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Fundamentos químicos de la
tinción
Celeste Abigail Banda Rodríguez MC
HISTOLOGIA TEORICA
ICEST CAMPUS 2001 FACULTAD DE
MEDICINA
1. colorantes ácidos y básicos.
2. Metacromasia.
3. Grupos aldehído y el reactivo de schiff.
Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga
neta negativa en su parte coloreada y se la describe con
la fórmula general [Na+ anilina–].
Un colorante básico tiene una carga neta positiva en
su parte coloreada y se lo describe con la fórmula
general [anilina+Cl–]. hematoxilina
• Los componentes aniónicos incluyen los grupos
fosfato de los ácidos nucleicos, los grupos sulfato
de los glucosamino- glucanos y los grupos
carboxilo de las proteínas.
• La capacidad de estos grupos aniónicos de
reaccionar con una anilina o colorante básico se
denomina basofilia [gr., afinidad por lo básico].
Los componentes del tejido que se tiñen con la
hematoxilina también exhiben basofilia.
• La reacción de los grupos aniónicos varía
según el pH.
• Con un pH alto (cerca de 10) los tres grupos se
ionizan y quedan disponibles para la reacción con el
colorante básico mediante uniones electroestáticas.
• Con un pH ligeramente ácido a neutro (5 a 7) se
ionizan los grupos fosfato y sulfato y quedan
disponibles para reaccionar con la anilina básica a
través de uniones electroestáticas.
• Con un pH bajo (inferior a 4) solo se mantienen
ionizados los grupos sulfato y reaccionan con
colorantes básicos.
• La tinción con colorantes básicos en un pH
determinado se puede utilizar para centrar el
estudio en grupos aniónicos específicos; debido
a que estos grupos predominan en ciertas
macromoléculas, la tinción sirve, entonces como
un indicador.
• la hematoxilina no es un colorante básico en
sentido estricto. Se usa con un mordiente (es
decir, un intermediario entre el componente del
tejido y la anilina). El mordiente hace que la
tinción se parezca a un colorante básico.
• La reacción de los grupos catiónicos con un
colorante ácido recibe el nombre de acidofilia
[gr., afinidad por lo ácido].
• Las reacciones de los componentes celulares y
tisulares con los colorantes acídicos no son tan
específicas ni tan precisas como las reacciones
con los colorantes básicos.
• Por ejemplo, en la técnica de teñido de Ma-
llory, se utilizan tres colorantes ácidos: anilina
azul, fuscina ácida y naranja G.
• Estos colorantes tiñen en forma selectiva el
colágeno, el citoplasma en general y los
eritrocitos, respectiva- mente.
• La fuscina ácida también tiñe los núcleos.
2. Metacromasia
• Ciertos colorantes básicos reaccionan con los
componentes del tejido que cambian su color
normal de azul a rojo o púrpura; este cambio de
la absorbancia se llama metacromasia.
3. Grupos aldehído y el reactivo de
schiff.
• La capacidad de la fucsina básica decolorada
(reactivo de Schiff) para reaccionar con los
grupos aldehído trae como resultado la aparición
de un color rojo distintivo y es la base de las
reacciones de ácido peryódico-reactivo de Schiff
y de Feulgen.
• La reacción de PAS tiene como fundamento lo
siguiente:
• Los anillos hexosa de hidratos de carbono contienen
car- bonos contiguos, cada uno de los cuales lleva un
grupo hidroxilo (–OH).
• Las hexosaminas de glucosaminoglucanos
contienen car- bonos contiguos, uno de las cuales
lleva un grupo –OH, mientras que el otro lleva un
grupo amino (–NH2).
• El ácido peryódico escinde la unión entre estos
átomos de carbono contiguos y forma grupos
aldehído.
• Estos grupos aldehído reaccionan con el reactivo de
Schiff para dar un color púrpura distintivo.

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fundamentos químicos de la tincion

  • 1. Fundamentos químicos de la tinción Celeste Abigail Banda Rodríguez MC HISTOLOGIA TEORICA ICEST CAMPUS 2001 FACULTAD DE MEDICINA
  • 2. 1. colorantes ácidos y básicos. 2. Metacromasia. 3. Grupos aldehído y el reactivo de schiff. Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga neta negativa en su parte coloreada y se la describe con la fórmula general [Na+ anilina–]. Un colorante básico tiene una carga neta positiva en su parte coloreada y se lo describe con la fórmula general [anilina+Cl–]. hematoxilina
  • 3. • Los componentes aniónicos incluyen los grupos fosfato de los ácidos nucleicos, los grupos sulfato de los glucosamino- glucanos y los grupos carboxilo de las proteínas. • La capacidad de estos grupos aniónicos de reaccionar con una anilina o colorante básico se denomina basofilia [gr., afinidad por lo básico]. Los componentes del tejido que se tiñen con la hematoxilina también exhiben basofilia.
  • 4.
  • 5. • La reacción de los grupos aniónicos varía según el pH. • Con un pH alto (cerca de 10) los tres grupos se ionizan y quedan disponibles para la reacción con el colorante básico mediante uniones electroestáticas. • Con un pH ligeramente ácido a neutro (5 a 7) se ionizan los grupos fosfato y sulfato y quedan disponibles para reaccionar con la anilina básica a través de uniones electroestáticas. • Con un pH bajo (inferior a 4) solo se mantienen ionizados los grupos sulfato y reaccionan con colorantes básicos.
  • 6. • La tinción con colorantes básicos en un pH determinado se puede utilizar para centrar el estudio en grupos aniónicos específicos; debido a que estos grupos predominan en ciertas macromoléculas, la tinción sirve, entonces como un indicador. • la hematoxilina no es un colorante básico en sentido estricto. Se usa con un mordiente (es decir, un intermediario entre el componente del tejido y la anilina). El mordiente hace que la tinción se parezca a un colorante básico.
  • 7. • La reacción de los grupos catiónicos con un colorante ácido recibe el nombre de acidofilia [gr., afinidad por lo ácido]. • Las reacciones de los componentes celulares y tisulares con los colorantes acídicos no son tan específicas ni tan precisas como las reacciones con los colorantes básicos.
  • 8. • Por ejemplo, en la técnica de teñido de Ma- llory, se utilizan tres colorantes ácidos: anilina azul, fuscina ácida y naranja G. • Estos colorantes tiñen en forma selectiva el colágeno, el citoplasma en general y los eritrocitos, respectiva- mente. • La fuscina ácida también tiñe los núcleos.
  • 9. 2. Metacromasia • Ciertos colorantes básicos reaccionan con los componentes del tejido que cambian su color normal de azul a rojo o púrpura; este cambio de la absorbancia se llama metacromasia.
  • 10. 3. Grupos aldehído y el reactivo de schiff. • La capacidad de la fucsina básica decolorada (reactivo de Schiff) para reaccionar con los grupos aldehído trae como resultado la aparición de un color rojo distintivo y es la base de las reacciones de ácido peryódico-reactivo de Schiff y de Feulgen.
  • 11. • La reacción de PAS tiene como fundamento lo siguiente: • Los anillos hexosa de hidratos de carbono contienen car- bonos contiguos, cada uno de los cuales lleva un grupo hidroxilo (–OH). • Las hexosaminas de glucosaminoglucanos contienen car- bonos contiguos, uno de las cuales lleva un grupo –OH, mientras que el otro lleva un grupo amino (–NH2). • El ácido peryódico escinde la unión entre estos átomos de carbono contiguos y forma grupos aldehído. • Estos grupos aldehído reaccionan con el reactivo de Schiff para dar un color púrpura distintivo.