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DISCREPANCY IN GENOTYPING OF APOLIPOPROTEIN E BETWEEN ALLELE-SPECIFIC PCR AND FLUORESCENCE RESONANCE ENERGY TRANSFER OR SEQUENCINGChang-Hun Park, M.D GLORIA STHEFANY TORRES DAZA TERCER SEMESTRE SEPTIEMBRE, 2010
INTRODUCTION
GENERAL OBJECTIVE  Determinate the discrepancy in Genotyping of Apolipoprotein E between Allele-Specific PCR and Fluorescence Resonance Energy Transfer or Sequencing
MATERIALES Y MÉTODOS
RESULTADOS Se observaron dos casos en los que los resultados de la PCR (AS-PCR) del gen de la APOE no fueron consistentes con los de la resonancia de fluorescenciaTransferencia de energía (FRET) o secuenciación. En estos casos, la genotipificación por AS-PCR mostró que los pacientes fueron homocigotos ε2, mientras que el análisis y la secuenciación FREET demostró que eran ε2/ε3 heterocigotos.
FIGURa2
FIGURa3
FIGURa4
DISCUSSION
CONCLUSSION Sequencing analysis, As-PCR and FREET are a very important methods, to study the genotype. Sequencing analysis showed errors in genotyping when AS-PCR using the ApoE Genotyping. The ε2 homozygous result requires further evaluation by other methods because that can avoid an error. Evaluation of the results from the AS-PCR and FRET analyses indicated a discrepancy in the results.     (AS-PCR, ε2 homozygous; FRET, ε2/ε3 heterozygous).
GRACIAS
Seminario Molecular

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  • 3. GENERAL OBJECTIVE Determinate the discrepancy in Genotyping of Apolipoprotein E between Allele-Specific PCR and Fluorescence Resonance Energy Transfer or Sequencing
  • 5. RESULTADOS Se observaron dos casos en los que los resultados de la PCR (AS-PCR) del gen de la APOE no fueron consistentes con los de la resonancia de fluorescenciaTransferencia de energía (FRET) o secuenciación. En estos casos, la genotipificación por AS-PCR mostró que los pacientes fueron homocigotos ε2, mientras que el análisis y la secuenciación FREET demostró que eran ε2/ε3 heterocigotos.
  • 10. CONCLUSSION Sequencing analysis, As-PCR and FREET are a very important methods, to study the genotype. Sequencing analysis showed errors in genotyping when AS-PCR using the ApoE Genotyping. The ε2 homozygous result requires further evaluation by other methods because that can avoid an error. Evaluation of the results from the AS-PCR and FRET analyses indicated a discrepancy in the results. (AS-PCR, ε2 homozygous; FRET, ε2/ε3 heterozygous).