1. 4.1.-Breve reseña histórica
Los orígenes del microscopio son inciertos; probablemente en Holanda, en la ciudad de
Middelburg entre 1590 y 1610, algunas personas relacionadas con el mundo del espectáculo
inventaron tanto el microscopio compuesto como el telescopio. Hans Janssen y su hijo
Zacharias, fabricantes de anteojos, se mencionan como posibles inventores. Sin embargo,
algunos atribuyen a Galileo Galilei su invención en la primera mitad del siglo XVII, gracias a
que él difundió el microscopio y su uso. El microscopio compuesto original consistía en dos o
más lentes colocadas en un tubo rígido (17).
Los primeros usuarios bien conocidos fueron M. Malpighi, de Italia, A. van Leeuwenhoek, de
Holanda; Hooke y N. Grew, de Inglaterra. Leeuwenhoek fabricó un microscopio simple (17)
(fig. 4-1) y Hooke utilizó un microscopio compuesto. Los instrumentos empleados por
Leeuwenhoek eran superiores a aquellos utilizados por Hooke, en parte debido a que se
desconocía el efecto de las aberraciones de las lentes y como corregirlas. El microscopio
compuesto de Hooke sumaba los defectos de los dos juegos de lentes (objetivo y ocular),
dificultando la observación, de manera que en la historia de la microscopía fue Leeuwenhoek
quien realizó la mayor cantidad de descubrimientos con su microscopio simple.
Sin embargo, el microscopio compuesto sería el instrumento con más futuro. El instrumento
de Hooke del año 1665 tenía las partes básicas, dos lentes (una que aumentaba la imagen
de la otra), una estructura mecánica, mecanismos de enfoque y un frasco esférico para
concentrar la luz (fig. 4-2). Mejoras considerables se han realizado desde entonces.
Aunque algunos fabricantes como Culpeper y Cuff crearon microscopios apropiados y
mejorados por modelos con bases en trípode y la conocida base en herradura; no obstante,
el verdadero microscopio útil apareció con la invención de las lentes acromáticas,
desarrolladas en Inglaterra por Chester Moore Hall en 1729. El desarrollo de los instrumentos
de óptica es inseparable del de la industria del vidrio y la fabricación de las lentes (61). Sin
embargo, aún era difícil fabricar lentes acromáticas poderosas y a finales del siglo XVIII Jan y
Harmanus van Deyl lo lograron e iniciaron la comercialización de objetivos acromáticos. Las
lentes con mayores aperturas numéricas fueron realizadas alrededor de 1890. Un fabricante
famoso de microscopios de calidad superior era la firma de Powell y de Lealand, quienes
elaboraron objetivos de alto poder, apocromáticos y de inmersión con una apertura numérica
de 1,50.
Otros creadores fueron Ross y Smith. Karl Zeiss Jena realizó objetivos de inmersión
diseñados por Ernst Abbe quien fue el fundador de la teoría óptica de las lentes del
microscopio y desarrolló el diseño de las mismas basado en un procedimiento matemático
riguroso (62). A finales del siglo XIX los microscopios de campo claro fueron modificados
para obtener campo oscuro y polarización, detalles que permitieron incrementar el contraste.
A principios del siglo XX la fabricación de microscopios se concentró en Alemania y en los
años sucesivos se desarrolló la fluorescencia, contraste de fase, interferencia, holografía, luz
ultravioleta, rayos X, métodos con electrones y protones, microscopios computarizados para
la observación, cuantificación y análisis tridimensional. Estos instrumentos abrieron muchas
posibilidades en el campo de la microscopía.
Los fabricantes (Leitz, Zeiss, Olympus, y otros) respondieron a muchas necesidades,
haciendo microscopios más efectivos, de uso universal, capaces de utilizar el tipo de
radiación (luz visible o no) que revele de la mejor manera posible la naturaleza del
espécimen y convierta detalles invisibles de la imagen en un patrón visible que pueda ser
analizado.
2. HISTORIA DEL MICROSCOPIO
El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los
holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la
"Accademia dei Lincei" una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo
sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.
Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660
y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al
microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia.
A mediados del siglo XVII un comerciante holandés, Leenwenhoek, utilizando microscopios simples
de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos.
Durante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que aumentaron su
estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras ópticas. Las mejoras mas
importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio y por
encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo
que permite obtener aumentos de 2000A principios de los años 30 se habia alcanzado el limite teórico
para los microscopios ópticos no consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X o 1000X sin
embargo existia un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares ( núcleo,
mitochondria... etc.).
El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) fué el primer tipo de microscopio electrónico
desarrollado este utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo
aumentos de 100.000 X. Fue desarrollada por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931.
Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).