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UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL
SECCION DE MICROBIOLOGÍA

Microbiología Médica I
Tema # 10
Lic. Yudy Aranguren
Enero 2009
BLOQUE 2:
TEMA 10: CONTENIDO:
• Cocos Gram positivos patógenos
• Morfotipos
• Géneros
• Características biológicas
• Diferenciación bioquímica
OBJETIVOS:
10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al
Gram
10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus
según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas.
10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos
Gram positivos
COCOS GRAM POSITIVOS
GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA

GÉNERO

GÉNERO

GÉNERO

STAPHYLOCOCCUS

STREPTOCOCCUS

ENTEROCOCCUS

Clasificación de Lancefield:
Grupo A
Grupo B
Grupo C
Grupo D

No Enterococcus:
Streptococcus bovis
No tipificables

1984
Estudios
ADN
GÉNERO:
GENERALIDADES:

• Cocos Gram positivo
• Tienen forma redondeada y se presentan en
pares o en grupos en forma de racimos de uva

• Inmóviles

• No forman esporas
• Aerobios y anaerobios facultativos
• Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.

Tinción de Gram
• Son catalasa positivo:

• Fáciles de cultivar

Agar Salado Manitol 7%

• Resistente a concentraciones de sal (7%)

• Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares

• Algunos producen pigmentos

-
ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA

Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente
inmunocomprometidos

Staphylococcus aureus.

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus
CARACTERISTICAS :

• Beta Hemolítico

• Produce pigmentos (algunas cepas)

• Manitol positivo

• Coagulasa positivo
FACTORES DE PATOGENICIDAD:

Proteína A

ESTRUCTURA CELULAR

IgG

Cápsula:
Inhibe la
fagocitosis

Pared celular

Peptidoglicano
Ac. Teicóico:
Adherencia
inespecífica

Adhesinas: Proteínas de superficie que
favorece al anclaje a la célula huésped.
FACTORES DE PATOGENICIDAD:

FACTORES SOLUBLES
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Nucleasa
Coagulasa

U

Estafiloquinasa
U

U

U

U

U

U

U

U

U

U

U

UU

U

U

TOXINAS:
Leucocidina
Hemolisinas
Toxina del sindrome del
shock tóxico (TSST-1)
Exfoliativa: sindrome de
la “piel escaldada”
PRODUCTOS CELULARES:
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Proteasas

Difusión de la bacteria en los tejidos.

Nucleasa

Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa
protectora
EXOTOXINAS:
• Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de
macrófagos
• Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan
gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.

•

Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel
escaldada”

• Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas
del SST.
ENTEROTOXINAS
• Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación
alimentaria
CARACTERISTICAS :
• Coagulasa negativo
• No hemolíticos
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Sensible a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Presenta un glicocalix de protección
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metálicas
CARACTERISTICAS :
• No contiene proteína A
• Coagulasa negativo
• No hemolítico
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Resistente a la Novobiocina

FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Receptores oligosacáridos específicos de
células de la uretra
Diagnóstico de laboratorio

?

COCOS GRAM POSITIVOS

CATALASA

NEGATIVAS
GÉNERO

Streptococcus

?

REDUCCIÓN DE NITRATOS

POSITIVAS
GÉNERO

Staphylococcus
PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
S
E
N
S
I
B
I
L
I
D
A
D

COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA

REDUCCIÓN DE NITRATOS

POSITIVAS

• S. aureus
• S. epidermidis

COAGULASA

?

A

• S. saprophyticus

POSITIVA
Staphylococcus
aureus

+

NEGATIVA
S. epidermidis
S. saprophyticus

-

L
A

?

N
O
V
O
B
I
O
C
I
N
A
SENSIBILIDAD A LA
NOVOBIOCINA

SENSIBLE-SIN
CRECIMIENTO

S. epidermidis

RESISTENTECON
CRECIMIENTO

S. saprophyticus
M
O
R
F
O
T
I
P
O
S
CARACTERISTICAS DEL GÉNERO
• Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas
o en pares

• Catalasa negativo

• No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae
• No son esporulados
• Producen diferentes patrones de hemólisis:
ALFA
BETA

• Aerobios facultativos
GAMMA

• Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos

• Fermentan azucares sin producir gas

- +
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
Enterococcus sp
( algunas cepas)

Enterococcus sp
( algunas cepas)

Streptococcus
pneumoniae
Streptococcus
viridans

Grupo D no Enterococcus
(Streptococcus bovis)
Enterococcus sp.

Streptococcus
pyogenes

Streptococcus
agalactiae
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR
• Clasificación de Rebeca Lancefield (1933)
• Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo

Enterococcus sp.
GRUPO D (ac. Teicóico)
GRUPO C y G

Streptococcus
pyogenes
GRUPO A

Streptococcus
agalactiae
GRUPO B
CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y
BIOQUÍMICAS:
Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género.
• Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep
• Posee más de 20 pruebas bioquímicas
API 20 Strep
ENFERMEDADES
FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes
• Diplococos Gram positivos
• Sensibles a la Optoquina
• Poseen cápsula

FACTOR DE VIRULENCIA

Alfa hemolíticos
Factores de patogenicidad:
1.- Cápsula
2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión
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• Hemolisina dermatotóxica (neumolisina)
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CARACTERÍSTICAS:

Streptococcus
agalactiae

• Son beta hemolíticos

• Hidrolisan el hipurato

+

-

• Prueba de CAMP: El estreptococo
del grupo B produce un factor que aumenta
la beta hemólisis de una cepa indicadora de
S. aureus.

S. aureus

S. agalactiae

S.pyogenes

Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa,
hialuronidasa, y hemolisina
CARACTERÍSTICAS:
• Morfotipo: Diplococos
• Aerobios facultativos
• Hemólisis Gamma (No hemoliticos)
• Poco exigentes para cultivar
• Crecen a 6,5% de NaCl
• 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal
Enterococcus faecalis 85-90%
Enterococcus faecium 5-10%
• Enfermedades nosocomiales: Resistencia
natural a cefalosporinas y otros antibióticos
FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas,
beta lactamasa
CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
1.- Hidrólisis de bilis-esculina:
Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina
POSITIVO
2- Crecimiento en solución salina al 6,5%

+

-

• Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) :
CRECEN
• No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN

-
CARACTERISTICAS:
• Habitan la boca principalmente: Flora normal
• Responsables de las caries
• Hemólisis Alfa
Streptococcus mutans
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarium
Streptococcus sanguis

• No son tipificables con las pruebas anteriores
COCOS GRAM POSITIVOS

(Grupos)
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(Cadenas y pares)
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DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS
GRAM POSITIVOS
MUESTRA: Extendido y frotis para
Tinción de Gram
• Exudado faringeo
• Pus
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• LCR
EN

OS
CIM
RA

?

1.- EXAMEN DIRECTO:
Tinción de Gram
Gram: cocos Gram positivos

EN

CA
DE

NA
S?
2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA

REDUCCIÓN DE NITRATOS

POSITIVAS

NEGATIVAS

• S. aureus
• S. epidermidis

Streptococcus

?

• S. saprophyticus
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NOVOBIOCINA

POSITIVA

NEGATIVA

Staphylococcus
aureus

S. epidermidis
S. saprophyticus

?

SENSIBLE-SIN
CRECIMIENTO

S. epidermidis

RESISTENTECON
CRECIMIENTO

S. saprophyticus
Streptococcus
3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE:
Agar sangre en 10% Co2:

ALFA

GAMMA

BETA

S. pneumoniae
Sensible a Optoquina

Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%

S. pyogenes
(Grupo-A)
Sensible a Bacitracina

Grupo Viridans
Reacciones bioquímicas

Grupo-D
No Enterococcus
No crece en NaCl 6,5%

S. agalactiae
(Grupo-B)
Prueba Camp positiva

Grupo Viridans
Reacciones bioquímicas

Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%

Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
AUTOEVALUACIÓN

STAPHYLOCOCCUS
AUREUS

STAPHYLOCOCCUS
EPIDERMIDIS

STAPHYLOCOCCUS
SAPROPHYTICUS

POSITIVO

NEGATIVO

NEGATIVO

Produce pigmentos

SI

NO

NO

Crece a 7% NaCl

SI

SI

SI

SI

NO

NO

-----

SI

NO

PRUEBA BIOQUÍMICA

Coagulasa

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Manitol
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Cocosgrampos

  • 1. UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL SECCION DE MICROBIOLOGÍA Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009
  • 2. BLOQUE 2: TEMA 10: CONTENIDO: • Cocos Gram positivos patógenos • Morfotipos • Géneros • Características biológicas • Diferenciación bioquímica OBJETIVOS: 10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al Gram 10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas. 10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos Gram positivos
  • 3. COCOS GRAM POSITIVOS GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA GÉNERO GÉNERO GÉNERO STAPHYLOCOCCUS STREPTOCOCCUS ENTEROCOCCUS Clasificación de Lancefield: Grupo A Grupo B Grupo C Grupo D No Enterococcus: Streptococcus bovis No tipificables 1984 Estudios ADN
  • 4. GÉNERO: GENERALIDADES: • Cocos Gram positivo • Tienen forma redondeada y se presentan en pares o en grupos en forma de racimos de uva • Inmóviles • No forman esporas • Aerobios y anaerobios facultativos • Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC. Tinción de Gram
  • 5. • Son catalasa positivo: • Fáciles de cultivar Agar Salado Manitol 7% • Resistente a concentraciones de sal (7%) • Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares • Algunos producen pigmentos -
  • 6. ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos Staphylococcus aureus. Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus
  • 7. CARACTERISTICAS : • Beta Hemolítico • Produce pigmentos (algunas cepas) • Manitol positivo • Coagulasa positivo
  • 8. FACTORES DE PATOGENICIDAD: Proteína A ESTRUCTURA CELULAR IgG Cápsula: Inhibe la fagocitosis Pared celular Peptidoglicano Ac. Teicóico: Adherencia inespecífica Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.
  • 9. FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Nucleasa Coagulasa U Estafiloquinasa U U U U U U U U U U U UU U U TOXINAS: Leucocidina Hemolisinas Toxina del sindrome del shock tóxico (TSST-1) Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”
  • 10. PRODUCTOS CELULARES: ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Proteasas Difusión de la bacteria en los tejidos. Nucleasa Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora
  • 11. EXOTOXINAS: • Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos • Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica. • Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada” • Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST. ENTEROTOXINAS • Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria
  • 12. CARACTERISTICAS : • Coagulasa negativo • No hemolíticos • Crece a 7% NaCl • No fermenta Manitol • Sensible a la Novobiocina FACTORES DE PATOGENICIDAD: • Presenta un glicocalix de protección • Adherencia a superficies plásticas y metálicas
  • 13. CARACTERISTICAS : • No contiene proteína A • Coagulasa negativo • No hemolítico • Crece a 7% NaCl • No fermenta Manitol • Resistente a la Novobiocina FACTORES DE PATOGENICIDAD: • Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra
  • 14. Diagnóstico de laboratorio ? COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA NEGATIVAS GÉNERO Streptococcus ? REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS GÉNERO Staphylococcus
  • 15. PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS: S E N S I B I L I D A D COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS • S. aureus • S. epidermidis COAGULASA ? A • S. saprophyticus POSITIVA Staphylococcus aureus + NEGATIVA S. epidermidis S. saprophyticus - L A ? N O V O B I O C I N A
  • 16. SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO S. epidermidis RESISTENTECON CRECIMIENTO S. saprophyticus
  • 18. CARACTERISTICAS DEL GÉNERO • Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas o en pares • Catalasa negativo • No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae • No son esporulados
  • 19. • Producen diferentes patrones de hemólisis: ALFA BETA • Aerobios facultativos GAMMA • Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos • Fermentan azucares sin producir gas - +
  • 20. CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS Enterococcus sp ( algunas cepas) Enterococcus sp ( algunas cepas) Streptococcus pneumoniae Streptococcus viridans Grupo D no Enterococcus (Streptococcus bovis) Enterococcus sp. Streptococcus pyogenes Streptococcus agalactiae
  • 21. CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR • Clasificación de Rebeca Lancefield (1933) • Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo Enterococcus sp. GRUPO D (ac. Teicóico) GRUPO C y G Streptococcus pyogenes GRUPO A Streptococcus agalactiae GRUPO B
  • 22. CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS: Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género. • Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep • Posee más de 20 pruebas bioquímicas API 20 Strep
  • 24. FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes
  • 25. • Diplococos Gram positivos • Sensibles a la Optoquina • Poseen cápsula FACTOR DE VIRULENCIA Alfa hemolíticos Factores de patogenicidad: 1.- Cápsula 2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión 3.- Toxinas: • Hemolisina dermatotóxica (neumolisina) • Leucocidina
  • 26. CARACTERÍSTICAS: Streptococcus agalactiae • Son beta hemolíticos • Hidrolisan el hipurato + - • Prueba de CAMP: El estreptococo del grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus. S. aureus S. agalactiae S.pyogenes Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina
  • 27. CARACTERÍSTICAS: • Morfotipo: Diplococos • Aerobios facultativos • Hemólisis Gamma (No hemoliticos) • Poco exigentes para cultivar • Crecen a 6,5% de NaCl • 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal Enterococcus faecalis 85-90% Enterococcus faecium 5-10% • Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos
  • 28. FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas, beta lactamasa CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS: 1.- Hidrólisis de bilis-esculina: Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina POSITIVO 2- Crecimiento en solución salina al 6,5% + - • Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) : CRECEN • No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN -
  • 29. CARACTERISTICAS: • Habitan la boca principalmente: Flora normal • Responsables de las caries • Hemólisis Alfa Streptococcus mutans Streptococcus mitis Streptococcus salivarium Streptococcus sanguis • No son tipificables con las pruebas anteriores
  • 31. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram • Exudado faringeo • Pus • Sangre • LCR EN OS CIM RA ? 1.- EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram Gram: cocos Gram positivos EN CA DE NA S?
  • 32. 2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS: COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS NEGATIVAS • S. aureus • S. epidermidis Streptococcus ? • S. saprophyticus COAGULASA SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA POSITIVA NEGATIVA Staphylococcus aureus S. epidermidis S. saprophyticus ? SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO S. epidermidis RESISTENTECON CRECIMIENTO S. saprophyticus
  • 33. Streptococcus 3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% Co2: ALFA GAMMA BETA S. pneumoniae Sensible a Optoquina Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5% S. pyogenes (Grupo-A) Sensible a Bacitracina Grupo Viridans Reacciones bioquímicas Grupo-D No Enterococcus No crece en NaCl 6,5% S. agalactiae (Grupo-B) Prueba Camp positiva Grupo Viridans Reacciones bioquímicas Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5% Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5%
  • 34. AUTOEVALUACIÓN STAPHYLOCOCCUS AUREUS STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO Produce pigmentos SI NO NO Crece a 7% NaCl SI SI SI SI NO NO ----- SI NO PRUEBA BIOQUÍMICA Coagulasa Fermenta Manitol Sensibilidad a la Novobiocina