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Autofluorescence du fond d’œil
                                      et
                     DMLA atrophique(s)
I Audo, M Benchaboune, JF Girmens, S Mohand-Saïd, K Nakashima, M Paques, JA Sahel
Qu’est-ce que l’autofluorescence (AF) du fond d’œil?
  = visualisation de la LIPOFUSCINE (LF), marqueur fonctionnel du
renouvellement des segments externes des photorécepteurs (=PR/EPR)
                                      Segments externe des photorécepteurs
• AF: reflète l’accumulation de
  LF, principalement A2E, dans
  les cellules de l’EPR
                                                           1           1          1
• Associée au renouvellement
                                    Epithélium
  cyclique des segments externes                                      2                   Lipo-
                                    pigmentaire
  des photorécepteurs                                                                     fuscine
                                    rétinien
• = « déchets » de la phagocytose
  incomplète, soumis à l ’ auto-
                                                         1 Phagocytose
  oxydation
                                                         2 Autophagie
• Accumulation dans les cellules
  post-mitotiques
• Augmente avec l’âge
• Modifiée dans les pathologies
  rétiniennes (DMLA, SGDT, Best…)

 Delori FC, et al. 2001
                                           http://webeye.ophth.uiowa.edu/DEPT/images/Mullins/index.htm
Technique(s) d’imagerie
                            Non invasive+++
                         • SLO confocal, type HRA2


                           Filtre          488 nm


                                         > 521 nm




                                                          Autofluorescence (AF)
  Laser/488 nm                                                    in vivo
                         Détecteur
                                                            Après sommation
Rückmann et al. 1995


                 • Rétinographe, type Topcon, avec filtres spéciaux
Limites de la technique




• Opacité des milieux (cristallin+)
• Absence de quantification absolue => approche plutôt
qualitative
• +/- absence de fixation stable
Autofluorescence normale




Von Rückman et al., 1999
Atrophie géographique

= perte bien délimitée d’autofluorescence + anomalies de
       l’autofluorescence dans la zone de jonction
Différents aspects d’AF jonctionnelle = différentes DMLA atrophiques
 Bindenwald et al., 2005
                         (FAM study- reading center Bonn)




  normal              focal             patchy             banded

  DIFFUSE




 reticular          branching            Fine         Fine granular with
                                       granular      peripheral punctate
                                                            spots
Différents aspects d’AF jonctionnelle = différentes DMLA
Bindenwald et al., 2005 atrophiques




89,13% même aspect entre les 2 yeux: bonne corrélation intra-individuelle

                       Facteurs génétiques ?
Progression de l’atrophie
                                       vers les zones d’anomalies
                                           d’AF jonctionnelle
                                                     FAM study
                                                Holtz et al 2001, 2007
                                            Schmitz-Valckenberg et al 2009




Rythme de progression fonction de la zone jonctionnelle
Moindre progression si pas ou peu de modification d’AF jonctionnelle
                      ≠ modifications diffuses
Corrélation
   structure/fonction

         Fine Matrix Mapping:
         baisse de la sensibilité
 photopique<scotopique dans la zone de
                jonction


                                                   Scholl et al., 2004




            Micropérimétrie:
 Perte de sensibilité dans les cas d’hyper
autofluorescence dans la zone de jonction




                                             Schmitz-Valckenberg et al 2004
Corrélation AF/SD-OCT

     Hyper AF en bande
 OCT: hyper-réflexivité, irrégularité,
 épaississement et perte de la LEE




        Pas d’hyper AF
        OCT: bords abruptes




     Conjonction des 2
         aspects


     Brar et al., 2009
Corrélation AF
                                                                     Kellner et al., 2009
            bleue Argon vs proche IR




(Ex 488nm/Em >500nm)             (Ex 787nm/Em >800nm) (évite la lumière bleue)
   (SE PR/EPR)
                       Mélanine des mélanosomes, principalement pôle apical EPR
                        Diminution: blocage ou déplacement des mélanosomes ou
                       perte cellulaire de l‘EPR
                        Augmentation: déplacement ou augmentation de la
                       mélanine, mélanolysosomes, mélanolipofushine
= corrélation intéressante
   pour le suivi d’essai
      thérapeutique
            mais
     nécessité d’études
longitudinales et meilleures
    connaissances de la
     pathophysiologie




       Kellner et al., 2009
Perspectives



• Développement de logiciels pour quantifier la surface d’atrophie et les
anomalies de la zone de jonction

• Approche de quantification des anomalies de l’autofluorescence…

• Poursuite des corrélations avec des techniques d’imagerie haute résolution
pour une meilleure compréhension des anomalies de la zone de jonction et
déterminer les meilleurs indicateurs pronostiques et thérapeutiques
Corrélation avec l’optique adaptative
ARM 75ans                    Témoin 38ans




                                            200µm
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[Jeudi de la Retine] Autofluorescence et DMLA atrophique (I. Audo)

  • 1. Autofluorescence du fond d’œil et DMLA atrophique(s) I Audo, M Benchaboune, JF Girmens, S Mohand-Saïd, K Nakashima, M Paques, JA Sahel
  • 2. Qu’est-ce que l’autofluorescence (AF) du fond d’œil? = visualisation de la LIPOFUSCINE (LF), marqueur fonctionnel du renouvellement des segments externes des photorécepteurs (=PR/EPR) Segments externe des photorécepteurs • AF: reflète l’accumulation de LF, principalement A2E, dans les cellules de l’EPR 1 1 1 • Associée au renouvellement Epithélium cyclique des segments externes 2 Lipo- pigmentaire des photorécepteurs fuscine rétinien • = « déchets » de la phagocytose incomplète, soumis à l ’ auto- 1 Phagocytose oxydation 2 Autophagie • Accumulation dans les cellules post-mitotiques • Augmente avec l’âge • Modifiée dans les pathologies rétiniennes (DMLA, SGDT, Best…) Delori FC, et al. 2001 http://webeye.ophth.uiowa.edu/DEPT/images/Mullins/index.htm
  • 3. Technique(s) d’imagerie Non invasive+++ • SLO confocal, type HRA2 Filtre 488 nm > 521 nm Autofluorescence (AF) Laser/488 nm in vivo Détecteur Après sommation Rückmann et al. 1995 • Rétinographe, type Topcon, avec filtres spéciaux
  • 4. Limites de la technique • Opacité des milieux (cristallin+) • Absence de quantification absolue => approche plutôt qualitative • +/- absence de fixation stable
  • 6. Atrophie géographique = perte bien délimitée d’autofluorescence + anomalies de l’autofluorescence dans la zone de jonction
  • 7. Différents aspects d’AF jonctionnelle = différentes DMLA atrophiques Bindenwald et al., 2005 (FAM study- reading center Bonn) normal focal patchy banded DIFFUSE reticular branching Fine Fine granular with granular peripheral punctate spots
  • 8. Différents aspects d’AF jonctionnelle = différentes DMLA Bindenwald et al., 2005 atrophiques 89,13% même aspect entre les 2 yeux: bonne corrélation intra-individuelle Facteurs génétiques ?
  • 9. Progression de l’atrophie vers les zones d’anomalies d’AF jonctionnelle FAM study Holtz et al 2001, 2007 Schmitz-Valckenberg et al 2009 Rythme de progression fonction de la zone jonctionnelle Moindre progression si pas ou peu de modification d’AF jonctionnelle ≠ modifications diffuses
  • 10. Corrélation structure/fonction Fine Matrix Mapping: baisse de la sensibilité photopique<scotopique dans la zone de jonction Scholl et al., 2004 Micropérimétrie: Perte de sensibilité dans les cas d’hyper autofluorescence dans la zone de jonction Schmitz-Valckenberg et al 2004
  • 11. Corrélation AF/SD-OCT Hyper AF en bande OCT: hyper-réflexivité, irrégularité, épaississement et perte de la LEE Pas d’hyper AF OCT: bords abruptes Conjonction des 2 aspects Brar et al., 2009
  • 12. Corrélation AF Kellner et al., 2009 bleue Argon vs proche IR (Ex 488nm/Em >500nm) (Ex 787nm/Em >800nm) (évite la lumière bleue) (SE PR/EPR) Mélanine des mélanosomes, principalement pôle apical EPR  Diminution: blocage ou déplacement des mélanosomes ou perte cellulaire de l‘EPR  Augmentation: déplacement ou augmentation de la mélanine, mélanolysosomes, mélanolipofushine
  • 13. = corrélation intéressante pour le suivi d’essai thérapeutique mais nécessité d’études longitudinales et meilleures connaissances de la pathophysiologie Kellner et al., 2009
  • 14. Perspectives • Développement de logiciels pour quantifier la surface d’atrophie et les anomalies de la zone de jonction • Approche de quantification des anomalies de l’autofluorescence… • Poursuite des corrélations avec des techniques d’imagerie haute résolution pour une meilleure compréhension des anomalies de la zone de jonction et déterminer les meilleurs indicateurs pronostiques et thérapeutiques
  • 15. Corrélation avec l’optique adaptative ARM 75ans Témoin 38ans 200µm 200µm