1. Uso de la fluorescencia en la identificación de agentes toxicológicos de los
dinoflagelados
1 EMILIO ROBERTO ROMANO SOTERO
1Circuito Gonzalo Aguirre S/N Zona Universitaria, Universidad Veracruzana,
Facultad De Química Farmacéutica Biológica Campus Xalapa, teléfono
(228)842--‐17--‐59, Xalapa, Veracruz México.
analiza por medio de una sonda
Resumen
fluorescente ya puede ser una
la fluorescencia es un tipo
herramienta para evaluar la
particular de luminiscencia, que
presencia de toxinas en tiempo real
caracteriza a las sustancias que son
y ayudar a erradicar la intoxicación
capaces de absorber energía en
relacionada con el consumo de
forma de radiaciones
productos del mar. Con
electromagnéticas y luego emitir
microscopio fluorescente se
parte de esa energía en forma de
detectan los dinoflagelados que
radiación electromagnética de
producen las toxinas en los
longitud de onda diferente y
moluscos. Se logró marcar por
sabemos que algas como los
medio de un método de
dinoflagelados que tienen como
fluorescencia una proteína tomada
principales características
de las células marinas que
pigmentos rojo-anaranjados y la
biosintetiza las toxinas ya que los
presencia natural fluorocromos y
fluorocromos naturales facilitan su
que esta alga es sumamente toxica
identificación. (1)
ya que las toxinas que liberan son
saxitoxinas y las gonyautoxinas que
presentan severas intoxicaciones al Palabras claves:
ser humano debido al consuno de Fluorescencia, algas,
moluscos lo que se propone es dinoflagelados, fluorocromos,
toxinas.

2. together what is proposed is
ABSTRACT analyzed by means of a fluorescent
probe and can be a tool to assess the
The fluorescence is a particular presence of toxins in real time and
type of luminescence, help eradicate poisoning related to
characterizing substances that are consumption of seafood. With
capable of absorbing energy as fluorescent microscopy detected
electromagnetic radiation and then dinoflagellates that produce toxins
emit part of that energy as in shellfish. Score was achieved by
electromagnetic radiation of a method of fluorescence protein
different wavelength and known as cells taken from marine toxins
the dinoflagellate algae that whose biosynthesized as natural
main characteristic red-orange fluorochromes facilitate
pigment and the natural presence identification.(1)
and that this alga fluorochromes is Keywords:
highly toxic because toxins are Fluorescence, algae,
released and saxitoxin having dinoflagellates, fluorophores,
severe intoxications gonyautoxinas toxins.
to humans due to the mollusk
(2)

3. Introducción:
Los dinoflagelados son protistas microscópicos unicelulares que forman el
phylum Pyrrophyta, constituido por dos clases: Dinophyceae, con más de
4 000 especies de vida libre, y Syndinophyceae, con alrededor de 40 especies
parásitas y simbiontes. (3) En condiciones favorables, algunos dinoflagelados
de vida libre de los géneros Alexandrium, Glenodinium, Gymnodinium y
Gonyaulax pueden reproducirse fácilmente y tornar las aguas superficiales de
color rojo debido a las neurotóxicas que producen, lo que se llama marea roja,
y que suele ser venenosa para muchos tipos de organismos marinos,
provocando su muerte en cadena. (4) Algunos dinoflagelados establecen
asociaciones simbióticas con invertebrados marinos, especialmente con
corales, anémonas, zoantidos y gorgonias (cnidarios de la clase Antozoa),
formando así los arrecifes coralinos, que albergan un cuarto de la
biodiversidad marina del planeta. Las asociaciones simbióticas son
interespecíficas y complejas, y los participantes reciben beneficios que les
permiten coexistir en un ambiente escaso de nutrimentos. (5) Estas
asociaciones simbióticas hacen que las toxinas se impregnen y ocasione daños
a los humanos al consumirlo por otro lado la fluorescencia es un tipo
particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias que son capaces
de absorber energía en forma de radiaciones electromagnéticas y luego emitir
parte de esa energía en forma de radiación electromagnética de longitud de
onda diferente cabe destacar que luminiscencia y fluorescencia no es lo
mismo y es muy común que la gente e incluso los mismos científicos llegan a
decir que es lo mismo pero llamamos luminiscencia al fenómeno físico que
consiste en emisión de luz, no debida a incandescencia, cuando una sustancia
absorbe cualquier tipo de energía. (6)Los dinoflagelados se encuentran
principalmente en las costas de Canadá y por supuesto en el mar rojo donde se
encuentran por millones.

4. Método:
Con el fin de identificar niveles de biotoxinas en los productos pesqueros, se
recolectaran muestras de las especies marinas en los sitios de muestreo
sistemático de acuerdo a los resultados y reportes de concentración de
fitoplancton y al apoyo logístico a los técnicos de pesca, bioterio y técnicos
del bioensayo. (7)Las muestras serán enviadas semanal y mensualmente para
el análisis de biotoxinas con el método de bioensayo en ratón o metodología
alterna los niveles permitidos de biotoxinas en mariscos para consumo
humano deben ser menores de 400 ur / 100 gramos por lo que una
aproximación a estos niveles exige una intensificación en frecuencia y numero
de muestras así como la investigación de otros contaminantes relacionados.
(8)El análisis de contaminantes no orgánicos (fósforo y nitrógeno) en agua
serán realizados en el laboratorio competente. La cuantificación de la
salinidad y temperatura se tomaran localmente. Se ha establecido que quistes
temporales y de reposo de dinoflagelados juegan un papel importante en el
pronóstico de futuros afloramientos relacionados con las corrientes y vientos
dominantes ligados a factores físico-químicos del ambiente. (9)Se tomaran
muestras de estratos superficiales del bento en la desembocadura de los ríos y
esteros relacionados con acumulación y reagrupamiento de dinoflagelados, la
toma deberá efectuarse cada tres meses, conservarse en formalina o lugol y
enviarlas al laboratorio de referencia. (10)
Las muestras se recolectarán en bolsas platicas, sin agua, rotuladas según
lugar de la toma, fecha de recolecta, hora, especie, zona (estero o playa) y
nombre del que tomo la muestra, y destinatario. Las muestras se enviaran en el
menor tiempo posible por lo que no requieren hielo, caso contrario enviarlas
en hielo picado. La frecuencia del envío será cada mes y si existen reportes de
alerta se enviaran cada cuatro días o en su defecto por semana. (11)
La muestra se tiñe con sustancias fluorescente fluorita, calcita y uranio que
absorbieron la energía de las ondas cortas de la luz (azul) y emitieron luz de
longitudes de ondas más largas (verde) las muestras en color verde fueron las
biotoxinas encontradas en los productos del mar. (11) Se utilizo también la
inmunofluorescencia, técnica en la cual una sustancia fluorescente se une a un
anticuerpo específico de ciertos microrganismos. Si el anticuerpo fluorescente

5. se une al microrganismo, este microrganismo emite fluorescencia y se puede
identificar por lo que se localizaron 5 diferentes toxinas de los dinoflagelados.
Se prosiguió con un análisis cuantitativo y cualitativo obteniendo lo siguiente:
FECHA TECNICA MUESTRA CONCENTRAC
IÓN
SAXITOXINAS
(UR/100 g)
18-10-05 Lugol Ostras No detectada
28-10-05 Fluorescencia Ostras No detectada
31-10-05 Fluorescencia Conchas No detectada
11-11-05 Fluorescencia Ostras No detectada
18-11-05 Fluorescencia Ostiones No detectada
30-11-05 Fluorescencia Conchas No detectada
07-12-05 Fluorescencia Conchas 2170
07-12-05 Fluorescencia Conchas 630
12-12-05 Fluorescencia Ostras No detectada
13-12-05 Fluorescencia Mejillones No detectada
14-12-05 Fluorescencia Conchas 716.5
15-12-05 Fluorescencia Ostras 1609
19-12-05 Fluorescencia Mejillón No detectada
19-12-05 Fluorescencia Conchas 1177
por
Fluorescencia
(13)

6. Conclusiones:
La investigación de la presencia de dinoflagelados en los productos
provenientes del mar es de suma importancia ya que en los últimos años han
aumentado en un número considerable provocando así la contaminación de los
productos marinos y a su vez la intoxicación de los humanos por lo que se
debe atender inmediatamente para evitar más muertes la fluorescencia es uno
de los proceso de identificación mas rápida y si se usa la sonda fluorescente el
tejido de los pescados conchas y de toda la vida marina no es dañada por lo
que es el mejor método para esta investigación ya que también los
dinoflagelados muestra fluorescencia natural.
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