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DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UNA CÁMARA DE ELECTROFORÉSIS CASERA
INTRODUCCIÓN
El término electroforesis significa mover con electricidad y es una técnica muy usada cuando se trabaja
con moléculas que tengan carga eléctrica como las proteínas y el ADN. Debido a que el ADN es una molécula
cargada negativamente puede moverse hacia un polo positivo dentro de un campo eléctrico. Si además el medio
donde se mueve tiene ciertas características que le permiten obstaculizar el paso de las moléculas más grandes
y permitir el paso de las más pequeñas, tenemos una técnica que permite separar el ADN por tamaño. Esta
técnica es muy útil hoy en día y tiene múltiples aplicaciones, por ejemplo test de paternidad.
La electroforesis es una herramienta común en biología molecular, biotecnología, ingeniería genética,
etc., por lo que es útil para analizar y separar macromoléculas de ADN, ARN, proteínas y entre otras de uso
cotidiano (como compuestos coloreados, como los colorantes de los jugos, extractos de frutas) que tengan
cargas eléctricas y por lo tanto pueden moverse a través de un campo eléctrico.
MATERIALES
 Recipientes rectangulares de plástico
 Probeta de 100 mL
 Matraz de 250 mL
 Piceta con agua destilada
 Agar o colapiz
 Colorantes
 05 baterías de 9V
 Cables y ganchitos de metal
 Papel de aluminio
 Bicarbonato
 Glicerina
 Bandejas de plumavit
 Jeringas o goteros
 Balanza
 Cocinilla eléctrica
 Regla en cm y mm
PROCEDIMIENTO:
1. Diseñar, construir o adquirir una cámara de plástico (envase pequeño rectangular), en la cual irán en los
extremos dos cables hechos de aluminio a los que posteriormente conectarás las baterías montadas en serie
(figura de abajo), asegurarse de que los alambres queden bien firmes a la cámara, para ello se puede usar
cinta adhesiva. En esta cámara se preparará el gel, que en este caso se usará colapiz.
2. Construir un peine que irá por encima y en el medio de la cámara, y los dientes estarán a 0,5 cm por encima
del fondo. Se hacen los pocillos en este caso en el medio por que vamos a hacer correr muestras positivas y
negativas a la vez.
3. Para preparar el gel, esta se hace con colapiz y como diluyente o buffer de corrida (1 litro de agua con una
cucharada de bicarbonato). La solución debe quedar homogénea. Así como el gel.
4. El gel disuelto agregar en la cámara que contenga el peine. El peine nos permitirá dejar huecos en el gel
donde se cargarán las muestras.
5. Una vez que el agar este sólido quita con cuidado el peine
6. Luego que este sólido el gel, retirar porciones del gel de los extremos donde irán los electrodos. Y luego cubrir
estos espacios con buffer de corrida hasta la altura del gel.
7. Seguidamente cargar las muestras (para este caso con diferentes colorantes que tengan cargas positivas y
negativas. A esta cámara colocar una tapa transparente.
8. Ahora conecta los cables en 5 baterías de 9 V cada una y observar cómo se mueven los colorantes en el gel.
9. Responder que moléculas de colorantes tienen cargas positivas o negativas, y cuales han migrado más.
Peine
Recipiente
con el gel
Pocillos
Electrodo
negativo
Electrodo
positivo
Espacio
del gel
recortado
Espacio
del gel
recortado
Muestras
✓ Freifelder, D. 1981.Técnicas de Bioquímica y Biología Molecular. 2Da. Ed., Publicado por Reverté:
235-240
✓ Fuentes, M. J. 1998. Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Volumen 1. 2da Ed., Publicado por
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en serie
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Diseño y construcción de camara de electroforesis casera

  • 1. DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UNA CÁMARA DE ELECTROFORÉSIS CASERA INTRODUCCIÓN El término electroforesis significa mover con electricidad y es una técnica muy usada cuando se trabaja con moléculas que tengan carga eléctrica como las proteínas y el ADN. Debido a que el ADN es una molécula cargada negativamente puede moverse hacia un polo positivo dentro de un campo eléctrico. Si además el medio donde se mueve tiene ciertas características que le permiten obstaculizar el paso de las moléculas más grandes y permitir el paso de las más pequeñas, tenemos una técnica que permite separar el ADN por tamaño. Esta técnica es muy útil hoy en día y tiene múltiples aplicaciones, por ejemplo test de paternidad. La electroforesis es una herramienta común en biología molecular, biotecnología, ingeniería genética, etc., por lo que es útil para analizar y separar macromoléculas de ADN, ARN, proteínas y entre otras de uso cotidiano (como compuestos coloreados, como los colorantes de los jugos, extractos de frutas) que tengan cargas eléctricas y por lo tanto pueden moverse a través de un campo eléctrico. MATERIALES  Recipientes rectangulares de plástico  Probeta de 100 mL  Matraz de 250 mL  Piceta con agua destilada  Agar o colapiz  Colorantes  05 baterías de 9V  Cables y ganchitos de metal  Papel de aluminio  Bicarbonato  Glicerina  Bandejas de plumavit  Jeringas o goteros  Balanza  Cocinilla eléctrica  Regla en cm y mm PROCEDIMIENTO: 1. Diseñar, construir o adquirir una cámara de plástico (envase pequeño rectangular), en la cual irán en los extremos dos cables hechos de aluminio a los que posteriormente conectarás las baterías montadas en serie (figura de abajo), asegurarse de que los alambres queden bien firmes a la cámara, para ello se puede usar cinta adhesiva. En esta cámara se preparará el gel, que en este caso se usará colapiz. 2. Construir un peine que irá por encima y en el medio de la cámara, y los dientes estarán a 0,5 cm por encima del fondo. Se hacen los pocillos en este caso en el medio por que vamos a hacer correr muestras positivas y negativas a la vez. 3. Para preparar el gel, esta se hace con colapiz y como diluyente o buffer de corrida (1 litro de agua con una cucharada de bicarbonato). La solución debe quedar homogénea. Así como el gel. 4. El gel disuelto agregar en la cámara que contenga el peine. El peine nos permitirá dejar huecos en el gel donde se cargarán las muestras. 5. Una vez que el agar este sólido quita con cuidado el peine
  • 2. 6. Luego que este sólido el gel, retirar porciones del gel de los extremos donde irán los electrodos. Y luego cubrir estos espacios con buffer de corrida hasta la altura del gel. 7. Seguidamente cargar las muestras (para este caso con diferentes colorantes que tengan cargas positivas y negativas. A esta cámara colocar una tapa transparente. 8. Ahora conecta los cables en 5 baterías de 9 V cada una y observar cómo se mueven los colorantes en el gel. 9. Responder que moléculas de colorantes tienen cargas positivas o negativas, y cuales han migrado más. Peine Recipiente con el gel Pocillos Electrodo negativo Electrodo positivo Espacio del gel recortado Espacio del gel recortado Muestras
  • 3. ✓ Freifelder, D. 1981.Técnicas de Bioquímica y Biología Molecular. 2Da. Ed., Publicado por Reverté: 235-240 ✓ Fuentes, M. J. 1998. Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Volumen 1. 2da Ed., Publicado por Reverté: 169-171 Baterías en serie Migración de moléculas