduro con 4 núcleos.
Quiste joven tiene uno o
dos núcleos con
citoplasma granuloso. Se
observa dos bastones
gruesos son los cuerpos
cromatoides o siderófilos .
Imágenes de
  quistes

Entamoeba
 histolytica
Ciclo evolutivo
Forma infectante: Quiste maduro
                     tetranucleado
Vía de infección : Oral

Mecanismo de infección : ingesta de
agua o alimentos contaminados con
heces humanas con quistes maduros
tetranucleados.
Ciclo de vida de
Entamoeba histolytica
CICLO DE VIDA DE E. histolytica
       quiste
COMPLICACIONES EXTRADIGESTIVAS   Entamoeba histolytica   28
Ciclo evolutivo no patógeno

Ingesta de quistes maduros.

Desenquistamiento en medio gastro-
intestinal.
Tripsina pancreática con T°, pH y
potencial de oxido reducción.

Los 4 núcleos se dividen por mitosis y
estado fugaz de metaquiste (8 núcleos).
División del citoplasma en 8
pequeñas amebas que se
convierten en trofozoítos
minuta.


En la luz del colon división por
bipartición y aumentan
considerablemente.
-
Las formas minuta , se redondean con una
 pared gruesa.


-Los quistes resisten en el exterior al ser
  eliminados pasivamente con las heces .


-Los trofozoítos sobreviven al fondo de
  las vellosidades intestinales .
La eliminación de quistes no es
constante y sufre variaciones en
el tiempo.


El ciclo no compromete ningún
órgano patogénicamente.
Trofozoíto minuta se transforma en
patógeno: factor hospedero o factor
parásito (cepa).

Amebas penetran la pared intestinal,
se agrandan y fagocitan hematíes .

Se dividen por bipartición a ritmo
acelerado.
Poder lítico, provocan
úlceras extendidas en la
pared del intestino y en otros
órganos.


Mecanismo de
transformación en patógeno
no es bien conocido.
Ciclo evolutivo patógeno


Por Tratamiento o Anticuerpos, las
amebas hematófagas disminuyen ritmo
de multiplicación.


Se destruyen muchas amebas y las
sobrevivientes migran hacia la luz del
intestino.
Los trofozoítos disminuyen de tamaño y
luego se enquistan, se reinstala ciclo
minuta.


La presencia de glóbulos rojos en el
citoplasma del trofozoito es elemento
diagnóstico, en paciente con diarrea.
Patogenicidad
      Mecanismos de virulencia


Experimentos:
Contacto en cultivo lectina
reconociendo galactosamina de la
célula epitelial suficiente para provocar
hendiduras en la membrana y que lleva
a su destrucción.
Desaparición de
microvellocidades con
modificaciones letales.


Proteasas provocarán la
transformación esférica y daño
de la matriz celular.
Mecanismos de virulencia



Las proteinasas (histolisína una
proteinasa-cisteína) de la ameba,
degradan el tejido colágeno , la
fibronectina, en los cultivos celulares.
También se ha detectado toxinas
citopatógenas que producen
efecto de aglutinación celular y
producen Ac IgG.


Por movimientos de pseudópodos
ejerce efecto mecánico en
células epiteliales y su soporte.
Lesiones
intestinales

Entamoeba

histolytica
Diagnóstico de la Amebiasis
                  Directo
           Examen microscópico

Examen en fresco de heces, a 37° C,
inmediatamente después de la toma de muestra.

Se encuentran trofozoítos de 20 a 30 μm
conteniendo glóbulos rojos.

Se debe repetir el examen ( 3 exámenes seriados)

Es mejor colectar la muestra a través de una
rectoscopia.
Cultivos en medios artificiales
como PAVLOVA.


Cultivos en líneas celulares.
Metodos de Concentración (Ritchie, Faust)

Métodos de coloración :
Temporales como la de lugol y otros.

Permanentes como, frotises de heces
Coloreados con:
a. Hematoxilina férrica

b. Gomorris trichrome.
Se puede agregar colorantes como: la
eosina que tiñen el fondo de rosa para
observar los quistes en negativo.

El lugol colorea las membranas
externas y nucleares de color amarillo o
marrón.
El reactivo de Bailenger colorea
el citoplasma y bastones
cristaloides en rojo y el núcleo
negro.
La coloración Sargeaunt
colorea la pared externa del
quiste, la membrana nuclear de
color verde claro y los cuerpos
Diagnóstico: forma magna
En referencia al diagnóstico el hallazgo
de trofozoítos con eritrocitos
fagocitados en heces frescas o biopsias
se correlaciona con la presencia de E.
histolytica.
Entamoeba hartmanni
Entamoeba hartmanni
                      Trofozoito
Entamoeba hartmanni
Cosmopolita
En 1959 fue descrita nuevamente por
Barrow.
Se le consideraba una raza pequeña de
E. histolityca.
Faust 1958, informa sobre sus
diferencias con E. histolytica
Entamoeba hartmanni
trofozoito          quiste
Morfología, biología y ciclo evolutivo.
E. hartmanni semejante a E. histolytica
en todas las fases de su ciclo vital,
salvo por su tamaño.
Trofozoitos desde 4 hasta 12µ, no
ingieren hematies, y son menos
moviles.
Núcleo similar al de E. coli , por su
cromatina y su cariosoma.
Quistes de 5 a 10 micras, los
inmaduros con 1 o 2 núcleos,
varios cuerpos cromatoides
cortos.


Quistes maduros con 4 núcleos.
Epidemiología
Cosmopolita.

Se adquiere por ingesta de quistes
maduros.

La prevalencia es casi igual a la
E. histolytica.
Patogenia, anatomia patológica y
sintomatología.
E. hartmanni es considerada un
sinónimo de E. histolytica.

Experimentalmente se vio que producía
colitis amibiana en perros y gatos.

En humanos no se ha observado
patología.
Diagnóstico
Examen de heces, coloraciones

E. hartmanni e E. histolytica se
diferencian mejor por el tamaño de sus
quistes.

E. hartamanni se confunde
frecuentemente con E. nana .
Tratamiento
   No se indica ya que los
   portadores son asintomáticos.
Profilaxis
   Evitar ingerir alimentos o agua
   contaminados con heces
   humanas.
Entamoeba dispar
Entamoeba dispar
Entamoeba dispar
La ameba comensal Entamoeba
dispar, morfológicamente idéntica a
E. histolytica.
Entamoeba dispar
trofozoito          quiste
ANTECEDENTES


Emil Brumpt en 1925 describe una
ameba
similar a E. histolytica , con 4 núcleos y
la denomina


Entamoeba dispar , considerándola no
patógena
En 1978 Sargeunt y Williams utilizando
los patrones de migración
electroforética de tres isoenzimas
(glucosa fosfato isomerasa,
fosfoglucomutasa y malato
xidoreductasa) lograron establecer:


Cuatro diferentes zimodemas, uno de
los cuales es relacionado con la forma
invasora y los otros con la forma no
EPIDEMIOLOGIA
Se revisan los nuevos hallazgos en cuanto la


epidemiología en distintos países del mundo,
utilizando


 las técnicas moleculares de diferenciación
para
E. histolytica / E. dispar.


Los pacientes en climas templados presentan
En el examen al fresco se observan
quistes se trata verdaderamente de esta
ameba.


 de E. dispar, por cuanto la presencia
de anticuerpos se utiliza para
diferenciar una infección por E.
histolytica de una causada por E.
dispar.
Diagnóstico de Amebas
El referencia al diagnóstico el hallazgo
de trofozoítos con eritrocitos
fagocitados en heces frescas o biopsias
se correlaciona con la presencia de E.
histolytica.
 Por el contrario los quistes de ambos
protozoarios son indistinguibles.
En la actualidad se dispone de
variadas técnicas inmunológicas,
algunos comercialmente
disponibles, para la detección de
antígenos en heces y anticuerpos
en suero, para ambos casos la
técnica más utilizada es el ELISA
indirecto.
Se establece la presencia de 21
zimodemas, de los cuales nueve
corresponden a zimodemas no
patogénicos, actualmente
identificados para E. dispar y los
restantes doce a zimodemas
patogénicos que corresponden a
E. histolytica .
Entamoeba hartmanni


Entamoeba dispar
son del grupo “LIKE”
ya que son muy
parecidas a E.
histolytica. para un ojo
no muy experto
pueden ser
confundidas al examen
directo.
MECANISMOS DE DEFENSA
DEL Hospedero
 INESPECÍFICOS:
  • Mucus intestinal
  • Peristaltismo intestinal.

 ESPECÍFICOS:
  • GALT (tejidos linfoides asociados al
    intestino)
  • IgA secretoria
  • Aumento de la IgE
  • Eosinófilos
Diagnostico indirecto
En la actualidad se dispone de variadas
técnicas inmunológicas, algunos
comercialmente disponibles:
Coproantigenos, para la detección de
antígenos en heces.
y anticuerpos en suero , para ambos
casos la técnica más utilizada es el
ELISA indirecto,
Dot Elisa, Wester BLOT.
HAI (reacción de hemoaglutinación
indirecta).
ELISA
 C-
 C-
C+
C+
DOT ELISA
RHAI   HAI
Inmunodiagnóstico
Test de ELISA indirecto-
IgG, IGM

Test de Dot-ELISA
IFI (Reacción de inmunofluorescencia
indirecta).

IEC (Reacción de
contrainmunoeletroforesis)

Reacción de hemaglutinación indirecta
(HAI).
por cuanto la presencia de anticuerpos
se utiliza para:

diferenciar una infección por E.
histolytica de una causada por E.
dispar, que es morfologicamente
parecida .
También por el estudio de
 Isoenzimas, se establece la
 presencia de mas de 21 zimodemas,
 de los cuales 9 corresponden a
 zimodemas no patogénicos ,
 actualmente identificados para E.
 dispar
 Y por lo menos 12 zimodemas
 patogénicos que corresponden a
E. histolytica .
Se ha desarrollado anticuerpos
monoclonales.

y establecido la presencia de al
menos 6 epitopos importantes como
posibles herramientas para la
diferenciación de E. histolytica / E.
dispar.

Empleo de Antígenos recombinantes a
mejorado el diagnóstico .
Diagnóstico Molecular
Mas o menos se sabe que existen 37
subespecies de E. histolytica .

Últimamente se esta trabajando con
el ADN para poder diferenciarlas .

PCR.

Isoenzimas.
Electroforesis de isoenzimas como
      método de diferenciación entre
         E. histolytica y E. dispar
Todas las especies de amibas del
intestinos humano pueden ser
diferenciadas por patrones
isoenzimáticos.
 Este resultado incluye la importante
verificación de la existencia de la E.
hartmanni, de E. histolytica, como
especie distintiva .
Gracias a la técnica de
electroforesis de isoenzimas
actualmente se ha logrado
establecer lo siguiente:

Más de 20 patrones isoenzimáticos
de  E. histolytica han sido
encontrados en cuatro continentes.
Epidemiología
E. histolytica es cosmopolita.

Se adquiere por ingesta de quistes
maduros (tetranucleados).

La prevalencia de E. histolytica
depende de varios factores
especialmente socioeconómicos, cepa
de la ameba y factores propios del
EPIDEMIOLOGIA
Se revisan los nuevos hallazgos en
cuanto la epidemiología en distintos
países del mundo, utilizando.

 las técnicas moleculares de
diferenciación para E. histolytica.

Los pacientes en climas templados
presentan la ameba ( E. dispar )
generalmente.
La seroprevalencia por
E. histolytica en pacientes
con heces positivas por quistes
de
E. histolytica/ E. dispar .
RIZOPODOS               DISENTERIA AMEBIANA : AMEBIASIS


Entamoeba histolytica

DISTRIBUCIÓN
- Mundial


                                      Entamoeba histolytica




Los trofozoitos no son infecciosos                    quistes infecciosos
Distribución de Entamoeba histolytica
Tratamiento de la Amebiasis

Amoebicidas de contacto

 Actúan sobre los trafozoítos forma
 minuta.
 Paramomicina 1500 mg (25-30 mg/Kg)
 c/8 hs. 5-7 días.
Amoebicidas tisulares

 Dehidroemetina 1 mg/Kg en inyección
 subcutánea durante 10 días.

 Metronidazol 2000 mg (30-50 mg/Kg)
 c/8 hs. 5-10 días.

 Tinidazol 2000 mg (50-75 mg/Kg) 1 vez
 por 2 días.
Entamoeba coli
Entamoeba coli
Esta ameba parasita al ser humano y a
veces al cerdo, mono y puede vivir
como comensal en el intestino grueso.
 Causando infecciones asintomáticas
que no llegan a adquirir importancia
clínica.
Esta ataca al ser humano en cualquier
edad, siendo más frecuente en niños y
adultos jóvenes.
Morfología
Presenta 2 estadios evolutivos:
trofozoito, quiste,.
El trofozoito de E. coli , es de forma
ameboide incolora, de 15 a 50 micras,
con citoplasma viscoso en el que es
difícil diferenciar el ectoplasma del
endoplasma, y el núcleo no se observa
con facilidad.
Entamoeba coli (trofozoito)
En las preparaciones teñidas con
hematoxilina,


En el interior del endoplasma se
encuentran pocas o muchas vacuolas
alimenticias, que generalmente
contienen bacterias.
El núcleo esférico, de membrana
relativamente gruesa y revestida
en el interior por placas o
gránulos de cromatina y un
cariosoma de volumen moderado
y excéntrico.
Quiste
   Redondeados de 8 núcleos con
   barras cromidiales con extremos
   astillados, doble pared quística.
Entamoeba histolytica (quiste)
Antecedentes
Entamoeba coli fue identificada por
Lewis
 Descrita por Cunningham en Calcuta.

Gras fue el primero que dio una
descripción que permitiera reconocerla,
y dijo haberla encontrado en las heces
de personas sanas y enfermas.
E. coli es un protozoario que se
encuentra presente en los hombres de
todo el mundo.

 Más común entre las poblaciones
nativas de los países de climas cálidos
y húmedos.

También se encuentra con frecuencia
entre algunos grupos o población de
clima frío.
CICLO EVOLUTIVO
  Forma infectante; quiste maduro
                        (8 núcleos)
  Vía de infección:  Oral
  Mecanismo de infección : ingesta
  de agua o alimentos
  contaminados con el quiste
  maduro.
Epidemiología
Se transmite en forma de quiste viable
por contaminación fecal oral.

La infección es alta en países
tropicales, en climas fríos se debe a
malas condiciones de higiene.
Patogenia
 No patógeno y no produce síntomas.

 Diagnóstico

 Hallazgo principalmente de trofozoitos
 y quistes.
Diagnostico
   Hallazgo de cualquier estadio
   evolutivo
   Trofozoito o quiste.
Profilaxis
   Igual que las otras amebas ya
   que es un indicador de fecalismo.
Iodamoeba butschlii
Iodamoeba butschlii (trofozoito)
Iodamoeba butschlii (quiste)
Endolimax nana (trofozoito)
Endolimax nana (Quiste)
CONTROL y PROFILAXIS

INDIVIDUAL

 Higiene personal y ambiental .
 Lavado de manos
 Lavado meticuloso de frutas y
 verduras
HIGIENE COLECTIVA



  SANEAMIENTO AMBIENTAL
 POTABILIZACIÓN DEL AGUA
 ACTIVIDADES DE CONTROL BIEN
 ESTRUCTURADAS Y
 PERMANENTES.
• programas en convenio con la
  universidad para:
• control de enteroparásitos en
  guarderías comunitarias para
  preescolares, ESCOLARES ,
• que logra reducción significativa en
  la prevalencia de las parasitosis a
  través de actividades de:
      –EDUCACIÓN SANITARIA
      –DIAGNÓSTICO
      –TRATAMIENTO
ESTRATEGIAS DE CONTROL
 
    A CORTO PLAZO
      Atención médica individual
      Tratamiento farmacológico
      Educación sanitaria
     A LARGO PLAZO
      Mejora del saneamiento ambiental
      Abastecimiento de agua potable
      Promoción de higiene personal y
      alimentaría.
BIBLIOGRAFÍA
ACKERS J P (2002). The diagnostic implications of the
separation of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar.
Department of Infectious and Tropical Diseases, London
School of Hygiene and Tropical Medicine.[Version electronica].
The diagnostic implications of the separation of Entamoeba
histolytica and Entamoeba dispar; J. Biosci. | Vol. 27 | No. 6 |
Suppl. 3 |, 27, 573–578.
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Reconocimiento de Entamoeba Dispar en la Amibiasis. Invest.
clín. [online]. set. 2001, vol.42, no.3 [citado 23 Octubre 2005],
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script=sci_arttext&pid=S0535-
51332001000300001&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0535-5133.
COPYRIGHT © 2004 LABORATORIOS GÉMINIS, C.A.
laboratorios géminis. Ultima actualizacion 15/05/2005. Extraído
el 22 de octubre, 2005 de
http://pandora.labgeminis.com:8909/disclaimer.htm
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Centro de Cinematografía CARLO ERBA. Roma(Italia), 88p.


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La Entamoeba histolytica y la Amibiasis. Una pequeña revisión
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    REINA, Manuel (2003). Metodos en biologia celular: ELISA. Última actualización:
    15/09/2003. Extraído el 22 de octubre, 2005 de
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    REYES, L y LEON, R. Diferenciación de Entamoeba histolytica / entamoeba dispar y
    los nuevos hallazgos en la patogénesis de la amibiasis intestinal. Rev. costarric.
    cienc. méd. [online]. dic. 2002, vol.23, no.3-4 [citado 24 Octubre 2005], p.161-173.
    Disponible en la World Wide Web: http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?
    script=sci_arttext&pid=S0253-29482002000200006&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0253-
    2948.

    Son todas las amebas invasoras. Extraído el 15 de octubre, 2005 de
    http://omega.ilce.edu.mx:3000/sites/ciencia/volumen1/ciencia2/47/html/sec_6.html

    WALKER, J. M; GINGOLD E.B. Biologia Molecular y Biotecnologia: 2ª edición.
    Editorial Acribia, S.A. Zaragoza – España, 1997.
 
 
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1.3 enteroparasitismo por protozoarios rizópodos entamoeba histolytica

  • 1. Entamoeba histolytica Entamoeba histolytica Entamoeba histolytica Protozoarios Entamoeba histolytica E.nana Rizhopodos: Entamoeba histolytica E. coli Y otras amebas no patógenas Dra. Hilda María Solís Acosta Profesora Principal del Departamento de Entamoeba hartmanni Microbiología medica Facultad de Medicina 2012 UNMSM Iodamoeba
  • 2. Definición: Producen amebiasis Amebiasis Infección del intestino grueso del hombre por la ameba Entamoeba histolytica que ocasionalmente puede tener localizaciones extraintestinales e invadir el hígado, pulmón, piel y cerebro. (amebiasis secundaria)
  • 3. Entamoeba histolytica Antecedentes En 1587 se reconoce la Disentería. Sennert (1626) menciona la contagiosidad de la enfermedad. Pisonis en 1648 “Historia rerum naturalium” base de la medicina tropical.
  • 4. En 1875 Lösh descubre trofozoítos móviles en heces de agricultor : Amoeba coli. En 1883 Koch en autopsias: Entamoeba disenteriae .
  • 5. En 1885 Kartulis describe las amebas en abscesos hepáticos. En 1893 y 1894 Quink y Ross describen las formas quísticas como formas de resistencia de las amebas. En 1903 Schaudinn Entamoeba histolytica Entamoeba coli .
  • 6. En 1908 Martin, noción de portador asintomático. En 1912 Rogers acción curativa de la emetina.
  • 7. Biologia de Entamoeba histolytica Presenta 2 estadios evolutivos: Trofozoito y Quiste.
  • 8. Caracteres morfológicos y fisiológicos De E. histolytica Formas vegetativas (trofozoítos) La forma magna mide 20 a 30 μm . La forma minuta mide 10 a 20 μm. Se movilizan emitiendo psudopodos A 37° movimientos lentos, emisión de seudópodos con desplazamientos amplios de citoplasma. A 20° desplazamientos mínimos, se forman seudópodos de manera explosiva.
  • 10. Caracteres morfológicos y fisiológicos Formas quísticas Enquistamiento únicamente en la luz del intestino El quiste maduro es esférico 12 a 16 μm. Núcleo único (prequiste) : quiste maduro con 4 núcleos.
  • 11. Quiste joven tiene uno o dos núcleos con citoplasma granuloso. Se observa dos bastones gruesos son los cuerpos cromatoides o siderófilos .
  • 12. Imágenes de quistes Entamoeba histolytica
  • 13. Ciclo evolutivo Forma infectante: Quiste maduro tetranucleado Vía de infección : Oral Mecanismo de infección : ingesta de agua o alimentos contaminados con heces humanas con quistes maduros tetranucleados.
  • 14. Ciclo de vida de Entamoeba histolytica
  • 15.
  • 16. CICLO DE VIDA DE E. histolytica quiste
  • 17. COMPLICACIONES EXTRADIGESTIVAS Entamoeba histolytica 28
  • 18. Ciclo evolutivo no patógeno Ingesta de quistes maduros. Desenquistamiento en medio gastro- intestinal. Tripsina pancreática con T°, pH y potencial de oxido reducción. Los 4 núcleos se dividen por mitosis y estado fugaz de metaquiste (8 núcleos).
  • 19. División del citoplasma en 8 pequeñas amebas que se convierten en trofozoítos minuta. En la luz del colon división por bipartición y aumentan considerablemente.
  • 20. - Las formas minuta , se redondean con una pared gruesa. -Los quistes resisten en el exterior al ser eliminados pasivamente con las heces . -Los trofozoítos sobreviven al fondo de las vellosidades intestinales .
  • 21. La eliminación de quistes no es constante y sufre variaciones en el tiempo. El ciclo no compromete ningún órgano patogénicamente.
  • 22. Trofozoíto minuta se transforma en patógeno: factor hospedero o factor parásito (cepa). Amebas penetran la pared intestinal, se agrandan y fagocitan hematíes . Se dividen por bipartición a ritmo acelerado.
  • 23. Poder lítico, provocan úlceras extendidas en la pared del intestino y en otros órganos. Mecanismo de transformación en patógeno no es bien conocido.
  • 24. Ciclo evolutivo patógeno Por Tratamiento o Anticuerpos, las amebas hematófagas disminuyen ritmo de multiplicación. Se destruyen muchas amebas y las sobrevivientes migran hacia la luz del intestino.
  • 25. Los trofozoítos disminuyen de tamaño y luego se enquistan, se reinstala ciclo minuta. La presencia de glóbulos rojos en el citoplasma del trofozoito es elemento diagnóstico, en paciente con diarrea.
  • 26. Patogenicidad Mecanismos de virulencia Experimentos: Contacto en cultivo lectina reconociendo galactosamina de la célula epitelial suficiente para provocar hendiduras en la membrana y que lleva a su destrucción.
  • 27. Desaparición de microvellocidades con modificaciones letales. Proteasas provocarán la transformación esférica y daño de la matriz celular.
  • 28. Mecanismos de virulencia Las proteinasas (histolisína una proteinasa-cisteína) de la ameba, degradan el tejido colágeno , la fibronectina, en los cultivos celulares.
  • 29. También se ha detectado toxinas citopatógenas que producen efecto de aglutinación celular y producen Ac IgG. Por movimientos de pseudópodos ejerce efecto mecánico en células epiteliales y su soporte.
  • 31. Diagnóstico de la Amebiasis Directo Examen microscópico Examen en fresco de heces, a 37° C, inmediatamente después de la toma de muestra. Se encuentran trofozoítos de 20 a 30 μm conteniendo glóbulos rojos. Se debe repetir el examen ( 3 exámenes seriados) Es mejor colectar la muestra a través de una rectoscopia.
  • 32. Cultivos en medios artificiales como PAVLOVA. Cultivos en líneas celulares.
  • 33. Metodos de Concentración (Ritchie, Faust) Métodos de coloración : Temporales como la de lugol y otros. Permanentes como, frotises de heces Coloreados con: a. Hematoxilina férrica b. Gomorris trichrome.
  • 34. Se puede agregar colorantes como: la eosina que tiñen el fondo de rosa para observar los quistes en negativo. El lugol colorea las membranas externas y nucleares de color amarillo o marrón.
  • 35. El reactivo de Bailenger colorea el citoplasma y bastones cristaloides en rojo y el núcleo negro. La coloración Sargeaunt colorea la pared externa del quiste, la membrana nuclear de color verde claro y los cuerpos
  • 36. Diagnóstico: forma magna En referencia al diagnóstico el hallazgo de trofozoítos con eritrocitos fagocitados en heces frescas o biopsias se correlaciona con la presencia de E. histolytica.
  • 38. Entamoeba hartmanni Trofozoito
  • 39. Entamoeba hartmanni Cosmopolita En 1959 fue descrita nuevamente por Barrow. Se le consideraba una raza pequeña de E. histolityca. Faust 1958, informa sobre sus diferencias con E. histolytica
  • 41. Morfología, biología y ciclo evolutivo. E. hartmanni semejante a E. histolytica en todas las fases de su ciclo vital, salvo por su tamaño. Trofozoitos desde 4 hasta 12µ, no ingieren hematies, y son menos moviles. Núcleo similar al de E. coli , por su cromatina y su cariosoma.
  • 42. Quistes de 5 a 10 micras, los inmaduros con 1 o 2 núcleos, varios cuerpos cromatoides cortos. Quistes maduros con 4 núcleos.
  • 43. Epidemiología Cosmopolita. Se adquiere por ingesta de quistes maduros. La prevalencia es casi igual a la E. histolytica.
  • 44. Patogenia, anatomia patológica y sintomatología. E. hartmanni es considerada un sinónimo de E. histolytica. Experimentalmente se vio que producía colitis amibiana en perros y gatos. En humanos no se ha observado patología.
  • 45. Diagnóstico Examen de heces, coloraciones E. hartmanni e E. histolytica se diferencian mejor por el tamaño de sus quistes. E. hartamanni se confunde frecuentemente con E. nana .
  • 46. Tratamiento No se indica ya que los portadores son asintomáticos.
  • 47. Profilaxis Evitar ingerir alimentos o agua contaminados con heces humanas.
  • 50. Entamoeba dispar La ameba comensal Entamoeba dispar, morfológicamente idéntica a E. histolytica.
  • 52. ANTECEDENTES Emil Brumpt en 1925 describe una ameba similar a E. histolytica , con 4 núcleos y la denomina Entamoeba dispar , considerándola no patógena
  • 53. En 1978 Sargeunt y Williams utilizando los patrones de migración electroforética de tres isoenzimas (glucosa fosfato isomerasa, fosfoglucomutasa y malato xidoreductasa) lograron establecer: Cuatro diferentes zimodemas, uno de los cuales es relacionado con la forma invasora y los otros con la forma no
  • 54. EPIDEMIOLOGIA Se revisan los nuevos hallazgos en cuanto la epidemiología en distintos países del mundo, utilizando las técnicas moleculares de diferenciación para E. histolytica / E. dispar. Los pacientes en climas templados presentan
  • 55. En el examen al fresco se observan quistes se trata verdaderamente de esta ameba. de E. dispar, por cuanto la presencia de anticuerpos se utiliza para diferenciar una infección por E. histolytica de una causada por E. dispar.
  • 56. Diagnóstico de Amebas El referencia al diagnóstico el hallazgo de trofozoítos con eritrocitos fagocitados en heces frescas o biopsias se correlaciona con la presencia de E. histolytica. Por el contrario los quistes de ambos protozoarios son indistinguibles.
  • 57. En la actualidad se dispone de variadas técnicas inmunológicas, algunos comercialmente disponibles, para la detección de antígenos en heces y anticuerpos en suero, para ambos casos la técnica más utilizada es el ELISA indirecto.
  • 58. Se establece la presencia de 21 zimodemas, de los cuales nueve corresponden a zimodemas no patogénicos, actualmente identificados para E. dispar y los restantes doce a zimodemas patogénicos que corresponden a E. histolytica .
  • 59. Entamoeba hartmanni Entamoeba dispar son del grupo “LIKE” ya que son muy parecidas a E. histolytica. para un ojo no muy experto pueden ser confundidas al examen directo.
  • 60. MECANISMOS DE DEFENSA DEL Hospedero INESPECÍFICOS: • Mucus intestinal • Peristaltismo intestinal. ESPECÍFICOS: • GALT (tejidos linfoides asociados al intestino) • IgA secretoria • Aumento de la IgE • Eosinófilos
  • 61. Diagnostico indirecto En la actualidad se dispone de variadas técnicas inmunológicas, algunos comercialmente disponibles: Coproantigenos, para la detección de antígenos en heces. y anticuerpos en suero , para ambos casos la técnica más utilizada es el ELISA indirecto, Dot Elisa, Wester BLOT. HAI (reacción de hemoaglutinación indirecta).
  • 64. RHAI HAI
  • 65. Inmunodiagnóstico Test de ELISA indirecto- IgG, IGM Test de Dot-ELISA
  • 66. IFI (Reacción de inmunofluorescencia indirecta). IEC (Reacción de contrainmunoeletroforesis) Reacción de hemaglutinación indirecta (HAI).
  • 67. por cuanto la presencia de anticuerpos se utiliza para: diferenciar una infección por E. histolytica de una causada por E. dispar, que es morfologicamente parecida .
  • 68. También por el estudio de Isoenzimas, se establece la presencia de mas de 21 zimodemas, de los cuales 9 corresponden a zimodemas no patogénicos , actualmente identificados para E. dispar Y por lo menos 12 zimodemas patogénicos que corresponden a E. histolytica .
  • 69. Se ha desarrollado anticuerpos monoclonales. y establecido la presencia de al menos 6 epitopos importantes como posibles herramientas para la diferenciación de E. histolytica / E. dispar. Empleo de Antígenos recombinantes a mejorado el diagnóstico .
  • 70. Diagnóstico Molecular Mas o menos se sabe que existen 37 subespecies de E. histolytica . Últimamente se esta trabajando con el ADN para poder diferenciarlas . PCR. Isoenzimas.
  • 71. Electroforesis de isoenzimas como método de diferenciación entre E. histolytica y E. dispar Todas las especies de amibas del intestinos humano pueden ser diferenciadas por patrones isoenzimáticos. Este resultado incluye la importante verificación de la existencia de la E. hartmanni, de E. histolytica, como especie distintiva .
  • 72. Gracias a la técnica de electroforesis de isoenzimas actualmente se ha logrado establecer lo siguiente: Más de 20 patrones isoenzimáticos de E. histolytica han sido encontrados en cuatro continentes.
  • 73. Epidemiología E. histolytica es cosmopolita. Se adquiere por ingesta de quistes maduros (tetranucleados). La prevalencia de E. histolytica depende de varios factores especialmente socioeconómicos, cepa de la ameba y factores propios del
  • 74. EPIDEMIOLOGIA Se revisan los nuevos hallazgos en cuanto la epidemiología en distintos países del mundo, utilizando. las técnicas moleculares de diferenciación para E. histolytica. Los pacientes en climas templados presentan la ameba ( E. dispar ) generalmente.
  • 75. La seroprevalencia por E. histolytica en pacientes con heces positivas por quistes de E. histolytica/ E. dispar .
  • 76. RIZOPODOS DISENTERIA AMEBIANA : AMEBIASIS Entamoeba histolytica DISTRIBUCIÓN - Mundial Entamoeba histolytica Los trofozoitos no son infecciosos quistes infecciosos
  • 78. Tratamiento de la Amebiasis Amoebicidas de contacto Actúan sobre los trafozoítos forma minuta. Paramomicina 1500 mg (25-30 mg/Kg) c/8 hs. 5-7 días.
  • 79. Amoebicidas tisulares Dehidroemetina 1 mg/Kg en inyección subcutánea durante 10 días. Metronidazol 2000 mg (30-50 mg/Kg) c/8 hs. 5-10 días. Tinidazol 2000 mg (50-75 mg/Kg) 1 vez por 2 días.
  • 81. Entamoeba coli Esta ameba parasita al ser humano y a veces al cerdo, mono y puede vivir como comensal en el intestino grueso. Causando infecciones asintomáticas que no llegan a adquirir importancia clínica. Esta ataca al ser humano en cualquier edad, siendo más frecuente en niños y adultos jóvenes.
  • 82. Morfología Presenta 2 estadios evolutivos: trofozoito, quiste,. El trofozoito de E. coli , es de forma ameboide incolora, de 15 a 50 micras, con citoplasma viscoso en el que es difícil diferenciar el ectoplasma del endoplasma, y el núcleo no se observa con facilidad.
  • 84. En las preparaciones teñidas con hematoxilina, En el interior del endoplasma se encuentran pocas o muchas vacuolas alimenticias, que generalmente contienen bacterias.
  • 85. El núcleo esférico, de membrana relativamente gruesa y revestida en el interior por placas o gránulos de cromatina y un cariosoma de volumen moderado y excéntrico.
  • 86. Quiste Redondeados de 8 núcleos con barras cromidiales con extremos astillados, doble pared quística.
  • 88.
  • 89. Antecedentes Entamoeba coli fue identificada por Lewis Descrita por Cunningham en Calcuta. Gras fue el primero que dio una descripción que permitiera reconocerla, y dijo haberla encontrado en las heces de personas sanas y enfermas.
  • 90. E. coli es un protozoario que se encuentra presente en los hombres de todo el mundo. Más común entre las poblaciones nativas de los países de climas cálidos y húmedos. También se encuentra con frecuencia entre algunos grupos o población de clima frío.
  • 91. CICLO EVOLUTIVO Forma infectante; quiste maduro (8 núcleos) Vía de infección: Oral Mecanismo de infección : ingesta de agua o alimentos contaminados con el quiste maduro.
  • 92. Epidemiología Se transmite en forma de quiste viable por contaminación fecal oral. La infección es alta en países tropicales, en climas fríos se debe a malas condiciones de higiene.
  • 93. Patogenia No patógeno y no produce síntomas. Diagnóstico Hallazgo principalmente de trofozoitos y quistes.
  • 94. Diagnostico Hallazgo de cualquier estadio evolutivo Trofozoito o quiste.
  • 95. Profilaxis Igual que las otras amebas ya que es un indicador de fecalismo.
  • 101. CONTROL y PROFILAXIS INDIVIDUAL Higiene personal y ambiental . Lavado de manos Lavado meticuloso de frutas y verduras
  • 102. HIGIENE COLECTIVA SANEAMIENTO AMBIENTAL POTABILIZACIÓN DEL AGUA ACTIVIDADES DE CONTROL BIEN ESTRUCTURADAS Y PERMANENTES.
  • 103. • programas en convenio con la universidad para: • control de enteroparásitos en guarderías comunitarias para preescolares, ESCOLARES , • que logra reducción significativa en la prevalencia de las parasitosis a través de actividades de: –EDUCACIÓN SANITARIA –DIAGNÓSTICO –TRATAMIENTO
  • 104. ESTRATEGIAS DE CONTROL   A CORTO PLAZO Atención médica individual Tratamiento farmacológico Educación sanitaria  A LARGO PLAZO Mejora del saneamiento ambiental Abastecimiento de agua potable Promoción de higiene personal y alimentaría.
  • 105. BIBLIOGRAFÍA ACKERS J P (2002). The diagnostic implications of the separation of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar. Department of Infectious and Tropical Diseases, London School of Hygiene and Tropical Medicine.[Version electronica]. The diagnostic implications of the separation of Entamoeba histolytica and Entamoeba dispar; J. Biosci. | Vol. 27 | No. 6 | Suppl. 3 |, 27, 573–578. CHAC BONILLA, Leonor (2001). Relevancia del Reconocimiento de Entamoeba Dispar en la Amibiasis. Invest. clín. [online]. set. 2001, vol.42, no.3 [citado 23 Octubre 2005], p.157-160. Disponible en Internet:http://www.scielo.org.ve/scielo.php? script=sci_arttext&pid=S0535- 51332001000300001&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0535-5133. COPYRIGHT © 2004 LABORATORIOS GÉMINIS, C.A. laboratorios géminis. Ultima actualizacion 15/05/2005. Extraído el 22 de octubre, 2005 de http://pandora.labgeminis.com:8909/disclaimer.htm
  • 106. FERNÁNDEZ PONTES, José, CAMPOS, Rubens y CARNERI, Ivo de (1965). Amibiasis. Tomado del film realizado bajo la coordinacion científica del Prof. Ivo de Carneri y colaboradores. Centro de Cinematografía CARLO ERBA. Roma(Italia), 88p. HUSTON, Christopher D., HAQUE, Rashidul and PETRI, William A. Jr.( 1999, 22 marzo,). Molecular-based diagnosis of Entamoeba histolytica infection. expert reviews in molecular medicine. Extraído el 25 de octubre, 2005 de http://www- ermm.cbcu.cam.ac.uk LA AMIBIASIS. Disponible en Internet: Extraído el 15 de octubre, 2005 de http://www.drrondonpediatra.com/amibiasis.htm La Entamoeba histolytica y la Amibiasis. Una pequeña revisión de aspectos inmunológicos relevantes de este problema de salud publica. Extraído el 15 de octubre, 2005 de http://www.tuobra.unam.mx/publicadas/020723155256.html
  • 107. PUMAROLA, A.; RODRÍGUEZ TORRES, A.; GARCIA RODRÍGUEZ, J.A; PIEDROLA ANGULO G. Microbiología y Parasitología Medica. 2 Edición. Barcelona: Salvar editores, S. A. , 1987. 908 p. REINA, Manuel (2003). Metodos en biologia celular: ELISA. Última actualización: 15/09/2003. Extraído el 22 de octubre, 2005 de http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/elisa.htm#Tipos%20de%20ensayos%20. REYES, L y LEON, R. Diferenciación de Entamoeba histolytica / entamoeba dispar y los nuevos hallazgos en la patogénesis de la amibiasis intestinal. Rev. costarric. cienc. méd. [online]. dic. 2002, vol.23, no.3-4 [citado 24 Octubre 2005], p.161-173. Disponible en la World Wide Web: http://www.scielo.sa.cr/scielo.php? script=sci_arttext&pid=S0253-29482002000200006&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0253- 2948. Son todas las amebas invasoras. Extraído el 15 de octubre, 2005 de http://omega.ilce.edu.mx:3000/sites/ciencia/volumen1/ciencia2/47/html/sec_6.html WALKER, J. M; GINGOLD E.B. Biologia Molecular y Biotecnologia: 2ª edición. Editorial Acribia, S.A. Zaragoza – España, 1997.    
  • 108. MUCHAS GRACIAS Por su atención