Este documento describe los fundamentos químicos de la tinción histológica. Explica que los colorantes ácidos y básicos se unen electrostáticamente a grupos iónicos en tejidos, y cómo el pH afecta estas interacciones. También cubre la metacromasia, en la que ciertos colorantes cambian de color al unirse a componentes de tejido, y las reacciones de Schiff, que detectan grupos aldehído en carbohidratos y glucosaminoglucanos tiñéndolos de rojo.
1. Fundamentos químicos de la
tinción
Celeste Abigail Banda Rodríguez MC
HISTOLOGIA TEORICA
ICEST CAMPUS 2001 FACULTAD DE
MEDICINA
2. 1. colorantes ácidos y básicos.
2. Metacromasia.
3. Grupos aldehído y el reactivo de schiff.
Un colorante ácido, como la eosina, tiene una carga
neta negativa en su parte coloreada y se la describe con
la fórmula general [Na+ anilina–].
Un colorante básico tiene una carga neta positiva en
su parte coloreada y se lo describe con la fórmula
general [anilina+Cl–]. hematoxilina
3. • Los componentes aniónicos incluyen los grupos
fosfato de los ácidos nucleicos, los grupos sulfato
de los glucosamino- glucanos y los grupos
carboxilo de las proteínas.
• La capacidad de estos grupos aniónicos de
reaccionar con una anilina o colorante básico se
denomina basofilia [gr., afinidad por lo básico].
Los componentes del tejido que se tiñen con la
hematoxilina también exhiben basofilia.
4.
5. • La reacción de los grupos aniónicos varía
según el pH.
• Con un pH alto (cerca de 10) los tres grupos se
ionizan y quedan disponibles para la reacción con el
colorante básico mediante uniones electroestáticas.
• Con un pH ligeramente ácido a neutro (5 a 7) se
ionizan los grupos fosfato y sulfato y quedan
disponibles para reaccionar con la anilina básica a
través de uniones electroestáticas.
• Con un pH bajo (inferior a 4) solo se mantienen
ionizados los grupos sulfato y reaccionan con
colorantes básicos.
6. • La tinción con colorantes básicos en un pH
determinado se puede utilizar para centrar el
estudio en grupos aniónicos específicos; debido
a que estos grupos predominan en ciertas
macromoléculas, la tinción sirve, entonces como
un indicador.
• la hematoxilina no es un colorante básico en
sentido estricto. Se usa con un mordiente (es
decir, un intermediario entre el componente del
tejido y la anilina). El mordiente hace que la
tinción se parezca a un colorante básico.
7. • La reacción de los grupos catiónicos con un
colorante ácido recibe el nombre de acidofilia
[gr., afinidad por lo ácido].
• Las reacciones de los componentes celulares y
tisulares con los colorantes acídicos no son tan
específicas ni tan precisas como las reacciones
con los colorantes básicos.
8. • Por ejemplo, en la técnica de teñido de Ma-
llory, se utilizan tres colorantes ácidos: anilina
azul, fuscina ácida y naranja G.
• Estos colorantes tiñen en forma selectiva el
colágeno, el citoplasma en general y los
eritrocitos, respectiva- mente.
• La fuscina ácida también tiñe los núcleos.
9. 2. Metacromasia
• Ciertos colorantes básicos reaccionan con los
componentes del tejido que cambian su color
normal de azul a rojo o púrpura; este cambio de
la absorbancia se llama metacromasia.
10. 3. Grupos aldehído y el reactivo de
schiff.
• La capacidad de la fucsina básica decolorada
(reactivo de Schiff) para reaccionar con los
grupos aldehído trae como resultado la aparición
de un color rojo distintivo y es la base de las
reacciones de ácido peryódico-reactivo de Schiff
y de Feulgen.
11. • La reacción de PAS tiene como fundamento lo
siguiente:
• Los anillos hexosa de hidratos de carbono contienen
car- bonos contiguos, cada uno de los cuales lleva un
grupo hidroxilo (–OH).
• Las hexosaminas de glucosaminoglucanos
contienen car- bonos contiguos, uno de las cuales
lleva un grupo –OH, mientras que el otro lleva un
grupo amino (–NH2).
• El ácido peryódico escinde la unión entre estos
átomos de carbono contiguos y forma grupos
aldehído.
• Estos grupos aldehído reaccionan con el reactivo de
Schiff para dar un color púrpura distintivo.