2. 타액완충능 검사(A)
구강 내 타액에 산이 첨가됨에 따라 산도의 변화에 저항하는
능력
타액의 산도를 특정범위로 낮추는데 필요한 산을 ml단위로
측정
산도 측정기(pH meter)또는 색 지표를 이용해 측정
산도측정기, 적정장치(titration equipment)
0.05N lactic acid, 0.05N base, 파라핀왁스, 소량의 기름을
함유하
고 있는 멸균된 유리병
완 충 능
원 리
장 비 및 재 료
3. ① 자극타액 10ml를 식사 후 최소한 1시간 뒤에 기름 아래에 수집한다.
② 이 중 5ml는 비이커내에서 측정한다.
③ 실내온도에 산도 측정기를 보정한 후에 타액의 산도를 유산 또는 염기를
첨가하여 7.0으로 맞춘다.
④ 실린더내의 유산의 양을 재측정한다.
산도를 7.0에서 6.0 으로 낮추는데 필요한 유산을 ml단위로 하여 완충능을
측정한다. 이 수치를 liter당 miliequivalent로 환산할 수 있다.
0.1 N 유산 소비량 우식활성
0.615ml 이상 -
0.614~0.484ml +
0.484~0.353ml ++
0.353ml +++
타액완충능 검사(A)
과 정 및 평 가
4. 산 첨가에 따라 생길 수 있는 pH의 변화에 저항할 수 있는
능력
한계: 10방울 이상이면 완충능 충분
10방울 이하이면 완충능 부족
기구: Burett, butett stand, Slider
재료: paraffin wax, color standard(pH 5.0) 시약(BCG+BCP)
acetic buffer(or pH 5.0 0.1N lactic acid)
타액완충능 검사(B)
완 충 능
원 리
장 비 및 재 료
5. ① 음료수로 양치
② 파라핀을 저작시키며 4-5ml의 타액을 채취
③ 정확히 2ml의 타액과 BCG와 BCP 혼합지시약 3방울 첨가
④ Calibtated Dropper로 0.1N유산용액을 한방울씩 첨가 (pH 5.0이 될 때까지)
⑤ 남은 2ml의 타액으로 위의 과정 반복하여 평균값으로 타액 완충능 산출
0.1 N 유산 소비량 우식활성
14 방울 이상 충분
10~14 방울 보통
6~10 방울 부족
6방울 이하 매우 주의 요함
10방울 이하로 나타난 경우 과일이나 야채를 많이 섭취
6방울 이하인 경우 탄산소다를 사용하여 일시적으로나마
부족한 완충능을 보충
타액완충능 검사(B)
과 정 및 평 가
6. 목적 : 구강 내 산 생성균의 양과 그 활성을 측정
실 험 목 적
실 험 원 리
원리 : 색지표 (Color indicator)로서 BCG(bromcresol green)를 함유하고
산도가 4.7~5.0으로 맞추어져 있는 배지에 자극성 타액을 주입하여
산생성 속도를 측정하는 방법으로 구강 내 산생성능을 비색적으로
측정하는 검사법
Snyder Test
7. 근거 : 타액 중의 세균이 산을 생성하여 치아우식증을 유발시킨다는 근거
→ 함수탄소 배양기에서 타액 중의 세균이 산을 형성
실 험 근 거
실 험 장 비
타액수집용기, 파라핀왁스, 스나이더 배지, 피펫, 배양 장비,
Union-screw cap test tube
Snyder Test
8. 1) 재료 준비 (증류수, agar, Dextrose, BCG,
beef extract, lactic acid)
2) 중탕기에 증류수를 넣고 중탕시키면서
낮은 온도에서 Beef extract를 넣고 끓인다.
3) 지시약 (0.04% BCG)을 넣는다.
배지 제조 과정
Snyder Test
9. 4) Dextrose와 Agar를 소량씩 넣으면서 엉겨붙지
않게 한다.
5) 0.1N Lactic acid로 pH 5.0이 되도록 조절한다.
배지 제조 과정
Snyder Test
10. 1) 정규 식사 전이나 칫솔질을 하기 전에 약 3분 동안 1.0mg 정도의 파라핀
조각을 저작하여 자극성 타액을 추출한다.
2) 실험시 medium이 든 test tube를 65℃의 중탕기에서 melting 시킨 뒤 수집한
타액 0.2ml를 pipetting하여 잘 흔들어 준다.
3) 시험관의 agar가 굳으면 37℃에서 72시간 배양한다.
실 험 과 정
Snyder Test
11. 실 험 결 과
24hr 48hr 72hr
color yellow
Yellow
green
Green Blue
activity
Marked
(고도)
Definite
(중증도)
Limited
(경도)
Inactivat
e
(불활성)① 대조군
② Inactivate (blue)
③ Limited (green)
④ Definite (yellow green)
⑤ Marked (yellow)
SnyderTestSnyder Test
12. Lactobacillus colony count
구강 내 산 생성균, 산 내성균으로 치아 우식의 직접적인 원인균은 아니지만
상당히 관련되어 있으며 치아우식 와동이 있는 부위에서 잘 발견됨
→ 우식 발생을 예견하는데 많은 참고 자료가 됨
Lactobacillus 란?
실 험 목 적
목적 : 타액(침)에서 유산균 같은 호기성 산성 세균을 알아내는 슬라이드
배양법으로 유산균의 농도는 충치 위험도를 나타냄
→ Dentocult LB
13. 원리 : LBS agar (Rogasa) 에서의 총 세균 집락수는 타액내 산생성균의
비율을 말해줌
→ Dentocult LB는 슬라이드 양쪽에 유산균 배양을 위한 Rogasa 배지가
존재
실 험 원 리
실 험 장 비
타액수집용기, 파라핀왁스, 식염수 9m가 들어있는 시험관 2개,
유리막대 2개, 배양장비(incubator), Quebec Counter, 피펫
Lactobacillus colony count
14. 1) 타액은 아침식사 전에 파라핀 왁스를 이용하여
자극성 타액을 받는다.
→ 파라핀 왁스는 5분 정도 씹는다.
(타액분비속도 검사 동시 진행 가능)
2) 타액 1ml와 멸균된 식염수 9ml를 혼합하여
1:10으로 희석한다.
3) 위 희석타액 1ml에 다시 멸균된 식염수
9ml를 혼합하여 1:100희석타액을 만든다.
실 험 과 정
Lactobacillus colony count
15. 4) 1:100 희석타액을 잘 섞은 다음,
각 희석액의 0.4ml를 유리막대로
agar plate에 바른다.
5) 그 plate에 표를 붙이고 4일(96hr) 동안
37℃에서 배양한다.
→ 튜브 배양기에 바로 세워서 배양
실 험 과 정
Lactobacillus colony count
16. 6) 세균집락의 수는 Quebec Counter를
이용하여 측정한다.
실 험 과 정
Lactobacillus colony count
17. 실 험 결 과
Activity
1mg 타액당
Colony 수
None or
Little
<1000
Slight 1000~10,000
Moderate
10,000~100,00
0
Marked >100,000
Lactobacillus colony count