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2017
DR. MANUEL YAMUNAQUE
PRECIADO
QUITO – ECUADOR
2017
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
CURSO
FORMACIÓN
PROFECION
AL PERITO
FORENSE
VARIACION DE LA
CONCENTRACIÓN DE
ALCOHOL ETILICO EN
CADAVERES EN RELACIÓN
Manuel Yamunaqué Preciado
1
Agradecimiento
Agradezco a Gabriela Sandoval que con su apoyo paciencia y compresión brindadas
desde el inicio de una idea a la culminación.
Manuel Yamunaqué Preciado
2
Universidad Central del Ecuador
Variación de la concentración de alcohol etílico en cadáveres en relación al tiempo
Dr. Manuel Yamunaqué Preciado
Resumen
El grado de alcohol durante la autopsia obtenida en diferentes fluidos corporales para
determinar el grado de alcoholemia es un factor muy importante en la determinación de la
causa de la muerte de la persona y más aún si se relaciona en accidentes de tránsito,
Este artículo pretende aclarar el mecanismo de producción endógeno de alcohol en el
cuerpo humano en procesos como la digestión y la putrefacción para interpretar resultados
de alcoholemias o de presencia de etanol en otros fluidos del organismo cuando no se
pueden explicar por la ingesta usual.
Se logra determinar que existen muchos factores que determinan la producción endógena
en los cuerpos y que esto puede interferir en la interpretación del estado de la persona antes
del suceso.
Palabras claves
Alcohol, diabetes, autopsia médico legal, alcoholemia
Manuel Yamunaqué Preciado
3
ABSTRACT
The degree of alcohol during the autopsy obtained in different body fluids to determine the
level of alcohol is a very important factor in determining the cause of death of the person
and more even if it is related to traffic accidents.
The objectives of the article is to clarify the mechanism of endogenous production of
alcohol in the human body in processes such as digestion and putrefaction to interpret
results of alcohols or presence of ethanol in other fluids of the body when they can not be
explained by the usual intake.
Manuel Yamunaqué Preciado
4
Justificación de la investigación
El consumo de bebidas alcohólicas o más específicamente el abuso de las mismas, se ha
tornado en un problema de crecientes proporciones en nuestro país que traen como
consecuencia accidentes de tránsito, muertes violentas y criminalidad debida a que las
personas actúan bajo los efectos del alcohol etílico. Se ha vuelto de mayor importancia en
el ámbito de los sucesos de tránsito, donde se ha observado en los últimos años un aumento
de víctimas ocasionándoles la muerte. Debido a lo mencionado, la importancia en nuestro
medio de realizar el análisis toxicológico de sustancias psicoactivas en estas víctimas.
Dentro de este esquema el análisis y la interpretación de los niveles de alcohol etílico en
cadáveres a los que se les ha practicado la necropsia dispuesto por la ley se ha vuelto el más
frecuente de los exámenes toxicológicos solicitados a los laboratorios de toxicología
forense y su investigación como dato probatorio en procedimientos civiles y penales.
Conociendo que para la formación de alcohol se necesita ciertos elementos que se
encuentran presente en el cuerpo en descomposición y que varían según ciertos factores,
Razón, por cual es necesario determinar si los niveles obtenidos son producto de medio
endógenos por ingesta antemortem del individuo.
Hipótesis
El contenido de alcohol en los cuerpos postmortem puede variar según el tiempo en
descomposición por producción endógena
Objetivo principal:
Determinar si el grado de alcohol en sangre post mortem está relacionado con la ingesta o
es producción endógena propia del cuerpo.
Manuel Yamunaqué Preciado
5
Introducción:
GENERALIDADES
- Alcohol etílico El alcohol etílico (CH3-CH2OH) es llamado también etanol; es un líquido
transparente, incoloro, aromático, volátil, de sabor característico, combustible, presenta un
peso molecular igual a 46, presenta además un coeficiente de partición octanol / agua de
0,70795, soluble en agua y solventes orgánicos como la acetona y el éter, procede de la
fermentación de sustancias azucaradas, del almidón y de la celulosa; constituye el
componente activo de las bebidas alcohólicas. En medicina se utiliza como antiséptico, en
cosmética se le utiliza como solvente para lociones y otros preparados farmacéuticos. El
alcohol etílico puede dar lugar a una intoxicación común, accidental, voluntaria y a una
intoxicación profesional. 2
Código Orgánico Integral Penal 31
Artículo 385.-
Conducción de vehículo en estado de embriaguez.-
La persona que conduzca un vehículo en estado de embriaguez, será sancionada de
acuerdo con la siguiente escala:
1. Si el nivel de alcohol por litro de sangre es de 0,3 a 0,8 gramos, se aplicará multa
de un salario básico unificado del trabajador en general, pérdida de cinco puntos en su
licencia de conducir y cinco días de privación de libertad.
2. Si el nivel de alcohol por litro de sangre es mayor de 0,8 hasta 1,2 gramos, se
aplicará multa de dos salarios básicos unificados del trabajador en general, pérdida de diez
puntos en su licencia de conducir y quince días de privación de libertad.
3. Si el nivel de alcohol por litro de sangre supera 1,2 gramos, se aplicará multa de
tres salarios básicos unificados del trabajador en general, la suspensión de la licencia por
sesenta días y treinta días de privación de libertad.
Para las o los conductores de vehículos de transporte público liviano o pesado, comercial o
de carga, la tolerancia al consumo de cualquier sustancia estupefaciente, psicotrópica o
preparado que las contengan es cero, y un nivel máximo de alcohol de 0,1 gramos por cada
Manuel Yamunaqué Preciado
6
litro de sangre. En caso de exceder dicho límite, la sanción para el responsable será, pérdida
de treinta puntos en su licencia de conducir y pena privativa de libertad de noventa días.
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Imagen 2
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Manuel Yamunaqué Preciado
7
Imagen3
Manuel Yamunaqué Preciado
8
Proceso de Formación de Alcohol:
MATERIAS PRIMAS(3)
1.- MELAZA (Azucares)
En el proceso de fermentación de la melaza se utilizan los azúcares para ser transformados en
alcohol. Llevándola a un proceso de fermentación con levaduras del tipo Saccharomyces cerevisiae
para obtener el alcohol etílico.
2.- LEVADURA
La levadura es la fuente principal para empezar, multiplicación de las células encargadas de
transformar todo el azúcar contenido en la melaza en alcohol dentro del proceso de fermentación.
Las levaduras son las más importantes en la producción de alcohol, son las llamadas
Saccharomyces cerevisiae y Saccharomyces uvarun.
La S. cerevisiae es usada en la industria de la panificación, producción de proteínas y vinos.
La S. uvarun, para la fabricación de cerveza. Son microorganismos unicelulares, de mayor
tamaño que las bacterias, con formas variables (esféricas, ovaladas, cilíndricas), y su tamaño varia
de 4 - 8 m de largo, por 5 – 16 m de ancho (micrón = 10 – 5 m = 10 – 3 cm. una milésima parte
de un milímetro). Al igual que las bacterias, tienen núcleo, citoplasma, pared celular y membrana
citoplasmática. El núcleo no tiene membrana de separación y queda incluido dentro del citoplasma.
En este último puede haber una o más vacuolas, que son bolsas con material de reserva (azúcares,
grasas) o con productos de desecho del metabolismo celular. La membrana citoplasmática es
semipermeable, dejando pasar los elementos nutritivos que necesita la célula y permitiendo la salida
de los desechos de la misma. Las levaduras se reproducen por brotamiento y por ascoporos
Las levaduras constituyen uno de los grupos más importantes de microorganismos y se emplean en
muchos procesos de fermentación en la síntesis de compuestos orgánicos, como fuente de vitaminas
del complejo B y de tiamina, en algunas fases de la producción de antibióticos, hormonas
esteroides, como suplemento de la alimentación para animales y seres humanos
CONDICIONES PARA EL DESARROLLO DE LAS LEVADURAS
Como cualquier ser vivo, las levaduras necesitan una serie de condiciones y elementos para poder
desarrollarse, en que podemos citar como más importantes los siguientes: (3)
 Nutrientes
 Humedad
 Temperatura
 Oxígeno
Manuel Yamunaqué Preciado
9
 Acidez del medio
-nutrientes, las levaduras necesitan hidratos de carbono, proteínas, vitaminas y sales minerales. Los
hidratos de carbono o azúcares son quemados produciendo la energía necesaria para las actividades
vitales de las células. Junto a esa energía hay productos como el anhídrido carbónico, etanol, etc.
Esta facultad de las levaduras para producir alcohol y CO2 se aprovecha en la elaboración de
cerveza, vino, champán, etc.
-En cuanto a la humedad, aunque es necesaria para las bacterias, no lo es tanto para las levaduras.
Hay levaduras que pueden vivir en sustratos con un 45 - 50% de azúcares.El rango de pH óptimo
para el desarrollo de las levaduras es de 4.5 - 5.0, aunque pueden sobrevivir desde 3 - 7.5.
Siendo el PH normal del cuerpo humano de 7.35 a 7.45
Diastasas: La levadura encierra múltiples diastasas. Se ha identificado, en los productos de la
autólisis celular, una glicogenasa. La invertina se encuentra presente en la levadura en gran
cantidad, es poco difusible al medio exterior y se destruye por calentamiento; se favorece la
difusión de la invertina por la presencia de ciertas substancias, tales como el alcohol, el cloroformo,
el éter, etc., y en los líquidos procedentes de la autólisis de la levadura se la halla abundantemente.
También hemos de señalar la presencia de la maltasa, trealasa y melibiasa.
La levadura contiene dos proteasas: una, la proteinasa, que presenta propiedades análogas a la
papaína y cuya temperatura óptima se ha establecido a los 45 ºC, tiene un pH entre 5.0 – 5.8, y
degrada las proteínas hasta el estado de polipéptidos.
La otra diastasa, la peptidasa, tiene su pH óptimo en las proximidades de la neutralidad, pH 7 y
transforma los polipéptidos en aminoácidos.
OXÍGENO Durante mucho tiempo se pensó que las levaduras eran microorganismos aerobios
estrictos, es decir, debía realizarse la fermentación en ausencia de oxígeno. Sin embargo es un
hecho erróneo ya que requiere una cierta aireación. Esta oxigenación se consigue en los procesos
previos a la fermentación. Es importante que el aire no esté contaminado, es decir, libre de aceite,
humedad o alta temperatura, razón por la cual se recomienda que la temperatura del aire deba ser de
28 º C.
Fermentación:
DESENVOLVIMIENTO DE LA FERMENTACIÓN La fermentación alcohólica se desenvuelve a
través de una serie de reacciones; siendo la reacción principal, establecida por GAY – LUSSAC y
corregida por DUMAS la siguiente:
C6H12O6 (glucosa) + (Levadura) C2H5OH + CO2 +  Esta reacción es el producto del
desdoblamiento de los azucares fermentables, que se desarrollan dentro del tiempo que tarda la
fermentación. Para que esto suceda se mezcla el inóculo (levadura) con el mosto (mezcla de agua y
melaza), iniciándose el proceso de fermentación: dentro de este proceso existen diferentes fases que
se las puede clasificar como: fase preliminar, fase tumultuosa y fase final. 48 Fase Preliminar: Es la
que se inicia en el momento en que entra en contacto la levadura con el mosto, caracterizándose esta
Manuel Yamunaqué Preciado
10
fase por la multiplicación intensa de células con pequeña elevación de temperatura y
desprendimiento de dióxido de carbono (CO2).
Las células producidas tienen un gran poder fermentativo, se obtienen a temperaturas bajas entre 28
– 32 ºC, con mostos que estén acorde al tipo de fermentación que se lleva a cabo. El tiempo que
tarda esta fase está entre 4 - 6.
Fase Tumultuosa: Dentro de esta fase se produce la nutrición de los microorganismos (levaduras)
con los diversos azúcares que se encuentran en el medio y en presencia de oxígeno, oxidan
totalmente los azúcares convirtiéndolos en dióxido de carbono (CO2) y en medio anaeróbico la
levadura utiliza azúcar como alimento, con lo cual producen diversas sustancias orgánicas entre
ellas alcohol (C2H5OH). Como las células están en constante actividad, hay desprendimiento de
energía dentro del recipiente aumentando de esta forma la temperatura, la que se debe controlar
adecuadamente ya que de ella depende un buen rendimiento alcohólico. Si se producen temperatura
que pasan el limite establecido (31 - 34 ºC), se obtendrá otro tipo de fermentación y el producto
obtenido será distinto al que se desea producir. Conjuntamente con la elevación de la temperatura
hay aumento de espumas que difieren para cada tipo de substratos, así en los substratos de mosto de
melaza se desvanecen fácilmente tratándose con ácidos minerales, o también se salpica agua,
tiempo que dura esta fase está entre 12 – 16 horas. Fase Final: En esta fase se destaca la
disminución de la temperatura como también disminuye el desprendimiento de CO2. La
concentración de azúcares en esta fase llega a valores próximo a cero. Para determinar con exactitud
si la fermentación ha terminado, hay que medir 49 los grados Brix y la temperatura. En el momento
que se repiten los valores de grados Brix y de temperatura se debe decir que ha terminado la
fermentación. Esta fase tarda, aproximadamente, de 4 – 6 horas.
FACTORES QUE AFECTAN LA FERMENTACIÓN(5)
Una serie de factores pueden afectar la fermentación, y la variable más importante que puede ser
afectada, es el rendimiento de la fermentación, o rendimiento alcohólico, esto es, el porcentaje de
azúcar que se transforma en alcohol, en relación a la cantidad máxima teórica de la ecuación de Gay
- Lussac (100 Kg. de azúcar, en la forma de glucosa y/o fructosa, producen un máximo de 64.75
litros de alcohol, a 20 °C). La multiplicación de la levadura es paralela a la producción de alcohol.
La razón de esta asociación es porque las células no se multiplican si no hubiera energía. Como no
hay oxígeno, la energía producida depende directamente de la producción de etanol. Habiendo una
mayor producción de células (levaduras), la cantidad de alcohol producida por hora aumenta
proporcionalmente. Se puede observar en ésta fase también un aumento en el desprendimiento de
calor y una consecuente elevación de temperatura en fermentación.
Manuel Yamunaqué Preciado
11
CALIDAD DEL MOSTO
El mosto es la solución acuosa que contiene el azúcar que va a ser transformado en alcohol.
Además de los azúcares fermentables (sacarosa, glucosa y fructosa), el mosto contiene también una
gran cantidad de sales, si el mosto es producido de miel pobre más agua. Si el mosto es hecho de
miel rica más agua, tiene una cantidad intermedia de sales. Si el mosto es hecho de jugo o jarabe, la
cantidad de sales es baja. Las sales forman parte de la calidad del mosto, un mosto con pocas sales o
con muchas de algunas sales no son considerados mostos de buena calidad.
Factores Adicionales:
INFECCIÓN
La infección realmente afectar el rendimiento de la fermentación. Dentro de los microorganismos
responsables por el fracaso de una fermentación alcohólica del jugo de caña, melaza, o la mezcla de
ambos, se destacan las bacterias pertenecientes a los géneros Acetobacter, Lactobacillus,
Costridium, Bacillus, Aerobacter, Streptococcus, Leuconostoc, etc. De acuerdo con los productos
resultantes del metabolismo de esos grupos de microorganismos, esas bacterias son denominadas
homofermentativas 60 cuando el metabolito formado en mayor proporción es ácido láctico, y,
heterofermentativo cuando además del ácido láctico, cantidades apreciables de otros ácidos
orgánicos ( butírico, acético, fórmico ), así como alcohol y dióxido de carbono son también
formados. Otros compuestos pueden ser originados por metabolismos de algunos de esos tipos de
bacterias, como es el caso de DEXTRANEO y el LEVANEO, que son resultado de la acción de
bacterias del género Leuconostoc y Bacillus sobre la sacarosa, desdoblándola y dando formación a
polímeros de alto peso molecular, los cuales son constituidos por residuos de fructosa o de glucosa.
Otras bacterias, como aquellas pertenecientes al género Acetobacter, afectan al proceso
fermentativo por transformar el alcohol en ácido acético. Esas bacterias además de competir en la
utilización de azúcar, afectan al proceso fermentativo, disminuyendo la eficiencia de la levadura
alcohólica debido a la acción toxica de sus productos metabólicos
TEMPERATURA DE FERMENTACIÓN
La temperatura de fermentación debe ser constante desde el inicio hasta el final. Por lo que se
aconseja mantenerla por abajo de 34°C y por encima de 31°C en fermentación batch.
Las variaciones bruscas de temperaturas afectan la fermentación. Los factores que causan variación
de la temperatura en la fermentación pueden resumirse de la siguiente manera:
Cuanto más azúcar hay, más alcohol es producido, mayor calor es liberado y por lo tanto, mayor
será el calentamiento.
Porcentaje de levadura: Cuanto mayor es el porcentaje de levadura, más rápida es la fermentación,
por lo tanto, más energía es liberada por unidad de tiempo, consecuentemente, hay mayor
calentamiento
Velocidad de alimentación: Esta tiene que ser compatible con el sistema de enfriamiento, Altas
temperaturas, además de aumentar considerablemente la pérdida de alcohol por evaporación (en
Manuel Yamunaqué Preciado
12
caso de que no haya lavado y recuperación de los gases de ese alcohol), ocasionan una gran muerte
de fermento al mismo tiempo que propician un medio favorable para las bacterias. Para recuperar el
fermento muerto, se gasta azúcar que podría ser transformada en alcohol, y el aumento de la
población bacteriana, conlleva también a una disminución en el rendimiento alcohólico.
Si esto ocurre, habrá una disminución en el rendimiento de la fermentación. De igual modo, la
temperatura no se debe elevar más de 34 °C. Cuanto más rápida es la alimentación, mayor es la
producción de glicerol y menor el rendimiento fermentativo. La alimentación no debe ser muy lenta
tampoco, pues la evaporación de alcohol y el peligro de contaminación pueden ser grandes. 1
Procedimientos médicos
Reconociendo que al momento de un accidente se sucesos de tránsito, caídas, peleas, entre otros y
si la persona se mantiene con vida y es auxiliado por personal de salud, se puede administrar o
realizar procedimientos necesarios para salvar la vida de la persona y que al no lograrlo pueden
alterar la composición y/o producción de alcohol en el cuerpo por lo que es importante identificar
que componentes fueron administrados para así tener datos más confiables.
A continuación se habla de ciertos productos que se pueden usar en el área de cuidados críticos sea
emergencia o cuidados intensivos.
TIPOS DE SOLUCIONES. CARACTERÍSTICAS Y CLASIFICACIÓN.
SOLUCIONES CRISTALOIDES:
Son soluciones electrolíticas y/o azucaradas que permiten mantener el equilibrio hidroelectrolítico,
expandir el volumen intravascular y en caso de contener azúcares aportar energía.
Pueden ser hipo, iso o hipertónica respecto del plasma. Su capacidad de expandir volumen está
relacionada de forma directa con las concentraciones de sodio.
El 50% del volumen infundido de una solución cristaloide tarda como promedio unos 15 min en
abandonar el espacio intravascular.
A- CRISTALOIDES HIPOTÓNICAS
1- HIPOSALINO AL 0,45%
Aporta la mitad del contenido de ClNa que la solución fisiológica. Ideal para el aporte de agua libre
exenta de glucosa.
B- CRISTALOIDES ISOOSMÓTICAS
Se distribuyen fundamentalmente en el líquido extracelular, permaneciendo a la hora sólo el 20%
del volumen infundido en el espacio intravascular. Se distinguen varios tipos
1- SOLUCIÓN FISIOLÓGICA AL 0,9%.
Manuel Yamunaqué Preciado
13
Indicada para reponer líquidos y electrolitos especialmente en situaciones de pérdidas
importantes de cloro (ej: estados hipereméticos) ya que en la solución fisiológica la
proporción cloro: sodio es 1:1 mientras que en el líquido extracelular es de 2:3. Se requiere
infundir de 3-4 veces el volumen de pérdidas calculado para normalizar parámetros
hemodinámicos. Debido a su elevado contenido en sodio y en cloro, su administración en
exceso puede dar lugar a edemas y acidosis hiperclorémica por lo que no se indica de
entrada en cardiópatas ni hipertensos.
2- SOLUCIÓN DE RINGER. Solución electrolítica balanceada en la que parte del sodio
de la solución salina isotónica es sustituida por calcio y potasio. Su indicación principal
radica en la reposición de perdidas hidroelectrolíticas con depleción del espacio
extravascular.
3- SOLUCIÓN DE RINGER LACTATO Similar a la solución anterior, contiene además
lactato que tiene un efecto buffer ya que primero es transformado en piruvato y luego
en bicarbonato durante el metabolismo como parte del ciclo de Cori. La vida media del
lactato plasmático es de 20 min aproximadamente y puede llegar a 4-6 horas en
pacientes en estado de schock. Los preparados disponibles contienen una mezcla de D-
lactato y L-lactato. El D-lactato tiene una velocidad de aclaramiento un 30% mas lenta
que la forma levógira. En condiciones fisiológicas existe en plasma una concentración
de D-lactato inferior a 0,02 mmol/L, concentraciones superiores a 3 mmol/l pueden dar
lugar a encefalopatía. La presencia de hepatopatías o bien una disminución de la
perfusión hepática disminuiría el aclaramiento de lactato y por tanto aumentaría el
riesgo de daño cerebral, por lo que se debe usar con precaución en estos casos.
4- SOLUCIÓN GLUCOSADA AL 5%. Sus indicaciones principales son como solución
para mantener vía, en las deshidrataciones hipertónicas (por falta de ingesta de líquidos,
intensa sudoración, etc) y para proporcionar energía durante un periodo corto de
tiempo.
5- SOLUCION GLUCOSALINA ISOTÓNICA. Eficaz como hidratante, para cubrir la
demanda de agua y electrolitos.
Manuel Yamunaqué Preciado
14
SOLUCIONES GLUCOSADAS AL 10%, 20% Y 40%.
Aportan energía y movilizan sodio desde la célula al espacio extracelular y potasio en sentido
opuesto. La glucosa produciría una deshidratación celular, atrapando agua en el espacio
intravascular.
URGENCIAS DIABÉTICAS
A/ CETOACIDOSIS DIABÉTICA (CAD)
A.2/ OBJETIVOS DEL TRATAMIENTO
A.3/ TRATAMIENTO
a) FLUIDOTERAPIA
Objetivo: corregir hipovolemia y trastornos hidroelectrolíticos (precede a la adm. de insulina).
Déficit promedio de líquidos: 50 – 100 ml / kg peso (5 – 10 % peso corporal)
Fluido de elección: S. Fisiológico 0,9 % (Salino 0,9 %).
SHOCK HIPOVOLÉMICO (Hemorrágico, No Hemorrágico)
1/ SOPORTE VITAL:
2/ MANEJO DE LÍQUIDOS - El tipo de fluidos debe ser cuidadosamente seleccionado.
- No utilizar soluciones hipotónicas por favorecer incremento del volumen extravascular.
A.1/ CRITERIOS DIAGNÓSTICOS
- Hiperglucemia 300 – 600 mg /dl
* ancianos > 600
* embarazadas < 200
- Acidosis Metabólica con anión GAP ↑
( P < 7,25; CO3H < 15 mEq / litro)
- Cetonemia y Cetonuria intensas
Corregir el trastorno hidroeléctrico mediante reposición de líquidos
e iones
Corregir el trastorno metabólico mediante reposición de Insulina
Tratar los factores desencadenantes: infección, traumatismo, ACV,
IAM, error administración de insulina, etc.
Manuel Yamunaqué Preciado
15
- Administrar sangre si hematocrito < 30 %.
- Controversias en la elección de fluido inicial (cristaloides / coloides).
a) COLOIDES
- Albúmina: - Expansor más eficaz - 25 gr administrados rápidamente:
↑ volemia 400 cc. - A los 2` alcanza espacio intravascular
- Vida media de 4 - 16 horas.
- Dextranos: - Importante expansión de volemia por ↑ peso molecular.
- Efectos persisten de 8 a 12 horas. - Efectos antiagregantes plaquetarios.
- Toxicidad renal dosis – dependiente.
- Anafilaxia y efecto inmunosupresor.
b) CRISTALOIDES
- Solución fisiológica 0,9 % (SL) y Ringer Lactato (RL).
- Expansores fundamentalmente del espacio intersticial.
- Velocidad de desaparición del torrente circulatorio muy rápida (a los 60` de la perfusión
menos del
- 20 % permanece en espacio intravascular).
- Necesidad de alto aporte y riesgo de sobrecarga del espacio intersticial (Edemas, ICC).
- No utilizar soluciones hipotónicas (S. Glucosado 5% o Hiposalino 0,45 %, desaparecen
más rápidamente y no tienen capacidad expansora).
HEMORRAGIA DIGESTIVA ALTA (H.D.A.)
Importante reconocer que un porcentaje de las causas de un sangrado digestivo sea alto o bajo
puede ser causado por ingesta de alcohol o de alguna sustancia química lacerante y que al ingresar
al área de emergencia como principal procedimiento según el grado y el tiempo de sangrado es
administrar líquidos.
ACCIDENTE CEREBROVASCULAR (ACV)
Si la persona que sufre politraumatismo sea por accidente de tránsito, caídas, peleas entre otras
puede ocasionar hemorragias intracraneales por lo que el manejo es diferente.
- Pauta de fluidos: - NO utilizar S. Glucosado 5 % (Por su baja Osmolaridad → ↑ Edema Cerebral
→ ↑ Déficit neurológico).
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- Utilizar preferentemente S. Fisiológico 0,9 % (o Glucosalino)
- Mantener cifras TA discretamente ↑
http://www.medynet.com/usuarios/jraguilar/Manual%20de%20urgencias%20y%20Emergencias/fluido.pdf
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17
VARIACIONES POST MORTEM DEL ALCOHOL
Difusión pasiva:
El alcohol puede difundir pasivamente post mortem desde el estómago y el intestino a los otros
órganos y tejidos circundantes.
Cuando la concentración de alcohol en el estómago es superior a 0,5 g/L, es un indicativo que
la muerte sobrevino momentos después de la ingestión.
Cuando estaba en la primera fase de absorción. Ese líquido puede difundir al líquido
pericárdico, líquido pleural y posiblemente a bilis, así como a la cavidad peritoneal. Es
prácticamente imposible que llegue a las cavidades cardiacas.
El problema real de impregnación alcohólica se resolverá fácilmente analizando la
concentración de alcohol en orina y humor vítreo, que en este caso siempre serán inferiores a la
concentración encontrada en sangre (3).
Alteraciones post mortem:
La alcoholemia real del individuo, es decir, aquella que refleja la cantidad de alcohol
absorbido, puede sufrir diversos procesos que conducen a una alteración de la concentración y,
por tanto, a un error de análisis. Se puede presentar dos situaciones: pérdida de alcohol y
ganancia de alcohol etílico (3).
a. Pérdida de alcohol etílico: puede tener un mecanismo físico, la evaporación. Se produce
cuando el almacenamiento no es correcto y se deja un espacio libre entre el nivel de la sangre
en el vial y el tapón. El alcohol pasa a la cámara de aire y si no se tiene precaución se escapa al
abrir el vial (3).
También se puede perder por oxidación microbiana, tanto aerobia como anaerobia, aunque es
mayor en el primer caso. Por todo ello, en los viales que contienen el alcohol etílico para su
remisión al laboratorio no se debe dejar cámara de aire y añadir opcionalmente un inhibidor
microbiano (3).
b. Ganancia de alcohol etílico: el alcohol producido post mortem, denominado endógeno, es
alcohol etílico químicamente igual al de origen exógeno. No hay método analítico, por tanto,
capaz de diferenciarlos (3).
El alcohol endógeno se forma por los microorganismos, a partir de la glucosa
fundamentalmente. Deben, por tanto, coexistir ambos elementos. La sangre cardiaca es la que
contiene más glucosa y donde la bacteriemia es mayor, por lo que será éste el lugar donde se
forma el alcohol (3).
La presencia de alcohol en todas las muestras indica un origen exógeno.
Cuando solo se dispone de una muestra para el análisis, es muy difícil sacar conclusiones en los
casos de putrefacción ya iniciada (3).
La ganancia puede proceder también de una contaminación de los envases o de las faltas
cometidas en el momento de la toma: en ambos casos la sangre puede contaminarse por otros
fluidos ricos en alcohol: contenido gástrico, líquido cefalorraquídeo, pleural o pericárdico, entre
los más importantes (3).
Preservación de la muestra: La muestra de sangre debe ser recogida en un envase de
vidrio, con agujas y materiales estériles: se llenará el envase por completo y se adicionará
Manuel Yamunaqué Preciado
18
fluoruro sódico y un anticoagulante (oxalato de potasio). El fluoruro se ha demostrado como el
más eficaz inhibidorde las enzimas catalíticas e incluso como bactericida. Una dosis de 2,5 mg
de fluoruro y 2 mg de oxalato potásico por cada mililitro de sangre es suficiente para preservar
la metabolización. La sangre debe almacenarse en la nevera a –20 °C (3).
Contaminación y descomposición de origen microbiano:
La producción microbiana de etanol en especímenes post mortem es la complicación más
frecuentemente encontrada al examinar resultados de etanol (4,5). Luego de la muerte ocurre
la autolisis de tejidos por procesos enzimáticos, esto produce reblandecimiento y licuación
de tejidos. Durante ese proceso las bacterias del colon invaden tejidos adyacentes y el
sistema vascular, primeramente se propagan por el sistema linfático y el sistema venoso
portal, unas pocas horas luego de la muerte. La velocidad de la infiltración bacteriana
depende de factores aceleradores del proceso
Nota:
En resumen, el alcohol endógeno alcanza concentraciones que oscilan entre 0,00 g/L y 0,03
g/L, este alcohol es producido por:
-La fermentación intestinal de la peptina,
-Reducción de acetaldehído de diversa etiología,
-Infecciones producidas por bacterias como la Candida albicans y Comidas ricas en
carbohidratos(3).
-Putrefacción, como: la temperatura ambiental, lesiones intestinales, enfermedades
neoplásicas o gangrenas y si la muerte fue causada por una infección, o por la posición del
cuerpo o la presencia de traumas extensos del cuerpo.
-Temperatura ambiente, la contaminación bacteriana del sistema circulatorio ocurre
después de alrededor de 6 horas y luego de 24 horas hay una penetración directa de la pared
intestinal. Generalmente los tejidos permanecen relativamente libres de bacterias viables
durante las primeras 24 horas (6).
Los microorganismos que mayormente se ven envueltos en este proceso son:
Escherichia coli y especies de Candida, Clostridium y Klebsiella , entre otros , siendo
Candida albicans el principal agente productor; sin embargo existen al menos 58 especies
de bacterias,17 de levaduras y 24 de esporas capaces de esta producción (6).
Cuando las concentraciones de etanol son menores de 30 mg/100mL, es muy probable que
su origen sea la producción post mortem, por otro lado, niveles muy altos de alcoholemia
sugieren incorrecto almacenaje de la muestra, lo cual promueve la putrefacción y
producción de etanol por las bacterias (6).
Efecto de la temperatura:
La temperatura puede influir dentro de la producción de alcohol dentro de los fluidos
corporales.
Si el cuerpo no se mantienen con temperaturas bajas la producción de alcohol se produce dentro
de las primeras 24 horas (7)
Para evitar contaminación microbiana de la muestra es necesario un buen manejo y mantener a
temperaturas bajas evitando la producción de alcohol
La producción de alcohol puede producirse ya sea en el cuerpo (8)
Manuel Yamunaqué Preciado
19
Efecto del tiempo:
A mayor tiempo en especial pasadas las 24 horas y con temperaturas ambiente altas aumenta la
producción endógena de alcohol por los microorganismos precentes o por plitraumatismos pre
o postmortem (9,10)
Efecto del preservante:
Los preservantes más comúnmente usados son las sales de Flúor, aunque bajo ciertas
condiciones han sido reportadas como inadecuadas, mantener las muestras con fluoruro de
sodio al 1% después de la autopsia, impide la producción de etanol por la mayoría de los
microorganismos, menos a la Candida albicans.
El fluoruro de sodio actúa al inhibir la actividad de la enzima fosfoglucomutasa, para prevenir
la síntesis de polisacáridos y a su vez para inhibir el crecimiento in vitro de Candida albicans,
que fácilmente convierte la glucosa en etanol.
El ion fluoruro es sumamente eficaz en inhibir la actividad de varias enzimas, tales como la
enzima enolasa, un componente en el camino glicolítico, es también importante por su efecto
en levaduras, hongos y muchos otros microorganismos responsables de la fermentación y a su
vez evitar la coagulación sanguínea.
El manejo correcto de las muestras recolectadas, debe incluir la adición inmediata de la
cantidad correcta de preservante, y definitivamente el almacenamiento de las muestras tan
pronto como sea posible. (11,12)
Se recomienda utilizar fluoruro de sodio en concentraciones de 1% a 5% en peso o volumen,
para los análisis post mortem de alcohol etílico. (13)
Manuel Yamunaqué Preciado
20
Conclusiones:
La estimación correcta de la concentración de alcohol en el cuerpo postmortem es muy
fluctuante ya que está determinada por varios factores como son el tiempo de muerte
recolección de muestra, la calidad de la misma, traumas previos existentes, presencia de
microorganismos, condiciones ambientales como lluvia, calor, frio, sumersión,
Para una correcta identificación es necesario obtener más de un tipo de muestras que
pueden ser del humor acuoso, urinario, sangre en corazón, entre otros.
Como hemos mencionado unos de los componentes principales para la formación de
alcohol es la presencia de azucares, por lo tanto en personas con antecedentes médicos
donde se encuentren alterados este componente sería probable una incremento en la
producción del alcohol.
En el cuerpo de Personas que sufrieron politraumatismos mantienen un sustrato para
que microorganismo produzcan alcohol y de esta manera inician una fermentación
temprana.
En casos de personas hospitalizadas es necesario identificar la causa de muerte ya que una
septicemia o la administración de soluciones glucosadas facilitaría la producción de
alcohol en el cuerpo. La administración de antibióticos limitaría la producción de la
fermentación, por lo que es importante conocer el historial médico y los procedimientos
realizados intrahospitalarios.
Manuel Yamunaqué Preciado
21
Bibliografía
1.- Gilces Farías,Paola Elizabeth (2006): ESTUDIO DEL USO DE LOS NUTRIENTES PARA LA
LEVADURA EN FERMENTACIÓN CON EL PROPÓSITO DE MEJORAR LA PRODUCCIÓN
DEL ALCOHOL ETÍLICO
2.- Repetto M. 1 Ed. En: Repetto M., Toxicología Avanzada. Madrid: Díaz de Santos; 1995
3.- Villanueva E. Estudio toxicológico y médico – legal del alcohol etílico. En: Gisbert JA et al.,
Medicina Legal y Toxicología. Barcelona: Masson S.A.; 1998.
4.- Repetto M. Biotransformación de los tóxicos. 4 Ed. En: Repetto M., Toxicología Fundamental.
Madrid: Díaz de Santos; 2009.
5.- Villavicencio N. M. Bioquímica, Fondo Nacional Editorial de la Universidad Mayor de San
Marcos, 2 Edición, Lima.1998.
6.- Alvarado G. A. T. Determinación de alcohol Post Mortem: Aspectos a considerar para una
mejor interpretación. Medicina Legal Costa Rica v.25 n.2 Heredia septiembre. 2008.
7.- Hansen A.C. Validity of post mortem alcohol determination. Ugeskr Laeger 156(1)(1994)
8.- Winek T., Winek CL and Wahba WW. The effect of storage at various temperatures on blood
alcohol concentration. Forensic Sci Int 1996 Apr; 78.
9.- Clark MA, Jones JW. Studies of putrefactive ethanol production 1: lack of spontaneous ethanol
production in intact human bodies. J Forens Sci 1982; 27: 36 -37.
10.- Gormsen H. Alcohol production in the dead body. J Forens Med 1954:
27.- Skopp, G. 2004. Preanalytic aspects in postmortem toxicology. Forensic Sci. Int. 142: 75-100.
28.- Sulkowski, H. A., A. H. B. Wu, and Y.S. McCarter. 1995. In vitrous production of ethanol in
urine by fermentation. J Forensic Sci.
29.- Zuba D, Parczewski A and Rozanska M. Effect of salt Addition on sencitivity of HS-SPME-
GC Method of volatile Determination. Sencitivity of chemistry, Jagiellonian Universty, Krakow,
Poland.
30.- Lévano J. En: Aspectos bioquímicos y legales de la alcoholemia. Lima (Perú); 2003.
31.- Código Orgánico Integral Penal del Ecuador, Edición: 2014 Quito - Ecuador

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  • 1. 2017 DR. MANUEL YAMUNAQUE PRECIADO QUITO – ECUADOR 2017 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR CURSO FORMACIÓN PROFECION AL PERITO FORENSE VARIACION DE LA CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL ETILICO EN CADAVERES EN RELACIÓN
  • 2. Manuel Yamunaqué Preciado 1 Agradecimiento Agradezco a Gabriela Sandoval que con su apoyo paciencia y compresión brindadas desde el inicio de una idea a la culminación.
  • 3. Manuel Yamunaqué Preciado 2 Universidad Central del Ecuador Variación de la concentración de alcohol etílico en cadáveres en relación al tiempo Dr. Manuel Yamunaqué Preciado Resumen El grado de alcohol durante la autopsia obtenida en diferentes fluidos corporales para determinar el grado de alcoholemia es un factor muy importante en la determinación de la causa de la muerte de la persona y más aún si se relaciona en accidentes de tránsito, Este artículo pretende aclarar el mecanismo de producción endógeno de alcohol en el cuerpo humano en procesos como la digestión y la putrefacción para interpretar resultados de alcoholemias o de presencia de etanol en otros fluidos del organismo cuando no se pueden explicar por la ingesta usual. Se logra determinar que existen muchos factores que determinan la producción endógena en los cuerpos y que esto puede interferir en la interpretación del estado de la persona antes del suceso. Palabras claves Alcohol, diabetes, autopsia médico legal, alcoholemia
  • 4. Manuel Yamunaqué Preciado 3 ABSTRACT The degree of alcohol during the autopsy obtained in different body fluids to determine the level of alcohol is a very important factor in determining the cause of death of the person and more even if it is related to traffic accidents. The objectives of the article is to clarify the mechanism of endogenous production of alcohol in the human body in processes such as digestion and putrefaction to interpret results of alcohols or presence of ethanol in other fluids of the body when they can not be explained by the usual intake.
  • 5. Manuel Yamunaqué Preciado 4 Justificación de la investigación El consumo de bebidas alcohólicas o más específicamente el abuso de las mismas, se ha tornado en un problema de crecientes proporciones en nuestro país que traen como consecuencia accidentes de tránsito, muertes violentas y criminalidad debida a que las personas actúan bajo los efectos del alcohol etílico. Se ha vuelto de mayor importancia en el ámbito de los sucesos de tránsito, donde se ha observado en los últimos años un aumento de víctimas ocasionándoles la muerte. Debido a lo mencionado, la importancia en nuestro medio de realizar el análisis toxicológico de sustancias psicoactivas en estas víctimas. Dentro de este esquema el análisis y la interpretación de los niveles de alcohol etílico en cadáveres a los que se les ha practicado la necropsia dispuesto por la ley se ha vuelto el más frecuente de los exámenes toxicológicos solicitados a los laboratorios de toxicología forense y su investigación como dato probatorio en procedimientos civiles y penales. Conociendo que para la formación de alcohol se necesita ciertos elementos que se encuentran presente en el cuerpo en descomposición y que varían según ciertos factores, Razón, por cual es necesario determinar si los niveles obtenidos son producto de medio endógenos por ingesta antemortem del individuo. Hipótesis El contenido de alcohol en los cuerpos postmortem puede variar según el tiempo en descomposición por producción endógena Objetivo principal: Determinar si el grado de alcohol en sangre post mortem está relacionado con la ingesta o es producción endógena propia del cuerpo.
  • 6. Manuel Yamunaqué Preciado 5 Introducción: GENERALIDADES - Alcohol etílico El alcohol etílico (CH3-CH2OH) es llamado también etanol; es un líquido transparente, incoloro, aromático, volátil, de sabor característico, combustible, presenta un peso molecular igual a 46, presenta además un coeficiente de partición octanol / agua de 0,70795, soluble en agua y solventes orgánicos como la acetona y el éter, procede de la fermentación de sustancias azucaradas, del almidón y de la celulosa; constituye el componente activo de las bebidas alcohólicas. En medicina se utiliza como antiséptico, en cosmética se le utiliza como solvente para lociones y otros preparados farmacéuticos. El alcohol etílico puede dar lugar a una intoxicación común, accidental, voluntaria y a una intoxicación profesional. 2 Código Orgánico Integral Penal 31 Artículo 385.- Conducción de vehículo en estado de embriaguez.- La persona que conduzca un vehículo en estado de embriaguez, será sancionada de acuerdo con la siguiente escala: 1. Si el nivel de alcohol por litro de sangre es de 0,3 a 0,8 gramos, se aplicará multa de un salario básico unificado del trabajador en general, pérdida de cinco puntos en su licencia de conducir y cinco días de privación de libertad. 2. Si el nivel de alcohol por litro de sangre es mayor de 0,8 hasta 1,2 gramos, se aplicará multa de dos salarios básicos unificados del trabajador en general, pérdida de diez puntos en su licencia de conducir y quince días de privación de libertad. 3. Si el nivel de alcohol por litro de sangre supera 1,2 gramos, se aplicará multa de tres salarios básicos unificados del trabajador en general, la suspensión de la licencia por sesenta días y treinta días de privación de libertad. Para las o los conductores de vehículos de transporte público liviano o pesado, comercial o de carga, la tolerancia al consumo de cualquier sustancia estupefaciente, psicotrópica o preparado que las contengan es cero, y un nivel máximo de alcohol de 0,1 gramos por cada
  • 7. Manuel Yamunaqué Preciado 6 litro de sangre. En caso de exceder dicho límite, la sanción para el responsable será, pérdida de treinta puntos en su licencia de conducir y pena privativa de libertad de noventa días. Imagen 1 www.circulaseguro.com/cervezas-light-cervezas-sin-alcohol-y-cervezas-00/ Imagen 2 www.circulaseguro.com/cervezas-light-cervezas-sin-alcohol-y-cervezas-00/
  • 9. Manuel Yamunaqué Preciado 8 Proceso de Formación de Alcohol: MATERIAS PRIMAS(3) 1.- MELAZA (Azucares) En el proceso de fermentación de la melaza se utilizan los azúcares para ser transformados en alcohol. Llevándola a un proceso de fermentación con levaduras del tipo Saccharomyces cerevisiae para obtener el alcohol etílico. 2.- LEVADURA La levadura es la fuente principal para empezar, multiplicación de las células encargadas de transformar todo el azúcar contenido en la melaza en alcohol dentro del proceso de fermentación. Las levaduras son las más importantes en la producción de alcohol, son las llamadas Saccharomyces cerevisiae y Saccharomyces uvarun. La S. cerevisiae es usada en la industria de la panificación, producción de proteínas y vinos. La S. uvarun, para la fabricación de cerveza. Son microorganismos unicelulares, de mayor tamaño que las bacterias, con formas variables (esféricas, ovaladas, cilíndricas), y su tamaño varia de 4 - 8 m de largo, por 5 – 16 m de ancho (micrón = 10 – 5 m = 10 – 3 cm. una milésima parte de un milímetro). Al igual que las bacterias, tienen núcleo, citoplasma, pared celular y membrana citoplasmática. El núcleo no tiene membrana de separación y queda incluido dentro del citoplasma. En este último puede haber una o más vacuolas, que son bolsas con material de reserva (azúcares, grasas) o con productos de desecho del metabolismo celular. La membrana citoplasmática es semipermeable, dejando pasar los elementos nutritivos que necesita la célula y permitiendo la salida de los desechos de la misma. Las levaduras se reproducen por brotamiento y por ascoporos Las levaduras constituyen uno de los grupos más importantes de microorganismos y se emplean en muchos procesos de fermentación en la síntesis de compuestos orgánicos, como fuente de vitaminas del complejo B y de tiamina, en algunas fases de la producción de antibióticos, hormonas esteroides, como suplemento de la alimentación para animales y seres humanos CONDICIONES PARA EL DESARROLLO DE LAS LEVADURAS Como cualquier ser vivo, las levaduras necesitan una serie de condiciones y elementos para poder desarrollarse, en que podemos citar como más importantes los siguientes: (3)  Nutrientes  Humedad  Temperatura  Oxígeno
  • 10. Manuel Yamunaqué Preciado 9  Acidez del medio -nutrientes, las levaduras necesitan hidratos de carbono, proteínas, vitaminas y sales minerales. Los hidratos de carbono o azúcares son quemados produciendo la energía necesaria para las actividades vitales de las células. Junto a esa energía hay productos como el anhídrido carbónico, etanol, etc. Esta facultad de las levaduras para producir alcohol y CO2 se aprovecha en la elaboración de cerveza, vino, champán, etc. -En cuanto a la humedad, aunque es necesaria para las bacterias, no lo es tanto para las levaduras. Hay levaduras que pueden vivir en sustratos con un 45 - 50% de azúcares.El rango de pH óptimo para el desarrollo de las levaduras es de 4.5 - 5.0, aunque pueden sobrevivir desde 3 - 7.5. Siendo el PH normal del cuerpo humano de 7.35 a 7.45 Diastasas: La levadura encierra múltiples diastasas. Se ha identificado, en los productos de la autólisis celular, una glicogenasa. La invertina se encuentra presente en la levadura en gran cantidad, es poco difusible al medio exterior y se destruye por calentamiento; se favorece la difusión de la invertina por la presencia de ciertas substancias, tales como el alcohol, el cloroformo, el éter, etc., y en los líquidos procedentes de la autólisis de la levadura se la halla abundantemente. También hemos de señalar la presencia de la maltasa, trealasa y melibiasa. La levadura contiene dos proteasas: una, la proteinasa, que presenta propiedades análogas a la papaína y cuya temperatura óptima se ha establecido a los 45 ºC, tiene un pH entre 5.0 – 5.8, y degrada las proteínas hasta el estado de polipéptidos. La otra diastasa, la peptidasa, tiene su pH óptimo en las proximidades de la neutralidad, pH 7 y transforma los polipéptidos en aminoácidos. OXÍGENO Durante mucho tiempo se pensó que las levaduras eran microorganismos aerobios estrictos, es decir, debía realizarse la fermentación en ausencia de oxígeno. Sin embargo es un hecho erróneo ya que requiere una cierta aireación. Esta oxigenación se consigue en los procesos previos a la fermentación. Es importante que el aire no esté contaminado, es decir, libre de aceite, humedad o alta temperatura, razón por la cual se recomienda que la temperatura del aire deba ser de 28 º C. Fermentación: DESENVOLVIMIENTO DE LA FERMENTACIÓN La fermentación alcohólica se desenvuelve a través de una serie de reacciones; siendo la reacción principal, establecida por GAY – LUSSAC y corregida por DUMAS la siguiente: C6H12O6 (glucosa) + (Levadura) C2H5OH + CO2 +  Esta reacción es el producto del desdoblamiento de los azucares fermentables, que se desarrollan dentro del tiempo que tarda la fermentación. Para que esto suceda se mezcla el inóculo (levadura) con el mosto (mezcla de agua y melaza), iniciándose el proceso de fermentación: dentro de este proceso existen diferentes fases que se las puede clasificar como: fase preliminar, fase tumultuosa y fase final. 48 Fase Preliminar: Es la que se inicia en el momento en que entra en contacto la levadura con el mosto, caracterizándose esta
  • 11. Manuel Yamunaqué Preciado 10 fase por la multiplicación intensa de células con pequeña elevación de temperatura y desprendimiento de dióxido de carbono (CO2). Las células producidas tienen un gran poder fermentativo, se obtienen a temperaturas bajas entre 28 – 32 ºC, con mostos que estén acorde al tipo de fermentación que se lleva a cabo. El tiempo que tarda esta fase está entre 4 - 6. Fase Tumultuosa: Dentro de esta fase se produce la nutrición de los microorganismos (levaduras) con los diversos azúcares que se encuentran en el medio y en presencia de oxígeno, oxidan totalmente los azúcares convirtiéndolos en dióxido de carbono (CO2) y en medio anaeróbico la levadura utiliza azúcar como alimento, con lo cual producen diversas sustancias orgánicas entre ellas alcohol (C2H5OH). Como las células están en constante actividad, hay desprendimiento de energía dentro del recipiente aumentando de esta forma la temperatura, la que se debe controlar adecuadamente ya que de ella depende un buen rendimiento alcohólico. Si se producen temperatura que pasan el limite establecido (31 - 34 ºC), se obtendrá otro tipo de fermentación y el producto obtenido será distinto al que se desea producir. Conjuntamente con la elevación de la temperatura hay aumento de espumas que difieren para cada tipo de substratos, así en los substratos de mosto de melaza se desvanecen fácilmente tratándose con ácidos minerales, o también se salpica agua, tiempo que dura esta fase está entre 12 – 16 horas. Fase Final: En esta fase se destaca la disminución de la temperatura como también disminuye el desprendimiento de CO2. La concentración de azúcares en esta fase llega a valores próximo a cero. Para determinar con exactitud si la fermentación ha terminado, hay que medir 49 los grados Brix y la temperatura. En el momento que se repiten los valores de grados Brix y de temperatura se debe decir que ha terminado la fermentación. Esta fase tarda, aproximadamente, de 4 – 6 horas. FACTORES QUE AFECTAN LA FERMENTACIÓN(5) Una serie de factores pueden afectar la fermentación, y la variable más importante que puede ser afectada, es el rendimiento de la fermentación, o rendimiento alcohólico, esto es, el porcentaje de azúcar que se transforma en alcohol, en relación a la cantidad máxima teórica de la ecuación de Gay - Lussac (100 Kg. de azúcar, en la forma de glucosa y/o fructosa, producen un máximo de 64.75 litros de alcohol, a 20 °C). La multiplicación de la levadura es paralela a la producción de alcohol. La razón de esta asociación es porque las células no se multiplican si no hubiera energía. Como no hay oxígeno, la energía producida depende directamente de la producción de etanol. Habiendo una mayor producción de células (levaduras), la cantidad de alcohol producida por hora aumenta proporcionalmente. Se puede observar en ésta fase también un aumento en el desprendimiento de calor y una consecuente elevación de temperatura en fermentación.
  • 12. Manuel Yamunaqué Preciado 11 CALIDAD DEL MOSTO El mosto es la solución acuosa que contiene el azúcar que va a ser transformado en alcohol. Además de los azúcares fermentables (sacarosa, glucosa y fructosa), el mosto contiene también una gran cantidad de sales, si el mosto es producido de miel pobre más agua. Si el mosto es hecho de miel rica más agua, tiene una cantidad intermedia de sales. Si el mosto es hecho de jugo o jarabe, la cantidad de sales es baja. Las sales forman parte de la calidad del mosto, un mosto con pocas sales o con muchas de algunas sales no son considerados mostos de buena calidad. Factores Adicionales: INFECCIÓN La infección realmente afectar el rendimiento de la fermentación. Dentro de los microorganismos responsables por el fracaso de una fermentación alcohólica del jugo de caña, melaza, o la mezcla de ambos, se destacan las bacterias pertenecientes a los géneros Acetobacter, Lactobacillus, Costridium, Bacillus, Aerobacter, Streptococcus, Leuconostoc, etc. De acuerdo con los productos resultantes del metabolismo de esos grupos de microorganismos, esas bacterias son denominadas homofermentativas 60 cuando el metabolito formado en mayor proporción es ácido láctico, y, heterofermentativo cuando además del ácido láctico, cantidades apreciables de otros ácidos orgánicos ( butírico, acético, fórmico ), así como alcohol y dióxido de carbono son también formados. Otros compuestos pueden ser originados por metabolismos de algunos de esos tipos de bacterias, como es el caso de DEXTRANEO y el LEVANEO, que son resultado de la acción de bacterias del género Leuconostoc y Bacillus sobre la sacarosa, desdoblándola y dando formación a polímeros de alto peso molecular, los cuales son constituidos por residuos de fructosa o de glucosa. Otras bacterias, como aquellas pertenecientes al género Acetobacter, afectan al proceso fermentativo por transformar el alcohol en ácido acético. Esas bacterias además de competir en la utilización de azúcar, afectan al proceso fermentativo, disminuyendo la eficiencia de la levadura alcohólica debido a la acción toxica de sus productos metabólicos TEMPERATURA DE FERMENTACIÓN La temperatura de fermentación debe ser constante desde el inicio hasta el final. Por lo que se aconseja mantenerla por abajo de 34°C y por encima de 31°C en fermentación batch. Las variaciones bruscas de temperaturas afectan la fermentación. Los factores que causan variación de la temperatura en la fermentación pueden resumirse de la siguiente manera: Cuanto más azúcar hay, más alcohol es producido, mayor calor es liberado y por lo tanto, mayor será el calentamiento. Porcentaje de levadura: Cuanto mayor es el porcentaje de levadura, más rápida es la fermentación, por lo tanto, más energía es liberada por unidad de tiempo, consecuentemente, hay mayor calentamiento Velocidad de alimentación: Esta tiene que ser compatible con el sistema de enfriamiento, Altas temperaturas, además de aumentar considerablemente la pérdida de alcohol por evaporación (en
  • 13. Manuel Yamunaqué Preciado 12 caso de que no haya lavado y recuperación de los gases de ese alcohol), ocasionan una gran muerte de fermento al mismo tiempo que propician un medio favorable para las bacterias. Para recuperar el fermento muerto, se gasta azúcar que podría ser transformada en alcohol, y el aumento de la población bacteriana, conlleva también a una disminución en el rendimiento alcohólico. Si esto ocurre, habrá una disminución en el rendimiento de la fermentación. De igual modo, la temperatura no se debe elevar más de 34 °C. Cuanto más rápida es la alimentación, mayor es la producción de glicerol y menor el rendimiento fermentativo. La alimentación no debe ser muy lenta tampoco, pues la evaporación de alcohol y el peligro de contaminación pueden ser grandes. 1 Procedimientos médicos Reconociendo que al momento de un accidente se sucesos de tránsito, caídas, peleas, entre otros y si la persona se mantiene con vida y es auxiliado por personal de salud, se puede administrar o realizar procedimientos necesarios para salvar la vida de la persona y que al no lograrlo pueden alterar la composición y/o producción de alcohol en el cuerpo por lo que es importante identificar que componentes fueron administrados para así tener datos más confiables. A continuación se habla de ciertos productos que se pueden usar en el área de cuidados críticos sea emergencia o cuidados intensivos. TIPOS DE SOLUCIONES. CARACTERÍSTICAS Y CLASIFICACIÓN. SOLUCIONES CRISTALOIDES: Son soluciones electrolíticas y/o azucaradas que permiten mantener el equilibrio hidroelectrolítico, expandir el volumen intravascular y en caso de contener azúcares aportar energía. Pueden ser hipo, iso o hipertónica respecto del plasma. Su capacidad de expandir volumen está relacionada de forma directa con las concentraciones de sodio. El 50% del volumen infundido de una solución cristaloide tarda como promedio unos 15 min en abandonar el espacio intravascular. A- CRISTALOIDES HIPOTÓNICAS 1- HIPOSALINO AL 0,45% Aporta la mitad del contenido de ClNa que la solución fisiológica. Ideal para el aporte de agua libre exenta de glucosa. B- CRISTALOIDES ISOOSMÓTICAS Se distribuyen fundamentalmente en el líquido extracelular, permaneciendo a la hora sólo el 20% del volumen infundido en el espacio intravascular. Se distinguen varios tipos 1- SOLUCIÓN FISIOLÓGICA AL 0,9%.
  • 14. Manuel Yamunaqué Preciado 13 Indicada para reponer líquidos y electrolitos especialmente en situaciones de pérdidas importantes de cloro (ej: estados hipereméticos) ya que en la solución fisiológica la proporción cloro: sodio es 1:1 mientras que en el líquido extracelular es de 2:3. Se requiere infundir de 3-4 veces el volumen de pérdidas calculado para normalizar parámetros hemodinámicos. Debido a su elevado contenido en sodio y en cloro, su administración en exceso puede dar lugar a edemas y acidosis hiperclorémica por lo que no se indica de entrada en cardiópatas ni hipertensos. 2- SOLUCIÓN DE RINGER. Solución electrolítica balanceada en la que parte del sodio de la solución salina isotónica es sustituida por calcio y potasio. Su indicación principal radica en la reposición de perdidas hidroelectrolíticas con depleción del espacio extravascular. 3- SOLUCIÓN DE RINGER LACTATO Similar a la solución anterior, contiene además lactato que tiene un efecto buffer ya que primero es transformado en piruvato y luego en bicarbonato durante el metabolismo como parte del ciclo de Cori. La vida media del lactato plasmático es de 20 min aproximadamente y puede llegar a 4-6 horas en pacientes en estado de schock. Los preparados disponibles contienen una mezcla de D- lactato y L-lactato. El D-lactato tiene una velocidad de aclaramiento un 30% mas lenta que la forma levógira. En condiciones fisiológicas existe en plasma una concentración de D-lactato inferior a 0,02 mmol/L, concentraciones superiores a 3 mmol/l pueden dar lugar a encefalopatía. La presencia de hepatopatías o bien una disminución de la perfusión hepática disminuiría el aclaramiento de lactato y por tanto aumentaría el riesgo de daño cerebral, por lo que se debe usar con precaución en estos casos. 4- SOLUCIÓN GLUCOSADA AL 5%. Sus indicaciones principales son como solución para mantener vía, en las deshidrataciones hipertónicas (por falta de ingesta de líquidos, intensa sudoración, etc) y para proporcionar energía durante un periodo corto de tiempo. 5- SOLUCION GLUCOSALINA ISOTÓNICA. Eficaz como hidratante, para cubrir la demanda de agua y electrolitos.
  • 15. Manuel Yamunaqué Preciado 14 SOLUCIONES GLUCOSADAS AL 10%, 20% Y 40%. Aportan energía y movilizan sodio desde la célula al espacio extracelular y potasio en sentido opuesto. La glucosa produciría una deshidratación celular, atrapando agua en el espacio intravascular. URGENCIAS DIABÉTICAS A/ CETOACIDOSIS DIABÉTICA (CAD) A.2/ OBJETIVOS DEL TRATAMIENTO A.3/ TRATAMIENTO a) FLUIDOTERAPIA Objetivo: corregir hipovolemia y trastornos hidroelectrolíticos (precede a la adm. de insulina). Déficit promedio de líquidos: 50 – 100 ml / kg peso (5 – 10 % peso corporal) Fluido de elección: S. Fisiológico 0,9 % (Salino 0,9 %). SHOCK HIPOVOLÉMICO (Hemorrágico, No Hemorrágico) 1/ SOPORTE VITAL: 2/ MANEJO DE LÍQUIDOS - El tipo de fluidos debe ser cuidadosamente seleccionado. - No utilizar soluciones hipotónicas por favorecer incremento del volumen extravascular. A.1/ CRITERIOS DIAGNÓSTICOS - Hiperglucemia 300 – 600 mg /dl * ancianos > 600 * embarazadas < 200 - Acidosis Metabólica con anión GAP ↑ ( P < 7,25; CO3H < 15 mEq / litro) - Cetonemia y Cetonuria intensas Corregir el trastorno hidroeléctrico mediante reposición de líquidos e iones Corregir el trastorno metabólico mediante reposición de Insulina Tratar los factores desencadenantes: infección, traumatismo, ACV, IAM, error administración de insulina, etc.
  • 16. Manuel Yamunaqué Preciado 15 - Administrar sangre si hematocrito < 30 %. - Controversias en la elección de fluido inicial (cristaloides / coloides). a) COLOIDES - Albúmina: - Expansor más eficaz - 25 gr administrados rápidamente: ↑ volemia 400 cc. - A los 2` alcanza espacio intravascular - Vida media de 4 - 16 horas. - Dextranos: - Importante expansión de volemia por ↑ peso molecular. - Efectos persisten de 8 a 12 horas. - Efectos antiagregantes plaquetarios. - Toxicidad renal dosis – dependiente. - Anafilaxia y efecto inmunosupresor. b) CRISTALOIDES - Solución fisiológica 0,9 % (SL) y Ringer Lactato (RL). - Expansores fundamentalmente del espacio intersticial. - Velocidad de desaparición del torrente circulatorio muy rápida (a los 60` de la perfusión menos del - 20 % permanece en espacio intravascular). - Necesidad de alto aporte y riesgo de sobrecarga del espacio intersticial (Edemas, ICC). - No utilizar soluciones hipotónicas (S. Glucosado 5% o Hiposalino 0,45 %, desaparecen más rápidamente y no tienen capacidad expansora). HEMORRAGIA DIGESTIVA ALTA (H.D.A.) Importante reconocer que un porcentaje de las causas de un sangrado digestivo sea alto o bajo puede ser causado por ingesta de alcohol o de alguna sustancia química lacerante y que al ingresar al área de emergencia como principal procedimiento según el grado y el tiempo de sangrado es administrar líquidos. ACCIDENTE CEREBROVASCULAR (ACV) Si la persona que sufre politraumatismo sea por accidente de tránsito, caídas, peleas entre otras puede ocasionar hemorragias intracraneales por lo que el manejo es diferente. - Pauta de fluidos: - NO utilizar S. Glucosado 5 % (Por su baja Osmolaridad → ↑ Edema Cerebral → ↑ Déficit neurológico).
  • 17. Manuel Yamunaqué Preciado 16 - Utilizar preferentemente S. Fisiológico 0,9 % (o Glucosalino) - Mantener cifras TA discretamente ↑ http://www.medynet.com/usuarios/jraguilar/Manual%20de%20urgencias%20y%20Emergencias/fluido.pdf
  • 18. Manuel Yamunaqué Preciado 17 VARIACIONES POST MORTEM DEL ALCOHOL Difusión pasiva: El alcohol puede difundir pasivamente post mortem desde el estómago y el intestino a los otros órganos y tejidos circundantes. Cuando la concentración de alcohol en el estómago es superior a 0,5 g/L, es un indicativo que la muerte sobrevino momentos después de la ingestión. Cuando estaba en la primera fase de absorción. Ese líquido puede difundir al líquido pericárdico, líquido pleural y posiblemente a bilis, así como a la cavidad peritoneal. Es prácticamente imposible que llegue a las cavidades cardiacas. El problema real de impregnación alcohólica se resolverá fácilmente analizando la concentración de alcohol en orina y humor vítreo, que en este caso siempre serán inferiores a la concentración encontrada en sangre (3). Alteraciones post mortem: La alcoholemia real del individuo, es decir, aquella que refleja la cantidad de alcohol absorbido, puede sufrir diversos procesos que conducen a una alteración de la concentración y, por tanto, a un error de análisis. Se puede presentar dos situaciones: pérdida de alcohol y ganancia de alcohol etílico (3). a. Pérdida de alcohol etílico: puede tener un mecanismo físico, la evaporación. Se produce cuando el almacenamiento no es correcto y se deja un espacio libre entre el nivel de la sangre en el vial y el tapón. El alcohol pasa a la cámara de aire y si no se tiene precaución se escapa al abrir el vial (3). También se puede perder por oxidación microbiana, tanto aerobia como anaerobia, aunque es mayor en el primer caso. Por todo ello, en los viales que contienen el alcohol etílico para su remisión al laboratorio no se debe dejar cámara de aire y añadir opcionalmente un inhibidor microbiano (3). b. Ganancia de alcohol etílico: el alcohol producido post mortem, denominado endógeno, es alcohol etílico químicamente igual al de origen exógeno. No hay método analítico, por tanto, capaz de diferenciarlos (3). El alcohol endógeno se forma por los microorganismos, a partir de la glucosa fundamentalmente. Deben, por tanto, coexistir ambos elementos. La sangre cardiaca es la que contiene más glucosa y donde la bacteriemia es mayor, por lo que será éste el lugar donde se forma el alcohol (3). La presencia de alcohol en todas las muestras indica un origen exógeno. Cuando solo se dispone de una muestra para el análisis, es muy difícil sacar conclusiones en los casos de putrefacción ya iniciada (3). La ganancia puede proceder también de una contaminación de los envases o de las faltas cometidas en el momento de la toma: en ambos casos la sangre puede contaminarse por otros fluidos ricos en alcohol: contenido gástrico, líquido cefalorraquídeo, pleural o pericárdico, entre los más importantes (3). Preservación de la muestra: La muestra de sangre debe ser recogida en un envase de vidrio, con agujas y materiales estériles: se llenará el envase por completo y se adicionará
  • 19. Manuel Yamunaqué Preciado 18 fluoruro sódico y un anticoagulante (oxalato de potasio). El fluoruro se ha demostrado como el más eficaz inhibidorde las enzimas catalíticas e incluso como bactericida. Una dosis de 2,5 mg de fluoruro y 2 mg de oxalato potásico por cada mililitro de sangre es suficiente para preservar la metabolización. La sangre debe almacenarse en la nevera a –20 °C (3). Contaminación y descomposición de origen microbiano: La producción microbiana de etanol en especímenes post mortem es la complicación más frecuentemente encontrada al examinar resultados de etanol (4,5). Luego de la muerte ocurre la autolisis de tejidos por procesos enzimáticos, esto produce reblandecimiento y licuación de tejidos. Durante ese proceso las bacterias del colon invaden tejidos adyacentes y el sistema vascular, primeramente se propagan por el sistema linfático y el sistema venoso portal, unas pocas horas luego de la muerte. La velocidad de la infiltración bacteriana depende de factores aceleradores del proceso Nota: En resumen, el alcohol endógeno alcanza concentraciones que oscilan entre 0,00 g/L y 0,03 g/L, este alcohol es producido por: -La fermentación intestinal de la peptina, -Reducción de acetaldehído de diversa etiología, -Infecciones producidas por bacterias como la Candida albicans y Comidas ricas en carbohidratos(3). -Putrefacción, como: la temperatura ambiental, lesiones intestinales, enfermedades neoplásicas o gangrenas y si la muerte fue causada por una infección, o por la posición del cuerpo o la presencia de traumas extensos del cuerpo. -Temperatura ambiente, la contaminación bacteriana del sistema circulatorio ocurre después de alrededor de 6 horas y luego de 24 horas hay una penetración directa de la pared intestinal. Generalmente los tejidos permanecen relativamente libres de bacterias viables durante las primeras 24 horas (6). Los microorganismos que mayormente se ven envueltos en este proceso son: Escherichia coli y especies de Candida, Clostridium y Klebsiella , entre otros , siendo Candida albicans el principal agente productor; sin embargo existen al menos 58 especies de bacterias,17 de levaduras y 24 de esporas capaces de esta producción (6). Cuando las concentraciones de etanol son menores de 30 mg/100mL, es muy probable que su origen sea la producción post mortem, por otro lado, niveles muy altos de alcoholemia sugieren incorrecto almacenaje de la muestra, lo cual promueve la putrefacción y producción de etanol por las bacterias (6). Efecto de la temperatura: La temperatura puede influir dentro de la producción de alcohol dentro de los fluidos corporales. Si el cuerpo no se mantienen con temperaturas bajas la producción de alcohol se produce dentro de las primeras 24 horas (7) Para evitar contaminación microbiana de la muestra es necesario un buen manejo y mantener a temperaturas bajas evitando la producción de alcohol La producción de alcohol puede producirse ya sea en el cuerpo (8)
  • 20. Manuel Yamunaqué Preciado 19 Efecto del tiempo: A mayor tiempo en especial pasadas las 24 horas y con temperaturas ambiente altas aumenta la producción endógena de alcohol por los microorganismos precentes o por plitraumatismos pre o postmortem (9,10) Efecto del preservante: Los preservantes más comúnmente usados son las sales de Flúor, aunque bajo ciertas condiciones han sido reportadas como inadecuadas, mantener las muestras con fluoruro de sodio al 1% después de la autopsia, impide la producción de etanol por la mayoría de los microorganismos, menos a la Candida albicans. El fluoruro de sodio actúa al inhibir la actividad de la enzima fosfoglucomutasa, para prevenir la síntesis de polisacáridos y a su vez para inhibir el crecimiento in vitro de Candida albicans, que fácilmente convierte la glucosa en etanol. El ion fluoruro es sumamente eficaz en inhibir la actividad de varias enzimas, tales como la enzima enolasa, un componente en el camino glicolítico, es también importante por su efecto en levaduras, hongos y muchos otros microorganismos responsables de la fermentación y a su vez evitar la coagulación sanguínea. El manejo correcto de las muestras recolectadas, debe incluir la adición inmediata de la cantidad correcta de preservante, y definitivamente el almacenamiento de las muestras tan pronto como sea posible. (11,12) Se recomienda utilizar fluoruro de sodio en concentraciones de 1% a 5% en peso o volumen, para los análisis post mortem de alcohol etílico. (13)
  • 21. Manuel Yamunaqué Preciado 20 Conclusiones: La estimación correcta de la concentración de alcohol en el cuerpo postmortem es muy fluctuante ya que está determinada por varios factores como son el tiempo de muerte recolección de muestra, la calidad de la misma, traumas previos existentes, presencia de microorganismos, condiciones ambientales como lluvia, calor, frio, sumersión, Para una correcta identificación es necesario obtener más de un tipo de muestras que pueden ser del humor acuoso, urinario, sangre en corazón, entre otros. Como hemos mencionado unos de los componentes principales para la formación de alcohol es la presencia de azucares, por lo tanto en personas con antecedentes médicos donde se encuentren alterados este componente sería probable una incremento en la producción del alcohol. En el cuerpo de Personas que sufrieron politraumatismos mantienen un sustrato para que microorganismo produzcan alcohol y de esta manera inician una fermentación temprana. En casos de personas hospitalizadas es necesario identificar la causa de muerte ya que una septicemia o la administración de soluciones glucosadas facilitaría la producción de alcohol en el cuerpo. La administración de antibióticos limitaría la producción de la fermentación, por lo que es importante conocer el historial médico y los procedimientos realizados intrahospitalarios.
  • 22. Manuel Yamunaqué Preciado 21 Bibliografía 1.- Gilces Farías,Paola Elizabeth (2006): ESTUDIO DEL USO DE LOS NUTRIENTES PARA LA LEVADURA EN FERMENTACIÓN CON EL PROPÓSITO DE MEJORAR LA PRODUCCIÓN DEL ALCOHOL ETÍLICO 2.- Repetto M. 1 Ed. En: Repetto M., Toxicología Avanzada. Madrid: Díaz de Santos; 1995 3.- Villanueva E. Estudio toxicológico y médico – legal del alcohol etílico. En: Gisbert JA et al., Medicina Legal y Toxicología. Barcelona: Masson S.A.; 1998. 4.- Repetto M. Biotransformación de los tóxicos. 4 Ed. En: Repetto M., Toxicología Fundamental. Madrid: Díaz de Santos; 2009. 5.- Villavicencio N. M. Bioquímica, Fondo Nacional Editorial de la Universidad Mayor de San Marcos, 2 Edición, Lima.1998. 6.- Alvarado G. A. T. Determinación de alcohol Post Mortem: Aspectos a considerar para una mejor interpretación. Medicina Legal Costa Rica v.25 n.2 Heredia septiembre. 2008. 7.- Hansen A.C. Validity of post mortem alcohol determination. Ugeskr Laeger 156(1)(1994) 8.- Winek T., Winek CL and Wahba WW. The effect of storage at various temperatures on blood alcohol concentration. Forensic Sci Int 1996 Apr; 78. 9.- Clark MA, Jones JW. Studies of putrefactive ethanol production 1: lack of spontaneous ethanol production in intact human bodies. J Forens Sci 1982; 27: 36 -37. 10.- Gormsen H. Alcohol production in the dead body. J Forens Med 1954: 27.- Skopp, G. 2004. Preanalytic aspects in postmortem toxicology. Forensic Sci. Int. 142: 75-100. 28.- Sulkowski, H. A., A. H. B. Wu, and Y.S. McCarter. 1995. In vitrous production of ethanol in urine by fermentation. J Forensic Sci. 29.- Zuba D, Parczewski A and Rozanska M. Effect of salt Addition on sencitivity of HS-SPME- GC Method of volatile Determination. Sencitivity of chemistry, Jagiellonian Universty, Krakow, Poland. 30.- Lévano J. En: Aspectos bioquímicos y legales de la alcoholemia. Lima (Perú); 2003. 31.- Código Orgánico Integral Penal del Ecuador, Edición: 2014 Quito - Ecuador