La obra narra la historia de Doña Bárbara, una mujer rica y poderosa que domina la región de los llanos venezolanos a través de la violencia y la corrupción. Santos Luzardo regresa a su hacienda Altamira para poner orden y luchar contra la barbarie representada por Doña Bárbara. Además, se enamora de Marisela, hija de Doña Bárbara, lo que genera el enfrentamiento final entre los dos bandos.