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Cebola
        Kiwi
        Fígado
Escola Secundária de Bocage
Ciências Naturais – 9º ano – 2011/ 2012
                                   Prof. Gabriela Bruno
Extracção do DNA
 Toda a informação necessária para criar um
 organismo encontra-se no DNA. Esta molécula é
 usada durante o período de vida de um organismo
 para fornecer instruções para milhões de
 processos celulares que ocorrem constantemente.

 Para estudar o modo como essas informações são
 comunicadas à célula, os cientistas isolaram o DNA
 e estudaram o modo de interacção do DNA com as
 proteínas e RNAs.
Extracção do DNA
 Este trabalho laboratorial usa um processo
 semelhante ao utilizado pelos cientistas quando
 começaram as primeiras investigações sobre DNA.



 Para isolar o DNA os cientistas separaram-no dos
 outros componentes celulares. As células são
 fragmentadas e o DNA separado do conteúdo
 lipídico das membranas da célula e dos organitos.
 Em seguida o DNA é separado das proteínas.
Extracção do DNA
 Pode-se realizar um procedimento muito simples para
 extracção de DNA com coisas comuns existentes na
 cozinha. Ao fim de 40 minutos pode-se observar aquilo
 que os cientistas levaram muitos anos a descobrir.

 Embora nesta actividade se utilizem procedimentos e
 instrumentos muito simples que, não permitindo a
 separação do DNA de proteínas e de RNA, possibilita
 a visualização do conteúdo nuclear, sob a forma de
 filamentos brancos.

 Vão ser utilizados diferentes tecidos e ficarás apto a
 observar DNA de várias origens, uma vez que todas as
 células contêm DNA.
Extracção do DNA

Objectivo:

Isolar DNA de células vegetais
          e animais.
Extracção do DNA
Procedimento
1º Passo :

Materiais
   100ml de água a 60 ̊C
   4 gr de sal (NaCl)
   10 ml (1 colher de chá) de detergente
   Álcool etílico (Etanol) frio
   1 kiwi ou ½ cebola ou 25 gr de fígado.
Extracção do DNA
Procedimento
1º Passo :
       Materiais
         Copo             Gobelé
          misturador       Tubos de
          (para o           ensaio
          fígado)          Gaze ou
         Almofariz         filtros de
         Colher de chá     café
         Bisturi          Marcador ou
         Espátula          etiquetas
Extracção do DNA
Execução

   Cortar em pedaços pequenos o kiwi;
   Reduzir a uma pasta, no almofariz;
   Adicionar o sal e o detergente;
   Adicionar água a 60 ̊C;
   Filtrar para o gobelé, previamente identificado,
    utilizando a gaze;
   Agitar suavemente a mistura e por 5 ou 10 minutos;
   Passar cerca de 2,5 ml para um tubo de ensaio,
    previamente identificado;
   Manter o tubo aquecido na mão enquanto introduz
    cerca de 5 ml de etanol;
   Deixar repousar durante cerca de 5 minutos.
   Observar.
Extracção do DNA




Foto 1 – Manter o tubo aquecido para que haja
contraste de temperaturas.
Extracção do DNA




Foto 2
Separação do DNA do kiwi
Extracção do DNA




Foto 3 – A mistura de kiwi é mais densa que o álcool.
Extracção do DNA




Foto 4
Separação do DNA do fígado.
Extracção do DNA




Foto 5
Separação do DNA da cebola
Extracção do DNA




Foto 6
Separação do DNA do kiwi.
Extracção do DNA
Tópicos para discussão
Quais são as estruturas celulares e qual a sua
 composição?
 As    membranas, celular e nuclear são compostas
  principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se
  aprisionadas na bicamada lipídica.
 Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos
  nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.
 As paredes celulares das células vegetais são compostas
  essencialmente por polissacarídeos.
 As pequenas estruturas celulares são compostas por
  substâncias com diferentes propriedades químicas, pelo que
  os procedimentos experimentais devem ser definidos de
  modo a separar um determinado constituinte celular das
  restantes partes, sem causar muitos danos.
Extracção do DNA
 Onde se encontra o DNA na célula?


 Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da
 célula.

 O restante DNA encontra-se em locais
 específicos como, por exemplo, organitos (as
 mitocôndrias e os cloroplastos possuem o seu
 próprio DNA).
Extracção do DNA
 Qual a função dos reagentes usados na experiência?

        Sal (NaCl)?

        Detergente?

        Álcool?
Extracção do DNA

 Quais as semelhanças e as diferenças entre o
 DNA de origem animal e o de origem vegetal?



 Porque motivo não se pode ver a dupla hélice que
 constitui a molécula de DNA?

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Extraindo DNA: Um guia passo-a-passo

  • 1. Cebola Kiwi Fígado Escola Secundária de Bocage Ciências Naturais – 9º ano – 2011/ 2012 Prof. Gabriela Bruno
  • 2. Extracção do DNA  Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta molécula é usada durante o período de vida de um organismo para fornecer instruções para milhões de processos celulares que ocorrem constantemente.  Para estudar o modo como essas informações são comunicadas à célula, os cientistas isolaram o DNA e estudaram o modo de interacção do DNA com as proteínas e RNAs.
  • 3. Extracção do DNA  Este trabalho laboratorial usa um processo semelhante ao utilizado pelos cientistas quando começaram as primeiras investigações sobre DNA.  Para isolar o DNA os cientistas separaram-no dos outros componentes celulares. As células são fragmentadas e o DNA separado do conteúdo lipídico das membranas da célula e dos organitos. Em seguida o DNA é separado das proteínas.
  • 4. Extracção do DNA  Pode-se realizar um procedimento muito simples para extracção de DNA com coisas comuns existentes na cozinha. Ao fim de 40 minutos pode-se observar aquilo que os cientistas levaram muitos anos a descobrir.  Embora nesta actividade se utilizem procedimentos e instrumentos muito simples que, não permitindo a separação do DNA de proteínas e de RNA, possibilita a visualização do conteúdo nuclear, sob a forma de filamentos brancos.  Vão ser utilizados diferentes tecidos e ficarás apto a observar DNA de várias origens, uma vez que todas as células contêm DNA.
  • 5. Extracção do DNA Objectivo: Isolar DNA de células vegetais e animais.
  • 6. Extracção do DNA Procedimento 1º Passo : Materiais  100ml de água a 60 ̊C  4 gr de sal (NaCl)  10 ml (1 colher de chá) de detergente  Álcool etílico (Etanol) frio  1 kiwi ou ½ cebola ou 25 gr de fígado.
  • 7. Extracção do DNA Procedimento 1º Passo : Materiais  Copo  Gobelé misturador  Tubos de (para o ensaio fígado)  Gaze ou  Almofariz filtros de  Colher de chá café  Bisturi  Marcador ou  Espátula etiquetas
  • 8. Extracção do DNA Execução  Cortar em pedaços pequenos o kiwi;  Reduzir a uma pasta, no almofariz;  Adicionar o sal e o detergente;  Adicionar água a 60 ̊C;  Filtrar para o gobelé, previamente identificado, utilizando a gaze;  Agitar suavemente a mistura e por 5 ou 10 minutos;  Passar cerca de 2,5 ml para um tubo de ensaio, previamente identificado;  Manter o tubo aquecido na mão enquanto introduz cerca de 5 ml de etanol;  Deixar repousar durante cerca de 5 minutos.  Observar.
  • 9. Extracção do DNA Foto 1 – Manter o tubo aquecido para que haja contraste de temperaturas.
  • 10. Extracção do DNA Foto 2 Separação do DNA do kiwi
  • 11. Extracção do DNA Foto 3 – A mistura de kiwi é mais densa que o álcool.
  • 12. Extracção do DNA Foto 4 Separação do DNA do fígado.
  • 13. Extracção do DNA Foto 5 Separação do DNA da cebola
  • 14. Extracção do DNA Foto 6 Separação do DNA do kiwi.
  • 15. Extracção do DNA Tópicos para discussão Quais são as estruturas celulares e qual a sua composição?  As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica.  Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.  As paredes celulares das células vegetais são compostas essencialmente por polissacarídeos.  As pequenas estruturas celulares são compostas por substâncias com diferentes propriedades químicas, pelo que os procedimentos experimentais devem ser definidos de modo a separar um determinado constituinte celular das restantes partes, sem causar muitos danos.
  • 16. Extracção do DNA  Onde se encontra o DNA na célula? Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos como, por exemplo, organitos (as mitocôndrias e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA).
  • 17. Extracção do DNA  Qual a função dos reagentes usados na experiência?  Sal (NaCl)?  Detergente?  Álcool?
  • 18. Extracção do DNA  Quais as semelhanças e as diferenças entre o DNA de origem animal e o de origem vegetal?  Porque motivo não se pode ver a dupla hélice que constitui a molécula de DNA?