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LozanoRamirezAleiandra
TEIiAV.CROMATOGRAFIA.
OBJETIVO.
Emplearlacromatografiacomounat6cnicaquepermitesepararloscompuestospresentesen
unarnezcla;asimivno,utilizarlaparalapurificaci6ny posibleidentificaci6ndelosmismos,
Asimismoidentificarunasustanciaquimica,mediantecromatografiacomparada,
INTRODUCCTON(FUNDAMENTOTEOR:CO).
Elt6rrninocromatografia(delgriegochroma=colory Qraphos=escritura)aungueimplicacolor,
hasidoutilizadoindistintamenteparaprocesosendondeseempleanmateriascoloridase incoloras.En
general,el m6todopresentaunafaseestacionaria,com[rnmentesolida,lacualabsorbey adsorbela
mezclaporseparary unafasemdvil(liquidoo gas)quepasasobrelafaseestacionariay compitecon
ellaporlosconstituyentesdelamezcla,presentando6stosunamigraci6nselectivaatravdsdelsistema
dedosfases,
Losm6todoscromatograficospermitenfraccionarloscomponentesde unamezcla,ya que
dependendelamigraci6nselectivay diferencialdelossolutosa tav6sdeunsistemadedosfases:
unasoliday otrafluida.Lafasesolidasellamaadsorbente,y esestacisnaria;sedenominaadsorci6na
la capacidaddeladsorbenteparadetenero concentrarselectivamente,sobrew superficie,gases,
liquidososOlidosarrastradosporlafasefluidamovil.Elrepetidorepartodesolutosentrelafasefijay la
faseliquidamovibleesindispensableparaelfuncionamientodelascolumnasdeadsorci6n
La Adsorci6nsedefinecomolauni6ndelos6tomos,ioneso moldculasdeungaso deunliquido
(adsorbato)a la superficiede unsolidoo liquido(adsorbente).Enlossolidosporososo finamente
divididosla adsorci6nes mayordebidoal aumentode la superficieexpuesta,Deformasimilar,la
superficieadsorbentedeunacantidaddeliquidoseincrementasielliquidoestAdivididoengotasfinas,
La adsorcidnes tambi6nunaparteimportantede la catilisisy ohosprocesosquimicos.En la
absorci6n,lasmol6culasde lasustanciaadsorbidapenetranentodoel volumendelsolidoo liquido
adsorbente.
Lavelocidaddemigracl6ndeunsolutoenunacolumnadeadsorci6ndependeprincipalmentedea
capacidadadsortivadeladsorbente,delaconcentrhci6ndelsolutoy delavelocidadconquefluyenla
soluciony eldisolvente.ElllamadovalorR,estoes,lErazdnenheladistanciarecorridaporelsolutoy
laquerecorreeseluyente,esunaconstantettil. , y esiguala larazonentreel materialquehayaen
saluci6nen la columnay el quees retenidoporel adsorbente,Conun adsorbentey un eluyente
determinados,elvalorRsirveparacaracterizarelsoluto.Conunsolutoy uneluyentedeterminados,el
valorRdalamedidadelacapacidaddeadsorci6ndeladsorbente.
Losm6todoscromatograficosseutilizanconftecuenciaenellaboratoriodequimicaorg6nica,con
elprop6sitodesepararmezclasdecompuestossintdticosonaturales;asimismoparalapurificrci6nde
diversasespeciesorgAnicas,ya quede estamanerase fraccionanlos compuestosmediantela
comparaci6ndeestosconotrosquesecreenid6nticos.Aunquemuysencillosensuprincipioy enel
mododeoperar,losm6todoscromatografic'ossepuedenvariardemuydiversasmansras:empleando
variosadsorbente,disolventesy eluyentesLasmezclasdesustanciasldbileslcuyaspropiedadesson
tansemejantesquenoes posibleseparadasporcristalizaciony destilacion,cedenf6cilmentea las
fuerzasselestivasenlascalumnasdeadsorci6n.
I Queresbalaf6cilmente.qufm.[cornpuesto]Queestacildetansformarenofom6sest*le
1dell CROMAT- CISB
2. Resbucfuraci6npor:Prof.lsrnaelSalmBuf6n Lab.Q.O.I
LozanoRamirezAlejandra
LascolumnasdeadsorcionsonUtilesparapurificarciertassustancias,resolvermezclasen
suscomponentesy verificarla purezade diversassustandas.Sedicequeun compuestoes
cromatogreficamentepurosinosepuederesolvermediantelaaplicacidndediversosadsorbentesy
eluyentes.Sepuedencompararsustanciasquesesospechasoniddnticasporrnediodelaadsorcidn
deunamezcladeellasendiversascircunstancias:siseformamasdeunazona,nosuniddnticas,ysi
lamezclaesinseparable,probablementeseanid6nticalasdossustancias.
Acontinuaci6nseesquematizanlosrndtodoscromatograficosm6scomunes,
CromatografiadeReparto.Invductaunafasem6vil,quepuedeserunliquido;enestecasose
tratadecromatografialiquido-liquido(CLL),ounas,encuyocasoescromatografiagas-liquido(CGL).
LaCLLsellevaa caboencelulosay geldesiliceh0rneda.Enella,el aguapresenteact6acomo
soportedela faseestacionaria,porlo queseempleaparasepararsustaneiashidromlubles.La
separacionseefect0aalrepartirselasustanciaentrelahumedaddelsoportey eleluyentequefluye
mbreella.Asuvez,laCGLinvolucraunafaseestacionarialacualpresenteunaestructuraanilogaa
ladelassustanciasquec.omponenlamezcla.Paraellosecreaunapeliculamuyfinaquehacela
funci6ndefaseestacionaria,lacualdebeposeerbajavolatilidadsobreelsoportes6lido,aumentando
asilasuperficieintedasialentreelgasyelliquido,tantocomoseaposible.
Cromatograffade intercambiolonico.lnvolucragruposfuncionalescomunesde los
intercambiadores16nicos,asi,gruposcationicos(como-SO:H,-CO2H,-OH,-SH,-pO:H2,-NRf)o
gruposanionicos(como-NHz,-NHR,-NRtseunencovalentementealafaseestacionariasolida,por
lo comtnunaresinaconstituidapol gruposreactivosasociadosa ioneslAbilescapacesde
intercambiaseconotrosionespresentesenelmedioquelosrodea,Consecuentemente,losionesde
soluto,decargaopuestaa lafaseestacionaria,sonatraidoshaciaestaultlmamedianteunafuerza
electrost6tica,Lafasemovilesunliquido,asielequilibriodelosionesdesolutoentredisolventey los
sitiosfijos{positivoso negativos)cargadosde la faseestacionariafundamentanestem6todo
ctomatogr6ficu,
CronatografiadeadsorcionldeadaporTswerry reimplantadaporKuhny Ledereren'1g31.La
separaci6ndeloseompuestosdeunamezclaetabasadaenlasdiferenciasdelequilibrioadsorcidn-
desorcidn,queestospresentanmbreel solidoestacionario.Laadsorcidnesla capacidaddeun
sistemaadsorbenteparadetenero concentrarselectivamentesobresusuperficiegaso liquidos
arrastradosporlafasernovil,Asi,enunsentidocromatogr6flc,o,el terminoadsorci6nserefiereal
M6todosCronatograficos
Fmesbcionaria Liquido 56lido
Fmemoll Gas Liquido Gas Liquido
M6bdo
CGL CLL cGs CLS
Rryto Adsorcion
Adsorci6n
lntercambiolonho.
Exclusi6nmolecular.
2de11 CROMAT. CISB
3. Reesbucfuraci6npor:Prof. lsnaelSalasBu!6n Lab.Q.0.I
LozanoRamirezAlejandra
?
4.
resultadodelasfuerzasintermolecularesentrelasuperficiedelsolidoy lasmol6culasdelsoluto,ello
comoconsecuenciadesuinteracci6ndebidaaunao m6sdelassiguientescausas:
1. Fuerzasde London(fuerzade atraccionnetadebil)entretodaslas superficiesy mol6culas
adsorbidas,
Fuerzaseleckost6ticasentrelassuperficiespolaresy cualquiermol6culaadsorbidao entre
superficiesnopolaresymoldculaspolaresadsorbidas.
Fuerzasdetransferenciadecargaentredonadoreselectr6nicosfuertesyaceptores.
Formaciondeenlacesdehidr6geno.
Alrespecto,esconvenientemencionarqueestasfuerzasqueconducena laadsorci6nfisica,son
m6sdObilesquelasqueseencuentranenlasespeciesionicasocovalentes.Encualquierfendmenode
adsorci6ninfluyentresvariables:adsorbente,eluyentey solulos.Lapolaridad,asicomola acidezo
basicidaddelostreselementosanteriores,esimportante,puesinfluyeenel comportamientsde una
sustanciaendisoluci6ny enelpoderadsorbentedelafasefraccionada.Esdecir,e poderadsorbente
deunasustanciaestaenfunci6ndeldisolvente,asicomodeltamanodeparticuladeladsorbenteya
quecuantomenofseaesta,mayorserAelgradodesepalaciondelamezcla;sinembargo,disminuir6a
velocidadconlaqueeldieolventeo lasolucidnpasar6sahav6sdelafaseestacionaria,Porotraparte,
paraaumentarestarapidezse puedeaplicarsuccidnsuave(parteinfedor)o presidn{porla parte
superior)enelcasodequenecesariamentesetengaqueutilizarunpolvornuyfinocomoadsorbente,
paraelcasodeunacromatografiaencolumna.
CromatografiaenCapaFinao CapaDelgada.Estat6cnica,sedesignaconel acr6nimoCCF(TLC,
delinglesThinLayerChromatography),y comenz6a ulilizarsenormalmenteen1g60.Setratadeuna
cromalografiade adsarciony consisteen recubrirunaplaca,comtnmentede vidrio,conunacapa
uniformede unasuspensionde un adsorbenteadecuadoen polvo(faseestacionaria,tabla10),se
colocacercadelorigendelaplacaunamuestradeunadisoluci6ndelcompuestoorg6nico{omezcla)
enestudio,sedejaqueundisolventeadecuado(fasem6vil)asciendaporlacapadeladsorbentepor
capilaridady el(los)compuesto(s)selocaliza(n)enlaplacadirectamenteenelcasodeloscompuestos
coloreadoso conayudade un reveladorcuandoloscompuestossonincoloros.Loscompuestos
asciendenconvelocidadesdistintasporla capade adsorbenten relaci6neluyente,ocasionandola
separaci6ndeloscompuestosdeunamezcla.
Estatripleinteracci6nfijalasvelocidadesrelativasa alasqueel frentededisolventey el soluto
asciendenporlacapaadsorbentequerecubrelaplacadevidrio.Asi,paraposiblesidentificacionesse
calculanvaloresde R, (relaciondefrentesofrentesderetenci6n),elcualsedefinecomoelcociente
entreladistanciarecorridaporelcompuestoutilizadocomosolutoy lareconidaporeleluyenteenel
mismotiempo.
Cromatografraencolumna.Enlacromatografiadecolumna{CC)sellevaa cabolaseparacionde
mezclasquetienenlugarenunacolumnaqueseencuentraempacadaconunadsorbenteadecuado
ffaseestacionaria),Seponelamezclaenlacolumnay sehacepasarporellaundisolventeo mezcla
deellos(eluyenteo fasemovil);lassustanciassonarrastradasporeleluyenlea diferentevelocidad;
estecontinuofluirse denominadesarrollode la columna,Lassustanciasquetienenlos m6saltos
coeficientesdedistribuciinsetrasladamis r6pidamentehaciaabajodelacolumna.Selograasi,la
separaciondeloscompuestosloscualessonobtenidosmis tardeporlacolumna.Silassustanciasa
separarsoncompuestoscoloreados,$e puedevercomose desplazansucesivamenteen bandas,
separiindoseunasdeotrasalsalirdelacolumnaparasuidentificaci6n,sinembargo,enlamayoriade
3de11 CROMAT. CISB
4. Reestucturaci6npor.Proft.lsrnaelSalmBubon Lab.Q.0.I
LozanoRamirezAlejandra
lasseparacionescromatogrAficasloscompuestosa separarsonincolorosy, enestoscasos,el fluido
queabandCInaserecogefraccionadamenteparaseranalizadoposteriormenteporCCF.
Cromatografraen papel.Unoscuarentaafrosantesdequese inventarael metododeadsorcion
cromatogrdficase habiaobservadoquelossolutosemigrabanen el papelfiltroporcapilaridadcon
diferentesvelocidades.Esteefecto,queseobseryafAcilmentesiseintroduceunapuntadeunatirade
papelenunasoluci6ndesolorantes,seaprovechotambidnparalaresolucidndemezclasinorgAnicasy
org6nicas.Estaseparaci6ndemezclasdesolutosporadsorci6nentirasdepapelfiltro,quealprincipio
fuellamadaan6lisiscapilar,es ahoraconocidacomocromatograflaen papel.Enprincipio,no hay
diferenciaentrelasseparacionesobtenidasentirasdepapelfiltroy lasqueseobtienenencolumnade
adsorci6n.
Elecci6ndeladsorbentey eluyente
Encromatografiaalosdisolventes(eluyentes)selesconocecomofasemovily aladsorbentesele
conocecomofasefija,
En la mayoriade las aplicacionesdel m6todode adsorci6ncromatogr6ficahayque prestar
atenci6nespeciala laelecci6ndeladsorbentey eleluyente.Estasdosfasesinmissiblesdebenretener
solutosenequilibriodininico,peroel adsorbentedebetenerla afinidadexactaporlossolutos.Si
atraelossolutosdemasiadofuertemente,nosepuedehacerqueestosemigrenporlacolumnay acaso
sedificultesurecuperacionporelucion,Siel adso$entelienepocaafinidadporlossolutos,emigran
r6pidamenteporlamlumnay casinoseefect0aningunaseparacion,Porreglagenerallassustancias
no polaresson adsorbidaspor adsorbentesactivadossi est6ndisueltasen hidrocarburos,Las
sustanciaspolaresson adsorbidaspor adsorbentesd6bilmenteactivosen 6teres,cetonasy
compuestoscloradosd6bilmentepolarescomodisolventes.
El poderde un adsorbenteno dependesolode ella misma,sinotambi6ndel disolvente
(eluyente)empleado.En consecuencia,no es posibleestablecerunaclasificacionrigurosade los
poderesadsorbentesrelativosde las diferentessustaneias.Sin embargosi podemoscitarlos
principalesfactoresqueinfluyenparalaeleccidndeunAdsorbentequeson:
- Debeserinsolubleeneldisolventequesevaautilizarparalaseparacion,
- Nodebereaccionarconlassustanciasquesevanaseparar,asi6'omoeleluyente
- No debeactuarcomocatalizadorde su descomposicion,transposicion,polimerizacion.
lsomerizacidn.etc,
- Necesitapresentatunacomposicidnuniforme,debiendoser incolorosi se empleapara
compuestoscoloreados.
ADSORBENTES
Fuertes lntermedos D6biles
Al0mina
Carb6nActivado
Tienadediatomem
(Iiara SiliceaG)
Carbonatocalcico,potmicoosodico.
GeldeSilice
Sultatoc6lc*:o
Magnesia
Cal4aga&
$acarosa
lnulina
Almid6n
Talco
AcetatodeCelulosa
4de 11 CROMAT. CISB
5. Rees:fucfuraci6npu: Prof. lsmaelSda But6n Lab.Q,O,I
LozanoRamirezAlejandra
Enla siguientetablase resumenalgunosresultadosde la experienciaacercadelusode
disolventes(eluyentesJy adsorbentesparainvestigaci6ncromatograficade diversasclasesde
compuestos,
Masaundisponiendode estosinformes,es precisodeterminarpormdtodosempiricosla
resolvibilidaddemezclasdesustanciasdesconocidas,Porreglageneral,unpocodelamezcladisuelta
endiferenteseluyentesesadsorbidaencolumnaspequefrasdediverssadsorbentes,ysedesarollan
Sustancia Adsorbente Eluyente
lonesInorg6nicos Resinaspaa intscambiodeiones:
Zeolih,
8-Hidoxiquinolina
Agua,solucionesdesles
Agua,solucionesdesales
Agua;acidos
AcidosOrginicos Resinasparaintercanbiodeions:
Aci& silicilicohidabdo,
Talcao6cidosilicilbo
Agua
Alcoholbuliiicoma agua
Benceno
Azucares Bauxita
Prylfilto
Agua
Agua
Aminodcidos Almidon
Resinasfaa lntercambiodeionm:
di6xidodetihnis
Alumina
Agua
Agua
Agua
Agua
Alcaloides Resinaspaa intercambiodeiones:
Allmina
Agua
Agua
Clorofilas Srcaosa Et* depet6leomis alcoholes
Xantofilas Sacarosa
Magnesia
Eterdepet6leomdsaboholes
Eterdepef6leomisacetona
AlcoholesAlifdrticosyesteroles Al0mina
Al[mina
EterOepetoteom6sbenceno
Hldrocarburosinsaturados Cal
Magnesia
Eter de pet6leo: tetacloruro de
cabono:benceno
Hidrocaburossaturados Al0mina
Magnesia.
Eter& pefoleo
Eterdepef6teo
5dell CROMAT. CISB
6. Reesfucturai6npr: Prof.lsrnaelSalaBuf6n L*. Q.0.I
LozanoRamirezAlejandra
loscromatogtamascondiferenteseluyentes,quevaliandesdeloshidrocarburosnopolareshastalos
alcoholesy6cidosorg6nicosfuertementepolares,
Raneladares
Losreveladoressonm6todos(visuales)empleadosparalalocalizaciontantodesustancias
coloridas,asicomodecompuestosincolorosy porconsiguienteinvisibles,Estossepuedenclasificar
enflsicosyquimicos.
Losprimetosutilizanpropiedadesparticularesdeloscompuestos,talescomolafluorescencia
ylatadioactividad,aunquesuaplicaci6nesmuylimitada;taleselcasodelaluzultravioletaquesolo
permitereconocerentidadesquimicasquerepresentanunailuminaci6ncaracteristicaa longitudesde
luzemitidalargade(366nm)ocortade(254nm).
Losmdtodosquimicoshacenreaccionaralassustanciasarevelarconalgrinagentequimico
conelqueformanuncompuestocoloreado;elteveladoconm6todosquimicossepuederealizaren
unoovariospasosyenmuchasocasionesesnecesariocalentarparacompletarlareacci6n.
I}ESARROLLOEXPERIMENTAL
Matedalysustancias:lascorrespondientesaCROMATOGRAFIA
TECNICAS,
Cromatoqrafraenpapel
Paralosfinespricticosde nuesttodesarrolloexperirnentalesteprocedimientoservirApara
ptoporcionarunaexperienciapreviasobresustanciascoloridas,antesdeatendera nuestramuestra
problema.
1) Elaborarcartoncillosdepapelfiltrodeaprox135mm(largo)por15mm{ancho).
2) Prepararmuestrasde eluyentesde dilerentepolaridady colocaren diversostubos
aproximadamente1mldecadaeluyente.
3) A 8 mmaprox.delaparteinferiordelpapelfiltrotrazarunalineahorizontalconl6pizde
grafito.Enestalinea(alcentro)colocarunagotitadelatintao s:oluci6ndec,olorantequese
deseeemplear(conlaayudadeunmicrocapilar.)'
4) lntrcducirlatiradepapelenlostubosdeensaye,procurandoquelamuestranosealavada
poreleluyente
5) Dejarrepoiarhastaqueelfrentedeldisolventehayaascendidounos10crna partirdela
partequeestafueradeldisolvente.Retirarelpapel.
0) Marcarlaalturaalcanzadaporelftentedeldisolventeconunl6pizdegrafito.
7) DejarsecarelpapelydeterminarelvalordeRf,
Loseluyentessugeridosconsistenenmezclasenlassiguientesproporciones.Notesdquelos
eluyentesvandisminuyendodepolaridadentantomayoreslaproporcidnden-hexano,
Sustancia Cantidad(%)
AcetatodeEtilo r00 95 90 85 m 75 7A 65 60 55
6de11 CROMAT. CISB
7. Reestucturaci6npor:Prof.lsmaelSalasBut6n Lab.Q.0.I
LozanoRamirezAleiandra
n-Hexano 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
Sustancia Cantidad{%)
AcetatodeEtilo 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5
n-He,rano 50 55 60 65 tv 75 80 85 90 95
CromatwrafraenCapaFina(CCF)
Sesugierenunm6todoqueinvolucraalaSilicagel.
1) Adicionarunadisolucion{1:3)demetanol- cloroforrnoa unacantidadsuficientedesilicagel,
demodoquedespudsdeagitaradecuadamenteseobtengaunasuspensionfluida,
2) Tomar2 portaobjetosmuylimpios(exentosde grasa)y unirlosporsuscaras.Sumergirlos
unidosa la suspensiondegeldesilicea unas3 partesdesulongitudporunossegundos,
hastaformarunespesorde0.3mmaprox;posteriomentesacarlosy permitirquesesequen,
separarlosportaobjetos.
3) Aplicarconunmicrocapilarunagotafinadelamezcladesustanciasendisoluciona separar,
sintocarlapeliculadeladsobenteparanoestrellarlaa unadistanciaaprox.De0.5cmdel
extremoinferiorde la placa.Si la mezclafuesemuydiluidao clara,aplicar2 6 3 gotas
procurandodepositarlasenelmismolugary permitiendoquecadaaplicacionseseque.
4) Cubrirla superficiedelfondode unacAmaracrom6tograficaconpapelfiltroy agregarel
eluyentea la c6maraen un volumental,queal introducirla placa,el liquidotoqueel
adsorbentey nolasaplicacionesdenuestramuestraproblema.
5) Introducirlaplacaalacdmara,cerrarestaparaevitarquesevolatiliceeleluyente,permitiendo
eldesanolloc,ompletodelcromatograma,
6) Retirarlaplacacuandolaascensi6ndeleluyentecasihayaalcanzadolapartesuperiordela
placay marcarlaaltutaalcanzadaporeleluyente,delinearlasmanchasquehayanaparecido,
Encasodenoobservardichasmanchases necesariorcvelar,primercconunalamparade
rayosUVoconalg0nrevelador,
7) Medirladistanciadelpuntodeaplicaci6ndela muestraproblemaal centrodela manchay
dividiresteentreladistanciadelorigena laalturaquealcanzoeleluyente,obteniendoasiel
valordeR,
8) Selectionarel eluyenteidealdesarrollandotantoscromatogramas(CCF)comoserequiera,
conelobjetivode lograrla separaci6n6ptimadeloscomponentesde la mezclaproblema.
Paraelloseutilizarandisolventesdedistintaspolaridades,o bienrnezclasdedisolventesen
distintasproporciones,2
VerDiagranaI
CramatoqrafraenCatu{nna.(CC)
' En casodequemediantepruebasdesolubilidadpreviassehayadeterminadola polaridaddenuestra
muestrael eluyentedeberdtenerunapolaridadcontrariaafin dequeno lavepor completonuestra
muestra.
7de ll CROMAT. CISB
8. Reestucturaci6npor:Prof. lsnael$almBubon Lab.Q.0.I
LozanoRamirezAlejandra
1) Seleccionarelsistemadeeluci6nadeeuado,mediantelaformadescritaenlat6cnicadeCCF.
2) Montarunacolumnacromatograficasujet6ndolaconunaspinzasdetresdedosenunsoporte
universalycolocaruntrozopequenodealgod6nenelcuellodelasalidadelacolumnaconla
ayudadeunavarilla.
3) lntroducirconlaayudadeunembudounosmldelafasemovilsuficienteparaeliminarelaire
delalgod6n,presionandoesteconunavarilla,Posteriormentellenarla mitaddelaculumna
confasem6vil.
4) Adicionarinmediatamentedespu6sde empacarla columnasulfatode sodioanhidridsen
cantidadsuficientequecubraunaalturade0.5-1.0cmapfox,por aribadelSilice,verificar
queeleluyentecubraaambossistemas.
5) Disolverenlaminimacantidaddefasemovillamuestrae introducirlaa lacolumnamediante
unapipetaPasteur,procurarqueal mornentode la adicionexistala menorcantidadde
eluyentejustoporelniveldesulfatodesodioanhidridoy sinqueselleguea adherirsobrelas
paredesdelacolumnayjustoenelcentrodelacolumna.
6) Adicionarfasem6viljustocuandola muesfaseencuentreporel niveldesulfatode sodio
anhidridoparaqueestaseaeluidaatrav6sdelacolumna,Pracurarquelapartesuperiordela
c'olumnasiemprecontengafasem6vilhastaterminarde recolectarlasfracciones,evitando
conestolafomaciondeburbujasalolargodelacolumna,
7) Recolectarporfraccionesenrecipientesadecuados.
Ver Aagramall
lVolasy Ofseryaciones.
Parala experienciade cromatografiaen papel,el asesory los alumnoshande prepararlas
sustanciascoloddasqueconsiderenpertinente,yaseanproductoscomerciales,mezclasdejugos,tintas,
etc.
Losmicrocapilarespuedenfabricarsetomandountubocapilarsinheparinay calentAndoloporsu
partemedia,estirindoloy cort6ndoloporlamitad.Deestamaneraseobtienendosmicrocapilares.
8de l1 CROMAT. CISB
9. Rmfuctsraci6npor:Pmf. lsrnaelSala Buffin Lab.Q.O.I
LozanoRamirezAlejandra
Diagramat Cromatografiaen CapaFina(CCF).
Preparar rma suspensi6nen
metanol-cloroformo 1:3 de
silice.
Sumergir 2 portaobjetos
unidos por sus caras es la
suspensi6ndesilice.
Separarlosporaobjetosy
oermitir susecado.
Retirar la placa y marcar la
alhra alcanzada por el
eluyente.
9de l1 CROMAT. CISB
10. Reesfucturaci6npc:Prof.lsrnaelSdmBufon
DiasnmattCruna@r*fiaenColnmna.fGC)
1ab.0.0.I
LozanoRamirezAleiandra
Pregar una columna cromatog$fica y
colocarrm trozo de algo&n en el cuello de
salida.
Faseestacionaria
Silice
Micionarfasem6vil aliacolumnaycon
unevtrilla eliminaxel airedelalgod6n.
Adicionar mis fase m6vil y empcar la
columlavertierds unasuspensi6nespesade
silice con eluyente,perrnitiardo en fcrma
simulrineala salidadeeluvente.
Adicionarsulfatodesodioanhi&ido sobre
la faseestacionaria
Agrepr la mues,traproblema.
Affadirfam mordlduranteel desrrollo del
crornatognlma.
Recolectarlasfraccioneseluidas.
lCIel1 CROMAT. CISB
11. Ww
hrlesfigracldnFrovia. 'etegs:s
-urs*s-EFMAeb^J_
IasEs tllrma€ruaurss ,?RoFre-aao's 6
DFfersnciaentreabsorei"ffi#rD{r
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Reeductr€cifnpor:Prcff.lsnssl$dB Bufon LS.0.O.I
LozanoRamkezAleianda
BFL]OGRAFh
CursPr*{icqdeQulmicaOrg6n}ca,BreweterQ.Ray,EdAanrbra,Mdxlco,1986pp49-51
ffinff.tcepbn$i$rnfi$cedeCglpuest0e'&sFliffi.$hrinerRalph1,,Ed.Umusa,Nklxico,1990,pp7$
80
DimlEn$hdeTe*rnindosiaQuimiea.&seR.Barcelo,Ed.Alhanbra
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