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基因工程过程
- 10. • 什么叫基因工程?
基因工程是指依据先设计的蓝图,
用人工方法将某种生物的基因,接
合到另一种生物的基因组 DNA 中并
使其表达,使后者获得新的遗传性
状,产生出人类所需要的产物,或
创造出新的生物类型的现代生物技
。
术。
- 11. 基因操作的工具
• 化学剪刀 — — 限制性内切酶(简称限制酶
) 限制酶是在生物体 ( 主要是 微生
物 ) 内的一种酶,能将外来的 DNA 切断
,由于这种切割作用是在 DNA 分子内部
进行的,故名限制性内切酶。
特点:专一性。
即 一种 限制酶 只能识别一种 特定
的 核苷酸序列 ,并且能在 特定的切点 上
切割 DNA 分子。
- 12. 基因操作的工具
• 化学剪刀 — — 限制性内切酶(简称限制酶
) 大肠杆菌 (E.coR I) 的一种限制酶
能识别 GAATTC 序列 ,并在 G 和 A 之间
切开。 限制
酶
- 15. 基因操作的工具
• 化学浆糊 — — DNA 连接酶
DNA 连接酶 可把黏性末端 之间的
缝隙 “ 缝合 ” 起来,即把梯子两边扶手
的断口连接起来,这样一个重组的
DNA 分子就形成了。
- 17. 基因操作的工具
• 质粒:
质粒是除染色体外能够进行 自
主复制 的遗传单位,包括真核生物的
细胞器和细菌细胞中核区外的 DNA 分
子。现在习惯上用来专指细菌、酵母
菌和放线菌等生物中 核以外的 DNA 分
子。
质粒 是基因工程 最常用 的 运载
体。
绝大多数细菌质粒都是 闭合环
状双链 DNA 分子 。有的一个细菌中有
- 18. 基因操作的工具
• 大肠杆菌的质粒:
最常用的质
粒 是 大肠杆菌的质
粒 ,其中常含有 抗
药基因 ,如四环素
的标记基因。质粒
的 存在与否对宿主
细胞生存没有决定
性作用 ,但 复制只
能在宿主细胞内完
成。
- 23. 基因工程的基本过程
• 步骤二:目的基因与运载体重
组 1 )用一定的 限制酶切割质粒 ,使其
出现 一个切口 ,露出 黏性末端 。
2 )用 同一种 限制酶 切断目的基因 ,
使其产生 相同 的 黏性末端 。
3 )将切下的目的基因片段 插入质粒
的切口处,再加入适量 DNA 连接酶 ,
形成了一个 重组 DNA 分子 (重组质粒
)
目的基因与运载体的结合过程
,实际上是不同来源的 基因重组的过
- 24. 基因工程的基本过程
• 步骤三:重组 DNA 分子导入受体细胞
• 常用的受体细胞
:
有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农
杆菌、酵母菌和动植物细胞等。
• 将目的基因导入受体细胞的原理
借鉴 细菌或病毒侵染细胞 的途
径。
- 29. 练习
1 )以下说法正确的是 C
( )
A 、所有的限制酶只能识别一种特定的
核苷酸序列
B 、质粒是基因工程中唯一的运载体
C 、运载体必须具备的条件之一是:具
有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D 、基因控制的性状都能在后代表现出
来
- 31. 练习
3 )有关基因工程的叙述中,错误的是(
A
)
A 、 DNA 连接酶将黏性末端的碱基对连
接起来
B 、 限制性内切酶用于目的基因的获得
C 、目的基因须由运载体导入受体细胞
D 、 人工合成目的基因不用限制性内切
酶
- 33. 练习
5 )基因工程是在 DNA 分子水平上进行
设计施工的。在基因操作的基本步骤中
,不进行碱基互补配对的步骤是 C
( )
A 、人工合成目的基因
B 、目的基因与运载体结合
C 、将目的基因导入受体细胞
D 、目的基因的检测和表达