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Diagnóstico de enfermedades infecciosas con SERION ELISA classic
Desarrollo, validación y atención
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Acerca de Kabla
Somos una empresa líder en la distribución de productos para diagnóstico rápido en México.
Proveemos pruebas de excelente calidad manteniendo precios altamente competitivos.
En Kabla, somos representantes autorizados de diversos fabricantes para brindar a nuestro país
productos innovadores y altamente confiables, que conforman un catálogo amplio y atractivo para
nuestros clientes. Nuestra mezcla de productos incluye:
• Dispositivos de Diagnóstico: Pruebas Rápidas, Reactivos de Laboratorio, Inmunoensayo y
Equipos Point of Care.
• Labware: Consumibles e Instrumental de Laboratorio
• Alcoholímetros Digitales
• Herramientas de Concientización
Nuestra propuesta a la Secretaría de Salud
A continuación, presentamos un selecto grupo de aquellos productos que consideramos ofrecen
una significativa ventaja respecto a los productos que hoy en día adquiere por parte de la
institución.
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SERION ELISA classic
SERION ELISA classic es un sistema de pruebas con certificados CE. Por lo tanto, durante el
desarrollo del ensayo, se deben aplicar varios estándares armonizados.
Esto incluye documentación y evaluación de riesgos. Adicionalmente, se deben realizar
estudios de evaluación del rendimiento y estabilidad del producto.
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SERION ELISA classic
El proceso de desarrollo de ensayos y cuidado del producto es extenso y requiere mucho
tiempo. Comprende varios pasos de estudios de desarrollo y verificación.
Cada inmunoensayo usa pasos idénticos de desarrollo y cuidado.
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Selección de apropiada de antígenos
La selección de un distinto antígeno es dependiente de las demandas clínicas de un
inmunoensayo.
Para la detección sensitiva de infecciones agudas, es favorable un número máximo de
epítopes.
Esto se puede lograr mediante el uso de preparaciones de patógenos.
Si existe el riesgo de detectar anticuerpos de reacción cruzada, se deben seleccionar
antígenos específicos. Los antígenos de elección a menudo son preparaciones.
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Selección de apropiada de antígenos
Para la determinación del estado inmunológico, sólo las proteínas utilizadas para la
vacunación son adecuadas. Además, para varios patógenos se describen epítopos para
inducir anticuerpos protectores.
Los diversos grupos de antígenos difieren entre los esfuerzos y la intensidad de los costos
de su proceso de producción.
El cultivo en cultivos celulares es más caro que producir proteínas recombinantes en
bacterias.
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Selección de apropiada de antígenos
Para la identificación de antígenos apropiados, se
seleccionan y analizan varios antígenos en relación con
sus propiedades.
Estos análisis incluyen:
● Detección de sueros positivos.
● Exclusión de sueros negativos.
● Exclusión de sueros de reactividad cruzada.
● Relación P/N.
● Revestimiento homogéneo.
● Características económicas.
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Selección de placas de microtitulación adecuadas
Diferentes antígenos exhiben propiedades
variables que influyen en sus capacidades
de unión a las placas de microtitulación.
Varias placas de microtitulación con
diferentes capacidades de unión están
disponibles comercialmente.
Esta placa difiere entre su especificidad de
unión de antígenos negativos, positivos
o no cargados.
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Concentraciones de revestimiento
El recubrimiento de una cantidad óptima de antígenos a las placas de microtitulación
garantiza resultados reproducibles y fiables.
Las placas de microtitulación tienen una capacidad máxima de unión. La concentración
de antígeno no debe caer por debajo o exceder la capacidad de unión ya que influyó
fuertemente en los resultados del ensayo.
insaturado saturado saturación excedida
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Concentraciones de revestimiento
Con concentraciones de enlace crecientes se mejorará la señal obtenida. Alrededor de
la concentración de saturación de antígeno, se alcanzará una meseta.
Con concentraciones cada vez mayores, la señal caerá (efecto Hook).
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Condiciones de revestimiento
Junto a las concentraciones de antígeno, las condiciones del recubrimiento, como la temperatura y la
duración, influyen en el rendimiento del inmunoensayo.
Las soluciones de bloqueo se unen a áreas no recubiertas de la placa y estabilizan los antígenos
unidos.
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Determinación de la dilución de la muestra
En muestras con altas concentraciones de anticuerpos, las diluciones de suero bajas
pueden conducir a una unión de analito inespecífica que produce resultados falsos
positivos.
Además, las sustancias interferentes pueden influir en las interacciones
antígeno-anticuerpo.
Estas influencias se conocen como efectos de matriz y son causadas principalmente por
iones divalentes (Mg2+ o Ca2+).
Cuanto mayor sea la dilución del suero elegida, menor será la influencia de la
matriz del suero.
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Determinación de la dilución de la muestra
La selección de una dilución de suero muy alta perjudica la detección sensible de
infecciones agudas.
Además, las altas diluciones de la muestra pueden reducir la relación P / N y, por lo tanto,
reducir la precisión de la evaluación de la muestra.
Como las curvas de calibración se
aplanarán, se reducirá el rango de
cuantificación del anticuerpo y los
valores de U / ml serán menos
confiables.
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Determinación de la dilución de la muestra
La mayoría de los fabricantes de ELISA establecen diluciones de suero en 1 + 100. Esta
dilución generalmente garantiza un equilibrio óptimo entre la reducción de sustancias
interferentes y la intensidad de la señal.
Para la detección de anticuerpos específicos para parámetros de alta seroprevalencia, la
selección de diluciones más altas es adecuada para la compensación de la
seroprevalencia.
Mayores diluciones acompañan a mayores límites de detección.
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Cuantificación de anticuerpos
Con la cuantificación de anticuerpos se puede recibir más información sobre una
enfermedad.
La determinación de las actividades de anticuerpos permite la estadificación de la
enfermedad, el monitoreo de los cambios en el título y el control de la terapia.
Además, es posible la determinación del estado inmunológico, el control de la vacunación o
el dibujo de la recomendación de vacunación.
Para el diagnóstico de CSF, una cuantificación confiable de anticuerpos es una demanda
básica.
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Cuantificación de anticuerpos
La mayoría de los fabricantes de ELISA establecen diluciones de suero en 1 + 100. Esta
dilución generalmente garantiza un equilibrio óptimo entre la reducción de sustancias
interferentes y la intensidad de la señal.
Para la detección de anticuerpos específicos para parámetros de alta seroprevalencia, la
selección de diluciones más altas es adecuada para la compensación de la seroprevalencia.
Mayores diluciones acompañan a mayores límites de detección.
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Cuantificación de anticuerpos
Para la cuantificación de los resultados obtenidos con SERION ELISA classic, se prepara una
"Curva maestra almacenada" durante el proceso de control de calidad de cada lote. Esta
curva de cuantificación es válida durante el ciclo de vida del producto.
Para generar una curva de cuantificación se necesitan muestras de suero con alta actividad
de anticuerpos.
Para algunos patógenos están disponibles preparaciones internacionales estándar con
actividades de anticuerpos definidas.
Si no hay material de calibración estandarizado disponible, se utilizará un suero estándar
propio de la empresa. Estas muestras nos serán asignadas a una actividad de anticuerpos
definida (=Unidades arbitrarias).
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Cuantificación de anticuerpos
Un suero de calibración se diluye linealmente en 10 a 15 pasos. La transferencia de la DO
en correlación con los resultados de dilución en una curva sigmoidal. Cada paso puede
asignarse a los valores U / ml predefinidos.
Esta curva de calibración se determina en varias ejecuciones en condiciones óptimas.
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Cuantificación de anticuerpos
Para determinar una función matemática para el cálculo de la actividad, se realiza un
ajuste de curva basado en el método 4PL. Un programa varía los parámetros A, B, C y D
para encontrar el ajuste óptimo a los datos determinados experimentalmente.
A= asíntota inferior
B= pendiente
C= punto de inflexión
D= asíntota superior
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Calibración
Para compensar las desviaciones de ejecución a ejecución, se debe realizar una corrección.
Mediante esta corrección, los valores de medición alcanzados se refieren a la curva de
cuantificación.
El suero estándar sirve como calibrador.
El valor objetivo se determina durante el control de calidad en condiciones óptimas.
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Calibración
El suero estándar debe asignarse a un valor objetivo de OD = 0.7 - 1.0. Esta región OD se
encuentra dentro del rango pseudolineal de la curva estándar.
Para identificar un suero con los criterios deseados, se analiza un gran número de sueros.
Los sueros estándar están compuestos de una sola muestra de suero.
Las muestras de suero agrupadas o enriquecidas a menudo no producen resultados
reproducibles.
El suero estándar debe estar disponible en cantidades suficientes.
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Control Negativo
Al igual que el suero estándar, también los controles negativos están compuestos de una
sola muestra de suero.
La muestra debe ser evaluada como negativa homogéneamente.
Para identificar un suero con los criterios deseados, se analiza un gran número de sueros.
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Determinación de rangos de límites
Los rangos límite sirve para la evaluación del suero en “positivo”, “negativo” o “límite”.
Cuanto más susceptible sea un sistema de prueba, más resultados falsos positivos se
producirán (especificidad reducida).
Aumentar el rango límite para mejorar la especificidad reducirá la sensibilidad.
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Determinación de rangos de límites
La forma más sencilla de determinar los rangos límites es usar sólo muestras de suero
negativas.
El límite se determina calculando un valor medio y agregando la desviación estándar de
2 o 3 veces.
Esto resulta en un corte analítico.
Es el corte más sensible que se puede
lograr.
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Determinación de rangos de límites
La evaluación de muestras con SERION ELISA classic se basa con mayor frecuencia en un
corte clínico.
Este rango límite está determinado por un panel de donantes de sangre sanos y
pacientes con infecciones agudas.
Este tipo de corte permite la detección de anticuerpos con relevancia clínica
únicamente.
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Determinación de rangos de límites
Para algunos sistemas de detección de anticuerpos contra patógenos con altas
seroprevalencia, los resultados pueden evaluarse con diferentes puntos de cortes.
El rango límite inferior sirve para la detección sensible de infecciones primarias agudas en
niños.
El corte más alto permite la
compensación de la
seroprevalencia.
Puede utilizarse para el análisis de
muestras derivadas de pacientes
mayores de 4 años.
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Soluciones de Conjugado
Las modificaciones menores de los componentes de un solo ensayo pueden influir en el
nivel de prueba.
Los componentes de origen biológico, como los antígenos, pueden variar entre su
composición entre diferentes lotes.
Como consecuencia, diferentes epítopos pueden expresarse en diferentes extensiones.
Esto puede resultar en valores de OD más altos o más bajos cuando se comparan
ensayos basados en diferentes lotes de antígenos.
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Soluciones de Conjugado
Los antígenos con alta actividad pueden inducir limitaciones cerca del rango de
medición superior (ver a)).
Las actividades más bajas dan como resultado una curva de calibración con baja
amplitud. La cuantificación es menos confiable y se limita a un rango de medición más
pequeño (ver b)). La discriminación entre resultados positivos y negativos se ve afectada.
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Soluciones de Conjugado
Para compensar estos diferentes niveles de prueba y para mantener resultados de
medición similares en varios lotes de kits, las intensidades de señal pueden amplificarse o
reducirse.
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Soluciones de Conjugado
Para compensar estas desviaciones, cada lote de SERION ELISA classic se asigna para
conjugar soluciones de diferente potencia.
Estos conjugados difieren entre sus concentraciones del anticuerpo de detección.
Los lotes con menor actividad se utilizan con soluciones de conjugados de mayor
concentración y al revés.
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Soluciones de Conjugado
Un cambio en la fuerza de la solución conjugada solo influye en el nivel de los valores de
medición.
Las actividades de anticuerpos (U / ml) o las evaluaciones de muestras de suero no
se ven afectadas.
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Buffer de dilución
Para la mayoría de los sistemas de prueba clásicos SERION ELISA se utiliza un
tampón de dilución idéntico. Esto permite un fácil manejo y procesamiento
automatizado.
El tampón se basa en una solución salina tamponada con un valor de pH
definido y contiene un estabilizador de proteínas.
Para lograr mayores especificidades, para algunos SERION ELISA se usarán
tampones especiales de dilución.
Estos tampones sirven para la absorción
de anticuerpos de reacción cruzada.
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Estudios de Evaluación de Desempeño
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Evaluación del desempeño
La evaluación de rendimiento se realiza para cada SERISA ELISA clásico según DIN ISO
13612.
Durante estos estudios se realizan los siguientes análisis:
● Sensibilidad y especificidad
● Rango de medición
● Precisión
● Linearidad
● Reacción cruzada
● Sustancias interferentes
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Determinación de Sensibilidad y Especificidad
Para la determinación de la sensibilidad y especificidad se analiza un panel de
muestras de suero predefinidas de pacientes y donantes de sangre sanos.
Los parámetros de rendimiento se calculan en comparación con otros
inmunoensayos. Para una determinación confiable, se deben usar varios
ensayos comparativos.
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Determinación de Sensibilidad y Especificidad
La sensibilidad se determina con muestras de suero que se evalúan como
positivas con el ensayo comparativo.
La especificidad está determinada por muestras de suero negativas.
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Determinación de los rangos de medición
Cerca de las asíntotas superiores o inferiores de la curva de cuantificación, las
desviaciones leves de los valores de medición conducirán a desviaciones extensas en
la actividad determinada del anticuerpo.
Los valores de U / ml obtenidos no son reproducibles.
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Determinación de los rangos de medición
Debido a la precisión insuficiente los rangos de medición son limitados.
El coeficiente de variación (CV) se utiliza para determinar la precisión de la cuantificación
de anticuerpos. El CV se calcula por el cociente de desviación estándar y el valor medio de
los análisis repetidos.
El rango de medición está limitado a
regiones con un CV <20%.
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Precisión de intraensayo
La precisión de SERION ELISA classic es determinada dentro de una placa de
microtitulación.
Para este propósito, se analizan sueros de diferentes actividades de anticuerpos en
diferentes posiciones de una placa de microtitulación.
La precisión está determinada por el CV
entre cada muestra.
Es un indicador de la homogeneidad
del recubrimiento antigénico.
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Precisión de intraensayo
Para determinar la precisión entre varias placas de microtitulación, se analizan sueros
de diferentes actividades de anticuerpos en 10 placas.
La precisión está determinada por el CV entre cada muestra.
Es un indicador de la homogeneidad del recubrimiento antigénico.
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  • 7. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Selección de apropiada de antígenos Para la determinación del estado inmunológico, sólo las proteínas utilizadas para la vacunación son adecuadas. Además, para varios patógenos se describen epítopos para inducir anticuerpos protectores. Los diversos grupos de antígenos difieren entre los esfuerzos y la intensidad de los costos de su proceso de producción. El cultivo en cultivos celulares es más caro que producir proteínas recombinantes en bacterias.
  • 8. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Selección de apropiada de antígenos Para la identificación de antígenos apropiados, se seleccionan y analizan varios antígenos en relación con sus propiedades. Estos análisis incluyen: ● Detección de sueros positivos. ● Exclusión de sueros negativos. ● Exclusión de sueros de reactividad cruzada. ● Relación P/N. ● Revestimiento homogéneo. ● Características económicas.
  • 9. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Selección de placas de microtitulación adecuadas Diferentes antígenos exhiben propiedades variables que influyen en sus capacidades de unión a las placas de microtitulación. Varias placas de microtitulación con diferentes capacidades de unión están disponibles comercialmente. Esta placa difiere entre su especificidad de unión de antígenos negativos, positivos o no cargados.
  • 10. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Concentraciones de revestimiento El recubrimiento de una cantidad óptima de antígenos a las placas de microtitulación garantiza resultados reproducibles y fiables. Las placas de microtitulación tienen una capacidad máxima de unión. La concentración de antígeno no debe caer por debajo o exceder la capacidad de unión ya que influyó fuertemente en los resultados del ensayo. insaturado saturado saturación excedida
  • 11. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Concentraciones de revestimiento Con concentraciones de enlace crecientes se mejorará la señal obtenida. Alrededor de la concentración de saturación de antígeno, se alcanzará una meseta. Con concentraciones cada vez mayores, la señal caerá (efecto Hook).
  • 12. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Condiciones de revestimiento Junto a las concentraciones de antígeno, las condiciones del recubrimiento, como la temperatura y la duración, influyen en el rendimiento del inmunoensayo. Las soluciones de bloqueo se unen a áreas no recubiertas de la placa y estabilizan los antígenos unidos.
  • 13. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de la dilución de la muestra En muestras con altas concentraciones de anticuerpos, las diluciones de suero bajas pueden conducir a una unión de analito inespecífica que produce resultados falsos positivos. Además, las sustancias interferentes pueden influir en las interacciones antígeno-anticuerpo. Estas influencias se conocen como efectos de matriz y son causadas principalmente por iones divalentes (Mg2+ o Ca2+). Cuanto mayor sea la dilución del suero elegida, menor será la influencia de la matriz del suero.
  • 14. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de la dilución de la muestra La selección de una dilución de suero muy alta perjudica la detección sensible de infecciones agudas. Además, las altas diluciones de la muestra pueden reducir la relación P / N y, por lo tanto, reducir la precisión de la evaluación de la muestra. Como las curvas de calibración se aplanarán, se reducirá el rango de cuantificación del anticuerpo y los valores de U / ml serán menos confiables.
  • 15. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de la dilución de la muestra La mayoría de los fabricantes de ELISA establecen diluciones de suero en 1 + 100. Esta dilución generalmente garantiza un equilibrio óptimo entre la reducción de sustancias interferentes y la intensidad de la señal. Para la detección de anticuerpos específicos para parámetros de alta seroprevalencia, la selección de diluciones más altas es adecuada para la compensación de la seroprevalencia. Mayores diluciones acompañan a mayores límites de detección.
  • 16. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Cuantificación de anticuerpos Con la cuantificación de anticuerpos se puede recibir más información sobre una enfermedad. La determinación de las actividades de anticuerpos permite la estadificación de la enfermedad, el monitoreo de los cambios en el título y el control de la terapia. Además, es posible la determinación del estado inmunológico, el control de la vacunación o el dibujo de la recomendación de vacunación. Para el diagnóstico de CSF, una cuantificación confiable de anticuerpos es una demanda básica.
  • 17. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Cuantificación de anticuerpos La mayoría de los fabricantes de ELISA establecen diluciones de suero en 1 + 100. Esta dilución generalmente garantiza un equilibrio óptimo entre la reducción de sustancias interferentes y la intensidad de la señal. Para la detección de anticuerpos específicos para parámetros de alta seroprevalencia, la selección de diluciones más altas es adecuada para la compensación de la seroprevalencia. Mayores diluciones acompañan a mayores límites de detección.
  • 18. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Cuantificación de anticuerpos Para la cuantificación de los resultados obtenidos con SERION ELISA classic, se prepara una "Curva maestra almacenada" durante el proceso de control de calidad de cada lote. Esta curva de cuantificación es válida durante el ciclo de vida del producto. Para generar una curva de cuantificación se necesitan muestras de suero con alta actividad de anticuerpos. Para algunos patógenos están disponibles preparaciones internacionales estándar con actividades de anticuerpos definidas. Si no hay material de calibración estandarizado disponible, se utilizará un suero estándar propio de la empresa. Estas muestras nos serán asignadas a una actividad de anticuerpos definida (=Unidades arbitrarias).
  • 19. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Cuantificación de anticuerpos Un suero de calibración se diluye linealmente en 10 a 15 pasos. La transferencia de la DO en correlación con los resultados de dilución en una curva sigmoidal. Cada paso puede asignarse a los valores U / ml predefinidos. Esta curva de calibración se determina en varias ejecuciones en condiciones óptimas.
  • 20. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Cuantificación de anticuerpos Para determinar una función matemática para el cálculo de la actividad, se realiza un ajuste de curva basado en el método 4PL. Un programa varía los parámetros A, B, C y D para encontrar el ajuste óptimo a los datos determinados experimentalmente. A= asíntota inferior B= pendiente C= punto de inflexión D= asíntota superior
  • 21. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Calibración Para compensar las desviaciones de ejecución a ejecución, se debe realizar una corrección. Mediante esta corrección, los valores de medición alcanzados se refieren a la curva de cuantificación. El suero estándar sirve como calibrador. El valor objetivo se determina durante el control de calidad en condiciones óptimas.
  • 22. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Calibración El suero estándar debe asignarse a un valor objetivo de OD = 0.7 - 1.0. Esta región OD se encuentra dentro del rango pseudolineal de la curva estándar. Para identificar un suero con los criterios deseados, se analiza un gran número de sueros. Los sueros estándar están compuestos de una sola muestra de suero. Las muestras de suero agrupadas o enriquecidas a menudo no producen resultados reproducibles. El suero estándar debe estar disponible en cantidades suficientes.
  • 23. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Control Negativo Al igual que el suero estándar, también los controles negativos están compuestos de una sola muestra de suero. La muestra debe ser evaluada como negativa homogéneamente. Para identificar un suero con los criterios deseados, se analiza un gran número de sueros.
  • 24. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de rangos de límites Los rangos límite sirve para la evaluación del suero en “positivo”, “negativo” o “límite”. Cuanto más susceptible sea un sistema de prueba, más resultados falsos positivos se producirán (especificidad reducida). Aumentar el rango límite para mejorar la especificidad reducirá la sensibilidad.
  • 25. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de rangos de límites La forma más sencilla de determinar los rangos límites es usar sólo muestras de suero negativas. El límite se determina calculando un valor medio y agregando la desviación estándar de 2 o 3 veces. Esto resulta en un corte analítico. Es el corte más sensible que se puede lograr.
  • 26. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de rangos de límites La evaluación de muestras con SERION ELISA classic se basa con mayor frecuencia en un corte clínico. Este rango límite está determinado por un panel de donantes de sangre sanos y pacientes con infecciones agudas. Este tipo de corte permite la detección de anticuerpos con relevancia clínica únicamente.
  • 27. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de rangos de límites Para algunos sistemas de detección de anticuerpos contra patógenos con altas seroprevalencia, los resultados pueden evaluarse con diferentes puntos de cortes. El rango límite inferior sirve para la detección sensible de infecciones primarias agudas en niños. El corte más alto permite la compensación de la seroprevalencia. Puede utilizarse para el análisis de muestras derivadas de pacientes mayores de 4 años.
  • 28. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Soluciones de Conjugado Las modificaciones menores de los componentes de un solo ensayo pueden influir en el nivel de prueba. Los componentes de origen biológico, como los antígenos, pueden variar entre su composición entre diferentes lotes. Como consecuencia, diferentes epítopos pueden expresarse en diferentes extensiones. Esto puede resultar en valores de OD más altos o más bajos cuando se comparan ensayos basados en diferentes lotes de antígenos.
  • 29. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Soluciones de Conjugado Los antígenos con alta actividad pueden inducir limitaciones cerca del rango de medición superior (ver a)). Las actividades más bajas dan como resultado una curva de calibración con baja amplitud. La cuantificación es menos confiable y se limita a un rango de medición más pequeño (ver b)). La discriminación entre resultados positivos y negativos se ve afectada.
  • 30. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Soluciones de Conjugado Para compensar estos diferentes niveles de prueba y para mantener resultados de medición similares en varios lotes de kits, las intensidades de señal pueden amplificarse o reducirse.
  • 31. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Soluciones de Conjugado Para compensar estas desviaciones, cada lote de SERION ELISA classic se asigna para conjugar soluciones de diferente potencia. Estos conjugados difieren entre sus concentraciones del anticuerpo de detección. Los lotes con menor actividad se utilizan con soluciones de conjugados de mayor concentración y al revés.
  • 32. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Soluciones de Conjugado Un cambio en la fuerza de la solución conjugada solo influye en el nivel de los valores de medición. Las actividades de anticuerpos (U / ml) o las evaluaciones de muestras de suero no se ven afectadas.
  • 33. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Buffer de dilución Para la mayoría de los sistemas de prueba clásicos SERION ELISA se utiliza un tampón de dilución idéntico. Esto permite un fácil manejo y procesamiento automatizado. El tampón se basa en una solución salina tamponada con un valor de pH definido y contiene un estabilizador de proteínas. Para lograr mayores especificidades, para algunos SERION ELISA se usarán tampones especiales de dilución. Estos tampones sirven para la absorción de anticuerpos de reacción cruzada.
  • 34. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Estudios de Evaluación de Desempeño SERION ELISA classic
  • 35. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Evaluación del desempeño La evaluación de rendimiento se realiza para cada SERISA ELISA clásico según DIN ISO 13612. Durante estos estudios se realizan los siguientes análisis: ● Sensibilidad y especificidad ● Rango de medición ● Precisión ● Linearidad ● Reacción cruzada ● Sustancias interferentes
  • 36. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de Sensibilidad y Especificidad Para la determinación de la sensibilidad y especificidad se analiza un panel de muestras de suero predefinidas de pacientes y donantes de sangre sanos. Los parámetros de rendimiento se calculan en comparación con otros inmunoensayos. Para una determinación confiable, se deben usar varios ensayos comparativos.
  • 37. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de Sensibilidad y Especificidad La sensibilidad se determina con muestras de suero que se evalúan como positivas con el ensayo comparativo. La especificidad está determinada por muestras de suero negativas.
  • 38. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de los rangos de medición Cerca de las asíntotas superiores o inferiores de la curva de cuantificación, las desviaciones leves de los valores de medición conducirán a desviaciones extensas en la actividad determinada del anticuerpo. Los valores de U / ml obtenidos no son reproducibles.
  • 39. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Determinación de los rangos de medición Debido a la precisión insuficiente los rangos de medición son limitados. El coeficiente de variación (CV) se utiliza para determinar la precisión de la cuantificación de anticuerpos. El CV se calcula por el cociente de desviación estándar y el valor medio de los análisis repetidos. El rango de medición está limitado a regiones con un CV <20%.
  • 40. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Precisión de intraensayo La precisión de SERION ELISA classic es determinada dentro de una placa de microtitulación. Para este propósito, se analizan sueros de diferentes actividades de anticuerpos en diferentes posiciones de una placa de microtitulación. La precisión está determinada por el CV entre cada muestra. Es un indicador de la homogeneidad del recubrimiento antigénico.
  • 41. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense Precisión de intraensayo Para determinar la precisión entre varias placas de microtitulación, se analizan sueros de diferentes actividades de anticuerpos en 10 placas. La precisión está determinada por el CV entre cada muestra. Es un indicador de la homogeneidad del recubrimiento antigénico.
  • 43. (81) 4444 1001 | 01 800 112 0122 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Alcoholimetría | Point Of Care | Labware (81) 4444 1001 | info@kabla.mx | www.kabla.mx Si desea más información sobre cómo adquirir éste producto, por favor contáctenos. Teléfono. (81) 4444 1001 info@kabla.mx www.kabla.mx Oficina en Monterrey N.L. Loma Blanca 2900 Col. Deportivo Obispado Monterrey N.L. C.P. 64040 Oficina en CDMX Av. Patriotismo #201Piso 4, Suite 451, Col. San Pedrode los Pinos, Delegación Benito Juárez, Ciudad de México – Cp. 03800 /kabladiagnosticos Contacto Dispositivos de Diagnóstico | Alcoholimetría | Labware | Forense @kablamx /kabla /+kabla Redes Sociales Oficina en Guadalajara. Bruselas 626, Col. Moderna Guadalajara, Jalisco, 44190 @kabladiagnosticos