2.  Es un inmunoensayo enzimático de fase sólida (EIA), basado en un
principio de reconocimiento doble. La fase sólida es un Peine con 12
proyecciones ("dientes").
 Cada diente está sensibilizado en dos áreas reactivas: punto superior —
albúmina de suero bovino biotinilada (Control Interno) punto inferior
— HBsAg recombinante.
 La Bandeja de Desarrollo tiene 6 filas (A-F) de 12 pocillos.
 Cada fila contiene una solución reactiva lista para ser usada en cada
 etapa del ensayo. La prueba es realizada en etapas, pasando el Peine
 de una fila a otra, con un período de incubación en cada etapa.
 Para comenzar la prueba, las muestras de suero o plasma son
 agregadas al diluyente en los pocillos de la fila A de la Bandeja de
 Desarrollo. Luego se inserta el Peine en los pocillos de la fila A.

3.  Los anticuerpos anti-HBs, en caso de estar presentes en las
 muestras, se unirán con el HBsAg en los puntos inferiores del diente
 del Peine (Figura 1). Los componentes no unidos son lavados en la
 fila B. En la fila C, los anticuerpos anti-HBs capturados en los puntos
 inferiores del diente reaccionarán con el HBsAg biotinilado. En la fila
 D el complejo antígeno biotinilado/anticuerpo en los puntos
 inferiores del diente, y la albúmina de suero bovino biotinilada de los
 puntos superiores (Control Interno) reaccionarán con estreptavidina
 conjugada con fosfatasa alcalina (FA). En la fila E, los componentes
 no ligados son eliminados mediante un lavado. En la fila F, la
 fosfatasa alcalina unida reaccionará con un sustrato cromogénico.
 Los resultados pueden verse como puntos azul grisáceos en la
 superficie del diente del Peine.

6. Equipo necesario:
Pipetas de precisión.
Tijeras
cronometro

7.  Reacción Antígeno-Anticuerpo (Fila A de la
bandeja de Desarrollo.

8.  Primer lavado (Fila B)

9.  Unión del HBsAg Biotinilado (Fila C)
 Unión de la Estreptavidina/Fosfatasa alcalina (Fila
D).
 Segundo lavado (Fila E).
 Reacción de color (Fila F).

10.  Detención de la Reacción (Fila E).
 Resultados.

11.  Interpretación semicuantitativa por lectura visual.

12.  Lectura instrumental con el reflectómetro.
 Tabla de conversiones de las lecturas de
Absorbancia relativa a títulos.
Absorbancia Relativa Título (IU/L)*
<693 <10
693 – 1168 10
1169 – 1723 25
1724 – 2430 50
Mayor/igual 2431 Mayor/igual 100