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            BACTERIAS


ASPECTOS GENERALES Y CITOLOGÍA



          PROF. MARIANA DOMÍNGUEZ Y.
        DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA
        FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
          UNIVERSIDAD DE CONCEPCIÓN
                                          1




                                          2




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OBJETIVOS


 CARACTERÍSTICAS DE LA CÉLULA BACTERIANA
     TAMAÑO
     MORFOLOGÍA
     AGRUPACIÓN


 ESTRUCTURA BACTERIANA
     BACTERIAS GRAM POSITIVAS
     BACTERIAS GRAM NEGATIVAS




                                           3




      TAMAÑO DE CÉLULA BACTERIANA




                                           4




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 ¿CÓMO SE EVIDENCIAN LAS BACTERIAS?




  OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA




                CULTIVO EN MEDIOS ARTIFICIALES




                   SIMPLES


                                      TINCIÓN DE
TINCIONES
                                         GRAM


                DIFERENCIALES

                                      TINCIÓN DE
                                    ZIEHL NEELSEN




                                                            3
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                      TINCIÓN DE GRAM

                              FROTIS



                          CRISTAL VIOLETA


                              LUGOL



                              ALCOHOL


                            SAFRANINA


GRAM POSITIVAS                                         GRAM NEGATIVAS




                                                                  7




                 TINCIÓN DE ZIEHL-NIELSEN




                   bacilos alcohol-ácido resistentes




                                                                  8




                                                                                4
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            MORFOLOGÍA BACTERIANA


COCÁCEAS

                  BACILOS

                                        ESPIRALES




                                                        9




     AGRUPACIÓN DE BACTERIAS COCÁCEAS


                            PARES       DIPLOCOCOS


                            CADENAS     ESTREPTOCOCOS




                            TETRADAS




                            8 CÉLULAS   SARCINA



                            RACIMOS     ESTAFILOCOCOS


                                                        10




                                                                     5
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11




12




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  AGRUPACIÓN DE BACILOS

1. CADENAS

                      ESTREPTOBACILOS




2. EMPALIZADA O LETRAS CHINAS




                                        13




3. SIN AGRUPACIÓN




                                        14




                                                     7
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BACTERIAS CURVAS Y ESPIRALES




                                  SIN AGRUPACIÓN




                                                   15




     CULTIVO EN MEDIOS ARTIFICIALES




                  MEDIOS DE CULTIVO




       LÍQUIDOS                   SÓLIDOS




                                                                8
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   CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVO

                     MEDIOS LÍQUIDOS




                         TURBIDEZ




   CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS SÓLIDOS



   COLONIA (ufc)




                                               9
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CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS BACTERIANAS




                                          19




   ESTRUCTURA BACTERIANA




                                          20




                                                       10
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             ORGANIZACIÓN CELULAR

 Bacterias



PROCARIONTES




                                    21




 COMPONENTES CITOPLASMÁTICOS




                                    22




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          ADN BACTERIANO

CROMOSOMAL O “NUCLEOIDE”
  doble hebra
  circular
  tamaño variable (0.7x106 -12x106 pb)
  superenrrollado




                                                       23




                     ADN
                  BACTERIANO


  CROMOSOMAL            EXTRACROMOSOMAL
                          plásmidos (1-200 x 103 pb)
   replicación
                          ADN de fagos
   síntesis proteínas




                                                       24




                                                                    12
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                RIBOSOMAS




Subunidad 30S    Subunidad 50S
- ARNr 16S       - ARNr 5S
- proteínas      - ARNr 23S
                 - proteínas




                                    25




          MEMBRANA CITOPLASMÁTICA




                                    26




                                                 13
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FUNCIONES DE MEMBRANA CITOPLASMÁTICA

  barrera osmótica de permeabilidad selectiva

  transporte de moléculas al interior y exterior de la
  bacteria

  contiene sistema transportador de electrones

  fosforilación oxidativa

  biosíntesis de componentes celulares

  anclaje de ADN



                                                         27




  PARED CELULAR BACTERIANA


                BACTERIAS


GRAM POSITIVAS              GRAM NEGATIVAS




                                                         28




                                                                      14
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PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS




                PEPTIDOGLICAN




   COMPONENTES
   • N-acetil glucosamina (NAG)
   • Ácido N-acetil murámico (NAM)
   • Aminoácidos (unidos a NAM)
                                            30




                                                         15
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                                                      31




lisozima   lisozima


                      medio isotónico
                                    medio isotónico




                                                      32




                                                                   16
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PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS


                      polímeros de ribitol o glicerol fosfato
                      • captación de cationes divalentes
                      • Antígenos de superficie




PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM NEGATIVAS




                                                           34




                                                                        17
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            BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

                                           antígeno O
                       lipopolisacárido    lípido A                 porinas

                                                                               lipoproteína



                            MEMBRANA EXTERNA

                                   PEPTIDOGLICÁN




                                          periplasma




PORINAS: proteínas 35 kDa, forman trímeros con canales internos.
         Función: Transporte de moléculas hidrofílicas (<500-700 Da)

LIPOPROTEÍNA: unión de membrana externa al peptidoglicán
                                                                                         35




                   LIPOPOLISACARIDO (LPS)




               AgO                                       core                 lípido A
     Muy variable y antigénico                          Altamente       ENDOTOXINA
     (identificación serológica)                       conservado        propiedades
                Hidrofílico                                               biológicas




                                                                                         36




                                                                                                      18
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                ACTIVIDAD DE LÍPIDO A O ENDOTOXINA




                 Endotoxina (lípido A) en pequeña cantidad




    fiebre      inflamación          síntesis anticuerpos     vasodilatación




                Endotoxina (lípido A) en elevada cantidad

  fiebre                                                         coagulación
                                                                 intravascular
  inflamación
                                                             shock
                  síntesis anticuerpos   vasodilatación



                                                                               37




EN RESUMEN




                                                                               38




                                                                                            19
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CONOCIENDO LA ESTRUCTURA DE BACTERIAS GRAM
POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS



¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN DE GRAM?




                                                                39




¿POR QUÉ ALGUNAS BACTERIAS NO SE TIÑEN CON
             TINCIÓN DE GRAM?

- PARED CELULAR COMPLEJA
 Ej. bacterias alcohol ácido resistentes (Mycobacterium)




                                                           40




                                                                            20
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- AUSENCIA DE PARED CELULAR

Ej. Mycoplasma, Ureaplasma




                                      41




      ESTRUCTURAS NO INDISPENSABLES


                FLAGELOS



                FIMBRIAS



                CÁPSULA



                GLICOCÁLIX


                                           42




                                                        21
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1. FIMBRIAS
    COMPOSICIÓN: proteica (pilina)
    FUNCIÓN: - pili común: adherencia
             - pili sexual: transferencia información genética




                                                       43




2. FLAGELOS        FUNCIÓN: movilidad bacteriana



                           monótrica



                            lofótrica




                            anfítrica




                             perítrica

                                                       44




                                                                        22
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 composición proteica (flagelina)    antígeno H




                                                    45




3. POLÍMEROS EXTRACELULARES


- CÁPSULA          COMPOSICIÓN: polisacárido
                   FUNCIÓN: protección de fagocitosis




                                                    46




                                                                23
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- GLICOCÁLIX            COMPOSICIÓN: polisacárido
                        FUNCIÓN: adherencia




Biopelícula de Staphylococcus aureus en catéter     47




ESPORAS BACTERIANAS

presentes en algunas bacterias
Gram (+) (Clostridium, Bacillus)

desarrollo en respuesta a stress

estructuras de resistencia

metabólicamente inactivas

resistentes a altas temperaturas,
desecación,radiación,colorantes.
ácidos.

                                                    48




                                                                24
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      ESPORULACIÓN
       BACTERIANA




                                                            49




                                                      exosporio
                                    cubierta
                                                           corteza
                     ESPORULACIÓN



                                    pared
                                    core



                      GERMINACIÓN
                                                ACUMULACIÓN DE
                                                DIPICOLINATO DE
                                                CALCIO EN CORE



CÉLULA VEGETATIVA                              ESPORA




                                                            50




                                                                            25
27/03/2012




   CARACTERÍSTICAS DE CÉLULA VEGETATIVA Y ESPORA BACTERIANA


Característica               Célula vegetativa                                 Endospora
Estructura                   Célula Gram positiva típica                      Corteza, cubierta y exosporio
Apariencia microscópica      No refringente                                   Refringente
Contenido de calcio          Bajo                                             Alto
Ácido dipicolínico           Ausente                                          Presente
Síntesis de macromoléculas   Presente                                         Ausente
Resistencia a calor          Baja                                             Elevada
Resistencia a radiación      Baja                                             Elevada
Resistencia a compuestos
químicos y ácidos            Baja                                             Elevada
Tinción con colorantes       Fácil tinción                                    Sólo tinciones especiales
Contenido de agua            Elevado                                          Muy bajo




                                                                                                        51
                                    Modificado de http://textbookofbacteriology.net/structure_10.html




                                                                                                                     26

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Bacterias: aspectos generales y citología

  • 1. 27/03/2012 BACTERIAS ASPECTOS GENERALES Y CITOLOGÍA PROF. MARIANA DOMÍNGUEZ Y. DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS UNIVERSIDAD DE CONCEPCIÓN 1 2 1
  • 2. 27/03/2012 OBJETIVOS CARACTERÍSTICAS DE LA CÉLULA BACTERIANA TAMAÑO MORFOLOGÍA AGRUPACIÓN ESTRUCTURA BACTERIANA BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 3 TAMAÑO DE CÉLULA BACTERIANA 4 2
  • 3. 27/03/2012 ¿CÓMO SE EVIDENCIAN LAS BACTERIAS? OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA CULTIVO EN MEDIOS ARTIFICIALES SIMPLES TINCIÓN DE TINCIONES GRAM DIFERENCIALES TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN 3
  • 4. 27/03/2012 TINCIÓN DE GRAM FROTIS CRISTAL VIOLETA LUGOL ALCOHOL SAFRANINA GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS 7 TINCIÓN DE ZIEHL-NIELSEN bacilos alcohol-ácido resistentes 8 4
  • 5. 27/03/2012 MORFOLOGÍA BACTERIANA COCÁCEAS BACILOS ESPIRALES 9 AGRUPACIÓN DE BACTERIAS COCÁCEAS PARES DIPLOCOCOS CADENAS ESTREPTOCOCOS TETRADAS 8 CÉLULAS SARCINA RACIMOS ESTAFILOCOCOS 10 5
  • 7. 27/03/2012 AGRUPACIÓN DE BACILOS 1. CADENAS ESTREPTOBACILOS 2. EMPALIZADA O LETRAS CHINAS 13 3. SIN AGRUPACIÓN 14 7
  • 8. 27/03/2012 BACTERIAS CURVAS Y ESPIRALES SIN AGRUPACIÓN 15 CULTIVO EN MEDIOS ARTIFICIALES MEDIOS DE CULTIVO LÍQUIDOS SÓLIDOS 8
  • 9. 27/03/2012 CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVO MEDIOS LÍQUIDOS TURBIDEZ CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVO MEDIOS SÓLIDOS COLONIA (ufc) 9
  • 10. 27/03/2012 CARACTERÍSTICAS DE COLONIAS BACTERIANAS 19 ESTRUCTURA BACTERIANA 20 10
  • 11. 27/03/2012 ORGANIZACIÓN CELULAR Bacterias PROCARIONTES 21 COMPONENTES CITOPLASMÁTICOS 22 11
  • 12. 27/03/2012 ADN BACTERIANO CROMOSOMAL O “NUCLEOIDE” doble hebra circular tamaño variable (0.7x106 -12x106 pb) superenrrollado 23 ADN BACTERIANO CROMOSOMAL EXTRACROMOSOMAL plásmidos (1-200 x 103 pb) replicación ADN de fagos síntesis proteínas 24 12
  • 13. 27/03/2012 RIBOSOMAS Subunidad 30S Subunidad 50S - ARNr 16S - ARNr 5S - proteínas - ARNr 23S - proteínas 25 MEMBRANA CITOPLASMÁTICA 26 13
  • 14. 27/03/2012 FUNCIONES DE MEMBRANA CITOPLASMÁTICA barrera osmótica de permeabilidad selectiva transporte de moléculas al interior y exterior de la bacteria contiene sistema transportador de electrones fosforilación oxidativa biosíntesis de componentes celulares anclaje de ADN 27 PARED CELULAR BACTERIANA BACTERIAS GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS 28 14
  • 15. 27/03/2012 PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS PEPTIDOGLICAN COMPONENTES • N-acetil glucosamina (NAG) • Ácido N-acetil murámico (NAM) • Aminoácidos (unidos a NAM) 30 15
  • 16. 27/03/2012 31 lisozima lisozima medio isotónico medio isotónico 32 16
  • 17. 27/03/2012 PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS polímeros de ribitol o glicerol fosfato • captación de cationes divalentes • Antígenos de superficie PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 34 17
  • 18. 27/03/2012 BACTERIAS GRAM NEGATIVAS antígeno O lipopolisacárido lípido A porinas lipoproteína MEMBRANA EXTERNA PEPTIDOGLICÁN periplasma PORINAS: proteínas 35 kDa, forman trímeros con canales internos. Función: Transporte de moléculas hidrofílicas (<500-700 Da) LIPOPROTEÍNA: unión de membrana externa al peptidoglicán 35 LIPOPOLISACARIDO (LPS) AgO core lípido A Muy variable y antigénico Altamente ENDOTOXINA (identificación serológica) conservado propiedades Hidrofílico biológicas 36 18
  • 19. 27/03/2012 ACTIVIDAD DE LÍPIDO A O ENDOTOXINA Endotoxina (lípido A) en pequeña cantidad fiebre inflamación síntesis anticuerpos vasodilatación Endotoxina (lípido A) en elevada cantidad fiebre coagulación intravascular inflamación shock síntesis anticuerpos vasodilatación 37 EN RESUMEN 38 19
  • 20. 27/03/2012 CONOCIENDO LA ESTRUCTURA DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS ¿CUÁL ES EL FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN DE GRAM? 39 ¿POR QUÉ ALGUNAS BACTERIAS NO SE TIÑEN CON TINCIÓN DE GRAM? - PARED CELULAR COMPLEJA Ej. bacterias alcohol ácido resistentes (Mycobacterium) 40 20
  • 21. 27/03/2012 - AUSENCIA DE PARED CELULAR Ej. Mycoplasma, Ureaplasma 41 ESTRUCTURAS NO INDISPENSABLES FLAGELOS FIMBRIAS CÁPSULA GLICOCÁLIX 42 21
  • 22. 27/03/2012 1. FIMBRIAS COMPOSICIÓN: proteica (pilina) FUNCIÓN: - pili común: adherencia - pili sexual: transferencia información genética 43 2. FLAGELOS FUNCIÓN: movilidad bacteriana monótrica lofótrica anfítrica perítrica 44 22
  • 23. 27/03/2012 composición proteica (flagelina) antígeno H 45 3. POLÍMEROS EXTRACELULARES - CÁPSULA COMPOSICIÓN: polisacárido FUNCIÓN: protección de fagocitosis 46 23
  • 24. 27/03/2012 - GLICOCÁLIX COMPOSICIÓN: polisacárido FUNCIÓN: adherencia Biopelícula de Staphylococcus aureus en catéter 47 ESPORAS BACTERIANAS presentes en algunas bacterias Gram (+) (Clostridium, Bacillus) desarrollo en respuesta a stress estructuras de resistencia metabólicamente inactivas resistentes a altas temperaturas, desecación,radiación,colorantes. ácidos. 48 24
  • 25. 27/03/2012 ESPORULACIÓN BACTERIANA 49 exosporio cubierta corteza ESPORULACIÓN pared core GERMINACIÓN ACUMULACIÓN DE DIPICOLINATO DE CALCIO EN CORE CÉLULA VEGETATIVA ESPORA 50 25
  • 26. 27/03/2012 CARACTERÍSTICAS DE CÉLULA VEGETATIVA Y ESPORA BACTERIANA Característica Célula vegetativa Endospora Estructura Célula Gram positiva típica Corteza, cubierta y exosporio Apariencia microscópica No refringente Refringente Contenido de calcio Bajo Alto Ácido dipicolínico Ausente Presente Síntesis de macromoléculas Presente Ausente Resistencia a calor Baja Elevada Resistencia a radiación Baja Elevada Resistencia a compuestos químicos y ácidos Baja Elevada Tinción con colorantes Fácil tinción Sólo tinciones especiales Contenido de agua Elevado Muy bajo 51 Modificado de http://textbookofbacteriology.net/structure_10.html 26