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DE LIPOPROTEINAS:DE LIPOPROTEINAS:
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Y APLICACIONESY APLICACIONES
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Servi-Med
BIOL. CARLOS BEJAR LOZANO
Jefe del Departamento de Inmunología
Servi-Med Laboratorios Clínicos
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EVOLUCIONEVOLUCION CULTURALCULTURAL
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OBESIDAD:OBESIDAD: Cuestión cultural ?Cuestión cultural ?
Cuestión de países desarrollados ?Cuestión de países desarrollados ?
Cuestión genética ? … o TODO..?Cuestión genética ? … o TODO..?
MéxicoMéxico disputa el
Primer Lugar 2013Primer Lugar 2013
en Obesidad en
el Mundo.
Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos
Importante un
Sistema de ClasificaciónClasificación
MediciónMedición y seguimientoseguimiento
en dislipidemias.
CLASIFICACIONCLASIFICACION
SOBREPESO / OBESIDADSOBREPESO / OBESIDAD
I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2
I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2
Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos
Si Lincoln hubiera tenido pc
Si David hubiera viajado a EEUU
Mi IMC: 84.0 kg ÷ (1.80)2
84.0 ÷ 3.24 = 25.9
FACTORES DE RIESGOFACTORES DE RIESGO
VIEJOS Y EMERGENTESVIEJOS Y EMERGENTES
Síndrome Metabólico / Síndrome de Resistencia a la Insulina
Dislipidemia – Hipertensión – Diabetes
SíndromeSíndrome
metabólicometabólico
- Desfibrilador (60´s)
- Unidad Coronaria (80´s)
- Betabloqueadores
LOSLOS AVANCESAVANCES DE LADE LA
CARDIOLOGIA MODERNACARDIOLOGIA MODERNA
Era de Reperfusión (´80´s)
Trombolisis + Stents
Disminución de MortalidadDisminución de Mortalidad
IntrahospitalariaIntrahospitalaria
NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!
MORBILIDAD Y MORTALIDADMORBILIDAD Y MORTALIDAD
ASOCIADA A DISLIPIDEMIASASOCIADA A DISLIPIDEMIAS
 Cada hora mueren 7 personas en México por
infarto, de los que el 70 % está relacionado
con dislipidemias e hipertensión.
http://www.invdes.com.mx/anteriores/Abril2001/htm/infarto.html
 Es la tercer causa de muerte en México,
después de diabetes y cáncer.
http://sinais.salud.gob.mx/mortalidad/tabs/m_009.xls
 Se estima que al menos un tercio de la
población mexicana tiene algún grado de
obesidad y dislipidemia, muchos de ellos
asociados a diabetes.
 Como medida de control de factores de
riesgo, se debe controlar el nivel denivel de
lípidoslípidos, así como otros factores de riesgo
asociados (hipertensión, tabaquismo y
sedentarismo y hábitos alimenticios).
Mortalidad Mundial
22.3
19.3
12.6
9.7
9
6.3
0 5 10 15 20 25 30
AterosclerosisAterosclerosis
Enfermedad infecciosa
Cáncer
Accidentes
Enfermedad pulmonar
SIDA
Causas de mortalidad (%)
The World Health Report 2001. Geneva. WHO. 2001.
El papel del Laboratorio Clínico:
Proporcionar elementos medibles para el control de este padecimiento
Tendencias a buscar en la medicina..
 LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS
FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A:
- SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA
- DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS,
- HTA / TROMBOSIS
LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……
 LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS
FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A:
- SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA
- DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS,
- HTA / TROMBOSIS
LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……
Origen de las Dislipidemias:
Dislipidemias primarias
CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias)
de Dislipidemias:de Dislipidemias:
 Genética FamiliarGenética Familiar 
- Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar
- Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada
- Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica
- Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar
- Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar
- Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL
CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias)
de Dislipidemias:de Dislipidemias:
 Genética FamiliarGenética Familiar 
- Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar
- Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada
- Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica
- Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar
- Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar
- Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL
Enfermedades mas comunes
asociadas a desnutrición:
• Gen Ob en cr7 que codifica para Leptina.
• Se expresa (produce) en adipocitos, y bajo
condiciones normales, será en proporción directa a
la masa de tejido adiposo.
Leptina ↑↑
Aumento de tejido adiposo
Péptidos anoréxicos
- Ghrelina
- Serotonina
- Colecistoquinina
- Neuropéptido Y
Lipogénesis ↓
Lipólisis ↑
Apetito ↓↓
Origen de las Dislipidemias:
Dislipidemias Secundarias
- DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de
quilomicrones y VLDL
- ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados
de insulina (resistencia a la insulina)
- HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de
las LDL
- NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con
aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para
compensación oncótica.
- ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso
colesterol y fosfolípidos al plasma
- AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y
síntesis hepática de triglicéridos
- Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL
- DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de
quilomicrones y VLDL
- ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados
de insulina (resistencia a la insulina)
- HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de
las LDL
- NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con
aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para
compensación oncótica.
- ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso
colesterol y fosfolípidos al plasma
- AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y
síntesis hepática de triglicéridos
- Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL
Objetivo del estudio de Lípidos:
1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo
de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)
asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el
 Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL
2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a
hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de
acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,
hígado graso, etc.hígado graso, etc.
1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo
de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)
asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el
 Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL
2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a
hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de
acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,
hígado graso, etc.hígado graso, etc.
“Solo se puede conocer lo que se puede medir”
Valoración de las Dislipidemias por LaboratorioValoración de las Dislipidemias por Laboratorio
  Medición de Colesterol + Triglicéridos.
  Medición del Perfil de Lípidos
 Colesterol
 cHDL + cLDL + cVLDL  “LIPIDOS TOTALES..??? “
 Triglicéridos
 Test de Quilomicrones: Se deja reposar el suero a 4ºC durante 24 hs;
cuando existen quilomicrones, aparece un sobrenadante cremoso en la
superficie. En sueros normales, esto nunca aparecerá.
  Medición de Perfil de Lípidos + Electroforesis de Lipoproteínas
- Colesterol
- cHDL + cLDL + cVLDL
- Triglicéridos
- Indice de Riesgo Aterogénico
 C.T. / cHDL
- Alfa
- Pre-Beta
- Beta
- Indices de Riesgo Aterogénico
 Pre-Beta / Alfa
 Beta / Alfa
CALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DECALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DE
COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLDCOLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLD
Fórmula de FriedewaldFórmula de Friedewald para calcular las distintas
fracciones de colesterol:
- Medición directa de Colesterol (CT),
- Medición directa de Triglicéridos (TG)
- Medición directa de cHDL
- Calcular cLDLcLDL y cVLDLcVLDL mediante las fórmulas:
* cLDL = CT – ((Tg / 5 ) + cHDL)
* cVLDL = CT – (cLDL + cHDL)
 No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
cVLDL = TG / 5
METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION
DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO
 Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y
cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del
colesterol y las lipoproteínas de transporte.
 No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
Normal
(mg/dL)
Ejemplo 1 Ejemplo 2
Ejemplo 3 Ejemplo 4
Colesterol Total 100 – 200 200 200 250 314
Triglicéridos 50 – 170 170 170 400 245
cHDL > 50 35 50 60 46
cLDL < 100 131 116 110 219
cVLDL < 21 34 34 80 49
Riesgo
Aterogénico
C T / cHDL
< 4.5 5.7 4.0 4.1 6.8
METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION
DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO
 Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y
cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del
colesterol y las lipoproteínas de transporte.
 No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia
Normal
(mg/dL)
Ejemplo 5 Ejemplo 6
Ejemplo 7 Ejemplo 8
Colesterol Total 100 – 200 185 180 205 344
Triglicéridos 50 – 170 400 679 754 3 018
cHDL > 50 37 42 56 65
cLDL < 100 68 2 - 1 - 324
cVLDL < 21 80 136 150 603
Riesgo
Aterogénico
C T / cHDL
< 4.5 5.0 4.3 3.6 :-) 5.3
VALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CONVALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CON
CIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDLCIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDL
 Datos de Riesgo y Terapéutica del Toronto Working Group, 1998Toronto Working Group, 1998
Factor de
Riesgo
Coronario
Nivel de
riesgo
Riesgo EC
a 10 años
Tratamiento, si:
LDL(mg) ó CT/HDL
≥ 4 Muy alto ≥ 40% 135 ó >5
≤ 3 Alto 20 a 39% ≥ 174 ó >6
≤ 2 Normal 10 a 19% ≥ 193 ó >7
≤ 1 Bajo <10% ≥ 232 ó >8
Las lipoproteínas están formadas por:
- Fracción proteica o Apo (Apoproteína)
 Función primordial en acoplamiento a
receptores.
- Colesterol total y esterificado
- Triglicéridos.
COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS
COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS
 PROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINASPROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINAS
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
 METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
 CAUSAS Y CLASIFICACIONCAUSAS Y CLASIFICACION
DE LAS DISLIPIDEMIASDE LAS DISLIPIDEMIAS
 PROCESO DE LAPROCESO DE LA ATEROSCLEROSISATEROSCLEROSIS 
IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DELIMPORTANCIA DEL ESTUDIO DEL
PACIENTE CON DISLIPIDEMIAPACIENTE CON DISLIPIDEMIA
Cual es su riesgo aterogénico..??Cual es su riesgo aterogénico..??
  NO HAY REGLA: Hay “flacos” con hipercolesterolemia o
hipertrigliceridemia, y flacos normolipémicos.
  Hay “gordos” con hipercolesterolemia y/o hipertrigliceridemia
y “gordos normolipémicos.
 Se pueden clasificar las dislipidemias y medir el riesgo
aterogénico… con solo medir colesterol y triglicéridos ?
… Causas de obesidad ?
… Causas de talla baja ?
ESTUDIO DE DISLIPIDEMIASESTUDIO DE DISLIPIDEMIAS
• La ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS ofrece un método
sensible y accesible para valoración de riesgos aterogénicos, tanto
asociados a hipercolesterolemia como hipertrigliceridemia.
 Patológico: Aumento de LDL y VLDL con agravamiento por
presencia de quilomicrones. Disminución de síntesis de HDL.
 Tendencia óptima: Aumentar HDL y disminuir LDL, IDL y VLDL
Clasificación de
Dislipidemias
Terapéutica específica Riesgo EC
Respuesta
A tratamiento
Electroforesis de
Lipoproteinas
ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
 ELECTROFORESIS DE MICROZONAELECTROFORESIS DE MICROZONA
Clasificacion de las DislipidemiasClasificacion de las Dislipidemias
(OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963)(OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963)
- Tipo I: Quilomicrones.
- Tipo IIa: Betalipoproteínas (LDL)
- Tipo IIb: LDL + VLDL (Beta y p-Beta)
- Tipo III: IDL (Beta ancha)
- Tipo IV: VLDL (pre-Betalipoproteínas)
- Tipo V: VLDL + Quilomicrones
 Método semi-semi-
cuantitativocuantitativo
 Debe interpretarse
junto con los valores de
colesterolcolesterol y triglicéridos.triglicéridos.
Banda en el punto de aplicación
corresponde a la presencia de
quilomicrones,
Banda ancha que abarca beta y
prebeta sugiere un acúmulo
anormal de IDL y/o de
remanentes de quilomicrones.
Banda Pre-Pre-αα (LipoalbúminaLipoalbúmina)
aparece cuando hay ácidos
grasos libres y lecitina unida a
albúmina (no patológica).
ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
 ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa)ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa)
Punto de aplicación
Lipoproteínas Beta (LDL)
Lipoproteínas Pre-Beta (VLDL)
Lipoproteínas Alfa (HDL)
Sitio de aparición de
los quilomicrónes
Método electroforético que permite separar e identificar y medir las distintas
fracciones lipoproteicas, mediante su tinción con Sudán Negro y su integración
densitométrica en un lipidograma.
ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
HDL VLDL LDL
quilomicrones
Integración densitométrica de la electroforésis
MUESTRA A USAR…?MUESTRA A USAR…?
 El SUEROSUERO contiene Lipoprotein LipasaLipoprotein Lipasa, que es activa y estará
degradando lipoproteínas en la muestra.
 La Lipoprotein Lipasa es activada por laactivada por la HEPARINAHEPARINA, por lo que no
es una muestra útil para una electroforesis de lipoproteinas.
 ElEl EDTAEDTA inhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por loinhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por lo
que es la muestra ideal a utilizar, ya seaque es la muestra ideal a utilizar, ya sea EDTA -Na, -K, o -LiEDTA -Na, -K, o -Li..
 NO HAY CAMBIOS SIGNIFICATIVOS SI SE EMPLEA UNA
MUESTRA DE SUERO Y SE EFECTUA LA ELECTROFORESIS
ANTES DE 48 HORAS EN SUERO REFRIGERADO.
 Si no se procesará antes de 48 horas de obtenida la muestra, será
mas conveniente una muestra de plasma y refrigerar para procesar.
Datos del
paciente
ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS
 REPORTEREPORTE
Corrimiento
electroforético
Datos de
interpretación
clínica
Integración de
electroforesis
PROPORCIONAR AL
MEDICO, TODA LA
INFORMACION POSIBLE
PARA EL CORRECTO
APROBECHAMIENTO
DEL ESTUDIO
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 PATRON NORMALPATRON NORMAL
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 FENOTIPO IIa: Hiper-BetalipoproteinemiaFENOTIPO IIa: Hiper-Betalipoproteinemia
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 FENOTIPO IIb: Hiperlipidemia MixtaFENOTIPO IIb: Hiperlipidemia Mixta
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 FENOTIPO III: Beta AnchaFENOTIPO III: Beta Ancha
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
 FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS
FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
Principales problemas y alternativas:Principales problemas y alternativas:
Muy baja cantidad de lípidos (ppalm tg) Prescribir a pacientes dislipidémicos
Uso de sueros envejecidos (> 2 días)
Procesar al menos 3 veces por semana
Usar plasma si se procesara después de 48 hs
Uso de sueros/plasmas congelados No congelar. Ideal refrigerar a 4°C
Uso de Buffer equivocado o deteriorado Recambio de buffer y uso de secantes
Déficit Congénito
de HDL ..?
Usar un suero normal como
Control Interno
ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS
 Principales problemasPrincipales problemas
Principales problemas de corrimientos:
1. Deficiente preparación de acetatos por no recambio de filtros  Habrá
aparición de artificios en el corrimiento
2. Envejecimiento de reactivos  Teñido deficiente
3. Uso de amortiguador impropio  Corrimiento anormal
4. Muestras envejecidas  Desaparición o atenuamiento de bandas
5. No coincide lo que veo en el corrimiento con lo que integra el integrador
densitométrico  Limpieza y mantenimiento de los sensores o
fotoceldas de cada canal de integración.
Sugerencias:
- En lo posible, meter suero “normal” para comparar patrones anormales.
- Recambio de papel filtro de puentes y desecantes.
- Procesamiento 3 veces por semana
- Programación de mantenimiento preventivo  al menos una vez al año
Corrimientos de
lipoproteinas con
muestras frescas
(izquierda) y
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con 5 dias de
almacenamiento
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Estudio de dislipidemias por electroforesis

  • 1. ELECTROFORESISELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS:DE LIPOPROTEINAS: ASPECTOS TECNICOSASPECTOS TECNICOS Y APLICACIONESY APLICACIONES CLINICASCLINICAS Servi-Med BIOL. CARLOS BEJAR LOZANO Jefe del Departamento de Inmunología Servi-Med Laboratorios Clínicos Laboratorios Clínicos
  • 2. EVOLUCIONEVOLUCION BIOLOGICABIOLOGICA YY EVOLUCIONEVOLUCION CULTURALCULTURAL Diabetes Dislipidemia Hipertensión Sedentarismo Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos
  • 3. OBESIDAD:OBESIDAD: Cuestión cultural ?Cuestión cultural ? Cuestión de países desarrollados ?Cuestión de países desarrollados ? Cuestión genética ? … o TODO..?Cuestión genética ? … o TODO..? MéxicoMéxico disputa el Primer Lugar 2013Primer Lugar 2013 en Obesidad en el Mundo. Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos Importante un Sistema de ClasificaciónClasificación MediciónMedición y seguimientoseguimiento en dislipidemias.
  • 4. CLASIFICACIONCLASIFICACION SOBREPESO / OBESIDADSOBREPESO / OBESIDAD I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2 I.M.C. = Kg peso ÷ (Altura m)2 Servi-MedServi-MedLaboratoriosLaboratoriosClínicosClínicos Si Lincoln hubiera tenido pc Si David hubiera viajado a EEUU Mi IMC: 84.0 kg ÷ (1.80)2 84.0 ÷ 3.24 = 25.9
  • 5. FACTORES DE RIESGOFACTORES DE RIESGO VIEJOS Y EMERGENTESVIEJOS Y EMERGENTES Síndrome Metabólico / Síndrome de Resistencia a la Insulina Dislipidemia – Hipertensión – Diabetes SíndromeSíndrome metabólicometabólico
  • 6. - Desfibrilador (60´s) - Unidad Coronaria (80´s) - Betabloqueadores LOSLOS AVANCESAVANCES DE LADE LA CARDIOLOGIA MODERNACARDIOLOGIA MODERNA Era de Reperfusión (´80´s) Trombolisis + Stents Disminución de MortalidadDisminución de Mortalidad IntrahospitalariaIntrahospitalaria NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!NO PREVIENEN… TRATAN DE CORREGIR EL DEFECTO.:!
  • 7. MORBILIDAD Y MORTALIDADMORBILIDAD Y MORTALIDAD ASOCIADA A DISLIPIDEMIASASOCIADA A DISLIPIDEMIAS  Cada hora mueren 7 personas en México por infarto, de los que el 70 % está relacionado con dislipidemias e hipertensión. http://www.invdes.com.mx/anteriores/Abril2001/htm/infarto.html  Es la tercer causa de muerte en México, después de diabetes y cáncer. http://sinais.salud.gob.mx/mortalidad/tabs/m_009.xls  Se estima que al menos un tercio de la población mexicana tiene algún grado de obesidad y dislipidemia, muchos de ellos asociados a diabetes.  Como medida de control de factores de riesgo, se debe controlar el nivel denivel de lípidoslípidos, así como otros factores de riesgo asociados (hipertensión, tabaquismo y sedentarismo y hábitos alimenticios).
  • 8. Mortalidad Mundial 22.3 19.3 12.6 9.7 9 6.3 0 5 10 15 20 25 30 AterosclerosisAterosclerosis Enfermedad infecciosa Cáncer Accidentes Enfermedad pulmonar SIDA Causas de mortalidad (%) The World Health Report 2001. Geneva. WHO. 2001.
  • 9. El papel del Laboratorio Clínico: Proporcionar elementos medibles para el control de este padecimiento Tendencias a buscar en la medicina..  LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A: - SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA - DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS, - HTA / TROMBOSIS LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……  LA MEJOR MEDICINA ES LA QUE CONTROLA Y PREVIENE LOS FACTORES DE RIESGO Y LAS COMPLICACIONES ASOCIADOS A: - SINDROME DE RESISTRENCIA A LA INSULINA - DIABETES / DISLIPIDEMIASDISLIPIDEMIAS, - HTA / TROMBOSIS LA MEJOR MEDICINA SERALA MEJOR MEDICINA SERA LA PREVENTIVALA PREVENTIVA……
  • 10. Origen de las Dislipidemias: Dislipidemias primarias CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias) de Dislipidemias:de Dislipidemias:  Genética FamiliarGenética Familiar  - Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar - Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada - Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica - Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar - Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar - Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL CausasCausas genéticasgenéticas (primarias)(primarias) de Dislipidemias:de Dislipidemias:  Genética FamiliarGenética Familiar  - Hipercolesterolemia FamiliarHipercolesterolemia Familiar - Dislipidemia Familiar CombinadaDislipidemia Familiar Combinada - Hipercolesterolemia PoligénicaHipercolesterolemia Poligénica - Hiperquilomicronemia familiarHiperquilomicronemia familiar - Hipertrigliceridemia familiarHipertrigliceridemia familiar - Déficit congénito de HDLDéficit congénito de HDL
  • 11. Enfermedades mas comunes asociadas a desnutrición: • Gen Ob en cr7 que codifica para Leptina. • Se expresa (produce) en adipocitos, y bajo condiciones normales, será en proporción directa a la masa de tejido adiposo. Leptina ↑↑ Aumento de tejido adiposo Péptidos anoréxicos - Ghrelina - Serotonina - Colecistoquinina - Neuropéptido Y Lipogénesis ↓ Lipólisis ↑ Apetito ↓↓
  • 12. Origen de las Dislipidemias: Dislipidemias Secundarias - DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de quilomicrones y VLDL - ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados de insulina (resistencia a la insulina) - HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de las LDL - NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para compensación oncótica. - ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso colesterol y fosfolípidos al plasma - AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y síntesis hepática de triglicéridos - Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL - DiabetesDiabetes:: Valores elevados de insulina, defectos en el catabolismo de quilomicrones y VLDL - ObesidadObesidad:: Mayor cantidad de lípidos en circulación y valores elevados de insulina (resistencia a la insulina) - HipotiroidismoHipotiroidismo:: Disminución del receptor de LDL y depuración lenta de las LDL - NefropatíasNefropatías:: Insuficiencia renal crónica y depuración lenta de VLDL con aumento de producción de LDL. Retención de colesterol para compensación oncótica. - ColestasisColestasis:: Bloqueo de vía excretoria de la bilis con aumento del paso colesterol y fosfolípidos al plasma - AlcoholismoAlcoholismo:: Estimula la secreción de VLDL por parte del hígado y síntesis hepática de triglicéridos - Terapia sustitutiva de EstrógenosEstrógenos:: Mayor síntesis de VLDL y HDL
  • 13. Objetivo del estudio de Lípidos: 1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis) asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el  Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL 2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis, hígado graso, etc.hígado graso, etc. 1.1. Proporcionar unaProporcionar una medidamedida que valore el riesgoque valore el riesgo de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis)de Enfermedad Coronaria (aterosclerosis) asociada a dislipidemias, mediante elasociada a dislipidemias, mediante el  Indice de Riesgo = CTIndice de Riesgo = CT ÷ cHDL÷ cHDL 2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a2. Valorar dislipidemia y complicaciones asociadas a hiperlipidemia (hiperlipidemia (cifrascifras absolutas de CT y TG) deabsolutas de CT y TG) de acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis,acuerdo a riesgos de: colelitiasis, pancreatitis, hígado graso, etc.hígado graso, etc. “Solo se puede conocer lo que se puede medir”
  • 14. Valoración de las Dislipidemias por LaboratorioValoración de las Dislipidemias por Laboratorio   Medición de Colesterol + Triglicéridos.   Medición del Perfil de Lípidos  Colesterol  cHDL + cLDL + cVLDL  “LIPIDOS TOTALES..??? “  Triglicéridos  Test de Quilomicrones: Se deja reposar el suero a 4ºC durante 24 hs; cuando existen quilomicrones, aparece un sobrenadante cremoso en la superficie. En sueros normales, esto nunca aparecerá.   Medición de Perfil de Lípidos + Electroforesis de Lipoproteínas - Colesterol - cHDL + cLDL + cVLDL - Triglicéridos - Indice de Riesgo Aterogénico  C.T. / cHDL - Alfa - Pre-Beta - Beta - Indices de Riesgo Aterogénico  Pre-Beta / Alfa  Beta / Alfa
  • 15. CALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DECALCULO DE cLDL y cVLDL A PARTIR DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLDCOLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y cHLD Fórmula de FriedewaldFórmula de Friedewald para calcular las distintas fracciones de colesterol: - Medición directa de Colesterol (CT), - Medición directa de Triglicéridos (TG) - Medición directa de cHDL - Calcular cLDLcLDL y cVLDLcVLDL mediante las fórmulas: * cLDL = CT – ((Tg / 5 ) + cHDL) * cVLDL = CT – (cLDL + cHDL)  No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia cVLDL = TG / 5
  • 16.
  • 17. METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO  Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del colesterol y las lipoproteínas de transporte.  No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia Normal (mg/dL) Ejemplo 1 Ejemplo 2 Ejemplo 3 Ejemplo 4 Colesterol Total 100 – 200 200 200 250 314 Triglicéridos 50 – 170 170 170 400 245 cHDL > 50 35 50 60 46 cLDL < 100 131 116 110 219 cVLDL < 21 34 34 80 49 Riesgo Aterogénico C T / cHDL < 4.5 5.7 4.0 4.1 6.8
  • 18. METODOS PARA VALORACIONMETODOS PARA VALORACION DE RIESGO ATEROGÉNICODE RIESGO ATEROGÉNICO  Medición de Colesterol y Triglicéridos, incluyendo las fracciones cHDL, cLDL Y cVLDL, para obtener el riesgo aterogénico derivado de alteraciones del colesterol y las lipoproteínas de transporte.  No valora riesgo asociado a hipertrigliceridemiahipertrigliceridemia Normal (mg/dL) Ejemplo 5 Ejemplo 6 Ejemplo 7 Ejemplo 8 Colesterol Total 100 – 200 185 180 205 344 Triglicéridos 50 – 170 400 679 754 3 018 cHDL > 50 37 42 56 65 cLDL < 100 68 2 - 1 - 324 cVLDL < 21 80 136 150 603 Riesgo Aterogénico C T / cHDL < 4.5 5.0 4.3 3.6 :-) 5.3
  • 19. VALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CONVALORACION DE RIESGO DE ENFERMEDAD CORONARIA (EC) CON CIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDLCIFRAS DE COLESTEROL, TRIGLICERIDOS Y LOS cHDL, cLDL Y cVLDL  Datos de Riesgo y Terapéutica del Toronto Working Group, 1998Toronto Working Group, 1998 Factor de Riesgo Coronario Nivel de riesgo Riesgo EC a 10 años Tratamiento, si: LDL(mg) ó CT/HDL ≥ 4 Muy alto ≥ 40% 135 ó >5 ≤ 3 Alto 20 a 39% ≥ 174 ó >6 ≤ 2 Normal 10 a 19% ≥ 193 ó >7 ≤ 1 Bajo <10% ≥ 232 ó >8
  • 20. Las lipoproteínas están formadas por: - Fracción proteica o Apo (Apoproteína)  Función primordial en acoplamiento a receptores. - Colesterol total y esterificado - Triglicéridos. COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS
  • 21. COMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINASCOMPOSICION DE LAS LIPOPROTEINAS  PROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINASPROPORCION DE LIPIDOS / APOPROTEINAS
  • 22. METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
  • 23. METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
  • 24. METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
  • 25.  METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINASMETABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS
  • 26.  CAUSAS Y CLASIFICACIONCAUSAS Y CLASIFICACION DE LAS DISLIPIDEMIASDE LAS DISLIPIDEMIAS
  • 27.  PROCESO DE LAPROCESO DE LA ATEROSCLEROSISATEROSCLEROSIS 
  • 28. IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DELIMPORTANCIA DEL ESTUDIO DEL PACIENTE CON DISLIPIDEMIAPACIENTE CON DISLIPIDEMIA Cual es su riesgo aterogénico..??Cual es su riesgo aterogénico..??   NO HAY REGLA: Hay “flacos” con hipercolesterolemia o hipertrigliceridemia, y flacos normolipémicos.   Hay “gordos” con hipercolesterolemia y/o hipertrigliceridemia y “gordos normolipémicos.  Se pueden clasificar las dislipidemias y medir el riesgo aterogénico… con solo medir colesterol y triglicéridos ? … Causas de obesidad ? … Causas de talla baja ?
  • 29. ESTUDIO DE DISLIPIDEMIASESTUDIO DE DISLIPIDEMIAS • La ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS ofrece un método sensible y accesible para valoración de riesgos aterogénicos, tanto asociados a hipercolesterolemia como hipertrigliceridemia.  Patológico: Aumento de LDL y VLDL con agravamiento por presencia de quilomicrones. Disminución de síntesis de HDL.  Tendencia óptima: Aumentar HDL y disminuir LDL, IDL y VLDL Clasificación de Dislipidemias Terapéutica específica Riesgo EC Respuesta A tratamiento Electroforesis de Lipoproteinas
  • 30. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS  ELECTROFORESIS DE MICROZONAELECTROFORESIS DE MICROZONA
  • 31. Clasificacion de las DislipidemiasClasificacion de las Dislipidemias (OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963)(OMS 1970 modificada de Fredickson y Levi de 1963) - Tipo I: Quilomicrones. - Tipo IIa: Betalipoproteínas (LDL) - Tipo IIb: LDL + VLDL (Beta y p-Beta) - Tipo III: IDL (Beta ancha) - Tipo IV: VLDL (pre-Betalipoproteínas) - Tipo V: VLDL + Quilomicrones  Método semi-semi- cuantitativocuantitativo  Debe interpretarse junto con los valores de colesterolcolesterol y triglicéridos.triglicéridos. Banda en el punto de aplicación corresponde a la presencia de quilomicrones, Banda ancha que abarca beta y prebeta sugiere un acúmulo anormal de IDL y/o de remanentes de quilomicrones. Banda Pre-Pre-αα (LipoalbúminaLipoalbúmina) aparece cuando hay ácidos grasos libres y lecitina unida a albúmina (no patológica).
  • 32. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS  ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa)ELECTROFORESIS DE MICROZONA (acetato de celulosa) Punto de aplicación Lipoproteínas Beta (LDL) Lipoproteínas Pre-Beta (VLDL) Lipoproteínas Alfa (HDL) Sitio de aparición de los quilomicrónes Método electroforético que permite separar e identificar y medir las distintas fracciones lipoproteicas, mediante su tinción con Sudán Negro y su integración densitométrica en un lipidograma.
  • 33. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS HDL VLDL LDL quilomicrones Integración densitométrica de la electroforésis
  • 34. MUESTRA A USAR…?MUESTRA A USAR…?  El SUEROSUERO contiene Lipoprotein LipasaLipoprotein Lipasa, que es activa y estará degradando lipoproteínas en la muestra.  La Lipoprotein Lipasa es activada por laactivada por la HEPARINAHEPARINA, por lo que no es una muestra útil para una electroforesis de lipoproteinas.  ElEl EDTAEDTA inhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por loinhibe la actividad de la enzima Lipoprotein Lipasa, por lo que es la muestra ideal a utilizar, ya seaque es la muestra ideal a utilizar, ya sea EDTA -Na, -K, o -LiEDTA -Na, -K, o -Li..  NO HAY CAMBIOS SIGNIFICATIVOS SI SE EMPLEA UNA MUESTRA DE SUERO Y SE EFECTUA LA ELECTROFORESIS ANTES DE 48 HORAS EN SUERO REFRIGERADO.  Si no se procesará antes de 48 horas de obtenida la muestra, será mas conveniente una muestra de plasma y refrigerar para procesar.
  • 35. Datos del paciente ELECTROFORESIS DE PROTEINASELECTROFORESIS DE PROTEINAS  REPORTEREPORTE Corrimiento electroforético Datos de interpretación clínica Integración de electroforesis PROPORCIONAR AL MEDICO, TODA LA INFORMACION POSIBLE PARA EL CORRECTO APROBECHAMIENTO DEL ESTUDIO
  • 36. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  PATRON NORMALPATRON NORMAL
  • 37. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  FENOTIPO IIa: Hiper-BetalipoproteinemiaFENOTIPO IIa: Hiper-Betalipoproteinemia
  • 38. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  FENOTIPO IIb: Hiperlipidemia MixtaFENOTIPO IIb: Hiperlipidemia Mixta
  • 39. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  FENOTIPO III: Beta AnchaFENOTIPO III: Beta Ancha
  • 40. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
  • 41. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS  FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)FENOTIPO IV: Hiper-Betalipo (trigliceridemia)
  • 42. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
  • 43. FENOTIPO DE DISLIPIDEMIASFENOTIPO DE DISLIPIDEMIAS FENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicronesFENOTIPO V: Hipertrigliceridemia con quilomicrones
  • 44. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS Principales problemas y alternativas:Principales problemas y alternativas: Muy baja cantidad de lípidos (ppalm tg) Prescribir a pacientes dislipidémicos Uso de sueros envejecidos (> 2 días) Procesar al menos 3 veces por semana Usar plasma si se procesara después de 48 hs Uso de sueros/plasmas congelados No congelar. Ideal refrigerar a 4°C Uso de Buffer equivocado o deteriorado Recambio de buffer y uso de secantes Déficit Congénito de HDL ..? Usar un suero normal como Control Interno
  • 45. ELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINASELECTROFORESIS DE LIPOPROTEINAS  Principales problemasPrincipales problemas Principales problemas de corrimientos: 1. Deficiente preparación de acetatos por no recambio de filtros  Habrá aparición de artificios en el corrimiento 2. Envejecimiento de reactivos  Teñido deficiente 3. Uso de amortiguador impropio  Corrimiento anormal 4. Muestras envejecidas  Desaparición o atenuamiento de bandas 5. No coincide lo que veo en el corrimiento con lo que integra el integrador densitométrico  Limpieza y mantenimiento de los sensores o fotoceldas de cada canal de integración. Sugerencias: - En lo posible, meter suero “normal” para comparar patrones anormales. - Recambio de papel filtro de puentes y desecantes. - Procesamiento 3 veces por semana - Programación de mantenimiento preventivo  al menos una vez al año
  • 46. Corrimientos de lipoproteinas con muestras frescas (izquierda) y misma muestra con 5 dias de almacenamiento (imagen derecha).