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"AÑO DE LA PROMOCIÓN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y DEL COMPROMISO CLIMÁTICO" 
“DETERMINACIÓN DE SÓLIDOS SOLUBLES EN ALIMENTOS.” 
CURSO: Análisis instrumental de productos Agroind. 
CICLO: VI 
DOCENTE: ING. RODRIGUEZ PAUCAR GILBERT NILO 
INTEGRANTES: 
 MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. 
 VEGA VIERA, Jhonas Abner. 
FACULTAD DE INGENIERÍA 
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL 
NUEVO CHIMBOTE - PERÚ
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 2 
I. INTRODUCCIÓN. 
La refractometria se basa en los cambios del índice de refracción que sufre una sustancia cuando otra es disuelta en ella. Si consideramos el jugo de frutas como una sustancia constituida por agua, su índice de refracción será mayor cuando mayor sea la cantidad de azúcar presente en ella. Existe diversos instrumentos que miden esta variación, pero el más útil para nuestros fines es el refractómetro. Este consiste de un tubo con un prisma en su interior que dirige el rayo de luz incidente hacia una escala observable en un ocular. Al colocar una muestra liquida sobre el prisma (dos o tres gotas), esta ocasiona una desviación proporcional a la cantidad de solidos solubles disueltos. Esta desviación es leída en la escala como porcentaje de azúcar, conocida también como grados brix. 
II. OBJETIVO 
 Determinar los grados Brix de un alimento. Determinar el porcentaje de sólidos solubles, la cantidad de vitamina C. 
 Conocer el fundamento de uso del instrumento y la determinación del índice de refracción. 
 Determinar el contenido de solidos solubles en los alimentos. 
 Establecer relaciones tabulares o graficas entre concentración y grados brix, solidos solubles, solidos totales. 
III. FUNDAMENTÓ TEÓRICO 
3.1. DETERMINACIÓN DE AZUCARES (GRADOS BRIX). 
Los grados Brix miden la cantidad de sólidos solubles presentes en un jugo o pulpa expresados en porcentaje de sacarosa. Los sólidos solubles están compuestos por los azúcares, ácidos, sales y demás compuestos solubles en agua presentes en los jugos de las células de una fruta. Se determinan empleando un refractómetro calibrado y a 20 ºC. Si la pulpa o jugo se hallan a diferente temperatura se podrá realizar un ajuste en ºBrix, según la temperatura en que se realice la lectura. 
- Determinación en zumo de uva. 
La medida de los sólidos solubles totales en el zumo de uva da una indicación bastante buena del contenido en azúcares, ya que los azúcares representan sobre el 90- 94% de los
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sólidos totales solubles. Los azúcares predominantes en el mosto son glucosa y fructosa (ambos azúcares reductores) y una pequeña cantidad de sacarosa (no reductor). 
Los sólidos solubles totales son determinados mediante métodos físicos como hidrometría, picnometría y refractometría. 
Los densímetros (basados en que un objeto colocado en un líquido desplaza un volumen de líquido igual a su propio peso) dan una medida del peso específico de la disolución, lo cual está relacionado con el contenido total de sólidos solubles en esa disolución. Las escalas en que pueden encontrarse son: 
a. "'Brix: % en peso; l0Brix = 1 gramo de azúcar por 100 gramos de disolución. 
b. "'Baumé: su definición no es fácil, pero es muy práctico 1º Baumé de azúcar en el zumo producirá aproximadamente 1%(v/v) de alcohol si el vino es fermentado hasta quedar seco. 
c. Peso específico: es el peso de 1 ml de disolución dividido entre el peso de l ml de agua destilada a 20 ºC. 
Durante la fermentación, el azúcar se transforma en alcohol. 
Este alcohol formado afecta a la lectura del densímetro ya que se reduce el peso específico de la disolución. La finalización de la fermentación se observa por el valor constante de la densidad con el tiempo (rango entre 0,990-1,000). Una medida exacta de la concentración de azúcar solamente puede ser obtenida mediante métodos de análisis químicos, por ejemplo el método Rebelein. 
3.2. REFRACTÓMETROS 
- Refractómetro de Abbé: Aparece un esquema que muestra dos prismas articulados entre los cuales se coloca la muestra. Por el centro de los prismas pasa un eje que permite mover el prisma de refracción P2 y así medir a en una escala graduada que es proyectada en el ocular y que se gradúa en unidades de nD hasta 0,001. El amplificador permite determinar la siguiente cifra, 0,0001. Se miden índices entre 1,3 y 1,7. Los denominados compensadores están formados por unos prismas (prismas de Amici), y permiten utilizar luz blanca como fuente. Estos prismas de vidrio permiten dispersar todas las longitudes de onda excepto el color amarillo en le vecindad de la línea D del sodio, que es la única que atraviesa el prisma. Es decir, actúa como un monocromador, pero la resolución no es perfecta.
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- Aplicaciones 
Para monitorizar la pureza del butadieno y estireno para la fabricación del caucho. Los índices de estos ingredientes son 1,5434 y 1,4120, respectivamente. Un cambio de 0.1% es detectable por refractometría. En la industria alimentaria para la semilla de soja o del aceite de semilla de algodón con índices de 1,47. El producto final para producir margarina tiene 1,43. Otras aplicaciones se relacionan con la variación de la concentración de disoluciones. Así, la concentración en azúcar, salmueras y ácidos es fácil de seguir mediante refractometría. Por ejemplo, el índice de refracción de una disolución de sacarosa aumenta 0,0002 unidades por un incremento de la concentración de 0,1%. También se detectan cambios de 0,02% en la concentración de ácido nítrico por el mismo procedimiento, e incluso más sensibilidad se puede conseguir en las medidas de las concentraciones de ácido sulfúrico.
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3.2.1. Factores que afectan la medición del índice de refracción. 
A. Temperatura: es una medida de cambios de densidad. La temperatura debe ser controlada para poder obtener mediciones precisas de índice de refracción. Para el líquido mediante las fluctuaciones de la temperatura deben ser menores de 0.2ºC, si se requiere presión de cuatro decimales. En general un aumento de (T), disminuye la densidad y el índice de refracción, el índice de refracción pueden ser corregido en muestras de grasa y aceites por temperatura, usando las siguientes ecuaciones: 
( ) ( ) 
B. Presión: en general para los líquidos un aumento en la presión aumenta la densidad y por ende aumenta el índice de refracción. 
En los gases el efecto es más pronunciado y para solidos es aún menos que los líquidos. La variación en la presión atmosférica solo es importante para trabajar con gases. ( ) ( ) 
C. Longitud de onda: el índice de refracción en un medio transparente disminuye gradualmente al aumentar la longitud de onda (Aumento de longitud de onda, disminuye el índice de refracción). 
3.3. Aplicaciones de Refractometria. 
A. Cualitativamente. 
 Para describir (Identificar y Caracterizar) una especie química por ejemplo aceites y grasas. 
 En la identificación de sustancias desconocidas por comparación con valores tabulados en la literatura. 
 En la identificación de compuestos puros, correlacionado con los puntos de ebullición y fusión 
B. Cuantitativamente. 
 Para medir la pureza de un compuesto 
 Evaluación de calidad en grasas y aceites 
 Control de procesos de hidrogenación
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 Determinación de sólidos solubles en frutas y productos de frutas tales como jaleas, mermeladas, néctares, pulpas, etc. 
 Determinar la concentración de soluciones acuosas de azúcar (da concentración total de carbohidratos) 
 Determinación de sólidos totales en productos de tomates, jugos cítricos, proteínas, huevos, leche, y productos lácteos, cerveza, vinagre, alcohol. 
 Cálculo de la densidad a partir de valores de “r” tabulados 
 Determinación cuantitativa del contenido de agua en miel 
 Para determinar el extracto de alimentos que esté formado principalmente por azúcar (sacarosa), como los es el caso de las confituras, miel, jarabe de almidón, zumos etc. 
 Evaluar la composición de un líquido binario o una mezcla gaseosa 
 Determinación de concentraciones de azufre en caucho no vulcanizado 
 Para evaluar aparatos y métodos para separaciones como destilación, extracción, Cromatografía de adsorción y difusión. 
3.4. PORCENTAJE DE ACIDEZ 
El porcentaje de acidez se define como la cantidad de ácido predominante en las frutas. Algunos de los ácidos que se encuentran más comúnmente son: 
- Ácido cítrico. 
- Ácido málico. 
- Ácido ascórbico (vitamina C). 
- Ácido oxálico. 
- Ácido chikimico. 
- Ácido acético. 
- Ácido tartárico. 
La acidez de una sustancia se puede determinar por métodos volumétricos, es decir, midiendo los volúmenes. Ésta medición se realiza mediante una titulación, la cual implica siempre tres agentes o medios: el titulante, el titulado y el colorante. Cuando un ácido y una base reaccionan, se produce una reacción; reacción que se puede observar con un colorante. Un ejemplo de colorante, y el más común, es la fenolftaleína (C20H14O4), que vira (cambia) de color a rosa cuando se en cuentra presente una reacción ácido-base. El agente titulante es una base, y el agente titulado es el ácido o la sustancia que contiene el ácido. Se emplea entonces la siguiente fórmula: 
Donde: 
- 
- 
- 
-
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Los agentes titulantes a emplear varían según el ácido a determinar. Por ejemplo, si queremos saber la acidez de ácido oleico utilizaremos hidróxido de potasio (KOH), o si vamos a determinar ácido láctico emplearemos hidróxido de sodio (NaOH). Por ejemplo para el caso de harinas el factor es: H2SO4, que resulta de la presencia de sulfatos, al unirse con el agua forma el ácido sulfúrico. 
- Factor de acidez (en harinas), Ácido sulfúrico: 0.049 
- Factor de acidez (en cítricos),Ácido cítrico: 0.064 
- Factor de acidez (en manzanas),Acido málico: 0.067 
- Factor de acidez (en vinagres), Ácido acético: 0.060 
- Factor de acidez (en uvas),Acido tartárico: 0.075 
- Factor de acidez (en leche), Ácido láctico: 0.09 
Tabla ¡Error! Marcador no definido.. Ácidos predominantes en frutas y hortalizas. 
FRUTA 
ACIDO Manzana Málico 
Cerezas 
Málico. Albaricoques Málico. 
Melocotones 
Predomina con cítrico. Ciruelas Málico. 
Membrillo 
Málico. Durazno Málico. 
Tomate Chonto 
Predomina con cítrico Tomate de árbol Predomina con cítrico 
Banano 
Málico. Mora Málico 
Pitahaya 
Málico Tomates Cítrico. 
Grosellas negras 
Cítrico. Uvas espinas Cítrico. 
“Hucklaberries” 
Cítrico. (variedad de arándano) Cítrico. 
Arándanos agrios 
Predomina con málico. Peras Cítrico. 
Zarzamora. 
Cítrico. Frambuesas Cítrico. 
Fresas 
Cítrico. Pera Cítrico. 
Piña 
Cítrico. Zarzamora Cítrico 
Naranjas 
Cítrico. Limones Cítrico 
Uvas 
Tartárico y málico Higo Tartárico 
(Wills, 1977)
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3.5. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD 
Este ensayo tiene por finalidad, determinar el contenido de humedad de una muestra de suelo.El contenido de humedad de una masa de suelo, esta formado por la suma de sus aguas libre, capilar e higroscópica. 
La importancia del contenido de agua que presenta un suelo representa junto con la cantidad de aire, una de las características más importantes para explicar el comportamiento de este (especialmente en aquellos de textura más fina), como por ejemplo cambios de volumen, cohesión, estabilidad mecánica. 
El método tradicional de determinación de la humedad del suelo en laboratorio, es por medio del secado a horno, donde la humedad de un suelo es la relación expresada en porcentaje entre el peso del agua existente en una determinada masa de suelo y el peso de las partículas sólidas, o sea: ( ) ( ) 
Dónde: 
 
 
 
3.6. DETERMINACIÓN DE CENIZAS 
El término "cenizas de un alimento" es equivalente al residuo inorgánico que queda después de quemar la materia orgánica. La muestra se incinera a 550-600 ºC para eliminar todo el material orgánico. El material inorgánico que no se destruye a esta temperatura se denomina ceniza. Cuando se requiere analizar metales alcalinos, o algún otro elemento volátil a partir de las cenizas, se sugiere la obtención de las cenizas en húmedo, a partir de la digestión de la muestra con ácidos concentrados (nítrico y sulfúrico) y calentamiento. 
Desde el punto de vista nutricional, el registro del valor de las cenizas tiene escaso valor, sin embargo desde el punto de vista analítico, el conocer el valor del material inorgánico total es útil cuando se requiere calcular los carbohidratos «por diferencia», nos brinda información sobre la naturaleza de la muestra, así como sobre algunas adulteraciones presentes en el alimento, y es útil también en la investigación cuantitativa de algunos oligoelementos. ( ) ( )
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IV. MATERIALES Y MÉTODOS. 
4.1. Materiales. 
o Refractómetro de ABBE de mesa y manual. 
o Pipetas, vasos precipitados, mortero, sobrecitos de gasa, embudo, azúcar blanca, termómetro. 
o Baño María. 
o Bombas peristálticas. 
o Muestra: diferentes frutas y aceites. 
4.2. MÉTODO. 
o Uso del instrumento: 
- Chequear el instrumento con agua destilada y el índice de refracción debe ser 1.3330 ºC y 1.33 a 28 ºC. 
- Después de limpiar cuidadosamente el prisma, colocar una gota de sustancia del problema. Debe ser lo suficiente transparente para que se deje pasar la luz. 
o Determinación del índice de refracción de alimentos: 
- Colocar el refractómetro en un lugar iluminado con luz difusa o frente a una luz artificial. 
- Ajustar el instrumento colocando unas gotas de agua destilada entre los dos prismas. El índice de refracción debe ser 1.3330; si no es asi corregir adecuadamente la lectura. 
- Corte la fuente en gajos (en caso de sor solida) e introducirlo en un mortero para obtener el zumo de la fruta. Si fuera necesario use gasa para filtrar. En caso de usar cítricos como la naranja, se puede exprimir por completo. 
- Con auxilio de una pipeta, cucharita o gotero colocar la muestra sobre el prisma del refractómetro. 
- Medir y registrar la concentración de azúcar de la muestra (º brix) y el índice de refracción, siguiendo las instrucciones de funcionamiento del refractómetro utilizando (cada marca y modelo tienen instrucciones específicas). 
- Si se emplea otro temperatura para medir el índice de refracción, utilizar la tabla de corrección para la corrección de temperatura a 20 ºC. 
- Lavar bien la prisma para hacer las demás lecturas.
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INDICE DE REFRACCION Y GRADOS BRIX A DISTINTAS TEMPERATURAS 
Se medirán el índice de Refracción y Grados Brix de la sacarosa a distintas concentraciones (5%, 10%, 20%, 30% y 40%). 
 Se prepararon las soluciones a las distintas concentraciones.
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ºT = 20ºC 
Se calentaron las fiolas a 20ºC aproximadamente mediante el calor transmitido mediante las manos de nuestros compañeros. 
Se controló con un termómetro para asegurarnos que se encuentre a 20ºC. 
Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura 
Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. 
Se utilizó diferentes pipetas para cada concentración a fin de evitar errores en las mediciones.
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Se obtuvieron los siguientes datos: 
TEMPERATURA 20°C concentración °BRIX IR 
5 
4,8 
1,3399 10 9,6 1,3471 
20 
17,6 
1,35995 30 25,4 1,3730 
40 
33,3 
1,3869 
ºT = 60ºC 
Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. 
Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura 
Se puso en contacto con agua caliente y contrlo que no pase de la T de 60ºC 
Para la medida a 60 ºC, se tuvo que llevar a esta temperatura mediante el prisma del refractómetro.
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Se obtuvieron los siguientes datos: TEMPERATURA 60°C concentración °BRIX IR 5 
2,1 
1,3361 10 5,025 1,3430 20 
13,45 
1,35320 30 22,45 1,3673 40 
31,1 
1,3831 
ºT = 7ºC 
Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. 
Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura 
Se controlo con un termómetro manual en cada una de las fiolas cuidando que n pase de 7 ºC 
Para llegar a 7 ºC, se tuvo que colocar las fiolas dentro de un baño María que contenía Hielo
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Se obtuvieron los siguientes datos: TEMPERATURA 7°C concentración °BRIX IR 5 
6,53 
1,3429 10 10,52 1,349 20 
18 
1,3602 30 26,3 1,3745 40 
32,1 
1,389 
ANALISIS PROXIMAL DE LA FRESA Y UVA 
HUMEDAD 
Se pes aprox. 10gr 
Se pes aprox. 10gr 
ESTUFA
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CENIZA 
Se pesaron aprox. 2 gr de muestra en un crisol para cada muestra 
Se cocinó hasta que deje de salir humo de la muestra. 
Colocar en la mufla aprox. Durante 3h.
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PH 
Centrifugamos las muestras 
Machacamos ambas muestras tanto fresa como uva 
Ph(uva)= 3,74 
Ph (fresa)= 3,77
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ACIDEZ 
Gasto 8,3 ml 
Gasto 10 ml
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ºBRIX 
16.5 ºbrix 
10 ºbrix
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Preparamos los siguientes tubos para ser leídos en el espectrofotómetro. 
 I: 10 ml de agua destilada 
 II: 1 ml de ácido oxálico al 0.4 % + 9 ml de solución coloreada. 
 III: 1 ml de E.T Nº 1 + 9 ml de agua destilada 
 IV: 1 ml de E.T Nº 1 + 9 ml de solución coloreada. 
( I ) 
( I I ) 
( I I I ) 
VITAMINA C
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( I V ) 
Se repite el mismos procedimiento para ambas frutas
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V. RESULTADOS. 
Tablas de conversión de unidades de medida 
Densidad Grado Baumé 
Grado Brix Alcohol probable 
Densidad Grado Baumé 
Grado Brix 
Alcohol probable 1000 0 1101 13.23 23.9 14.1 
1001 0.14 
1102 13.34 
24.2 
14.3 1002 0.28 1103 13.46 24.4 14.4 
1003 0.43 
1104 13.58 
24.7 
14.6 1004 0.57 1105 13.69 25.0 14.7 
1005 0.71 
1106 13.81 
25.2 
14.9 1006 0.85 1107 13.93 25.5 15.0 
1007 1.00 
1108 14.05 
25.8 
15.2 1008 1.14 1109 14.16 26.0 15.3 
1009 1.28 
1110 14.28 
26.3 
15.5 1010 1.42 1111 14.40 26.6 15.7 
1011 1.56 
1112 14.52 
26.8 
15.9 1012 1.70 0.20 0.11 1113 14.64 27.1 16.0 
1013 1.84 
0.47 0.23 
1114 14.75 
27.4 
16.2 1014 1.98 0.73 0.43 1115 14.87 27.6 16.3 
1015 2.12 
1.10 0.59 
1116 14.99 
27.9 
16.4 1016 2.27 1.26 0.70 1117 15.11 28.2 16.6 
1017 2.41 
1.53 0.88 
1118 15.23 
28.4 
16.7 1018 2.55 1.80 1.06 1119 15.34 28.7 16.9 
1019 2.68 
2.06 1.18 
1120 15.46 
29.0 
17.1 1020 2.82 2.33 1.35 1121 15.57 29.2 17.3 
1021 2.91 
2.59 1.47 
1122 15.68 
29.5 
17.4 1022 3.10 2.86 1.65 1123 15.80 29.8 17.6 
1023 3.24 
3.13 1.82 
1124 15.91 
30.1 
17.7 1024 3.37 3.39 1.94 1125 16.03 30.3 17.9 
1025 3.51 
3.66 2.21 
1126 16.14 
30.6 
18.0 1026 3.65 3.92 2.30 1127 16.26 30.9 18.2 
1027 3.79 
4.19 2.41 
1128 16.37 
31.1 
18.3 1028 3.92 4.46 2.69 1129 16.48 31.4 18.5 
1029 4.06 
4.72 2.77 
1130 16.60 
31.6 
18.7 1030 4.20 5.00 2.95 1131 16.71 31.9 18.8 
1031 4.33 
5.27 3.06 
1132 16.82 
32.2 
19.0 1032 4.47 5.54 3.24 1133 16.93 32.5 19.1 
1033 4.60 
5.80 3.42 
1134 17.05 
32.7 
19.3 1034 4.74 6.07 3.54 1135 1716 33.0 19.5 
1035 4.88 
63.3 3.71 
1136 17.27 
33.2 
19.6 1036 5.01 6.6 3.7 1137 17.39 33.5 19.8 
1037 5.15 
6.9 4.0 
1138 17.50 
33.8 
19.9 1038 5.28 7.2 4.2 1139 17.61 34.1 20.1
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 22 
1039 5.41 
7.4 4.4 
1140 17.76 
34.3 
20.2 1088 11.67 20.4 12.0 1189 22.95 47.4 27.9 
1089 11.79 
20.7 12.2 
1190 23.05 
47.6 
28.1 1090 11.91 21.0 12.3 1191 23.15 47.9 28.2 
1091 12.03 
21.2 12.5 
1192 23.25 
48.2 
28.4 1092 12.15 21.5 12.6 1193 23.35 48.5 28.6 
1093 12.27 
21.8 12.8 
1194 23.45 
48.7 
28.7 1094 12.39 22.0 12.9 1195 23.55 49.0 28.9 
1095 12.52 
22.3 13.1 
1196 23.65 
49.3 
29.1 1096 12.64 22.6 13.3 1197 23.75 49.5 29.2 
1097 12.76 
22.8 13.4 
1198 23.85 
49.9 
29.4 1098 12.87 23.1 13.6 1199 23.95 50.1 29.5 
1099 12.99 
23.4 13.8 
1200 24.05 
50.3 
29.7 
1100 13.11 
23.6 13.9 
Tablas de corrección de temperatura (grados Brix) 
Temperatura 
º C 
Grados Brix 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 10 
A 
RESTAR 0.50 
0.54 0.58 
0.61 0.64 
0.66 0.68 
070 0.72 
0.73 0.74 
0.75 0.76 
0.78 
0.79 11 0.46 0.46 0.53 0.55 0.58 0.60 0.62 0.64 0.65 0.66 0.67 0.68 0.69 0.70 0.71 12 0.42 
0.45 0.48 
0.50 0.52 
0.54 0.56 
0.57 0.58 
0.59 0.60 
0.61 0.61 
0.63 
0.63 13 0.37 0.40 0.42 0.44 0.46 0.48 0.49 0.50 0.51 0.52 0.53 0.54 0.54 0.55 0.55 14 0.33 
0.35 .037 
0.39 0.40 
0.41 0.42 
0.43 0.44 
0.45 0.45 
0.46 0.46 
0.47 
0.48 15 0.27 0.29 0.31 0.33 0.34 0.34 0.35 0.36 0.37 0.37 0.38 0.39 0.39 0.40 0.40 16 0.22 
0.24 0.25 
0.26 0.27 
0.28 0.28 
0.29 0.29 
0.30 0.30 
0.31 0.31 
0.32 
0.32 17 0.17 0.18 0.19 0.20 0.21 0.21 0.21 0.22 0.22 0.23 0.23 0.23 0.23 0.24 0.24 18 0.12 
0.13 0.13 
0.14 0.14 
0.14 0.14 
0.15 0.15 
0.15 0.15 
0.16 0.16 
0.16 
0.16 19 0.06 0.06 0.06 0.07 0.07 0.07 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 20 
0 
0 0 
0 0 
0 0 
0 0 
0 0 
0 0 
0 
0 21 A SUMAR 0.06 0.07 0.07 0.07 0.07 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 22 0.13 
0.13 0.14 
0.14 0.15 
0.15 0.15 
0.15 0.15 
0.16 0.16 
0.16 0.16 
0.16 
0.16 23 0.19 0.20 0.21 0.22 0.22 0.23 0.23 0.23 0.23 0.24 0.24 0.24 0.24 0.24 0.24 24 0.26 
0.27 0.28 
0.29 0.30 
0.30 0.31 
0.31 0.31 
0.31 0.31 
0.32 0.32 
0.32 
0.32 25 0.33 0.35 0.36 0.37 0.38 0.38 0.39 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 26 0.40 
0.42 0.43 
0.44 0.45 
0.46 0.47 
0.48 0.48 
0.48 0.48 
0.48 0.48 
0.48 
0.48 27 0.48 0.50 0.52 0.53 0.54 0.55 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 28 0.56 
0.57 0.60 
0.61 0.62 
0.63 0.63 
0.64 0.64 
0.64 0.64 
0.64 0.64 
0.64 
0.64 29 0.64 0.66 0.68 0.69 0.71 0.72 0.72 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 30 0.72 
0.74 0.77 
0.78 0.79 
0.80 0.80 
0.81 0.81 
0.81 0.81 
0.81 0.81 
0.81 
0.81
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 23 
o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo A”. 
Primero medimos el porcentaje de grados brix y el índice de refracción para posteriormente corregir de acuerdo a las temperaturas. 
[ ] 
°Bx - 60°C 
IR - 60°C 
°Bx - 20°C 
IR - 20°C 5 2.1 1.3361 4.8 1.3399 
10 
5.025 
1.343 
9.6 
1.3471 20 13.45 1.3532 17.6 1.35995 
30 
22.45 
1.3673 
25.45 
1.3731 40 31.1 1.3831 33.2 1.3869 
Grafica de Grados Brix 
Grafica de índice de refracción. 
y = 0,8422x - 2,8617 R² = 0,9979 
y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 
0 
5 
10 
15 
20 
25 
30 
35 
40 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º BRIX 
[ ] 
°Bx - 60°C 
°Bx - 20°C 
Lineal (°Bx - 60°C) 
Lineal (°Bx - 20°C) 
y = 0,0013x + 1,3289 R² = 0,9938 
y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 
1,33 
1,34 
1,35 
1,36 
1,37 
1,38 
1,39 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º IR 
[ ] 
IR - 60°C 
IR - 20°C 
Lineal (IR - 60°C) 
Lineal (IR - 20°C)
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 24 
o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo A” en este caso ya corrigiendo con la tabla. 
[ ] 
°Bx - 60°C 
IR - 60°C 
°Bx - 20°C 
IR - 20°C 5 4.83 1.3361 4.8 1.3399 
10 
8.185 
1.343 
9.6 
1.3471 20 16.63 1.3532 17.6 1.35995 
30 
25.771 
1.3673 
25.45 
1.3731 40 34.3 1.3831 33.2 1.3869 
Grafica de Grados Brix 
Grafica de índice de refracción. 
y = 0,8533x + 0,0242 R² = 0,9989 
y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 
0 
5 
10 
15 
20 
25 
30 
35 
40 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º BRIX 
[ ] 
°Bx - 60°C 
°Bx - 20°C 
Lineal (°Bx - 60°C) 
Lineal (°Bx - 20°C) 
y = 0,0013x + 1,3289 R² = 0,9938 
y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 
1,33 
1,34 
1,35 
1,36 
1,37 
1,38 
1,39 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º IR 
[ ] 
IR - 60°C 
IR - 20°C 
Lineal (IR - 60°C) 
Lineal (IR - 20°C)
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 25 
o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo B”. 
Primero medimos el porcentaje de grados brix y el índice de refracción para posteriormente corregir de acuerdo a las temperaturas. 
[ ] 
°Bx - 20°C 
IR - 20°C 
°Bx - 7°C 
IR - 7°C 5 4.8 1.3399 6.53 1.3429 
10 
9.6 
1.3471 
10.52 
1.349 20 17.6 1.35995 18 1.3602 
30 
25.45 
1.3731 
26.3 
1.3745 40 33.2 1.3869 32.1 1.389 
Grafica de Grados Brix 
Grafica de índice de refracción. 
y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 
y = 0,742x + 3,109 R² = 0,9968 
0 
5 
10 
15 
20 
25 
30 
35 
40 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º BRIX 
[ ] 
°Bx - 60°C 
°Bx - 7°C 
Lineal (°Bx - 60°C) 
Lineal (°Bx - 7°C) 
y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 
y = 0,0013x + 1,3356 R² = 0,9969 
1,33 
1,34 
1,35 
1,36 
1,37 
1,38 
1,39 
1,4 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º IR 
[ ] 
IR - 20°C 
IR - 7°C 
Lineal (IR - 20°C) 
Lineal (IR - 7°C)
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 26 
o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo B” en este caso ya corrigiendo con la tabla. 
[ ] 
°Bx - 20°C 
IR - 20°C 
°Bx - 7°C 
IR - 7°C 5 4.8 1.3399 5.874 1.3429 
10 
9.6 
1.3471 
9.779 
1.349 20 17.6 1.35995 17.18 1.3602 
30 
25.45 
1.3731 
25.429 
1.3745 40 33.2 1.3869 31.17 1.389 
Grafica de Grados Brix 
Grafica de índice de refracción. 
Para la tabla del cálculo de grados Brix, para calcular los grados brix de cada una de las muestras utilizamos el refractómetro, nos da los valores que comparando con los teóricos son muy próximos. Alguna variación relativamente baja sucede de acuerdo el origen, el tipo y otros. 
y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 
y = 0,7346x + 2,4602 R² = 0,9969 
0 
5 
10 
15 
20 
25 
30 
35 
40 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º BRIX 
[ ] 
°Bx - 20°C 
°Bx - 7°C 
Lineal (°Bx - 20°C) 
Lineal (°Bx - 7°C) 
y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 
y = 0,0013x + 1,3356 R² = 0,9969 
1,33 
1,34 
1,35 
1,36 
1,37 
1,38 
1,39 
1,4 
0 
10 
20 
30 
40 
50 
º IR 
[ ] 
IR - 20°C 
IR - 7°C 
Lineal (IR - 20°C) 
Lineal (IR - 7°C)
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
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o A TRAVÉS DE LOS PROCESO ANTERIORES LO QUE ANALIZAMOS EN CADA PROCESO. 
1) HALLAR CON LOS RESULTADOS DEL GRUPO “B-fresa” 1.1. Determinaciones de la HUMEDAD. 
C= Masa de la muestra después de estar en el horno. 
B= Masa de la muestra recién extraída. 
(B-C)= pérdida de peso de la muestra después del secado 
En el ensayo (1). 
B= 56, 4256g. 
C= 37, 5144g. ( ) ( ) 
1.2. Determinaciones de la CENIZA en base seca. 
En el ensayo (1). 
Peso de la ceniza= 35, 4696g. 
Peso de muestra= 3, 4474g. 
Peso del crisol= 35, 4661g
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PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
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1.3. Observamos el PH y grados BRIX. 
1.4. Observamos la cantidad de vitamina C. 
PARA VITAMINA C L1-L2 
L1 0,2482 
0.0166 
L2 0,2316 
UVA: 
0 
5 
10 
15 
20 
BRIX PH 
16,5 
3,74 
0 
0,1 
0,2 
0,3 
L1 L2 L1-L2 
VITAMINA C 
BRIX 16,50 
PH 3,74 
11.57 ml 
(Zumo) 
1 ml 
(Zumo) 
50ml
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PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 29 
De la uva se obtuvo una absorbancia de 0.0166 (y= 0.0166) Se extrajo 1 ml de zumo de uva, para hacer os cálculos debemos conocer la cantidad en gramos, entonces: 
A esa cantidad de zumo se le aforo a 50 ml con agua destilada, hallamos nuestro factor de dilución: ⁄ 
De la ecuación de la gráfica hallamos [ ], sabien que Y= 0.0166 (Absorbancia) 
[ ] [ ] 0.7956 mg V.C 
Con los valores hallados podemos calcular el % de azúcares reductores (X) en el zumo de naranja haciendo una regla de tres simple: ( ) ( ) ( ) X = 3.7563739 % de vitamina C
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PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
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1.5. Hallamos el % de Acidez 
A= Alícuota en mL de muestra (titulada). 
GB= Gasto de bureta [se mide en] mL. 
N= Normalidad del agente titulante. 
Peq= u.m.a. del ácido de muestra. 
2) HALLAR CON LOS RESULTADOS DEL GRUPO “A” 2.1. Determinaciones de la HUMEDAD. 
C= Masa de la muestra después de estar en el horno. 
B= Masa de la muestra recién extraída. 
(B-C)= pérdida de peso de la muestra después del secado 
En el ensayo (1). 
B= 44, 2367g. 
C= 37, 5803g. ( ) ( ) 
2.2. Determinaciones de la CENIZA en base seca.
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 31 
En el ensayo (1). 
Peso de la ceniza= 35, 0929g. 
Peso de muestra= 3, 1859g. 
Peso del crisol= 35, 0503g 
2.3. Observamos el PH y grados BRIX. 
2.4. Observamos la cantidad de vitamina C. 
PARA VITAMINA C 
L1-L2 L1 0,2545 0.1445 
L2 
0,11 
0 
5 
10 
BRIX 
PH 
10 
3,77 
0 
0,1 
0,2 
0,3 
L1 
L2 
L1-L2 
VITAMINA C 
BRIX 
10 PH 3,77
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 32 
FRESA: 
De la uva se obtuvo una absorbancia de 0.1445 (y= 0.1445) Se extrajo 1 ml de zumo de 
uva, para hacer os cálculos debemos conocer la cantidad en gramos, entonces: 
A esa cantidad de zumo se le aforo a 50 ml con agua destilada, hallamos nuestro factor de 
dilución: 
⁄ 
De la ecuación de la gráfica hallamos [ ], sabien que Y= 0.1445 (Absorbancia) 
[ ] 
[ ] 3.576 mg V.C 
Con los valores hallados podemos calcular el % de azúcares reductores (X) en el zumo de 
naranja haciendo una regla de tres simple: 
( ) ( ) 
( ) 
X =16.75 % de vitamina C 
3.4 ml 
(Zumo) 
1 ml 
(Zumo) 
50ml
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 33 
2.5. Hallamos el % de Acidez 
A= Alícuota en mL de muestra (titulada). 
GB= Gasto de bureta [se mide en] mL. 
N= Normalidad del agente titulante. 
Peq= u.m.a. del ácido de muestra. 
VI. DISCUSIONES: 
 Hay diferentes factores que afectan la determinación de los IR y de los °BRIX de los alimentos, como sabemos que la temperatura es un factor muy importante que afecta en la determinación de los resultados, debido a que siempre actúa como un factor dilatante y hace que la muestra aparezca más grande y por ende su concentración aparezca menor, de eso podemos deducir que a mayor temperatura, menor IR, y lo mismo podemos con la determinación de los °BRIX porque este factor camufla la concentración; La concentración es otro factor muy importante, porque a mayor concentración, mayor IR. 
 Según la teoría, el índice de refracción aumenta con la presión debido al aumento de la densidad. Entonces la muestra analizada en la práctica (jugo de pulp) va a tener casi el mismo valor de ºbrix, solo debido a la variación de la temperatura, ya que puede variar solo si la muestra es sometida a otro tipo de presión. 
 Como sabemos que los refractómetros necesitan de la luz para determinar los IR. Por lo cual durante el uso del refractómetro es importante poner al equipo en una fuente de luz para que facilite su trabajo. 
 El índice de refracción es un número, entre 1,3000 y 1,7000 para la mayoría de los compuestos sobretodo líquidos, y se determina normalmente a la precisión de cinco dígitos. Puesto que el índice de refracción depende de la temperatura de la muestra y de la longitud de onda de la luz utilizada. En los resultados de la práctica ocurrió lo mismo, ya obtuvimos un valor promedio a 20º C de IR =1.361339 lo cual está dentro del rango.
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PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
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 El valor de IR, puede mantenerse puede mantenerse constante si se mantienen estables las condiciones de temperatura y presión además de la longitud de onda de la radiación. 
 El índice de refracción del agua es de 1.361339 y de la fresa (muestra) es de 1,4270 - 1,4470 (R. Bauch Lomb) y como la refracción es una propiedad aditiva, y que cambia con la densidad por lo que la fresa tiene un índice de refracción 1,4270 - 1,4470 que es mayor, esto se debe a los ingredientes utilizados en su preparación pues es un producto trasformado (procesado), contiene mayor concentración de sólidos y los aditivos utilizados varían mucho su contenido en grados Brix e Indice de Refracción. 
 Cuando la densidad de la mezcla disminuye entonces la velocidad del haz de luz aumenta, por lo tanto la velocidad con que se propaga un haz de luz depende de la densidad de la muestra. 
 La vitamina C se encuentra de dos formas, como ácido ascórbico y ácido dehidroascorbico, se utiliza el método de la transformación del ácido ascórbico, este método se utiliza colorante 2,6 dicloroindofenol, y es este la que muestra un máximo de absorción a 540nm. La técnica de análisis, espectrofotometría, es un método muy aceptable, y nos permite determinar con un buen grado de exactitud las absorbancias en las muestras preparadas, así trabajar con curva de calibración para calcular concentraciones de la naranja y otros. 
 Según H. Zumbado, 2002 en su libro titulado análisis químico de los alimentos métodos químicos, hace mención indicando que el análisis gravimétrico involucra dos etapas generales esenciales; primero: la separación del componente que se desea cuantificar y segundo: la pesada exacta y precisa del componente separado. Existen factores que pueden incider en los resultados finales como la que indica la UNAM en el libro titulado análisis de alimentos fundamentos y técnica, en la que indica, La temperatura no es igual en los distintos puntos de la estufa, y a cierta temperatura el alimento es susceptible de descomponerse, con lo que se volatilizan otras sustancias además de agua también pueden perderse otras materias volátiles aparte de agua. podemos afirmas que existen diversos factores que pueden ser parte del error del posible resultado. 
 Según: H. Egan, R.S. Kirk, R. Sawyer: La humedad atmosférica es el peso del vapor de agua contenido en una unidad de peso de aire. Este peso se expresa como un porcentaje del máximo peso de vapor de agua que dicha unidad pueda retener a una temperatura dada, conociéndose este porcentaje como humedad relativa. El que un material cualquiera tienda a secarse a absorber humedad depende de la humedad
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relativa de la atmósfera a la que está expuesto, habiendo para cada sustancia una humedad relativa para la que se alcanza el equilibrio. 
La función de la cobertura es evitar la adsorción del vapor de agua del medio ambiente y proporcionan al cereal un perfil de aroma idóneo. Es decir que el alimento tiene un tiempo de vida útil mayor. 
 Según Harlold E. En Análisis químico de alimentos, nos dice: La ceniza de los alimentos están constituidos por residuo inorgánico que queda después que la materia orgánica se ha quemado. El valor de la ceniza puede considerase como una medida general de la calidad. y a menudo es un criterio útil para determinar la identidad de un alimento. Cuando hay un alto contenido de cenizas se sugiere la presencia de un adulterante inorgánico. 
 Según Leslie F. En Análisis moderna de los alimentos, nos dice: Todos los alimentos contiene elementos minerales formando parte de compuestos orgánicos e inorgánicos, nos dice que es muy difícil determinarlos tal y como se presentan en los alimentos. La incineración para destruir toda la materia orgánica cambia su naturaleza, por ejemplo las sales metálicas de los ácidos orgánicos se convierten en óxidos o cabonatos, el contenido de cenizas. 
Si bien la ceniza de un producto alimentario natural es el residuo inorgánico que queda después de eliminar la materia orgánica. La ceniza obtenida no tiene la misma composición que la materia inorgánica del alimento original, ya que puede haber pérdidas por volatilización entre los elementos que se pueden perder por volatilización tenemos: As, B, Cd, Cr, Fe, Pb, Hg, Ni, P, V, y Zn. Además de las interacciones de los componentes minerales y los crisoles 
 (Kirk et al, 1996) http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1067/1/ManualdeFundamentosyTecnicasdeAnalisisdeAlimentos_6501.pdf 
Los lípidos, junto con las proteínas y carbohidratos, constituyen los principales componentes estructurales de los alimentos. (Nielsen, 1998). Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo de compuestos que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgánicos tales como éter, cloroformo, benceno o acetona. Todos los lípidos contienen carbón, hidrógeno y oxígeno, y algunos también contienen fósforo y nitrógeno (Aurand et al, 1987). Los lípidos comprenden un grupo de sustancias que tienen propiedades comunes y similitudes en la composición, sin embargo algunos, tales como los triacilgliceroles son muy hidrofóbicos. Otros, tales como los di y
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 36 
monoacilgliceroles tienen movilidad hidrofóbica e hidrofílica en su molécula por lo que pueden ser solubles en disolventes relativamente polares (Nielsen, 1998). 
 http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1067/1/ManualdeFundamentosyTecnicasdeAnalisisdeAlimentos_6501.pdf 
Las cenizas de un alimento son un término analítico equivalente al residuo inorgánico que queda después de calcinar la materia orgánica. Las cenizas normalmente, no son las mismas sustancias inorgánicas presentes en el alimento original, debido a las perdidas por volatilización o a las interacciones químicas entre los constituyentes. El valor principal de la determinación de cenizas (y también de las cenizas solubles en agua, la alcalinidad de las cenizas y las cenizas insolubles en ácido) es que supone un método sencillo para determinar la calidad de ciertos alimentos, por ejemplo en las especias y en la gelatina es un inconveniente un alto contenido en cenizas. Las cenizas de los alimentos deberán estar comprendidas entre ciertos valores, lo cual facilitará en parte su identificación. 
VII. CONCLUSIONES. 
 Las determinaciones refractométricas ayudan a determinar concentraciones de sólidos solubles en la muestra (°Brix) y también podemos decir que nos permite identificar productos puros, como sabemos que estos producto puros tienes un rango o una normalización estándar de concentración, y nosotros podemos identificar a estos mediante comparaciones. Si tienen la misma concentración podemos decir que son el mismo producto. 
 Lo mismo sucede con el IR, porque cada producto tiene un IR y también permite determinar la calidad de los productos, por ejemplo: aquellos productos que nos son puros el IR va a variar y de esto podemos decir que el producto haya sido alterado y por consiguiente sea de mala calidad. 
 Aprendimos a manipular nuevas equipos que recién estamos conociendo y que nos servirán mucho más adelante en el transcurso de la carrera. 
 La medición del índice de refracción es una herramienta útil para medirla concentración de una mezcla binaria. La concentración y el índice de refracción son directamente proporcional. 
 El índice de refracción y la temperatura son inversamente proporcional. 
 La Refractometría permite determinar la concentración de una solución.
COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE 
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES 
MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 37 
 La Refractometría y los ºBrix son buenos indicadores de la calidad de un producto. 
 Como futuros ingenieros agroindustriales para obtener una buena calidad nutritiva de un producto debemos evitar la degradación de la vitamina C; que es muy importante para nuestro organismo. 
 Se complementó satisfactoriamente nuestros conocimientos en clase con la práctica ejecutada; y pudimos ver la linealidad de los equipos y los contenidos de vitamina C en 2 concentraciones. 
VIII. BIBLIOGRAFÍA. 
 Frank Bradleey Armstrong, Thomas Peter Bennett BIOQUIMICA (1982) pag.163-165. 
 http://es.scribd.com/doc/51664602/En-el-laboratorio-de-pruebas-cualitativaspara- carbohidrato-podemos-analizar-barios-cosas 
 http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:Xik40D7C3DoJ:www.cursos. ucv.cl/qui34302/XLaboratorios/Laboratorio1REVGuia03.doc+&cd=5&hl=es&ct=clnk&gl=pe 
 QUAM: 2000.P1. (2000). EURACHEM/CITAC Guide. Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement. Second edition. 
 http://fisica.udea.edu.co/~labgicm/Laboratorio%20Fisica%202_2011/2011_Practica%20no%20linealidad.pdf 
 http://inta.gob.ar/documentos/guia-para-la-verificacion-de-espectofotometros-uv- visible-utilizados-en-el-analisis-de-suelo-y agua/at_multi_download/file/Guia_espectrofot%C3%B3metros_UV.pdf 
 http://es.slideshare.net/jestval/actividad-experimental-no-11 
 http://www.lacomet.go.cr/documentosweb/quimica/2011/Publicaciones/sandra.pdf.

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Determinación de sólidos solubles en alimentos

  • 1. "AÑO DE LA PROMOCIÓN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y DEL COMPROMISO CLIMÁTICO" “DETERMINACIÓN DE SÓLIDOS SOLUBLES EN ALIMENTOS.” CURSO: Análisis instrumental de productos Agroind. CICLO: VI DOCENTE: ING. RODRIGUEZ PAUCAR GILBERT NILO INTEGRANTES:  MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela.  VEGA VIERA, Jhonas Abner. FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL NUEVO CHIMBOTE - PERÚ
  • 2. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 2 I. INTRODUCCIÓN. La refractometria se basa en los cambios del índice de refracción que sufre una sustancia cuando otra es disuelta en ella. Si consideramos el jugo de frutas como una sustancia constituida por agua, su índice de refracción será mayor cuando mayor sea la cantidad de azúcar presente en ella. Existe diversos instrumentos que miden esta variación, pero el más útil para nuestros fines es el refractómetro. Este consiste de un tubo con un prisma en su interior que dirige el rayo de luz incidente hacia una escala observable en un ocular. Al colocar una muestra liquida sobre el prisma (dos o tres gotas), esta ocasiona una desviación proporcional a la cantidad de solidos solubles disueltos. Esta desviación es leída en la escala como porcentaje de azúcar, conocida también como grados brix. II. OBJETIVO  Determinar los grados Brix de un alimento. Determinar el porcentaje de sólidos solubles, la cantidad de vitamina C.  Conocer el fundamento de uso del instrumento y la determinación del índice de refracción.  Determinar el contenido de solidos solubles en los alimentos.  Establecer relaciones tabulares o graficas entre concentración y grados brix, solidos solubles, solidos totales. III. FUNDAMENTÓ TEÓRICO 3.1. DETERMINACIÓN DE AZUCARES (GRADOS BRIX). Los grados Brix miden la cantidad de sólidos solubles presentes en un jugo o pulpa expresados en porcentaje de sacarosa. Los sólidos solubles están compuestos por los azúcares, ácidos, sales y demás compuestos solubles en agua presentes en los jugos de las células de una fruta. Se determinan empleando un refractómetro calibrado y a 20 ºC. Si la pulpa o jugo se hallan a diferente temperatura se podrá realizar un ajuste en ºBrix, según la temperatura en que se realice la lectura. - Determinación en zumo de uva. La medida de los sólidos solubles totales en el zumo de uva da una indicación bastante buena del contenido en azúcares, ya que los azúcares representan sobre el 90- 94% de los
  • 3. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 3 sólidos totales solubles. Los azúcares predominantes en el mosto son glucosa y fructosa (ambos azúcares reductores) y una pequeña cantidad de sacarosa (no reductor). Los sólidos solubles totales son determinados mediante métodos físicos como hidrometría, picnometría y refractometría. Los densímetros (basados en que un objeto colocado en un líquido desplaza un volumen de líquido igual a su propio peso) dan una medida del peso específico de la disolución, lo cual está relacionado con el contenido total de sólidos solubles en esa disolución. Las escalas en que pueden encontrarse son: a. "'Brix: % en peso; l0Brix = 1 gramo de azúcar por 100 gramos de disolución. b. "'Baumé: su definición no es fácil, pero es muy práctico 1º Baumé de azúcar en el zumo producirá aproximadamente 1%(v/v) de alcohol si el vino es fermentado hasta quedar seco. c. Peso específico: es el peso de 1 ml de disolución dividido entre el peso de l ml de agua destilada a 20 ºC. Durante la fermentación, el azúcar se transforma en alcohol. Este alcohol formado afecta a la lectura del densímetro ya que se reduce el peso específico de la disolución. La finalización de la fermentación se observa por el valor constante de la densidad con el tiempo (rango entre 0,990-1,000). Una medida exacta de la concentración de azúcar solamente puede ser obtenida mediante métodos de análisis químicos, por ejemplo el método Rebelein. 3.2. REFRACTÓMETROS - Refractómetro de Abbé: Aparece un esquema que muestra dos prismas articulados entre los cuales se coloca la muestra. Por el centro de los prismas pasa un eje que permite mover el prisma de refracción P2 y así medir a en una escala graduada que es proyectada en el ocular y que se gradúa en unidades de nD hasta 0,001. El amplificador permite determinar la siguiente cifra, 0,0001. Se miden índices entre 1,3 y 1,7. Los denominados compensadores están formados por unos prismas (prismas de Amici), y permiten utilizar luz blanca como fuente. Estos prismas de vidrio permiten dispersar todas las longitudes de onda excepto el color amarillo en le vecindad de la línea D del sodio, que es la única que atraviesa el prisma. Es decir, actúa como un monocromador, pero la resolución no es perfecta.
  • 4. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 4 - Aplicaciones Para monitorizar la pureza del butadieno y estireno para la fabricación del caucho. Los índices de estos ingredientes son 1,5434 y 1,4120, respectivamente. Un cambio de 0.1% es detectable por refractometría. En la industria alimentaria para la semilla de soja o del aceite de semilla de algodón con índices de 1,47. El producto final para producir margarina tiene 1,43. Otras aplicaciones se relacionan con la variación de la concentración de disoluciones. Así, la concentración en azúcar, salmueras y ácidos es fácil de seguir mediante refractometría. Por ejemplo, el índice de refracción de una disolución de sacarosa aumenta 0,0002 unidades por un incremento de la concentración de 0,1%. También se detectan cambios de 0,02% en la concentración de ácido nítrico por el mismo procedimiento, e incluso más sensibilidad se puede conseguir en las medidas de las concentraciones de ácido sulfúrico.
  • 5. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 5 3.2.1. Factores que afectan la medición del índice de refracción. A. Temperatura: es una medida de cambios de densidad. La temperatura debe ser controlada para poder obtener mediciones precisas de índice de refracción. Para el líquido mediante las fluctuaciones de la temperatura deben ser menores de 0.2ºC, si se requiere presión de cuatro decimales. En general un aumento de (T), disminuye la densidad y el índice de refracción, el índice de refracción pueden ser corregido en muestras de grasa y aceites por temperatura, usando las siguientes ecuaciones: ( ) ( ) B. Presión: en general para los líquidos un aumento en la presión aumenta la densidad y por ende aumenta el índice de refracción. En los gases el efecto es más pronunciado y para solidos es aún menos que los líquidos. La variación en la presión atmosférica solo es importante para trabajar con gases. ( ) ( ) C. Longitud de onda: el índice de refracción en un medio transparente disminuye gradualmente al aumentar la longitud de onda (Aumento de longitud de onda, disminuye el índice de refracción). 3.3. Aplicaciones de Refractometria. A. Cualitativamente.  Para describir (Identificar y Caracterizar) una especie química por ejemplo aceites y grasas.  En la identificación de sustancias desconocidas por comparación con valores tabulados en la literatura.  En la identificación de compuestos puros, correlacionado con los puntos de ebullición y fusión B. Cuantitativamente.  Para medir la pureza de un compuesto  Evaluación de calidad en grasas y aceites  Control de procesos de hidrogenación
  • 6. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 6  Determinación de sólidos solubles en frutas y productos de frutas tales como jaleas, mermeladas, néctares, pulpas, etc.  Determinar la concentración de soluciones acuosas de azúcar (da concentración total de carbohidratos)  Determinación de sólidos totales en productos de tomates, jugos cítricos, proteínas, huevos, leche, y productos lácteos, cerveza, vinagre, alcohol.  Cálculo de la densidad a partir de valores de “r” tabulados  Determinación cuantitativa del contenido de agua en miel  Para determinar el extracto de alimentos que esté formado principalmente por azúcar (sacarosa), como los es el caso de las confituras, miel, jarabe de almidón, zumos etc.  Evaluar la composición de un líquido binario o una mezcla gaseosa  Determinación de concentraciones de azufre en caucho no vulcanizado  Para evaluar aparatos y métodos para separaciones como destilación, extracción, Cromatografía de adsorción y difusión. 3.4. PORCENTAJE DE ACIDEZ El porcentaje de acidez se define como la cantidad de ácido predominante en las frutas. Algunos de los ácidos que se encuentran más comúnmente son: - Ácido cítrico. - Ácido málico. - Ácido ascórbico (vitamina C). - Ácido oxálico. - Ácido chikimico. - Ácido acético. - Ácido tartárico. La acidez de una sustancia se puede determinar por métodos volumétricos, es decir, midiendo los volúmenes. Ésta medición se realiza mediante una titulación, la cual implica siempre tres agentes o medios: el titulante, el titulado y el colorante. Cuando un ácido y una base reaccionan, se produce una reacción; reacción que se puede observar con un colorante. Un ejemplo de colorante, y el más común, es la fenolftaleína (C20H14O4), que vira (cambia) de color a rosa cuando se en cuentra presente una reacción ácido-base. El agente titulante es una base, y el agente titulado es el ácido o la sustancia que contiene el ácido. Se emplea entonces la siguiente fórmula: Donde: - - - -
  • 7. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 7 Los agentes titulantes a emplear varían según el ácido a determinar. Por ejemplo, si queremos saber la acidez de ácido oleico utilizaremos hidróxido de potasio (KOH), o si vamos a determinar ácido láctico emplearemos hidróxido de sodio (NaOH). Por ejemplo para el caso de harinas el factor es: H2SO4, que resulta de la presencia de sulfatos, al unirse con el agua forma el ácido sulfúrico. - Factor de acidez (en harinas), Ácido sulfúrico: 0.049 - Factor de acidez (en cítricos),Ácido cítrico: 0.064 - Factor de acidez (en manzanas),Acido málico: 0.067 - Factor de acidez (en vinagres), Ácido acético: 0.060 - Factor de acidez (en uvas),Acido tartárico: 0.075 - Factor de acidez (en leche), Ácido láctico: 0.09 Tabla ¡Error! Marcador no definido.. Ácidos predominantes en frutas y hortalizas. FRUTA ACIDO Manzana Málico Cerezas Málico. Albaricoques Málico. Melocotones Predomina con cítrico. Ciruelas Málico. Membrillo Málico. Durazno Málico. Tomate Chonto Predomina con cítrico Tomate de árbol Predomina con cítrico Banano Málico. Mora Málico Pitahaya Málico Tomates Cítrico. Grosellas negras Cítrico. Uvas espinas Cítrico. “Hucklaberries” Cítrico. (variedad de arándano) Cítrico. Arándanos agrios Predomina con málico. Peras Cítrico. Zarzamora. Cítrico. Frambuesas Cítrico. Fresas Cítrico. Pera Cítrico. Piña Cítrico. Zarzamora Cítrico Naranjas Cítrico. Limones Cítrico Uvas Tartárico y málico Higo Tartárico (Wills, 1977)
  • 8. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 8 3.5. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD Este ensayo tiene por finalidad, determinar el contenido de humedad de una muestra de suelo.El contenido de humedad de una masa de suelo, esta formado por la suma de sus aguas libre, capilar e higroscópica. La importancia del contenido de agua que presenta un suelo representa junto con la cantidad de aire, una de las características más importantes para explicar el comportamiento de este (especialmente en aquellos de textura más fina), como por ejemplo cambios de volumen, cohesión, estabilidad mecánica. El método tradicional de determinación de la humedad del suelo en laboratorio, es por medio del secado a horno, donde la humedad de un suelo es la relación expresada en porcentaje entre el peso del agua existente en una determinada masa de suelo y el peso de las partículas sólidas, o sea: ( ) ( ) Dónde:    3.6. DETERMINACIÓN DE CENIZAS El término "cenizas de un alimento" es equivalente al residuo inorgánico que queda después de quemar la materia orgánica. La muestra se incinera a 550-600 ºC para eliminar todo el material orgánico. El material inorgánico que no se destruye a esta temperatura se denomina ceniza. Cuando se requiere analizar metales alcalinos, o algún otro elemento volátil a partir de las cenizas, se sugiere la obtención de las cenizas en húmedo, a partir de la digestión de la muestra con ácidos concentrados (nítrico y sulfúrico) y calentamiento. Desde el punto de vista nutricional, el registro del valor de las cenizas tiene escaso valor, sin embargo desde el punto de vista analítico, el conocer el valor del material inorgánico total es útil cuando se requiere calcular los carbohidratos «por diferencia», nos brinda información sobre la naturaleza de la muestra, así como sobre algunas adulteraciones presentes en el alimento, y es útil también en la investigación cuantitativa de algunos oligoelementos. ( ) ( )
  • 9. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 9 IV. MATERIALES Y MÉTODOS. 4.1. Materiales. o Refractómetro de ABBE de mesa y manual. o Pipetas, vasos precipitados, mortero, sobrecitos de gasa, embudo, azúcar blanca, termómetro. o Baño María. o Bombas peristálticas. o Muestra: diferentes frutas y aceites. 4.2. MÉTODO. o Uso del instrumento: - Chequear el instrumento con agua destilada y el índice de refracción debe ser 1.3330 ºC y 1.33 a 28 ºC. - Después de limpiar cuidadosamente el prisma, colocar una gota de sustancia del problema. Debe ser lo suficiente transparente para que se deje pasar la luz. o Determinación del índice de refracción de alimentos: - Colocar el refractómetro en un lugar iluminado con luz difusa o frente a una luz artificial. - Ajustar el instrumento colocando unas gotas de agua destilada entre los dos prismas. El índice de refracción debe ser 1.3330; si no es asi corregir adecuadamente la lectura. - Corte la fuente en gajos (en caso de sor solida) e introducirlo en un mortero para obtener el zumo de la fruta. Si fuera necesario use gasa para filtrar. En caso de usar cítricos como la naranja, se puede exprimir por completo. - Con auxilio de una pipeta, cucharita o gotero colocar la muestra sobre el prisma del refractómetro. - Medir y registrar la concentración de azúcar de la muestra (º brix) y el índice de refracción, siguiendo las instrucciones de funcionamiento del refractómetro utilizando (cada marca y modelo tienen instrucciones específicas). - Si se emplea otro temperatura para medir el índice de refracción, utilizar la tabla de corrección para la corrección de temperatura a 20 ºC. - Lavar bien la prisma para hacer las demás lecturas.
  • 10. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 10 INDICE DE REFRACCION Y GRADOS BRIX A DISTINTAS TEMPERATURAS Se medirán el índice de Refracción y Grados Brix de la sacarosa a distintas concentraciones (5%, 10%, 20%, 30% y 40%).  Se prepararon las soluciones a las distintas concentraciones.
  • 11. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 11 ºT = 20ºC Se calentaron las fiolas a 20ºC aproximadamente mediante el calor transmitido mediante las manos de nuestros compañeros. Se controló con un termómetro para asegurarnos que se encuentre a 20ºC. Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. Se utilizó diferentes pipetas para cada concentración a fin de evitar errores en las mediciones.
  • 12. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 12 Se obtuvieron los siguientes datos: TEMPERATURA 20°C concentración °BRIX IR 5 4,8 1,3399 10 9,6 1,3471 20 17,6 1,35995 30 25,4 1,3730 40 33,3 1,3869 ºT = 60ºC Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura Se puso en contacto con agua caliente y contrlo que no pase de la T de 60ºC Para la medida a 60 ºC, se tuvo que llevar a esta temperatura mediante el prisma del refractómetro.
  • 13. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 13 Se obtuvieron los siguientes datos: TEMPERATURA 60°C concentración °BRIX IR 5 2,1 1,3361 10 5,025 1,3430 20 13,45 1,35320 30 22,45 1,3673 40 31,1 1,3831 ºT = 7ºC Se limpió el prisma del equipo para la media de cada concentración para evitar contaminación. Se midieron (I.R y ºBx) uno a uno el contenido de cada fiola, verificando siempre la temperatura Se controlo con un termómetro manual en cada una de las fiolas cuidando que n pase de 7 ºC Para llegar a 7 ºC, se tuvo que colocar las fiolas dentro de un baño María que contenía Hielo
  • 14. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 14 Se obtuvieron los siguientes datos: TEMPERATURA 7°C concentración °BRIX IR 5 6,53 1,3429 10 10,52 1,349 20 18 1,3602 30 26,3 1,3745 40 32,1 1,389 ANALISIS PROXIMAL DE LA FRESA Y UVA HUMEDAD Se pes aprox. 10gr Se pes aprox. 10gr ESTUFA
  • 15. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 15 CENIZA Se pesaron aprox. 2 gr de muestra en un crisol para cada muestra Se cocinó hasta que deje de salir humo de la muestra. Colocar en la mufla aprox. Durante 3h.
  • 16. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 16 PH Centrifugamos las muestras Machacamos ambas muestras tanto fresa como uva Ph(uva)= 3,74 Ph (fresa)= 3,77
  • 17. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 17 ACIDEZ Gasto 8,3 ml Gasto 10 ml
  • 18. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 18 ºBRIX 16.5 ºbrix 10 ºbrix
  • 19. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 19 Preparamos los siguientes tubos para ser leídos en el espectrofotómetro.  I: 10 ml de agua destilada  II: 1 ml de ácido oxálico al 0.4 % + 9 ml de solución coloreada.  III: 1 ml de E.T Nº 1 + 9 ml de agua destilada  IV: 1 ml de E.T Nº 1 + 9 ml de solución coloreada. ( I ) ( I I ) ( I I I ) VITAMINA C
  • 20. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 20 ( I V ) Se repite el mismos procedimiento para ambas frutas
  • 21. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 21 V. RESULTADOS. Tablas de conversión de unidades de medida Densidad Grado Baumé Grado Brix Alcohol probable Densidad Grado Baumé Grado Brix Alcohol probable 1000 0 1101 13.23 23.9 14.1 1001 0.14 1102 13.34 24.2 14.3 1002 0.28 1103 13.46 24.4 14.4 1003 0.43 1104 13.58 24.7 14.6 1004 0.57 1105 13.69 25.0 14.7 1005 0.71 1106 13.81 25.2 14.9 1006 0.85 1107 13.93 25.5 15.0 1007 1.00 1108 14.05 25.8 15.2 1008 1.14 1109 14.16 26.0 15.3 1009 1.28 1110 14.28 26.3 15.5 1010 1.42 1111 14.40 26.6 15.7 1011 1.56 1112 14.52 26.8 15.9 1012 1.70 0.20 0.11 1113 14.64 27.1 16.0 1013 1.84 0.47 0.23 1114 14.75 27.4 16.2 1014 1.98 0.73 0.43 1115 14.87 27.6 16.3 1015 2.12 1.10 0.59 1116 14.99 27.9 16.4 1016 2.27 1.26 0.70 1117 15.11 28.2 16.6 1017 2.41 1.53 0.88 1118 15.23 28.4 16.7 1018 2.55 1.80 1.06 1119 15.34 28.7 16.9 1019 2.68 2.06 1.18 1120 15.46 29.0 17.1 1020 2.82 2.33 1.35 1121 15.57 29.2 17.3 1021 2.91 2.59 1.47 1122 15.68 29.5 17.4 1022 3.10 2.86 1.65 1123 15.80 29.8 17.6 1023 3.24 3.13 1.82 1124 15.91 30.1 17.7 1024 3.37 3.39 1.94 1125 16.03 30.3 17.9 1025 3.51 3.66 2.21 1126 16.14 30.6 18.0 1026 3.65 3.92 2.30 1127 16.26 30.9 18.2 1027 3.79 4.19 2.41 1128 16.37 31.1 18.3 1028 3.92 4.46 2.69 1129 16.48 31.4 18.5 1029 4.06 4.72 2.77 1130 16.60 31.6 18.7 1030 4.20 5.00 2.95 1131 16.71 31.9 18.8 1031 4.33 5.27 3.06 1132 16.82 32.2 19.0 1032 4.47 5.54 3.24 1133 16.93 32.5 19.1 1033 4.60 5.80 3.42 1134 17.05 32.7 19.3 1034 4.74 6.07 3.54 1135 1716 33.0 19.5 1035 4.88 63.3 3.71 1136 17.27 33.2 19.6 1036 5.01 6.6 3.7 1137 17.39 33.5 19.8 1037 5.15 6.9 4.0 1138 17.50 33.8 19.9 1038 5.28 7.2 4.2 1139 17.61 34.1 20.1
  • 22. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 22 1039 5.41 7.4 4.4 1140 17.76 34.3 20.2 1088 11.67 20.4 12.0 1189 22.95 47.4 27.9 1089 11.79 20.7 12.2 1190 23.05 47.6 28.1 1090 11.91 21.0 12.3 1191 23.15 47.9 28.2 1091 12.03 21.2 12.5 1192 23.25 48.2 28.4 1092 12.15 21.5 12.6 1193 23.35 48.5 28.6 1093 12.27 21.8 12.8 1194 23.45 48.7 28.7 1094 12.39 22.0 12.9 1195 23.55 49.0 28.9 1095 12.52 22.3 13.1 1196 23.65 49.3 29.1 1096 12.64 22.6 13.3 1197 23.75 49.5 29.2 1097 12.76 22.8 13.4 1198 23.85 49.9 29.4 1098 12.87 23.1 13.6 1199 23.95 50.1 29.5 1099 12.99 23.4 13.8 1200 24.05 50.3 29.7 1100 13.11 23.6 13.9 Tablas de corrección de temperatura (grados Brix) Temperatura º C Grados Brix 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 10 A RESTAR 0.50 0.54 0.58 0.61 0.64 0.66 0.68 070 0.72 0.73 0.74 0.75 0.76 0.78 0.79 11 0.46 0.46 0.53 0.55 0.58 0.60 0.62 0.64 0.65 0.66 0.67 0.68 0.69 0.70 0.71 12 0.42 0.45 0.48 0.50 0.52 0.54 0.56 0.57 0.58 0.59 0.60 0.61 0.61 0.63 0.63 13 0.37 0.40 0.42 0.44 0.46 0.48 0.49 0.50 0.51 0.52 0.53 0.54 0.54 0.55 0.55 14 0.33 0.35 .037 0.39 0.40 0.41 0.42 0.43 0.44 0.45 0.45 0.46 0.46 0.47 0.48 15 0.27 0.29 0.31 0.33 0.34 0.34 0.35 0.36 0.37 0.37 0.38 0.39 0.39 0.40 0.40 16 0.22 0.24 0.25 0.26 0.27 0.28 0.28 0.29 0.29 0.30 0.30 0.31 0.31 0.32 0.32 17 0.17 0.18 0.19 0.20 0.21 0.21 0.21 0.22 0.22 0.23 0.23 0.23 0.23 0.24 0.24 18 0.12 0.13 0.13 0.14 0.14 0.14 0.14 0.15 0.15 0.15 0.15 0.16 0.16 0.16 0.16 19 0.06 0.06 0.06 0.07 0.07 0.07 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 21 A SUMAR 0.06 0.07 0.07 0.07 0.07 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 0.08 22 0.13 0.13 0.14 0.14 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 23 0.19 0.20 0.21 0.22 0.22 0.23 0.23 0.23 0.23 0.24 0.24 0.24 0.24 0.24 0.24 24 0.26 0.27 0.28 0.29 0.30 0.30 0.31 0.31 0.31 0.31 0.31 0.32 0.32 0.32 0.32 25 0.33 0.35 0.36 0.37 0.38 0.38 0.39 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 26 0.40 0.42 0.43 0.44 0.45 0.46 0.47 0.48 0.48 0.48 0.48 0.48 0.48 0.48 0.48 27 0.48 0.50 0.52 0.53 0.54 0.55 0.55 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 0.56 28 0.56 0.57 0.60 0.61 0.62 0.63 0.63 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 0.64 29 0.64 0.66 0.68 0.69 0.71 0.72 0.72 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 0.73 30 0.72 0.74 0.77 0.78 0.79 0.80 0.80 0.81 0.81 0.81 0.81 0.81 0.81 0.81 0.81
  • 23. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 23 o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo A”. Primero medimos el porcentaje de grados brix y el índice de refracción para posteriormente corregir de acuerdo a las temperaturas. [ ] °Bx - 60°C IR - 60°C °Bx - 20°C IR - 20°C 5 2.1 1.3361 4.8 1.3399 10 5.025 1.343 9.6 1.3471 20 13.45 1.3532 17.6 1.35995 30 22.45 1.3673 25.45 1.3731 40 31.1 1.3831 33.2 1.3869 Grafica de Grados Brix Grafica de índice de refracción. y = 0,8422x - 2,8617 R² = 0,9979 y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 10 20 30 40 50 º BRIX [ ] °Bx - 60°C °Bx - 20°C Lineal (°Bx - 60°C) Lineal (°Bx - 20°C) y = 0,0013x + 1,3289 R² = 0,9938 y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 1,33 1,34 1,35 1,36 1,37 1,38 1,39 0 10 20 30 40 50 º IR [ ] IR - 60°C IR - 20°C Lineal (IR - 60°C) Lineal (IR - 20°C)
  • 24. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 24 o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo A” en este caso ya corrigiendo con la tabla. [ ] °Bx - 60°C IR - 60°C °Bx - 20°C IR - 20°C 5 4.83 1.3361 4.8 1.3399 10 8.185 1.343 9.6 1.3471 20 16.63 1.3532 17.6 1.35995 30 25.771 1.3673 25.45 1.3731 40 34.3 1.3831 33.2 1.3869 Grafica de Grados Brix Grafica de índice de refracción. y = 0,8533x + 0,0242 R² = 0,9989 y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 10 20 30 40 50 º BRIX [ ] °Bx - 60°C °Bx - 20°C Lineal (°Bx - 60°C) Lineal (°Bx - 20°C) y = 0,0013x + 1,3289 R² = 0,9938 y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 1,33 1,34 1,35 1,36 1,37 1,38 1,39 0 10 20 30 40 50 º IR [ ] IR - 60°C IR - 20°C Lineal (IR - 60°C) Lineal (IR - 20°C)
  • 25. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 25 o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo B”. Primero medimos el porcentaje de grados brix y el índice de refracción para posteriormente corregir de acuerdo a las temperaturas. [ ] °Bx - 20°C IR - 20°C °Bx - 7°C IR - 7°C 5 4.8 1.3399 6.53 1.3429 10 9.6 1.3471 10.52 1.349 20 17.6 1.35995 18 1.3602 30 25.45 1.3731 26.3 1.3745 40 33.2 1.3869 32.1 1.389 Grafica de Grados Brix Grafica de índice de refracción. y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 y = 0,742x + 3,109 R² = 0,9968 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 10 20 30 40 50 º BRIX [ ] °Bx - 60°C °Bx - 7°C Lineal (°Bx - 60°C) Lineal (°Bx - 7°C) y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 y = 0,0013x + 1,3356 R² = 0,9969 1,33 1,34 1,35 1,36 1,37 1,38 1,39 1,4 0 10 20 30 40 50 º IR [ ] IR - 20°C IR - 7°C Lineal (IR - 20°C) Lineal (IR - 7°C)
  • 26. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 26 o Calculo de Grados ºBrix y Índice de refracción “Grupo B” en este caso ya corrigiendo con la tabla. [ ] °Bx - 20°C IR - 20°C °Bx - 7°C IR - 7°C 5 4.8 1.3399 5.874 1.3429 10 9.6 1.3471 9.779 1.349 20 17.6 1.35995 17.18 1.3602 30 25.45 1.3731 25.429 1.3745 40 33.2 1.3869 31.17 1.389 Grafica de Grados Brix Grafica de índice de refracción. Para la tabla del cálculo de grados Brix, para calcular los grados brix de cada una de las muestras utilizamos el refractómetro, nos da los valores que comparando con los teóricos son muy próximos. Alguna variación relativamente baja sucede de acuerdo el origen, el tipo y otros. y = 0,8047x + 1,2314 R² = 0,9992 y = 0,7346x + 2,4602 R² = 0,9969 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 10 20 30 40 50 º BRIX [ ] °Bx - 20°C °Bx - 7°C Lineal (°Bx - 20°C) Lineal (°Bx - 7°C) y = 0,0013x + 1,3334 R² = 0,9998 y = 0,0013x + 1,3356 R² = 0,9969 1,33 1,34 1,35 1,36 1,37 1,38 1,39 1,4 0 10 20 30 40 50 º IR [ ] IR - 20°C IR - 7°C Lineal (IR - 20°C) Lineal (IR - 7°C)
  • 27. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 27 o A TRAVÉS DE LOS PROCESO ANTERIORES LO QUE ANALIZAMOS EN CADA PROCESO. 1) HALLAR CON LOS RESULTADOS DEL GRUPO “B-fresa” 1.1. Determinaciones de la HUMEDAD. C= Masa de la muestra después de estar en el horno. B= Masa de la muestra recién extraída. (B-C)= pérdida de peso de la muestra después del secado En el ensayo (1). B= 56, 4256g. C= 37, 5144g. ( ) ( ) 1.2. Determinaciones de la CENIZA en base seca. En el ensayo (1). Peso de la ceniza= 35, 4696g. Peso de muestra= 3, 4474g. Peso del crisol= 35, 4661g
  • 28. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 28 1.3. Observamos el PH y grados BRIX. 1.4. Observamos la cantidad de vitamina C. PARA VITAMINA C L1-L2 L1 0,2482 0.0166 L2 0,2316 UVA: 0 5 10 15 20 BRIX PH 16,5 3,74 0 0,1 0,2 0,3 L1 L2 L1-L2 VITAMINA C BRIX 16,50 PH 3,74 11.57 ml (Zumo) 1 ml (Zumo) 50ml
  • 29. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 29 De la uva se obtuvo una absorbancia de 0.0166 (y= 0.0166) Se extrajo 1 ml de zumo de uva, para hacer os cálculos debemos conocer la cantidad en gramos, entonces: A esa cantidad de zumo se le aforo a 50 ml con agua destilada, hallamos nuestro factor de dilución: ⁄ De la ecuación de la gráfica hallamos [ ], sabien que Y= 0.0166 (Absorbancia) [ ] [ ] 0.7956 mg V.C Con los valores hallados podemos calcular el % de azúcares reductores (X) en el zumo de naranja haciendo una regla de tres simple: ( ) ( ) ( ) X = 3.7563739 % de vitamina C
  • 30. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 30 1.5. Hallamos el % de Acidez A= Alícuota en mL de muestra (titulada). GB= Gasto de bureta [se mide en] mL. N= Normalidad del agente titulante. Peq= u.m.a. del ácido de muestra. 2) HALLAR CON LOS RESULTADOS DEL GRUPO “A” 2.1. Determinaciones de la HUMEDAD. C= Masa de la muestra después de estar en el horno. B= Masa de la muestra recién extraída. (B-C)= pérdida de peso de la muestra después del secado En el ensayo (1). B= 44, 2367g. C= 37, 5803g. ( ) ( ) 2.2. Determinaciones de la CENIZA en base seca.
  • 31. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 31 En el ensayo (1). Peso de la ceniza= 35, 0929g. Peso de muestra= 3, 1859g. Peso del crisol= 35, 0503g 2.3. Observamos el PH y grados BRIX. 2.4. Observamos la cantidad de vitamina C. PARA VITAMINA C L1-L2 L1 0,2545 0.1445 L2 0,11 0 5 10 BRIX PH 10 3,77 0 0,1 0,2 0,3 L1 L2 L1-L2 VITAMINA C BRIX 10 PH 3,77
  • 32. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 32 FRESA: De la uva se obtuvo una absorbancia de 0.1445 (y= 0.1445) Se extrajo 1 ml de zumo de uva, para hacer os cálculos debemos conocer la cantidad en gramos, entonces: A esa cantidad de zumo se le aforo a 50 ml con agua destilada, hallamos nuestro factor de dilución: ⁄ De la ecuación de la gráfica hallamos [ ], sabien que Y= 0.1445 (Absorbancia) [ ] [ ] 3.576 mg V.C Con los valores hallados podemos calcular el % de azúcares reductores (X) en el zumo de naranja haciendo una regla de tres simple: ( ) ( ) ( ) X =16.75 % de vitamina C 3.4 ml (Zumo) 1 ml (Zumo) 50ml
  • 33. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 33 2.5. Hallamos el % de Acidez A= Alícuota en mL de muestra (titulada). GB= Gasto de bureta [se mide en] mL. N= Normalidad del agente titulante. Peq= u.m.a. del ácido de muestra. VI. DISCUSIONES:  Hay diferentes factores que afectan la determinación de los IR y de los °BRIX de los alimentos, como sabemos que la temperatura es un factor muy importante que afecta en la determinación de los resultados, debido a que siempre actúa como un factor dilatante y hace que la muestra aparezca más grande y por ende su concentración aparezca menor, de eso podemos deducir que a mayor temperatura, menor IR, y lo mismo podemos con la determinación de los °BRIX porque este factor camufla la concentración; La concentración es otro factor muy importante, porque a mayor concentración, mayor IR.  Según la teoría, el índice de refracción aumenta con la presión debido al aumento de la densidad. Entonces la muestra analizada en la práctica (jugo de pulp) va a tener casi el mismo valor de ºbrix, solo debido a la variación de la temperatura, ya que puede variar solo si la muestra es sometida a otro tipo de presión.  Como sabemos que los refractómetros necesitan de la luz para determinar los IR. Por lo cual durante el uso del refractómetro es importante poner al equipo en una fuente de luz para que facilite su trabajo.  El índice de refracción es un número, entre 1,3000 y 1,7000 para la mayoría de los compuestos sobretodo líquidos, y se determina normalmente a la precisión de cinco dígitos. Puesto que el índice de refracción depende de la temperatura de la muestra y de la longitud de onda de la luz utilizada. En los resultados de la práctica ocurrió lo mismo, ya obtuvimos un valor promedio a 20º C de IR =1.361339 lo cual está dentro del rango.
  • 34. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 34  El valor de IR, puede mantenerse puede mantenerse constante si se mantienen estables las condiciones de temperatura y presión además de la longitud de onda de la radiación.  El índice de refracción del agua es de 1.361339 y de la fresa (muestra) es de 1,4270 - 1,4470 (R. Bauch Lomb) y como la refracción es una propiedad aditiva, y que cambia con la densidad por lo que la fresa tiene un índice de refracción 1,4270 - 1,4470 que es mayor, esto se debe a los ingredientes utilizados en su preparación pues es un producto trasformado (procesado), contiene mayor concentración de sólidos y los aditivos utilizados varían mucho su contenido en grados Brix e Indice de Refracción.  Cuando la densidad de la mezcla disminuye entonces la velocidad del haz de luz aumenta, por lo tanto la velocidad con que se propaga un haz de luz depende de la densidad de la muestra.  La vitamina C se encuentra de dos formas, como ácido ascórbico y ácido dehidroascorbico, se utiliza el método de la transformación del ácido ascórbico, este método se utiliza colorante 2,6 dicloroindofenol, y es este la que muestra un máximo de absorción a 540nm. La técnica de análisis, espectrofotometría, es un método muy aceptable, y nos permite determinar con un buen grado de exactitud las absorbancias en las muestras preparadas, así trabajar con curva de calibración para calcular concentraciones de la naranja y otros.  Según H. Zumbado, 2002 en su libro titulado análisis químico de los alimentos métodos químicos, hace mención indicando que el análisis gravimétrico involucra dos etapas generales esenciales; primero: la separación del componente que se desea cuantificar y segundo: la pesada exacta y precisa del componente separado. Existen factores que pueden incider en los resultados finales como la que indica la UNAM en el libro titulado análisis de alimentos fundamentos y técnica, en la que indica, La temperatura no es igual en los distintos puntos de la estufa, y a cierta temperatura el alimento es susceptible de descomponerse, con lo que se volatilizan otras sustancias además de agua también pueden perderse otras materias volátiles aparte de agua. podemos afirmas que existen diversos factores que pueden ser parte del error del posible resultado.  Según: H. Egan, R.S. Kirk, R. Sawyer: La humedad atmosférica es el peso del vapor de agua contenido en una unidad de peso de aire. Este peso se expresa como un porcentaje del máximo peso de vapor de agua que dicha unidad pueda retener a una temperatura dada, conociéndose este porcentaje como humedad relativa. El que un material cualquiera tienda a secarse a absorber humedad depende de la humedad
  • 35. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 35 relativa de la atmósfera a la que está expuesto, habiendo para cada sustancia una humedad relativa para la que se alcanza el equilibrio. La función de la cobertura es evitar la adsorción del vapor de agua del medio ambiente y proporcionan al cereal un perfil de aroma idóneo. Es decir que el alimento tiene un tiempo de vida útil mayor.  Según Harlold E. En Análisis químico de alimentos, nos dice: La ceniza de los alimentos están constituidos por residuo inorgánico que queda después que la materia orgánica se ha quemado. El valor de la ceniza puede considerase como una medida general de la calidad. y a menudo es un criterio útil para determinar la identidad de un alimento. Cuando hay un alto contenido de cenizas se sugiere la presencia de un adulterante inorgánico.  Según Leslie F. En Análisis moderna de los alimentos, nos dice: Todos los alimentos contiene elementos minerales formando parte de compuestos orgánicos e inorgánicos, nos dice que es muy difícil determinarlos tal y como se presentan en los alimentos. La incineración para destruir toda la materia orgánica cambia su naturaleza, por ejemplo las sales metálicas de los ácidos orgánicos se convierten en óxidos o cabonatos, el contenido de cenizas. Si bien la ceniza de un producto alimentario natural es el residuo inorgánico que queda después de eliminar la materia orgánica. La ceniza obtenida no tiene la misma composición que la materia inorgánica del alimento original, ya que puede haber pérdidas por volatilización entre los elementos que se pueden perder por volatilización tenemos: As, B, Cd, Cr, Fe, Pb, Hg, Ni, P, V, y Zn. Además de las interacciones de los componentes minerales y los crisoles  (Kirk et al, 1996) http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1067/1/ManualdeFundamentosyTecnicasdeAnalisisdeAlimentos_6501.pdf Los lípidos, junto con las proteínas y carbohidratos, constituyen los principales componentes estructurales de los alimentos. (Nielsen, 1998). Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo de compuestos que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgánicos tales como éter, cloroformo, benceno o acetona. Todos los lípidos contienen carbón, hidrógeno y oxígeno, y algunos también contienen fósforo y nitrógeno (Aurand et al, 1987). Los lípidos comprenden un grupo de sustancias que tienen propiedades comunes y similitudes en la composición, sin embargo algunos, tales como los triacilgliceroles son muy hidrofóbicos. Otros, tales como los di y
  • 36. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 36 monoacilgliceroles tienen movilidad hidrofóbica e hidrofílica en su molécula por lo que pueden ser solubles en disolventes relativamente polares (Nielsen, 1998).  http://dspace.universia.net/bitstream/2024/1067/1/ManualdeFundamentosyTecnicasdeAnalisisdeAlimentos_6501.pdf Las cenizas de un alimento son un término analítico equivalente al residuo inorgánico que queda después de calcinar la materia orgánica. Las cenizas normalmente, no son las mismas sustancias inorgánicas presentes en el alimento original, debido a las perdidas por volatilización o a las interacciones químicas entre los constituyentes. El valor principal de la determinación de cenizas (y también de las cenizas solubles en agua, la alcalinidad de las cenizas y las cenizas insolubles en ácido) es que supone un método sencillo para determinar la calidad de ciertos alimentos, por ejemplo en las especias y en la gelatina es un inconveniente un alto contenido en cenizas. Las cenizas de los alimentos deberán estar comprendidas entre ciertos valores, lo cual facilitará en parte su identificación. VII. CONCLUSIONES.  Las determinaciones refractométricas ayudan a determinar concentraciones de sólidos solubles en la muestra (°Brix) y también podemos decir que nos permite identificar productos puros, como sabemos que estos producto puros tienes un rango o una normalización estándar de concentración, y nosotros podemos identificar a estos mediante comparaciones. Si tienen la misma concentración podemos decir que son el mismo producto.  Lo mismo sucede con el IR, porque cada producto tiene un IR y también permite determinar la calidad de los productos, por ejemplo: aquellos productos que nos son puros el IR va a variar y de esto podemos decir que el producto haya sido alterado y por consiguiente sea de mala calidad.  Aprendimos a manipular nuevas equipos que recién estamos conociendo y que nos servirán mucho más adelante en el transcurso de la carrera.  La medición del índice de refracción es una herramienta útil para medirla concentración de una mezcla binaria. La concentración y el índice de refracción son directamente proporcional.  El índice de refracción y la temperatura son inversamente proporcional.  La Refractometría permite determinar la concentración de una solución.
  • 37. COMPOSICIÓN BIOQUÍMICA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES MUÑOZ ROJAS, Andrea Gisela. VEGA VIERA, Jhonas Abner. Página 37  La Refractometría y los ºBrix son buenos indicadores de la calidad de un producto.  Como futuros ingenieros agroindustriales para obtener una buena calidad nutritiva de un producto debemos evitar la degradación de la vitamina C; que es muy importante para nuestro organismo.  Se complementó satisfactoriamente nuestros conocimientos en clase con la práctica ejecutada; y pudimos ver la linealidad de los equipos y los contenidos de vitamina C en 2 concentraciones. VIII. BIBLIOGRAFÍA.  Frank Bradleey Armstrong, Thomas Peter Bennett BIOQUIMICA (1982) pag.163-165.  http://es.scribd.com/doc/51664602/En-el-laboratorio-de-pruebas-cualitativaspara- carbohidrato-podemos-analizar-barios-cosas  http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:Xik40D7C3DoJ:www.cursos. ucv.cl/qui34302/XLaboratorios/Laboratorio1REVGuia03.doc+&cd=5&hl=es&ct=clnk&gl=pe  QUAM: 2000.P1. (2000). EURACHEM/CITAC Guide. Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement. Second edition.  http://fisica.udea.edu.co/~labgicm/Laboratorio%20Fisica%202_2011/2011_Practica%20no%20linealidad.pdf  http://inta.gob.ar/documentos/guia-para-la-verificacion-de-espectofotometros-uv- visible-utilizados-en-el-analisis-de-suelo-y agua/at_multi_download/file/Guia_espectrofot%C3%B3metros_UV.pdf  http://es.slideshare.net/jestval/actividad-experimental-no-11  http://www.lacomet.go.cr/documentosweb/quimica/2011/Publicaciones/sandra.pdf.