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SUMMARY
목적
바이오센서란 분석 물질을 생체 수용체(Bio-Receptor)와 반응시켜 신호 변환기(Signal Transducer)로
측정하여 분석 물질의 존재 유무(정성)나 양(정량)을 측정하는 장치나 소자임
바이오센서는 극미량의 분석 물질을 고감도로 정확하게 검출하거나, 대용량의 시료를 자동으로 연속
검출하고, 시료 전처리와 결과 해석을 단순화하는 등 현장검사 또는 신속 진단 검사 추세로, 수요에 따라
제품이 다양화되고 있음
주요현황
최근 생체 고분자 직접 검출 등의 새로운 원리, 감염질환에서 만성질환까지 적용 질환 확대, 생물정보DB를
활용한 광대역 진단, 체액이나 생체 유래 가스 등 다양한 검체 형태 적용, 초민감 마커 진단을 통한 조기 치료
구현 등이 새로운 트렌드로서, 다양한 체외 진단용 바이오센서가 활발하게 개발되고 있음
대표적인 예로 MALDI 미생물 동정 바이오센서, RFMP 유전자형 바이오센서, FABP 급성 심근경색
바이오센서, 캔틸레버(Cantilever) 바이오센서, 요소 호기 검출 바이오센서가 있음
시사점 및 정책 제안
21세기 바이오센서 기술 분야에서는 질환의 조기 진단, 예방, 예후 예측, 진단-치료의 융합 등 개인별
맞춤의료가 핵심 키워드이며, 바이오센서의 체외진단 분야는 맞춤의료시대에 필수불가결한 도구로써
중요성이 더욱 커질 것으로 예상됨
정부는 차세대 성장 산업인 헬스 케어 산업을 주도할 바이오센서 개발에 대한 지속적인 투자를 통해 관련
산업의 국가 경쟁력을 확보하고, 산학연 기술역량을 보유한 기관 간의 협업을 적극 중개하며, 사업모델의
조기 정착을 위한 법적ㆍ제도적 지원을 가속화하기를 제언함
l저자l 최수진 PD / KEIT 바이오PD실
홍선표 연구소장 / (주)진매트릭스
바이오센서 신기술 소개
014 한국산업기술평가관리원
PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3
KEIT PD Issue Report
1. 바이오센서 개요
정의
바이오센서란, 분석하고자 하는 대상 물질(Analyte)을 선택 특이성이 있는 생체 수용체(Bio-Receptor)와 반응시키고,
그 반응 정도를 신호 변환기(Signal Transducer)로 측정하여, 대상 물질(analyte)의 존재나 양을 확인할 수 있는 장치나
소자를 통칭함
최근에는 분석하고자 하는 대상 물질이 글루코오스(포도당) 또는 세포일 경우 글루코오스 센서 또는 세포 센서, 항원/
항체를 생체 수용체로 하는 경우는 면역 바이오센서, 상보적인 DNA를 생체 수용체로 이용한 경우는 DNA칩 등으로
다양하게 명명됨
최초의 바이오센서는 1962년 Clark이 당산화 효소와 산소 측정 전극을 활용해 개발한 글루코오스 센서라 할 수
있고, 1994년 미국의 Affymetrix사가 photolithography 기술로 최초로 상용화한 지놈(genome) 분석용 DNA칩이
바이오센터 관련 기술 혁신의 큰 획(breakthrough)을 그었다고 평가됨
기술 개발 동향
통상 대상 물질과 생체 수용체의 상호 반응을 신호화하거나 증폭하기 위하여, 대상물질 자체나 생체 수용체에 발광,
형광, 발색 잔기를 표지(Labelling)시켜 분석하거나, 인식 반응을 SPR(Surface Plasmon Resonance), FET(Field
Effect Transistor), 질량 분석(Mass Spectrometry) 등 비표지 방식으로 측정하는 바이오센서가 주로 개발됨
분석 물질에 선택성과 특이성이 있는 분자들이 지속적으로 개발됨에 따라 생체 내 아미노산이나 대사체와 같은 소분자
외에도 호르몬이나 단백질, 혹은 특정 DNA, RNA와 같은 고분자를 고감도로 정확하게 검출할 수 있으며, 세포 레벨로
기술이 확장되어 특정 암세포나 줄기세포까지 감지 할 수 있게 됨에 따라, 바이오센서는 질병 진단과 치료에 획기적인
기여를 할 수 있음
대상 물질의 검출한계(Lower Limit Of Detection; LOD)를 낮추고, 정량적으로 측정 가능한 구간(Dynamic Range)을
넓히고자 하는 기술 개발 추세는 국내외 시장 및 바이오센서 기술 연구 분야에서 공통적으로 관찰되며, 한꺼번에
다양한 표적 분자를 측정하기 위한 고집적화, 반응 시간을 획기적으로 줄여 대용량의 시료를 자동으로 연속 검출할
수 있는 워크스테이션화, 시료 전처리와 결과 해석을 신속ㆍ단순화하여 현장검사(Point-Of-Care Test; POCT) 또는
신속진단검사(Rapid Diagnostics Test; RDT)로 개발되는 등 수요에 따라 다양한 제품 형태가 출현하고 있음
시장 현황
바이오센서의 주요 응용 분야인 체외진단의 2009년 글로벌 시장 매출규모는 38.762억 달러이며, 2014년까지 연평균이
5.4%(CAGR)로 성장하여 503.79억 달러에 달할 것으로 전망됨(출처 : Strategic Analysis of the Global In-Vitro
Diagnostics Market (Frost & Sullivan, 2010))
체외진단 시장은 적용 분야에 따라 8개의 섹터로 나뉘는데, 면역화학(Immunochemistry), 임상미생물, POCT,
015Korea Evaluation Institute of Industrial Technology
ISSUE 1  바이오센서 신기술 소개
분자진단(Molecular Diagnostics), 지혈(Hemostasis), 자가 혈당 측정, 조직진단, 혈액진단으로 구분됨
‌ 이 중 면역화학 진단시장이 전체 체외진단시장의 35.8%로 가장 큰 비중을 차지하며, 자가 혈당 측정 시장과 POCT
시장이 각각 20.5%와 11.8%의 비중으로 시장을 형성하고 있으며, 유전자 마커를 진단하는 분자진단은 연평균
13.7%의 높은 성장률을 보임
2. 바이오센서 개발 현황
MALDI 미생물 동정 바이오센서
질량분석 기술은 분석 대상물질에 반응하는 생체 수용체와 별도의 표식(labelling)이 필요 없이, 분석 대상 분자의
질량을 직접 측정함으로써 대상 분자를 동정하는 대표적인 비표지 바이오센서 기술임
특히, MALDI(Matrix-Assisted Laser-Desorption Ionization) 질량분석 기술은 DNA나 단백질 같이 이온화가 어려운
생체 고분자를 이온화를 촉진하는 매트릭스에 결정화하여 고체상으로 시료를 분석하기 때문에 대량의 검체를 신속하게
일괄 분석하는 데 유리함
MALDI 미생물 동정 바이오센서 기술은 질량 분석을 통해 얻어지는 단백질들의 질량 프로파일이 미생물의 종류별로
상이한 점을 이용하여, 미생물 단백질 질량 패턴 데이터베이스를 확립하고, 이와 비교 분석을 통해 미지의 미생물을
고속으로 대량 동정하는 시스템으로서 미생물 질량 프로파일 데이터베이스, 결과 분석 소프트웨어, 질량 분석 센서가
통합된 형태임
| 그림 1-1 MALDI 미생물 동정 바이오센서 기술 개요도 |
016 한국산업기술평가관리원
PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3
KEIT PD Issue Report
기존의 생화학 미생물 동정 바이오센서는 6~24시간 이상 분석시간이 소요되는 데 비해 MALDI 바이오센서는 분석
시간이 5~10분내로 신속한 동정 결과를 얻을 수 있음. 특히, 패혈증과 같이 촌각을 다투는 중증 감염 환자의 경우
감염균의 신속ㆍ정확한 동정이 항생제 치료 예후에 막대한 영향을 미치게 되며, 불필요한 항생제 오남용에서 기인하는
부작용 및 약제내성, 병원 감염, 보건 경제적 부담을 근본적으로 해결할 수 있는 차세대 미생물 동정 기술로 주목받고
있음
신속성 외에도 MALDI 바이오센서는 데이터베이스 구축에 따라 수천 종의 미생물을 동정할 수 있어, 10개 이내 균종을
다중 분석(Multiplex Assay)하는데 그치는 기존의 FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer) 기반 형광
센서인 real-time PCR 보다 선별(Screening) 검사에 효용이 큼
MALDI 미생물 동정 바이오센서는 독일의 Bruker Daltonics사가 선두 주자로서 MALDI Biotyper란 이름으로
상용화를 시작하였고, 프랑스의 의료기기 전문기업인 Biomerieux사가 일본의 질량분석 장비 기업인 Shimadzu,
소프트웨어 전문 기업인 AnagnosTec와의 협업으로 Vitek MS를 개발함
국내 개발 사례는 아직 없으나, 균종의 지역적 특성을 고려하여, 균종 라이브러리의 확장이 용이한 개방형 데이터베이스,
고효율 이온화 나노 소재 개발 역량 등 국내 축적된 요소 기술들이 조직적으로 접목되면 국제경쟁력을 가진 우수한
사양의 차세대 미생물 동정 바이오센서 개발이 가능할 것으로 전망됨
RFMP 유전자형 바이오센서
만성 B형간염의 치료 목표는 지속적인 B형간염 바이러스(HBV)의 증식 억제를 통해 간염을 치료하고, 중증 합병증인
간경변이나 간세포암으로의 진행을 막아 전체적으로 환자의 삶의 질과 생존률을 높이는 데 있음
현재 경구용 항바이러스제는 효과적인 1차 치료법으로 자리 잡아 미국식품의약청(FDA)으로부터 승인 받은
제품으로만 라미부딘(Lamivudine), 아데포비어(Adefovir), 엔테카비어(Entecavir), 텔비부딘(Telbivudine),
테노포비어(Tenofovir)가 있으나, 경구용 항바이러스제는 장기 투여 시 HBV 중합효소 유전자에 돌연변이를 갖는 내성
바이러스를 유발하게 되며, 약물에 대한 바이러스 내성은 혈청 내 호전됐던 치료 지표를 반전시켜 간염의 재발이나
악화가 일어남. 따라서, 만성 B형 간염의 치료에 있어 항바이러스제 내성 변이 진단은 치료의 성패를 가늠하는 가장
중요한 요소로 부각되고 있음
내성 변이형 바이러스를 진단하는 방법에는 바이러스 Pol 유전자의 돌연변이를 직접 진단하는 유전자형 분석(genotyping
assay)로서 염기서열법(sequencing)이 있지만, 최근에는 질량분석에 기반한 제한효소질량다형성(Restriction
Fragment Mass Polymorphism, RFMP) 바이오센서가 임상에서 주목받고 있음
RFMP 바이오센서는 중합효소연쇄반응(PCR)을 통해 약제 내성 돌연변이 부위의 DNA를 증폭한 후, 제한효소를
반응시켜 올리고머 DNA로 절편화시키고, 절편화된 올리고머의 분자량을 MALDI-TOF 질량분석을 통해 측정함. 이 때
올리고머의 질량은 각 부위에서 발생하는 돌연변이 염기에 따라 특정값을 갖게 되므로 의사는 어떤 타입의 내성 변이가
환자에 있는지 알게 되고, 그에 따라 처방할 항바이러스제를 선택할 수 있음
017Korea Evaluation Institute of Industrial Technology
ISSUE 1  바이오센서 신기술 소개
| 그림 1-2 RFMP 유전자형 바이오센서 기술 개요 |
MALDI-TOF 질량 분석의 특성상 결과가 매우 정확하고 대용량 분석이 가능하며, 해당 분자량을 갖는 올리고머 DNA의
상대량을 피크(Peak)의 크기로 나타내주기 때문에 여러 변이가 혼재되어 있는 상태에서도 각 변이의 상대적 양을
제시해주는 장점이 있어 병원체의 상대적 증감을 판정할 수 있고, 다양한 항바이러스제에 대한 복수의 내성 변이를 여러
길이의 올리고머로 절편화시켜 일괄적으로 분석할 수 있도록 다중 분석 센서도 개발되고 있음
FABP 급성 심근경색 바이오센서
급성 심근경색(Acute Myocardial Infarction; AMI)은 갑작스럽게 관상동맥이 막히면서 심장근육이 괴사하여 사망률이
30%에 이르는 무서운 질병으로 발병 후 6-12시간 이내 신속 진단이 생사 갈림길의 관건으로 알려짐
기존 바이오센서에 사용되는 대상 물질로 Creatine Kinase-MB(CK-MB), Myoglobin(Myo), cardiac Troponin
I(cTnI), cardiac Troponin T(cTnT)이 있는데, CK-MB는 발병 후 3시간 이후부터 혈중 내 농도가 증가하여 12-24시간
에는 혈중 최고치를 보이고, Myo는 발병 후 1-3시간 이내에 혈중 농도가 급격히 증가하여 6-9시간 후에 혈중 농도가
최고치를 보이게 되며, cTnT, cTnI는 발병 후 4시간 이후부터 혈중 농도가 증가함
018 한국산업기술평가관리원
PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3
KEIT PD Issue Report
심장형 지방산 결합 단백질(heart-type Fatty Acid Binding Protein: FABP3 or h-FABP)은 현재까지 알려진 표지자들
가운데 가장 빠른 시간(1시간 이내) 내에 혈중 농도가 급격하게 증가하는 반면, 단시간(24-36시간) 내에 급격하게 정상
농도로 회귀하므로, 예민하고 특이하게 AMI 진단이 가능함. 특히, FABP3은 심근 및 다른 근육조직에 분포하기도
하지만, 다른 근육 조직에 비하여 심근에서의 농도가 10배 이상 높기 때문에 심근경색에 대한 진단 특이도가 Myo에
비해 20배 이상 높음
FABP 바이오센서는 colloidal gold와 lateral flow기법을 이용하는 면역크로마토그래피(Immunochromatography;
ICA)를 채용한 POCT 형태로 10분 내 결과 확인이 가능하며, 검체로 전혈까지 이용이 가능케 함으로써 혈청ㆍ혈장
분리에 필요한 장비와 시간을 절약할 수 있고, 소형의 광학 측정기기를 사용함으로써 지역 거점 병원만이 아닌 소형
병·의원, 응급차량 내에서도 사용 가능하여 현장 검사에 효과적인 기술로 평가됨
| 그림 1-3 심근경색 진단 표지자들의 발병 시간별 농도 변화 |
미국의 Randox사가 Biochip assay기술을 이용한 Cardiac Array, 독일의 Trimedis, 일본의 DS Pharma가 ICA기술을
이용한 RapiCheck-FABP3, CardioDetect-FABP3 제품을 개발하였으며, 국내에서는 (주)HBI가 관련 기술을 개발
중임
AMI 바이오센서는 혈당 측정용 글루코오스 바이오센서 9.5억불에 이어 2009년 단일 품목으로 5.1억불의 시장을 형성함
(출처 : World Biosensors Markets (Frost  Sullivan, 2010))
019Korea Evaluation Institute of Industrial Technology
ISSUE 1  바이오센서 신기술 소개
| 그림 1-4 FABP 급성심근경색 바이오센서 기술 개요 |
캔틸레버(Cantilever) 바이오센서
급성 캔틸레버 바이오센서는 수영장의 다이빙 보드와 같이 압전 물질(Piezoelectric material)로 구성된 센서를 전극에
외팔보(Cantilever) 형태로 연결시킨 후, 센서에 분자와 결합하거나 반응하게 되면 압전체 고유의 공명 진동수에 변화가
생기고, 이를 전극을 통해 측정함으로써 특정 분자의 존재나 양을 측정할 수 있게 되는 원리임
1994년 미국 Oak Ridge 연구소가 최초로 캔틸레버를 분자 탐침 연구에 활용한 후, 고유 진동수의 변화(dynamic
mode: resonance change) 뿐만 아니라 surface stress에 의한 탐침의 왜곡(static mode; bending change)도
분자의 존재량에 비례하는 것으로 알려져 이에 대한 연구가 활발히 진행됨
특정 분자에 대한 생체 수용체 표식 없이도 대상 분자를 감지할 수 있는 대표적 비표지 방식의 바이오센서로서, 센서의
크기에 따라 마크로 캔틸레버(mm 스케일)와 마이크로 캔틸레버(µm 스케일)로 나뉘며, 일반적으로 센서의 크기가
작아지면 민감도가 좋아지는 것으로 알려져 있으나 신호 대 잡음비(Signal to Noise ratio)와 간섭이 커질 수 있고,
용액과 같은 viscous condition에서 공명 성질이 감소할 수 있어 개발 시 고려되어야 함
미국의 Drexel 대학의 Mutharasan 박사팀의 연구에 따르면, 다양한 종양표지자(tumor marker)와 심근경색
마커(cardiac marker)가 femto gram/ml 수준의 LOD로 검출될 수 있고, 그 밖에도 DNA, RNA oligomer나
병원체(E.coli 0157) 검출에도 효과적이어서 의료 진단이나 식중독, 환경, 생물학전(bio defense) 등 다양한 응용 분야가
제시됨
기술적으로 보면 생체 수용체, 압전체, 전극, 센서바디 등의 완벽한 방수 접합과 고균질 코팅이 기술의 재연반복성에
중요하여 미세가공(Microfabrication) 기술에 대한 공학 연구가 활발함
캔틸레버 센서는 미국의 Veeco, 유럽의 Concentris, Cantion이 상용화 중이며, 국내에는 한국과학기술연구원(KIST),
전자부품연구원(KETI),한국전자통신연구원(ETRI)등에서 관련 연구를 진행 중임.LondonCentreforNanotechnolgy에서는
Nano-cantilever arrays를 통해 AIDS환자가 HIV 바이러스 수치를 자가 모니터링할 수 있는 기기를 선보임
020 한국산업기술평가관리원
PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3
KEIT PD Issue Report
| 그림 1-5 Cantilever 바이오센서 기술 개요 |
요소 호기(Urea Breath) 검출 바이오센서
요소 호기검사는 위염과 위궤양, 십이지장궤양을 일으키며 위암의 중요 원인인 헬리코박터 파일로리균(Helicobacter
pylori)의 유무를 확인하기 위한 검사로 헬리코박터 파일로리균이 가지고 있는 요소분해효소를 이용하여 감염여부를
확인함
요소 호기 검출 바이오센서는 구강을 통해 섭취된 탄소 동위원소를 포함한 요소가 위장 안에 존재하는 헬리코박터
파일로리균의 요소분해효소에 의해 분해되어 생긴 이산화탄소가 혈액내로 흡수되고, 이것이 다시 폐를 통해 배출되는
양을 Infra Red spectrometer, Gas chromatography/mass spectrometer,β-particle count 등의 기기로 측정하는
원리임
헬리코박터 파일로리균 검사는 주로 내시경 시 조직 채취를 통해 이루어지는 실정이며, 검사 시 통증이 수반되고 조직
부분 채취로 인한 위음성(false negative)의 가능성이 있음
요소 호기 검출 바이오센서는 높은 민감도, 특이도, 재현성으로 인해 헬리코박터 파일로리균의 제균 여부를 알아보는데
있어 가장 추천되는 검사법으로 조직검사 및 신속 Urease 법과는 달리 표본 오차(sampling error)가 없음. 또한,
비침윤적 방법으로서 내시경에 고통을 호소하는 환자들에게 적용 가능하며, 위 전체를 진단하여 정확도가 높고, 검사
당일에 헬리코박터 파일로리균의 감염 여부를 알 수 있어 최근 사용자들의 선호도가 높아지고 있음
독일 Fischer ANalysen Instrumente GmbH사의 C-13 요소호기검사장비(FANhp), 미국 Otsuka America
Pharmaceutical, Inc.사의 BreathTek UBT kit, 중국 Shenzhen Zhonghe Headway bio-Sci  Tech Co., Ltd사의 H.
Pylori Detector 제품 등이 상용화 중임
021Korea Evaluation Institute of Industrial Technology
ISSUE 1  바이오센서 신기술 소개
| 그림 1-6 요소 호기 검출 바이오센서 기술 개요 |
3. 시사점 및 정책 제안
21세기 메가트렌드는 질환의 조기 진단, 예방, 예후, 예측, 진단-치료의 융합 추세 등 개인별 맞춤의료가 핵심
키워드이며, 의료보건산업의 고도화 및 고부가가치화를 견인하고 있음
견조하게 성장하는 헬스케어 시장, 인구 노령화 및 복지 중시는 전 세계에서 공통적으로 나타나는 현상으로, 바이오센서
분야는 맞춤의료시대에 필수불가결한 도구로써 중요성이 더욱 커질 것으로 예상됨
연구자들은 기술 주도의 개발 관점(Technology Push)을 지양하고, 현장에서 수요자들이 요구하는 기술 사양을
예민하게 수용하여(Market Pull), 시장 성공 가능성이 높은 제품 사양을 도출하고 이를 구현할 핵심 요소 기술 개발을
전략적으로 추진하는 것이 필요함
정부는 산학연 기술역량을 보유한 기관 간의 협업을 적극 중개하고 유인책을 제시하여, 바이오, 나노, 정보, 의료 분야가
상생협력할 수 있는 자생적인 융합 생태계 조성을 서둘러야 함
차세대 성장 산업인 헬스케어 산업을 주도할 바이오센서 부문의 핵심 부품, 소재, 시스템 개발에 대한 지속적인 투자,
목표지향적 성과 관리, 범부처적 지원체계가 구축되길 고대하며 이로 인해 출현하게 될 새로운 사업모델이 조기 정착될
수 있도록 과감한 규제 개혁 등 법적ㆍ제도적 지원을 가속화하기를 제언함
022 한국산업기술평가관리원
PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3
KEIT PD Issue Report
[참고문헌]
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2. Clark AE, Kaleta EJ, Arora A, Wolk DM. Matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass
spectrometry: a fundamental shift in the routine practice of clinical microbiology. Clin Microbiol Rev.
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4. Lee JH, Hachiya A, Shin SK, Lee J, Gatanaga H, Oka S, Kirby KA, Ong YT, Sarafianos SG, Folk WR, Yoo
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5. Han KH, Hong SP, Choi SH, Shin SK, Cho SW, Ahn SH, Hahn JS, Kim SO. Comparison of multiplex restriction
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6. Kim JS, Kang JM. Diagnosis of Helicobacter pylori infection. Hanyang Medical Rev. 2007;27(2):50-56
7. Fallone CA, Veldhuyzen van Zanten SJO. Chiba N. The urea breath test for Helicobacter pylori infection:
taking the wind out the sails of endoscopy. CMAJ. 2000;162(3):371-372
[국내외 주요 기술개발 현황]
연구기관명 프로젝트명 개요 연구기간
서울대학교병원
간암 조기진단, 소라페닙
반응예측 및 TACE 예후진단
위한 다중 마커 검지 플랫폼 개발
간암 조기 및 예후 진단 시스템 개발 2013.06 ~ 현재
에치비아이(주)
나노바이오 융합기반 급성
심근경색 조기진단 기술 개발
급성 심근경색 (AMI) 조기 진단 바이오센서
개발
2012.12 ~ 현재
연세대학교산학협력단
위암ㆍ구강암 예후 예측 및 치료
지침을 위한 mRNA-miRNA
복합 진단 시스템 개발
위암ㆍ구강암 복합진단 시스템 개발 2012.06 ~ 현재
고려대학교
호흡기 감염성 질환 조기 진단용
나노 센서 개발
인플루엔자 바이러스 등 호흡기성 감염 진단
바이오센서 개발
2010.12 ~ 현재
㈜진매트릭스
질량분석기반 임상용 유전자
진단 시스템 기술 개발
유전자 진단 RFMP 바이오센서 개발 2009.05 ~ 현재

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바이오 센서 신기술 소개

  • 1. SUMMARY 목적 바이오센서란 분석 물질을 생체 수용체(Bio-Receptor)와 반응시켜 신호 변환기(Signal Transducer)로 측정하여 분석 물질의 존재 유무(정성)나 양(정량)을 측정하는 장치나 소자임 바이오센서는 극미량의 분석 물질을 고감도로 정확하게 검출하거나, 대용량의 시료를 자동으로 연속 검출하고, 시료 전처리와 결과 해석을 단순화하는 등 현장검사 또는 신속 진단 검사 추세로, 수요에 따라 제품이 다양화되고 있음 주요현황 최근 생체 고분자 직접 검출 등의 새로운 원리, 감염질환에서 만성질환까지 적용 질환 확대, 생물정보DB를 활용한 광대역 진단, 체액이나 생체 유래 가스 등 다양한 검체 형태 적용, 초민감 마커 진단을 통한 조기 치료 구현 등이 새로운 트렌드로서, 다양한 체외 진단용 바이오센서가 활발하게 개발되고 있음 대표적인 예로 MALDI 미생물 동정 바이오센서, RFMP 유전자형 바이오센서, FABP 급성 심근경색 바이오센서, 캔틸레버(Cantilever) 바이오센서, 요소 호기 검출 바이오센서가 있음 시사점 및 정책 제안 21세기 바이오센서 기술 분야에서는 질환의 조기 진단, 예방, 예후 예측, 진단-치료의 융합 등 개인별 맞춤의료가 핵심 키워드이며, 바이오센서의 체외진단 분야는 맞춤의료시대에 필수불가결한 도구로써 중요성이 더욱 커질 것으로 예상됨 정부는 차세대 성장 산업인 헬스 케어 산업을 주도할 바이오센서 개발에 대한 지속적인 투자를 통해 관련 산업의 국가 경쟁력을 확보하고, 산학연 기술역량을 보유한 기관 간의 협업을 적극 중개하며, 사업모델의 조기 정착을 위한 법적ㆍ제도적 지원을 가속화하기를 제언함 l저자l 최수진 PD / KEIT 바이오PD실 홍선표 연구소장 / (주)진매트릭스 바이오센서 신기술 소개
  • 2. 014 한국산업기술평가관리원 PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3 KEIT PD Issue Report 1. 바이오센서 개요 정의 바이오센서란, 분석하고자 하는 대상 물질(Analyte)을 선택 특이성이 있는 생체 수용체(Bio-Receptor)와 반응시키고, 그 반응 정도를 신호 변환기(Signal Transducer)로 측정하여, 대상 물질(analyte)의 존재나 양을 확인할 수 있는 장치나 소자를 통칭함 최근에는 분석하고자 하는 대상 물질이 글루코오스(포도당) 또는 세포일 경우 글루코오스 센서 또는 세포 센서, 항원/ 항체를 생체 수용체로 하는 경우는 면역 바이오센서, 상보적인 DNA를 생체 수용체로 이용한 경우는 DNA칩 등으로 다양하게 명명됨 최초의 바이오센서는 1962년 Clark이 당산화 효소와 산소 측정 전극을 활용해 개발한 글루코오스 센서라 할 수 있고, 1994년 미국의 Affymetrix사가 photolithography 기술로 최초로 상용화한 지놈(genome) 분석용 DNA칩이 바이오센터 관련 기술 혁신의 큰 획(breakthrough)을 그었다고 평가됨 기술 개발 동향 통상 대상 물질과 생체 수용체의 상호 반응을 신호화하거나 증폭하기 위하여, 대상물질 자체나 생체 수용체에 발광, 형광, 발색 잔기를 표지(Labelling)시켜 분석하거나, 인식 반응을 SPR(Surface Plasmon Resonance), FET(Field Effect Transistor), 질량 분석(Mass Spectrometry) 등 비표지 방식으로 측정하는 바이오센서가 주로 개발됨 분석 물질에 선택성과 특이성이 있는 분자들이 지속적으로 개발됨에 따라 생체 내 아미노산이나 대사체와 같은 소분자 외에도 호르몬이나 단백질, 혹은 특정 DNA, RNA와 같은 고분자를 고감도로 정확하게 검출할 수 있으며, 세포 레벨로 기술이 확장되어 특정 암세포나 줄기세포까지 감지 할 수 있게 됨에 따라, 바이오센서는 질병 진단과 치료에 획기적인 기여를 할 수 있음 대상 물질의 검출한계(Lower Limit Of Detection; LOD)를 낮추고, 정량적으로 측정 가능한 구간(Dynamic Range)을 넓히고자 하는 기술 개발 추세는 국내외 시장 및 바이오센서 기술 연구 분야에서 공통적으로 관찰되며, 한꺼번에 다양한 표적 분자를 측정하기 위한 고집적화, 반응 시간을 획기적으로 줄여 대용량의 시료를 자동으로 연속 검출할 수 있는 워크스테이션화, 시료 전처리와 결과 해석을 신속ㆍ단순화하여 현장검사(Point-Of-Care Test; POCT) 또는 신속진단검사(Rapid Diagnostics Test; RDT)로 개발되는 등 수요에 따라 다양한 제품 형태가 출현하고 있음 시장 현황 바이오센서의 주요 응용 분야인 체외진단의 2009년 글로벌 시장 매출규모는 38.762억 달러이며, 2014년까지 연평균이 5.4%(CAGR)로 성장하여 503.79억 달러에 달할 것으로 전망됨(출처 : Strategic Analysis of the Global In-Vitro Diagnostics Market (Frost & Sullivan, 2010)) 체외진단 시장은 적용 분야에 따라 8개의 섹터로 나뉘는데, 면역화학(Immunochemistry), 임상미생물, POCT,
  • 3. 015Korea Evaluation Institute of Industrial Technology ISSUE 1 바이오센서 신기술 소개 분자진단(Molecular Diagnostics), 지혈(Hemostasis), 자가 혈당 측정, 조직진단, 혈액진단으로 구분됨 ‌ 이 중 면역화학 진단시장이 전체 체외진단시장의 35.8%로 가장 큰 비중을 차지하며, 자가 혈당 측정 시장과 POCT 시장이 각각 20.5%와 11.8%의 비중으로 시장을 형성하고 있으며, 유전자 마커를 진단하는 분자진단은 연평균 13.7%의 높은 성장률을 보임 2. 바이오센서 개발 현황 MALDI 미생물 동정 바이오센서 질량분석 기술은 분석 대상물질에 반응하는 생체 수용체와 별도의 표식(labelling)이 필요 없이, 분석 대상 분자의 질량을 직접 측정함으로써 대상 분자를 동정하는 대표적인 비표지 바이오센서 기술임 특히, MALDI(Matrix-Assisted Laser-Desorption Ionization) 질량분석 기술은 DNA나 단백질 같이 이온화가 어려운 생체 고분자를 이온화를 촉진하는 매트릭스에 결정화하여 고체상으로 시료를 분석하기 때문에 대량의 검체를 신속하게 일괄 분석하는 데 유리함 MALDI 미생물 동정 바이오센서 기술은 질량 분석을 통해 얻어지는 단백질들의 질량 프로파일이 미생물의 종류별로 상이한 점을 이용하여, 미생물 단백질 질량 패턴 데이터베이스를 확립하고, 이와 비교 분석을 통해 미지의 미생물을 고속으로 대량 동정하는 시스템으로서 미생물 질량 프로파일 데이터베이스, 결과 분석 소프트웨어, 질량 분석 센서가 통합된 형태임 | 그림 1-1 MALDI 미생물 동정 바이오센서 기술 개요도 |
  • 4. 016 한국산업기술평가관리원 PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3 KEIT PD Issue Report 기존의 생화학 미생물 동정 바이오센서는 6~24시간 이상 분석시간이 소요되는 데 비해 MALDI 바이오센서는 분석 시간이 5~10분내로 신속한 동정 결과를 얻을 수 있음. 특히, 패혈증과 같이 촌각을 다투는 중증 감염 환자의 경우 감염균의 신속ㆍ정확한 동정이 항생제 치료 예후에 막대한 영향을 미치게 되며, 불필요한 항생제 오남용에서 기인하는 부작용 및 약제내성, 병원 감염, 보건 경제적 부담을 근본적으로 해결할 수 있는 차세대 미생물 동정 기술로 주목받고 있음 신속성 외에도 MALDI 바이오센서는 데이터베이스 구축에 따라 수천 종의 미생물을 동정할 수 있어, 10개 이내 균종을 다중 분석(Multiplex Assay)하는데 그치는 기존의 FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer) 기반 형광 센서인 real-time PCR 보다 선별(Screening) 검사에 효용이 큼 MALDI 미생물 동정 바이오센서는 독일의 Bruker Daltonics사가 선두 주자로서 MALDI Biotyper란 이름으로 상용화를 시작하였고, 프랑스의 의료기기 전문기업인 Biomerieux사가 일본의 질량분석 장비 기업인 Shimadzu, 소프트웨어 전문 기업인 AnagnosTec와의 협업으로 Vitek MS를 개발함 국내 개발 사례는 아직 없으나, 균종의 지역적 특성을 고려하여, 균종 라이브러리의 확장이 용이한 개방형 데이터베이스, 고효율 이온화 나노 소재 개발 역량 등 국내 축적된 요소 기술들이 조직적으로 접목되면 국제경쟁력을 가진 우수한 사양의 차세대 미생물 동정 바이오센서 개발이 가능할 것으로 전망됨 RFMP 유전자형 바이오센서 만성 B형간염의 치료 목표는 지속적인 B형간염 바이러스(HBV)의 증식 억제를 통해 간염을 치료하고, 중증 합병증인 간경변이나 간세포암으로의 진행을 막아 전체적으로 환자의 삶의 질과 생존률을 높이는 데 있음 현재 경구용 항바이러스제는 효과적인 1차 치료법으로 자리 잡아 미국식품의약청(FDA)으로부터 승인 받은 제품으로만 라미부딘(Lamivudine), 아데포비어(Adefovir), 엔테카비어(Entecavir), 텔비부딘(Telbivudine), 테노포비어(Tenofovir)가 있으나, 경구용 항바이러스제는 장기 투여 시 HBV 중합효소 유전자에 돌연변이를 갖는 내성 바이러스를 유발하게 되며, 약물에 대한 바이러스 내성은 혈청 내 호전됐던 치료 지표를 반전시켜 간염의 재발이나 악화가 일어남. 따라서, 만성 B형 간염의 치료에 있어 항바이러스제 내성 변이 진단은 치료의 성패를 가늠하는 가장 중요한 요소로 부각되고 있음 내성 변이형 바이러스를 진단하는 방법에는 바이러스 Pol 유전자의 돌연변이를 직접 진단하는 유전자형 분석(genotyping assay)로서 염기서열법(sequencing)이 있지만, 최근에는 질량분석에 기반한 제한효소질량다형성(Restriction Fragment Mass Polymorphism, RFMP) 바이오센서가 임상에서 주목받고 있음 RFMP 바이오센서는 중합효소연쇄반응(PCR)을 통해 약제 내성 돌연변이 부위의 DNA를 증폭한 후, 제한효소를 반응시켜 올리고머 DNA로 절편화시키고, 절편화된 올리고머의 분자량을 MALDI-TOF 질량분석을 통해 측정함. 이 때 올리고머의 질량은 각 부위에서 발생하는 돌연변이 염기에 따라 특정값을 갖게 되므로 의사는 어떤 타입의 내성 변이가 환자에 있는지 알게 되고, 그에 따라 처방할 항바이러스제를 선택할 수 있음
  • 5. 017Korea Evaluation Institute of Industrial Technology ISSUE 1 바이오센서 신기술 소개 | 그림 1-2 RFMP 유전자형 바이오센서 기술 개요 | MALDI-TOF 질량 분석의 특성상 결과가 매우 정확하고 대용량 분석이 가능하며, 해당 분자량을 갖는 올리고머 DNA의 상대량을 피크(Peak)의 크기로 나타내주기 때문에 여러 변이가 혼재되어 있는 상태에서도 각 변이의 상대적 양을 제시해주는 장점이 있어 병원체의 상대적 증감을 판정할 수 있고, 다양한 항바이러스제에 대한 복수의 내성 변이를 여러 길이의 올리고머로 절편화시켜 일괄적으로 분석할 수 있도록 다중 분석 센서도 개발되고 있음 FABP 급성 심근경색 바이오센서 급성 심근경색(Acute Myocardial Infarction; AMI)은 갑작스럽게 관상동맥이 막히면서 심장근육이 괴사하여 사망률이 30%에 이르는 무서운 질병으로 발병 후 6-12시간 이내 신속 진단이 생사 갈림길의 관건으로 알려짐 기존 바이오센서에 사용되는 대상 물질로 Creatine Kinase-MB(CK-MB), Myoglobin(Myo), cardiac Troponin I(cTnI), cardiac Troponin T(cTnT)이 있는데, CK-MB는 발병 후 3시간 이후부터 혈중 내 농도가 증가하여 12-24시간 에는 혈중 최고치를 보이고, Myo는 발병 후 1-3시간 이내에 혈중 농도가 급격히 증가하여 6-9시간 후에 혈중 농도가 최고치를 보이게 되며, cTnT, cTnI는 발병 후 4시간 이후부터 혈중 농도가 증가함
  • 6. 018 한국산업기술평가관리원 PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3 KEIT PD Issue Report 심장형 지방산 결합 단백질(heart-type Fatty Acid Binding Protein: FABP3 or h-FABP)은 현재까지 알려진 표지자들 가운데 가장 빠른 시간(1시간 이내) 내에 혈중 농도가 급격하게 증가하는 반면, 단시간(24-36시간) 내에 급격하게 정상 농도로 회귀하므로, 예민하고 특이하게 AMI 진단이 가능함. 특히, FABP3은 심근 및 다른 근육조직에 분포하기도 하지만, 다른 근육 조직에 비하여 심근에서의 농도가 10배 이상 높기 때문에 심근경색에 대한 진단 특이도가 Myo에 비해 20배 이상 높음 FABP 바이오센서는 colloidal gold와 lateral flow기법을 이용하는 면역크로마토그래피(Immunochromatography; ICA)를 채용한 POCT 형태로 10분 내 결과 확인이 가능하며, 검체로 전혈까지 이용이 가능케 함으로써 혈청ㆍ혈장 분리에 필요한 장비와 시간을 절약할 수 있고, 소형의 광학 측정기기를 사용함으로써 지역 거점 병원만이 아닌 소형 병·의원, 응급차량 내에서도 사용 가능하여 현장 검사에 효과적인 기술로 평가됨 | 그림 1-3 심근경색 진단 표지자들의 발병 시간별 농도 변화 | 미국의 Randox사가 Biochip assay기술을 이용한 Cardiac Array, 독일의 Trimedis, 일본의 DS Pharma가 ICA기술을 이용한 RapiCheck-FABP3, CardioDetect-FABP3 제품을 개발하였으며, 국내에서는 (주)HBI가 관련 기술을 개발 중임 AMI 바이오센서는 혈당 측정용 글루코오스 바이오센서 9.5억불에 이어 2009년 단일 품목으로 5.1억불의 시장을 형성함 (출처 : World Biosensors Markets (Frost Sullivan, 2010))
  • 7. 019Korea Evaluation Institute of Industrial Technology ISSUE 1 바이오센서 신기술 소개 | 그림 1-4 FABP 급성심근경색 바이오센서 기술 개요 | 캔틸레버(Cantilever) 바이오센서 급성 캔틸레버 바이오센서는 수영장의 다이빙 보드와 같이 압전 물질(Piezoelectric material)로 구성된 센서를 전극에 외팔보(Cantilever) 형태로 연결시킨 후, 센서에 분자와 결합하거나 반응하게 되면 압전체 고유의 공명 진동수에 변화가 생기고, 이를 전극을 통해 측정함으로써 특정 분자의 존재나 양을 측정할 수 있게 되는 원리임 1994년 미국 Oak Ridge 연구소가 최초로 캔틸레버를 분자 탐침 연구에 활용한 후, 고유 진동수의 변화(dynamic mode: resonance change) 뿐만 아니라 surface stress에 의한 탐침의 왜곡(static mode; bending change)도 분자의 존재량에 비례하는 것으로 알려져 이에 대한 연구가 활발히 진행됨 특정 분자에 대한 생체 수용체 표식 없이도 대상 분자를 감지할 수 있는 대표적 비표지 방식의 바이오센서로서, 센서의 크기에 따라 마크로 캔틸레버(mm 스케일)와 마이크로 캔틸레버(µm 스케일)로 나뉘며, 일반적으로 센서의 크기가 작아지면 민감도가 좋아지는 것으로 알려져 있으나 신호 대 잡음비(Signal to Noise ratio)와 간섭이 커질 수 있고, 용액과 같은 viscous condition에서 공명 성질이 감소할 수 있어 개발 시 고려되어야 함 미국의 Drexel 대학의 Mutharasan 박사팀의 연구에 따르면, 다양한 종양표지자(tumor marker)와 심근경색 마커(cardiac marker)가 femto gram/ml 수준의 LOD로 검출될 수 있고, 그 밖에도 DNA, RNA oligomer나 병원체(E.coli 0157) 검출에도 효과적이어서 의료 진단이나 식중독, 환경, 생물학전(bio defense) 등 다양한 응용 분야가 제시됨 기술적으로 보면 생체 수용체, 압전체, 전극, 센서바디 등의 완벽한 방수 접합과 고균질 코팅이 기술의 재연반복성에 중요하여 미세가공(Microfabrication) 기술에 대한 공학 연구가 활발함 캔틸레버 센서는 미국의 Veeco, 유럽의 Concentris, Cantion이 상용화 중이며, 국내에는 한국과학기술연구원(KIST), 전자부품연구원(KETI),한국전자통신연구원(ETRI)등에서 관련 연구를 진행 중임.LondonCentreforNanotechnolgy에서는 Nano-cantilever arrays를 통해 AIDS환자가 HIV 바이러스 수치를 자가 모니터링할 수 있는 기기를 선보임
  • 8. 020 한국산업기술평가관리원 PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3 KEIT PD Issue Report | 그림 1-5 Cantilever 바이오센서 기술 개요 | 요소 호기(Urea Breath) 검출 바이오센서 요소 호기검사는 위염과 위궤양, 십이지장궤양을 일으키며 위암의 중요 원인인 헬리코박터 파일로리균(Helicobacter pylori)의 유무를 확인하기 위한 검사로 헬리코박터 파일로리균이 가지고 있는 요소분해효소를 이용하여 감염여부를 확인함 요소 호기 검출 바이오센서는 구강을 통해 섭취된 탄소 동위원소를 포함한 요소가 위장 안에 존재하는 헬리코박터 파일로리균의 요소분해효소에 의해 분해되어 생긴 이산화탄소가 혈액내로 흡수되고, 이것이 다시 폐를 통해 배출되는 양을 Infra Red spectrometer, Gas chromatography/mass spectrometer,β-particle count 등의 기기로 측정하는 원리임 헬리코박터 파일로리균 검사는 주로 내시경 시 조직 채취를 통해 이루어지는 실정이며, 검사 시 통증이 수반되고 조직 부분 채취로 인한 위음성(false negative)의 가능성이 있음 요소 호기 검출 바이오센서는 높은 민감도, 특이도, 재현성으로 인해 헬리코박터 파일로리균의 제균 여부를 알아보는데 있어 가장 추천되는 검사법으로 조직검사 및 신속 Urease 법과는 달리 표본 오차(sampling error)가 없음. 또한, 비침윤적 방법으로서 내시경에 고통을 호소하는 환자들에게 적용 가능하며, 위 전체를 진단하여 정확도가 높고, 검사 당일에 헬리코박터 파일로리균의 감염 여부를 알 수 있어 최근 사용자들의 선호도가 높아지고 있음 독일 Fischer ANalysen Instrumente GmbH사의 C-13 요소호기검사장비(FANhp), 미국 Otsuka America Pharmaceutical, Inc.사의 BreathTek UBT kit, 중국 Shenzhen Zhonghe Headway bio-Sci Tech Co., Ltd사의 H. Pylori Detector 제품 등이 상용화 중임
  • 9. 021Korea Evaluation Institute of Industrial Technology ISSUE 1 바이오센서 신기술 소개 | 그림 1-6 요소 호기 검출 바이오센서 기술 개요 | 3. 시사점 및 정책 제안 21세기 메가트렌드는 질환의 조기 진단, 예방, 예후, 예측, 진단-치료의 융합 추세 등 개인별 맞춤의료가 핵심 키워드이며, 의료보건산업의 고도화 및 고부가가치화를 견인하고 있음 견조하게 성장하는 헬스케어 시장, 인구 노령화 및 복지 중시는 전 세계에서 공통적으로 나타나는 현상으로, 바이오센서 분야는 맞춤의료시대에 필수불가결한 도구로써 중요성이 더욱 커질 것으로 예상됨 연구자들은 기술 주도의 개발 관점(Technology Push)을 지양하고, 현장에서 수요자들이 요구하는 기술 사양을 예민하게 수용하여(Market Pull), 시장 성공 가능성이 높은 제품 사양을 도출하고 이를 구현할 핵심 요소 기술 개발을 전략적으로 추진하는 것이 필요함 정부는 산학연 기술역량을 보유한 기관 간의 협업을 적극 중개하고 유인책을 제시하여, 바이오, 나노, 정보, 의료 분야가 상생협력할 수 있는 자생적인 융합 생태계 조성을 서둘러야 함 차세대 성장 산업인 헬스케어 산업을 주도할 바이오센서 부문의 핵심 부품, 소재, 시스템 개발에 대한 지속적인 투자, 목표지향적 성과 관리, 범부처적 지원체계가 구축되길 고대하며 이로 인해 출현하게 될 새로운 사업모델이 조기 정착될 수 있도록 과감한 규제 개혁 등 법적ㆍ제도적 지원을 가속화하기를 제언함
  • 10. 022 한국산업기술평가관리원 PD ISSUE REPORT MARCH 2014 VOL 14-3 KEIT PD Issue Report [참고문헌] 1. Kakoti A, Goswami P. Heart type fatty acid binding protein: structure, function and biosensing applications for early detection of myocardial infarction. Biosens Bioelectron. 2013;43:400-411. 2. Clark AE, Kaleta EJ, Arora A, Wolk DM. Matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry: a fundamental shift in the routine practice of clinical microbiology. Clin Microbiol Rev. 2013;26(3):547-603. 3. Johnson BN, Mutharasan R. Biosensing using dynamic-mode cantilever sensors: a review. Biosens Bioelectron. 2012;32(1):1-18. 4. Lee JH, Hachiya A, Shin SK, Lee J, Gatanaga H, Oka S, Kirby KA, Ong YT, Sarafianos SG, Folk WR, Yoo W, Hong SP, Kim SO. Restriction fragment mass polymorphism (RFMP) analysis based on MALDI-TOF mass spectrometry for detecting antiretroviral resistance in HIV-1 infected patients. Clin Microbiol Infect. 2013;19(6)E263-270. 5. Han KH, Hong SP, Choi SH, Shin SK, Cho SW, Ahn SH, Hahn JS, Kim SO. Comparison of multiplex restriction fragment mass polymorphism and sequencing analyses for detecting entecavir resistance in chronic hepatitis B. Antiviral Therapy 2011;16(1):77-87. 6. Kim JS, Kang JM. Diagnosis of Helicobacter pylori infection. Hanyang Medical Rev. 2007;27(2):50-56 7. Fallone CA, Veldhuyzen van Zanten SJO. Chiba N. The urea breath test for Helicobacter pylori infection: taking the wind out the sails of endoscopy. CMAJ. 2000;162(3):371-372 [국내외 주요 기술개발 현황] 연구기관명 프로젝트명 개요 연구기간 서울대학교병원 간암 조기진단, 소라페닙 반응예측 및 TACE 예후진단 위한 다중 마커 검지 플랫폼 개발 간암 조기 및 예후 진단 시스템 개발 2013.06 ~ 현재 에치비아이(주) 나노바이오 융합기반 급성 심근경색 조기진단 기술 개발 급성 심근경색 (AMI) 조기 진단 바이오센서 개발 2012.12 ~ 현재 연세대학교산학협력단 위암ㆍ구강암 예후 예측 및 치료 지침을 위한 mRNA-miRNA 복합 진단 시스템 개발 위암ㆍ구강암 복합진단 시스템 개발 2012.06 ~ 현재 고려대학교 호흡기 감염성 질환 조기 진단용 나노 센서 개발 인플루엔자 바이러스 등 호흡기성 감염 진단 바이오센서 개발 2010.12 ~ 현재 ㈜진매트릭스 질량분석기반 임상용 유전자 진단 시스템 기술 개발 유전자 진단 RFMP 바이오센서 개발 2009.05 ~ 현재