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“Año de la universalización de la salud”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
Escuela Profesional De Ingeniería Ambiental
CURSO: BIOTECNOLOGÍA
NOMBRE: CATACHURA CHATA, Wilson
DOCENTE: SOTO GONZALES, Hebert Hernan
Producción de acido láctico por Lactobacillus
plantarum L10 en cultivos batch y continuo
Waldir Estela, Rychtera Mojmír, Melzoch Karel, Quillama Elena, Egoavil Erida. 2007.
Producción de acido láctico por Lactobacillus plantarum L10
en cultivos batch y continuo
El presente trabajo de investigación tiene como objetivo optimizar
la producción de ácido láctico utilizando Lactobacillus plantarum
L10 cultivado en sistemas batch y continuo, así como también
optimizar la composición del medio de fermentación para facilitar
el proceso de aislamiento y purificación del producto.
Metabolismo de
hexosas
Materiales y métodos
Para los ensayos de cultivo batch y continuo se utilizó la cepa
Lactobacillus plantarum L10, adquirida del Instituto de Tecnología de
Leche y Grasa de la Facultad de Tecnología de Alimentos de la
Universidad Tecnología Química de Praga, República Checa.
Microorganismo utilizado
Métodos
analíticos
Obtención de muestras
En los ensayos de cultivo batch las muestras se colectaron cada dos horas.
El volumen mínimo de muestra colectada fue 10 mL. Cuando el crecimiento
alcanzó la fase exponencial, se produjo gran cantidad de ácido láctico en el
biorreactor, el cual se neutralizó con la adición de NaOH al 20%v/v.
Esquema de un quimiostato. 1:
biorreactor; 2: reservorio de medio de
cultivo; SN: sonda de nivel; O2:
electrodo de medición de oxígeno
disuelto; pH: electrodo de medición de
pH; T: termómetro.
Métodos de cultivo
La propagación de las bacterias lácticas se llevó a cabo en cultivo
estático a 37 °C durante 10–12 horas, luego de ello se inoculó en el
biorreactor. El inóculo se preparó en dos vasos Erlenmeyer de 250 mL
conteniendo en cada uno 100 mL de medio de cultivo MRS.
Cultivo
batch
Se llevaron a cabo siete ensayos de cultivo batch en
biorreactor con un volumen de trabajo de 2200 mL (2000
mL de medio de cultivo y 200 mL de inóculo). Los
ensayos BI, BII y BIII se llevaron a cabo sin aireación.
Determinación de glucosa y
ácido láctico
La concentración de glucosa y lactato de sodio se determinaron por
HPLC . Las concentraciones de glucosa y lactato se calcularon
finalmente utilizando las curvas de calibración de cada compuesto,
las cuales han sido determinados previamente en el laboratorio.
ResultadosCultivo batch
Los resultados muestran que en los cultivos BI y BII no hubo una
conversión completa del sustrato comparado con los cultivos BIII, BV y
BVI. Por otro lado, al airear las dos primeras horas el cultivo BIV, el
sistema mostró en promedio valores bajos en los parámetros evaluados.
Parámetros de cultivo batch
determinados en la fase exponencial
de crecimiento en los ensayos con
Lactobacillus plantarum L10 a escala
de laboratorio.
Parámetros de cultivo continuo
determinados en el estado de
equilibrio del sistema (quimiostato),
en los ensayos con Lactobacillus
plantarum L10 a escala de
laboratorio.
Cultivo continuo en quimiostato
La conversión completa del sustrato se consiguió a la menor tasa de
dilución 0,08 h-1. El mayor rendimiento de ácido láctico por sustrato
consumido se consiguió a la tasa de dilución 0,51 h-1; a esta tasa de
dilución también se obtuvo el mayor rendimiento de biomasa por sustrato
consumido (21%). La productividad de ácido láctico (6 g/L/h) y de biomasa
(1,2 g/L/h) alcanzó el máximo valor a la tasa de dilución de 0,46 h-1.
Conclusión
Una de las principales conclusiones de este trabajo de investigación es la influencia
esencial que tiene la presencia de iones de manganeso en la formación de ácido láctico
y biomasa en cultivo batch. La presencia de sales de manganeso, fosfatos y la
concentración de fuente de carbono, cumplen un rol importante en la conversión
completa de la glucosa y en los demás parámetros de producción de ácido láctico.

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  • 1. “Año de la universalización de la salud” UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA Escuela Profesional De Ingeniería Ambiental CURSO: BIOTECNOLOGÍA NOMBRE: CATACHURA CHATA, Wilson DOCENTE: SOTO GONZALES, Hebert Hernan Producción de acido láctico por Lactobacillus plantarum L10 en cultivos batch y continuo Waldir Estela, Rychtera Mojmír, Melzoch Karel, Quillama Elena, Egoavil Erida. 2007.
  • 2. Producción de acido láctico por Lactobacillus plantarum L10 en cultivos batch y continuo El presente trabajo de investigación tiene como objetivo optimizar la producción de ácido láctico utilizando Lactobacillus plantarum L10 cultivado en sistemas batch y continuo, así como también optimizar la composición del medio de fermentación para facilitar el proceso de aislamiento y purificación del producto. Metabolismo de hexosas Materiales y métodos Para los ensayos de cultivo batch y continuo se utilizó la cepa Lactobacillus plantarum L10, adquirida del Instituto de Tecnología de Leche y Grasa de la Facultad de Tecnología de Alimentos de la Universidad Tecnología Química de Praga, República Checa. Microorganismo utilizado Métodos analíticos Obtención de muestras En los ensayos de cultivo batch las muestras se colectaron cada dos horas. El volumen mínimo de muestra colectada fue 10 mL. Cuando el crecimiento alcanzó la fase exponencial, se produjo gran cantidad de ácido láctico en el biorreactor, el cual se neutralizó con la adición de NaOH al 20%v/v. Esquema de un quimiostato. 1: biorreactor; 2: reservorio de medio de cultivo; SN: sonda de nivel; O2: electrodo de medición de oxígeno disuelto; pH: electrodo de medición de pH; T: termómetro. Métodos de cultivo La propagación de las bacterias lácticas se llevó a cabo en cultivo estático a 37 °C durante 10–12 horas, luego de ello se inoculó en el biorreactor. El inóculo se preparó en dos vasos Erlenmeyer de 250 mL conteniendo en cada uno 100 mL de medio de cultivo MRS. Cultivo batch Se llevaron a cabo siete ensayos de cultivo batch en biorreactor con un volumen de trabajo de 2200 mL (2000 mL de medio de cultivo y 200 mL de inóculo). Los ensayos BI, BII y BIII se llevaron a cabo sin aireación.
  • 3. Determinación de glucosa y ácido láctico La concentración de glucosa y lactato de sodio se determinaron por HPLC . Las concentraciones de glucosa y lactato se calcularon finalmente utilizando las curvas de calibración de cada compuesto, las cuales han sido determinados previamente en el laboratorio. ResultadosCultivo batch Los resultados muestran que en los cultivos BI y BII no hubo una conversión completa del sustrato comparado con los cultivos BIII, BV y BVI. Por otro lado, al airear las dos primeras horas el cultivo BIV, el sistema mostró en promedio valores bajos en los parámetros evaluados. Parámetros de cultivo batch determinados en la fase exponencial de crecimiento en los ensayos con Lactobacillus plantarum L10 a escala de laboratorio. Parámetros de cultivo continuo determinados en el estado de equilibrio del sistema (quimiostato), en los ensayos con Lactobacillus plantarum L10 a escala de laboratorio. Cultivo continuo en quimiostato La conversión completa del sustrato se consiguió a la menor tasa de dilución 0,08 h-1. El mayor rendimiento de ácido láctico por sustrato consumido se consiguió a la tasa de dilución 0,51 h-1; a esta tasa de dilución también se obtuvo el mayor rendimiento de biomasa por sustrato consumido (21%). La productividad de ácido láctico (6 g/L/h) y de biomasa (1,2 g/L/h) alcanzó el máximo valor a la tasa de dilución de 0,46 h-1. Conclusión Una de las principales conclusiones de este trabajo de investigación es la influencia esencial que tiene la presencia de iones de manganeso en la formación de ácido láctico y biomasa en cultivo batch. La presencia de sales de manganeso, fosfatos y la concentración de fuente de carbono, cumplen un rol importante en la conversión completa de la glucosa y en los demás parámetros de producción de ácido láctico.