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ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO
“Saber para Ser’’
Trabajo de Biotecnología Ambiental
Nombre: Ariel Cabrera.
Facultad: Ing. Biotecnología Ambiental.
Docente: Ing. Marcelo Carrera.
Fecha: 2014-04-22
Tema: Ingeniería Genética en la Biotecnología.
Ingeniería Genética en la Biotecnología.
Tecnicas dirigidas a modificar el material hereditario (genoma) de alguna especie, con fines
variables, desde la superacion de plagas y enfermedades de origen genético o con finalidad de
conseguir productos o un individuo con características no existentes haste ese momento.
Metodología de la Ingeniería Genética.
La ingeniería genética incluye un conjunto de metodologías biotecnológicas, entre las que
destacan:
*La tecnología del ADN recombinante: con la que es posible aislar y manipular un fragmento de
ADN de un organismo para introducirlo en otro.
*La secuenciación del ADN: Técnica que permite saber el orden o secuencia de los nucleótidos
que forman parte de un gen.
*La reacción en cadena de la polimerasa (PCR): con la que se consigue aumentar el número de
copias de un fragmento determinado de ADN, por lo tanto, con una mínima cantidad de muestra
de ADN, se puede conseguir toda la que se necesite para un determinado estudio.
Aislamiento del ADN
El objetivo de un proceso de aislamiento de DNA es conseguir separar esta molécula del resto de
las macromoléculas (proteínas, lípidos y polisacáridos) presentes en el interior de las células.
Dentro de la Ingenieria genética una vez que se ha logrado separar el ADN en segmentos
pequeños es necesario que cada uno de estos pueda ser identificado diferencialmente uno del
otro. Nuevamente la genética bacteriana aportó la solución. Se trabajó con un tipo de virus
bacterianos, los bacteriofagos, y con pequeñas estructuras de ADN circular extracromosomal,
llamadas plásmidos. Tanto uno como otro, son capaces de trasmitirse en forma natural de una
bacteria a otra y son los responsables de la transferencia de material genético entre las mismas.
Vectores para la tranferencia de ADN clonado
Los vectores para la transferencia de ADNclonado son moléculas transportadoras que transfieren y
replican fragmentos de ADN que llevan insertados mediante técnicas de ADN recombinante. Para
que sirva de vector, una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que
transporta. También tiene que tener secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del
fragmento de ADN a clonar.
Para insertar un fragmento de ADN al vector, se utiliza una enzima de restricción, y se mezcla con
fragmentos de ADN producidos con la misma enzima.
Los vectores que transportan un fragmento insertado se denominan vectores recombinantes.
Virus
Los vectores virales agrupan cuatro tipos de virus: retrovirus, adenovirus, virus adnoasociados y
herpesvirus; existen también vectores no virales, como el bombardeo con partículas, la inyección
directa de ADN, los liposomas catiónicos y la transferencia de genes mediante receptores.
Los vectores virales son unos virus modificados que hacen de vehículo para introducir material
genético exógeno en el núcleo de una célula.
En terapia génica, el uso de virus como vectores requiere la eliminación de los genes que dotan al
virus de su capacidad infecciosa y patógena, dejando únicamente aquellos que participan en la
inserción del material genético, y su sustitución por el gen terapéutico de interés. La Principal
ventaja de su utilización en la terapia génica es que se pueden producir en grandes cantidades y
transfieren de forma muy eficaz el material genético a un número elevado de células y tejidos,
aunque el hospedador parece limitar la duración de la expresión del nuevo material genético en
terapia genética.
Método para la produccion de anticuerpos monoclonales
George Köhler y Cesar Milstein en 1975 fueron losresponsables del desarrollo de la
tecnologíanecesaria para la generación de anticuerposmonoclonales17. Mediante esta técnica, es
posibleobtener poblaciones homogéneas de anticuerposfrente a un único antígeno18. El primer
pasonecesario para la generación de hibridomasconsiste en la inmunización de un ratón con
elantígeno de interés al que posteriormente se lehan de extraer linfocitos B. Estas
célulasproductoras de anticuerpos contra el antígenoinyectado mueren tras pocos días en cultivo
invitro, de tal manera que para obtener una fuentecontinuada de anticuerpos, se fusionan
concélulas inmortales de mieloma19. Tras seleccionar(en diversos medios de cultivo celular)
loshíbridos productores de los anticuerposespecíficos frente al antígeno deseado, se cultivanpara
producir grandes cantidades del anticuerpo.
Estos híbridos se conocen con el nombre dehibridomas. Dado que las células que derivan delos
hibridomas seleccionados proceden de unamisma célula y por tanto son clones, losanticuerpos
que se recuperan de estos cultivosson monoclonales.
Bibliografía.-
Pérez, G. D. (2012). Aislamiento y visualización de ácidos . Retrieved 04 22, 2014, from
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/42%20AISLAMIENTO%20VISUALIZACI%C3%93N%20ACIDOS%20NUCLEICOS.pdf
Vero. (2011, 12 05). Utilización de virus en ingeniería genética. Retrieved 04 22, 2014, from
http://verobiologiabachiller.blogspot.com/2011/12/utilizacion-de-virus-en-ingenieria.html
Gómez, E. (2011). El ADN y la ingeniería genética. Retrieved 04 22, 2014, from
http://www.slideshare.net/EDU3364/el-adn-y-la-ingeniera-gentica

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  • 1. ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO “Saber para Ser’’ Trabajo de Biotecnología Ambiental Nombre: Ariel Cabrera. Facultad: Ing. Biotecnología Ambiental. Docente: Ing. Marcelo Carrera. Fecha: 2014-04-22 Tema: Ingeniería Genética en la Biotecnología. Ingeniería Genética en la Biotecnología. Tecnicas dirigidas a modificar el material hereditario (genoma) de alguna especie, con fines variables, desde la superacion de plagas y enfermedades de origen genético o con finalidad de conseguir productos o un individuo con características no existentes haste ese momento. Metodología de la Ingeniería Genética. La ingeniería genética incluye un conjunto de metodologías biotecnológicas, entre las que destacan: *La tecnología del ADN recombinante: con la que es posible aislar y manipular un fragmento de ADN de un organismo para introducirlo en otro. *La secuenciación del ADN: Técnica que permite saber el orden o secuencia de los nucleótidos que forman parte de un gen. *La reacción en cadena de la polimerasa (PCR): con la que se consigue aumentar el número de copias de un fragmento determinado de ADN, por lo tanto, con una mínima cantidad de muestra de ADN, se puede conseguir toda la que se necesite para un determinado estudio. Aislamiento del ADN El objetivo de un proceso de aislamiento de DNA es conseguir separar esta molécula del resto de las macromoléculas (proteínas, lípidos y polisacáridos) presentes en el interior de las células. Dentro de la Ingenieria genética una vez que se ha logrado separar el ADN en segmentos pequeños es necesario que cada uno de estos pueda ser identificado diferencialmente uno del otro. Nuevamente la genética bacteriana aportó la solución. Se trabajó con un tipo de virus bacterianos, los bacteriofagos, y con pequeñas estructuras de ADN circular extracromosomal, llamadas plásmidos. Tanto uno como otro, son capaces de trasmitirse en forma natural de una bacteria a otra y son los responsables de la transferencia de material genético entre las mismas. Vectores para la tranferencia de ADN clonado Los vectores para la transferencia de ADNclonado son moléculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que llevan insertados mediante técnicas de ADN recombinante. Para que sirva de vector, una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que transporta. También tiene que tener secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del fragmento de ADN a clonar. Para insertar un fragmento de ADN al vector, se utiliza una enzima de restricción, y se mezcla con fragmentos de ADN producidos con la misma enzima. Los vectores que transportan un fragmento insertado se denominan vectores recombinantes.
  • 2. Virus Los vectores virales agrupan cuatro tipos de virus: retrovirus, adenovirus, virus adnoasociados y herpesvirus; existen también vectores no virales, como el bombardeo con partículas, la inyección directa de ADN, los liposomas catiónicos y la transferencia de genes mediante receptores. Los vectores virales son unos virus modificados que hacen de vehículo para introducir material genético exógeno en el núcleo de una célula. En terapia génica, el uso de virus como vectores requiere la eliminación de los genes que dotan al virus de su capacidad infecciosa y patógena, dejando únicamente aquellos que participan en la inserción del material genético, y su sustitución por el gen terapéutico de interés. La Principal ventaja de su utilización en la terapia génica es que se pueden producir en grandes cantidades y transfieren de forma muy eficaz el material genético a un número elevado de células y tejidos, aunque el hospedador parece limitar la duración de la expresión del nuevo material genético en terapia genética. Método para la produccion de anticuerpos monoclonales George Köhler y Cesar Milstein en 1975 fueron losresponsables del desarrollo de la tecnologíanecesaria para la generación de anticuerposmonoclonales17. Mediante esta técnica, es posibleobtener poblaciones homogéneas de anticuerposfrente a un único antígeno18. El primer pasonecesario para la generación de hibridomasconsiste en la inmunización de un ratón con elantígeno de interés al que posteriormente se lehan de extraer linfocitos B. Estas célulasproductoras de anticuerpos contra el antígenoinyectado mueren tras pocos días en cultivo invitro, de tal manera que para obtener una fuentecontinuada de anticuerpos, se fusionan concélulas inmortales de mieloma19. Tras seleccionar(en diversos medios de cultivo celular) loshíbridos productores de los anticuerposespecíficos frente al antígeno deseado, se cultivanpara producir grandes cantidades del anticuerpo. Estos híbridos se conocen con el nombre dehibridomas. Dado que las células que derivan delos hibridomas seleccionados proceden de unamisma célula y por tanto son clones, losanticuerpos que se recuperan de estos cultivosson monoclonales. Bibliografía.- Pérez, G. D. (2012). Aislamiento y visualización de ácidos . Retrieved 04 22, 2014, from http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol- mol/pdfs/42%20AISLAMIENTO%20VISUALIZACI%C3%93N%20ACIDOS%20NUCLEICOS.pdf Vero. (2011, 12 05). Utilización de virus en ingeniería genética. Retrieved 04 22, 2014, from http://verobiologiabachiller.blogspot.com/2011/12/utilizacion-de-virus-en-ingenieria.html Gómez, E. (2011). El ADN y la ingeniería genética. Retrieved 04 22, 2014, from http://www.slideshare.net/EDU3364/el-adn-y-la-ingeniera-gentica