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TÉCNICA DE LA HISTOQUÍMICA Y
CITOQUÍMICA
 Los procedimientos histoquímicos y citoquímicos se fundamentan
en la unión de un colorante, en el uso de los anticuerpos
marcados con un colorantes fluorescentes contra un elemento
celular.
 Son técnicas que localizan e identifican sustancias en las células
y la matriz celular.
 Son preparados histológicos que pueden teñirse para identificar
estructuras especiales.
 Se aplica a las reacciones químicas y bioquímicas con el fin de
localizar y de terminar de manera científica ciertas sustancias.
 La composición química de un tejido listo para una tinción de rutina difiere de la composición del tejido
vivo.
- Estas moléculas reaccionan con otras moléculas grandes para formar complejos macromoleculares.
o Nucleoproteínas. Formadas por ácidos nucleicos unidos a proteínas
o Proteínas intracelulares del cito esqueleto. Complejo con proteínas asociadas.
o Proteínas extracelulares. Grandes agregados insolubles, unidos a moléculas similares mediante
enlaces cruzados de moléculas vecinas.
o Complejos de fosfolípidos y proteínas. Estas moléculas constituyen la estructura de las células y
los tejidos son elementos celulares del tejido.
o Glucogeno. Son hidrato de carbono intracelular abundante en el hígado y las células musculares.
o Proteoglucanos y glucosaminoglucanos. Son hidratos de carbono complejos extracelulares que se
encuentran en el tejido conjuntivo.
COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS
MUESTRAS HISTOLÓGICAS
FUNDAMENTOS QUIMICOS
DE LA TINCIÓN
Colorantes ácidos y básicos
La hematoxilina y la eosina son los colores del uso mas frecuente en
la histología
 los colorantes básicos reaccionan con los componentes
aniónicos de las células y de los tejidos (que tienen una carga
neta negativa)
 Los colorantes ácidos reaccionan con los grupos catiónicos de
las células y los tejidos en particular con los grupos
aminoionizados de las proteínas.
METACROMASIA
 Ciertos colorantes básicos reaccionan con los
componentes del tejido que cambian su color
normal de azul a rojo o purpura este cambio se
llama metacromsia.
GRUPOS ALDEHÍDO Y
REACTIVO DE SCHIFF
 La reacción de acido peryódico-reactivo de Schiff tiñe hidratos de carbono y
macromoléculas.
 La reacción de feulgen se basa en una hidrólisis débil con ácido clorhídrico para teñir el
ADN.
 La reacción de PAS tiene como fundamento
 Los anillos hexosa de hidratos de carbono contienen carbonos, contiguos grupos hidroxilo
(-OH)
 Las hexosaminas de glucosamino glucanos contienen carbonos continuos grupo -OH
 El ácido peryódico escinde la unión entre estos átomos de carbono contiguos.
 Estos grupos aldehído reaccionan con el reactivo de Schiff para dar un color purpura
distinto.
DIGESTION ENZIMÁTICA
 La digestión enzimática para un componente especifico (como
glucógeno ADN o ARN) se puede utilizar para confirmar la identidad
del material que se tiñe.
- El material intracelular que se tiñe con la reacción de PAS se
puede identificar como glucógeno.
- La falta de tinción después de este tratamiento identifica
positivamente el material teñido como glucógeno.

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  • 1. TÉCNICA DE LA HISTOQUÍMICA Y CITOQUÍMICA  Los procedimientos histoquímicos y citoquímicos se fundamentan en la unión de un colorante, en el uso de los anticuerpos marcados con un colorantes fluorescentes contra un elemento celular.  Son técnicas que localizan e identifican sustancias en las células y la matriz celular.  Son preparados histológicos que pueden teñirse para identificar estructuras especiales.  Se aplica a las reacciones químicas y bioquímicas con el fin de localizar y de terminar de manera científica ciertas sustancias.
  • 2.  La composición química de un tejido listo para una tinción de rutina difiere de la composición del tejido vivo. - Estas moléculas reaccionan con otras moléculas grandes para formar complejos macromoleculares. o Nucleoproteínas. Formadas por ácidos nucleicos unidos a proteínas o Proteínas intracelulares del cito esqueleto. Complejo con proteínas asociadas. o Proteínas extracelulares. Grandes agregados insolubles, unidos a moléculas similares mediante enlaces cruzados de moléculas vecinas. o Complejos de fosfolípidos y proteínas. Estas moléculas constituyen la estructura de las células y los tejidos son elementos celulares del tejido. o Glucogeno. Son hidrato de carbono intracelular abundante en el hígado y las células musculares. o Proteoglucanos y glucosaminoglucanos. Son hidratos de carbono complejos extracelulares que se encuentran en el tejido conjuntivo. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS MUESTRAS HISTOLÓGICAS
  • 3. FUNDAMENTOS QUIMICOS DE LA TINCIÓN Colorantes ácidos y básicos La hematoxilina y la eosina son los colores del uso mas frecuente en la histología  los colorantes básicos reaccionan con los componentes aniónicos de las células y de los tejidos (que tienen una carga neta negativa)  Los colorantes ácidos reaccionan con los grupos catiónicos de las células y los tejidos en particular con los grupos aminoionizados de las proteínas. METACROMASIA  Ciertos colorantes básicos reaccionan con los componentes del tejido que cambian su color normal de azul a rojo o purpura este cambio se llama metacromsia.
  • 4. GRUPOS ALDEHÍDO Y REACTIVO DE SCHIFF  La reacción de acido peryódico-reactivo de Schiff tiñe hidratos de carbono y macromoléculas.  La reacción de feulgen se basa en una hidrólisis débil con ácido clorhídrico para teñir el ADN.  La reacción de PAS tiene como fundamento  Los anillos hexosa de hidratos de carbono contienen carbonos, contiguos grupos hidroxilo (-OH)  Las hexosaminas de glucosamino glucanos contienen carbonos continuos grupo -OH  El ácido peryódico escinde la unión entre estos átomos de carbono contiguos.  Estos grupos aldehído reaccionan con el reactivo de Schiff para dar un color purpura distinto.
  • 5. DIGESTION ENZIMÁTICA  La digestión enzimática para un componente especifico (como glucógeno ADN o ARN) se puede utilizar para confirmar la identidad del material que se tiñe. - El material intracelular que se tiñe con la reacción de PAS se puede identificar como glucógeno. - La falta de tinción después de este tratamiento identifica positivamente el material teñido como glucógeno.