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A IMPLEMENTAÇÃO DO MÉTODO COLILERT ®  NUM LABORATÓRIO DE PEQUENA DIMENSÃO : AS BARREIRAS DO CONVENCIONALISMO E AS VANTAGENS COMPETITIVAS Paulo Pedro LAQ / Universidade do Algarve Campus de Gambelas, 8005-139 Faro email: laq@ualg.pt
RESUMO DA APRESENTAÇÃO ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas
INTRODUÇÃO ,[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas Nestes métodos  o substrato definido é usado como fonte  de nutrientes vital ao crescimento dos microrganismos em pesquisa. Durante a incubação é libertado do substrato definido um cromóforo ou fluoróforo, indicando a presença do microrganismo alvo. Esta tecnologia está disponível desde a década de 90, é utilizada em diversos países com aprovação das entidades oficiais.
INTRODUÇÃO ,[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas Agradecimentos: Msc Marta Sofia Valente Bernardo, “Comparação dos métodos aplicados na detecção de bactérias coliformes,  Escherichia coli  e  Enterococcus sp . em águas para fins recreativos”, Universidade do Algarve, 2007.  Nesta apresentação vamos identificar as razões que levaram à escolha desta metodologia na nossa organização, alguns dos  problemas técnicos da aplicação a diferentes tipos de águas, e as vantagens em relação a outras metodologias disponíveis para o mesmo fim.
QUEM SOMOS…O QUE FAZEMOS  ,[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas
QUEM SOMOS…O QUE FAZEMOS 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas
A PROCURA DE SOLUÇÕES INOVADORAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas (Resultados em 24 horas) (Resultados comparáveis com métodos de referência) (Custo inferior a 30 EUR) 1º PROBLEMA Qualidade da água para consumo humano sem análises microbiológicas? (germes a 22º e 36ºC,  coliformes totais, coliformes fecais,  Escherichia coli , enterococos, clostridios) 2º PROBLEMA Rapidez e custo reduzido? (Resultados quantitativos/semi-quantitativos  no máximo em 24 horas, custo que permitisse manter o pacote nos 30 EUR) 3º PROBLEMA Meios, estrutura laboratorial, formação dos colaboradores? (Requisitos minimos de laboratório, facilidade de aprendizagem..)
A PROCURA DE SOLUÇÕES INOVADORAS 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas E a escolha foi :   COLILERT-18 + Quantitray 2000 da IDEXX Pacote básico de análises para águas de consumo, com resultados em 24 horas e determinação dos principais parâmetros químicos, físicos e bacteriológicos indicadores da qualidade da água.  Inclui a determinação dos seguintes parâmetros:  coliformes totais,  Escherichia coli , pH, condutividade, oxidabilidade, eH, cloretos, nitratos, amónia, dureza, alcalinidade ou acidez e ferro. PVP < 30 EUR negativo negativo negativo negativo positivo Amplificação de ADN – PCR quant. RT negativo positivo negativo negativo Aprendizagem negativo positivo positivo positivo Equipamento positivo positivo negativo  negativo Estrutura laboratorial negativo positivo positivo positivo Custo por analise positivo positivo negativo negativo Rapidez  no resultado Detecção imunolo-gica Enzimáticos Multi-poços (Colilert-18) Filtração por Menbrana Fermentação em tubos multiplos
A DESCONFIANÇA EM RELAÇÃO AOS KITS ,[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object],[object Object]
A IMPLEMENTAÇÃO DO COLILERT-18 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object]
VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO A DIFERENTES MATRIZES ,[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO A DIFERENTES MATRIZES 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas Foram testadas em paralelo 40 amostras de águas naturais subterrâneas e superficiais (lagos, rios, estuários, costeiras)  17.3% MLSA Escherichia coli Coliformes Totais Colilert 18  vs  MLSA Inconclusivo (analisar + amostras) Significativamente diferente ISO 17994:2004 Métodos equivalentes 95% (p<0.05) Métodos equivalentes 95% (p<0.05) Teste t Student para amostras emparelhadas 54.8 % 39.1% 82.5 % % de  amostras c/ contagens superiores IDEXX Colilert-18 MLSA IDEXX Colilert-18
QUANTITRAY 2000 ® ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas
DIFICULDADES... E ERROS MAIS COMUNS ,[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object],Dificuldades: ,[object Object],[object Object],[object Object],Soluções:
DIFICULDADES... E ERROS MAIS COMUNS (II) ,[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas ,[object Object],[object Object]
ANÁLISE SWOT Colilert-18 & Quantitray 2000 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas AMEAÇAS OPORTUNIDADES ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],PONTOS FRACOS PONTOS FORTES ,[object Object],[object Object],[object Object]
CONCLUSÕES ,[object Object],[object Object],[object Object],11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas Expectativas: Será possivel um dia ter métodos com o mesmo nível de robustez, simplicidade, rapidez e custo, para outros microrganismos?
MUITO OBRIGADO! 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas

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  • 1. A IMPLEMENTAÇÃO DO MÉTODO COLILERT ® NUM LABORATÓRIO DE PEQUENA DIMENSÃO : AS BARREIRAS DO CONVENCIONALISMO E AS VANTAGENS COMPETITIVAS Paulo Pedro LAQ / Universidade do Algarve Campus de Gambelas, 8005-139 Faro email: laq@ualg.pt
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  • 8. A PROCURA DE SOLUÇÕES INOVADORAS 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas E a escolha foi : COLILERT-18 + Quantitray 2000 da IDEXX Pacote básico de análises para águas de consumo, com resultados em 24 horas e determinação dos principais parâmetros químicos, físicos e bacteriológicos indicadores da qualidade da água. Inclui a determinação dos seguintes parâmetros: coliformes totais, Escherichia coli , pH, condutividade, oxidabilidade, eH, cloretos, nitratos, amónia, dureza, alcalinidade ou acidez e ferro. PVP < 30 EUR negativo negativo negativo negativo positivo Amplificação de ADN – PCR quant. RT negativo positivo negativo negativo Aprendizagem negativo positivo positivo positivo Equipamento positivo positivo negativo negativo Estrutura laboratorial negativo positivo positivo positivo Custo por analise positivo positivo negativo negativo Rapidez no resultado Detecção imunolo-gica Enzimáticos Multi-poços (Colilert-18) Filtração por Menbrana Fermentação em tubos multiplos
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  • 12. VALIDAÇÃO E APLICAÇÃO A DIFERENTES MATRIZES 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas Foram testadas em paralelo 40 amostras de águas naturais subterrâneas e superficiais (lagos, rios, estuários, costeiras) 17.3% MLSA Escherichia coli Coliformes Totais Colilert 18 vs MLSA Inconclusivo (analisar + amostras) Significativamente diferente ISO 17994:2004 Métodos equivalentes 95% (p<0.05) Métodos equivalentes 95% (p<0.05) Teste t Student para amostras emparelhadas 54.8 % 39.1% 82.5 % % de amostras c/ contagens superiores IDEXX Colilert-18 MLSA IDEXX Colilert-18
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  • 18. MUITO OBRIGADO! 11 de Dezembro de 2009 I Reunião sobre Análises Microbiológicas de Águas

Notas del editor

  1. Vocês usam Kits para fazer análises não é? IDEXX DST versus SMEWW
  2. Vocês usam Kits para fazer análises não é? IDEXX DST versus SMEWW