Description du sujet traité lors de mon stage et de mon travail de fin d'études en Master

1. Travail de fin d’é tudes Master 2
Biochimie
Détection de variations alléliques d’un gène
encodant pour un récepteur acétylcholique du
cerveau impliqué dans l’addiction au tabac.
Lieu de stage : Institut Scientifique de Santé Publique
(Bruxelles-Belgique)

2. Situation du problème
• Identification et développement de biomarqueur
ADN/ARN provenant de l’urine
• Biomarqueur??
• Provenant d’un tissu ou un fluide biologique
URINE

3. Cas de santé publique
• Le tabagisme responsable
de 5millions de morts/an
• 80% des fumeurs désirent
quitter leur addiction
• Seulement 5% sont
capables d’arrêter
• L’environnement et la
génétique tiennent un
rôle dans le
comportement vis-à-vis
de la dépendance

4. Objectifs de l’étude
• Utiliser l’urine comme source de
biomarqueurs ADN dans un cas de santé
publique (tabagisme)
• Implanter une méthode de détection du
SNP au niveau du gène CHRNA3

5. Stratégie mise en place

6. Amplification de la séquence
• Détection par sondes:
– Sondes TaqMan
• Détection par agent intercalant:
– Sondes SYBR Green

7. Amplification de la séquence
• Détection par sondes:
– Sondes TaqMan
• Détection par agent intercalant:
– Sondes SYBR Green