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1. • INMUNOENSAYO
INMUNOLOGIA ESPECIAL
MONTES HIJAR EFRAIN

2. Técnicas del Inmunoensayo
La técnica se basan en la gran especificidad
y afinidad de los anticuerpos por sus
antígenos específicos y se usan los
anticuerpos monoclonales (obtenidos en el
laboratorio) o de sueros policlonales
(obtenidos de animales), siendo más
específicos los monoclonales

3. Anticuerpos Policlonales
Separar
el suero
Purificación
de
anticuerpos

4. Anticuerpos Monoclonales
Linfocitos
sensibilizados
Hibridomas
Fusión

5. O Heterogéneos:
O Los más utilizados.
O Diversos formatos :
O micro placas,
O partículas magnéticas,
O Membranas de nitrocelulosa,
O Implican un paso de
separación del antígeno
unido del no unido. Por
ejemplo ELISA, los pasos
de lavado son etapas de
separación.
O Homogéneos
O Mas utilizados en drogas de
abuso y monitoreo de
fármacos
O Sin pasos de separación, no
se requiere la separación
del antígeno unido del no
unido.
O Ejemplos
O Emit
O Cedia

6. Por el marcador
O Radioinmunoensayo (RIA) : el marcador es un isótopo
radioactivo. • Técnicas de radioinmunoensayo. En
estas técnicas al anticuerpo se le une un isótopo
radiactivo, siendo posible la cuantificación del complejo
Ag-Ac a través de la radiactividad emitida
O Enzimoinmunoanálsis (EIA): el marcador es una
enzima como por ejemplo la técnica de
enzimoinmunoensayo conocido por su abreviatura
ELISA.
O Fluoroinmunoanálisis: el marcador es una molécula
fluorescente, por ejemplo FPIA.
O Ensayo Inmunoquimioluminiscente: la marca es en
general una enzima capaz de catalizar una reacción
quimioluminiscente. Son tanto o mas sensibles que los
radioinmunoensayos, y no presentan riesgos de
manipulación de sustancias radioactivas. En
contraposición estan poco desarrollados y no siempre es
posible aplicarlos

7. Inmunoanálisis con reactivos
marcados
Con compuestos radiactivos:
O RIA inmunoanálisis heterogéneo y competitivo
O IRMA inmunoanálisis heterogéneo no competitivo

8. Radioinmunoensayo
O Es un método sensible y
especifico para
determinar reacciones
Ag – Ac,
O Se han utilizado varios
isótopos productores de
radiaciones gama y beta.
O La base del RIA consiste
en la inhibición
competitiva de la unión
de un antígeno
radioactivo (Trazador) a
su antígeno específico
por parte del antígeno no
marcado

9. Radioinmunoensayo
O Desventajas:
O La vida media del isótopo es muy corta, por
ejemplo el I125. Tiene 57 días de vida media.
O Costosa y peligrosa
O Requiere un equipo especial que es el
contador gama para medir la radiación.
O Este método requiere siempre la elaboración
de una curva estándar para la lectura

10. Enzimoinmunoanálsis (EIA):
O Esta técnica, también se
conoce como test de ELISA
O La identificación de los
complejos Ag-Ac, se hace
mediante el empleo de
enzimas, bien unidas al
antígeno, o bien unidas al
anticuerpo.
O Las más utilizadas son:
O peroxidasa
O fosfatasa alcalina
O Glucosa 6-fosfato
deshidrogenasa
O B- galactosidasa