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Filamentos Intermedios
      Prof. Héctor A. Hurtazo
mponentes del citoesqueleto:
s o filamentos de actina (AF): “cables”
 actina filamentosa-FLEXIBLES
de la membrana)
 filamentos de tubulina (MT): tubos
des de tubulina polimerizada- RIGIDOS
s, esqueleto axonal y huso miótico)
 rmedios (IF): compuestos de proteínas
ada tipo celular o compartimento
 cleo, queratinas en epitelio, etc)-
 ndamio de estructuras como el núcleo)




                                          8-9    10      24
                                            Diámetro (nm):
FILAMENTOS INTERMEDIOS

Son fibras fuertes semejantes a las cuerdas que proporcionan
fuerza mecánica a las células que se someten a la tensión física
como a las neuronas, células musculares y epiteliales

Se esparcen por el citoplasma y se conectan con los microtúbulos
u otros filamentos intermedios por puentes delgados y frágiles
(plectina)
264        BIOLOGÍA CELULAR


        Filamentos intermedios
TABLA 6.1. Filamentos intermedios. Entre paréntesis figura un modelo de clasificación utilizado por algunos autores

           Nombre y tipo          PM (kDa)     Diámetro                            Tipos celulares

 Queratinas                                      8 nm        Células epiteliales
     Ácidas (tipo I)                 40-57
     Básicas-neutras (tipo II)       53-67

 Gliofilamentos (tipo III)           50          8 nm        Astrocitos y algunas células tipo las de Schwann

 Desmina (tipo III)                  53          10 nm       Células musculares y asimiladas

 Vimentina (tipo III)                57          10 nm       Células de origen mesodérmico

 Neurofilamentos (tipo IV)                       10 nm       Neuronas
     NF-L (PM bajo)                  70
     NF-M (PM medio)                 150
     NF-L (PM alto)                  200

 Filamentos menos comunes
      Periferina (tipo III)          57          10 nm       Neuronas con axones en el sistema nervioso periférico
      Internexina α (tipo IV)        66          10 nm       Neuronas del sistema nervioso periférico
      Nestina (tipo IV)              200         10 nm       Neuronas embrionarias

 Láminas nucleares (tipo V)                      Redes       Lámina nuclear de todas las células
     Lámina A                        72
     Lámina B1                       65
     Lámina B2                       78
     Lámina C                        67
Filamentos
intermedios




              Microfotografía electrónica de los
              filamentos de láminas bajo la
              membrana nuclear
Ensamble de los filamentos
         intermedios


Se cree que la unidad básica es un tetrámero formado por 2
dímeros que se alinean lado a lado en forma intercalada con sus
extremos N y C apuntando en direcciones contrarias
(antiparalelas)
NH2                         Extremos no helicoidales                    COOH




                                                        Porción helicoidal (42 nm)

                           Monómero
                                                                   48 nm



                                                                                                            1.5 nm


                           Dímero




                                                                                                             3 nm


                           Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros)




                      Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento



Figura 6.21. Modelo de estruc-
Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros)                                                      3 nm



                               Subfilamento
                                       Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros)




                 Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento

                                  Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento

 .21. Modelo de estruc-
 amento intermedio. Cada
          Figura 6.21. Modelo de estruc-
 el filamento intermedio
 ro) contiene de filamento intermedio. Cada
          tura una porción
          unidad del filamento intermedio
  y unos extremos globu-
          (monómero) contiene una porción
   monómeros se entrela-
          helicoidal y unos extremos globu-
 meros, los cuales se aso-
          lares. Los monómeros se entrela-
 disposición en dímeros, los cuales se aso-
          zan  antiparalela
mar tetrámeros. Éstos se
          cian en disposición antiparalela
   a continuación de tetrámeros. Éstos se
          para formar otro                                                                          Tetrámero Filamento
 subfilamentos. uno a continuación de otro
          unen Varios sub-                                                                                       Tetrámero Filamento
  (aproximadamente ocho)
          formando subfilamentos. Varios sub-
  en paralelo, aunque des-
          filamentos (aproximadamente ocho)
medio tetrámero, paraparalelo, aunque des-
          se adosan en for-                Filamento intermedio constituido por 8 tetrámeros
 lamentofasados medio tetrámero, para for-
           intermedio.
Microfilamentos
Microfilamentos
Consiste en una cadena simple de monómeros de actina

La actina es una proteína de un peso molecular de 42 KDa, la cual
es codificada por una familia de genes altamente conservada

En vertebrados se encuentran las siguientes isoformas

   α-actina (células musculares)

   β-actina (células no musculares)

   γ-actina (células no musculares)
Actina

La actina es la proteína más abundante de las células eucariotas
(10% peso celular en células musculares y el 1-5% de peso
molecular en células no musculares)

Esta conformada por monómeros de actina globular (actina G) y
cuando se forman polimeros filamentosos se les denomina actina
F

Actina F es cadena lineal de actina G
Monómero de actina G

        Hendidura
        de unión a
           ATP
a-G” es actina
ca (“globular”); la
                      (-)                               Filamento de actina
 polimerizada
tosa”)
                                                             (actina F)

ueden estar unidas                                       En una unidad que
ADP, pero la                      ATP
TP tiende a                                                 consta de 28
                                           Tienen
arse y la actina-                       POLARIDAD          subunidades (13
 spolimerizarse (un                     y se designa
  de actina-ADP
                                                          vueltas de hélice)
                                        extremo (-)
 estable que uno                        al que tiene   tiene una longitud de
 -ATP).                                 expuesto el             72 nm
                                         bolsillo de
entos crecen                            unión a ATP
más rápido (5-10                          al medio.
s) por el extremo
or el (-).                  (+)
Ensamblaje de los microfilamentos

Los microfilamentos de una célula se acortan y alargan
constantemente (formación y disolución)

In vitro ocurre en 3 fases:

 Fase de nucleación

 Fase elongación

 Estado estacionario
Fase de nucleación, se caracteriza por un periodo de latencia en
la que la actina G se agrega para formar oligómeros cortos e
inestables (3-5 subunidades)

Fase de elongación, se alarga con rapidez para formar un
filamento por el agregado de actina G en ambos extremos

Estado estacionario, los monómeros de la actina G se
intercambian con las subunidades de los extremos del filamento;
pero no hay un cambio neto de la masa total
Núcleo
Drogas estabilizadoras y desestabilizadoras


 Droga               Organismos           Efecto en el microfilamento


                                              Unión en los extremos (+)
Citocalasina             Mohos
                                         Despolimerización de los extremos (-)




                                         Unión en los extremos impidiendo su
 Faloidina          Amanita phalloides
                                                  despolimerización




                                         Unión a los monómeros libres, bloquea
Trunculina               Esponja
                                             la incorporación al polímero
Miosinas


Son proteínas motoras de células no musculares y musculares

Participan en movimientos de transporte de vesículas,
extensiones de membrana, movimiento de cromosomas

Se han descrito al menos 17 tipos de miosinas
Membrana plasmática




                                              Minimiosina




Miosina I   Extremo +                                   Sentido del movimiento                                Extremo –

            A   Deslizamiento de un filamento de actina accionado por minimiosina




            Extremo +                                                                                         Extremo –
                                                                                            Minimiosina
                            Filamento que permanece fijo



                                          Vesícula que se desplaza


                                       Sentido del movimiento




            B   Deslizamiento (por minimiosina) de una vesícula sobre un filamento de actina


            Extremo –                                   Sentido del movimiento                                Extremo +



                                             Filamento que se desplaza
                                                                     Filamento que permanece fijo
                                     Minimiosina




            Extremo +                                                                                         Extremo –

            C   Deslizamiento (por minimiosina) de un filamento de actina sobre otro, como ocurre con la miosina II
Miosina Va
Miosina VI

Se piensa que participa
   en la formación de
 vesículas cubiertas de
      clatrina y el
    movimiento de las
vesículas sin cubierta a
     los endosomas
        tempranos
Células pilosas de la cóclea



Miosinas I, V, VI,
   VII y XV
Mutaciones del gen para
                                         miosina VIIa




En humanos las mutaciones de la miosina VIIa causa el síndrome de
               Usher tipo 1b (sordera y ceguera)
Proteínas de unión con actina

 Los filamentos de actina se organizan en varios patrones (haces,
redes delgadas, gelatinas tridimensionales compuestas)

 Esta organización depende de una variedad de proteínas
denominadas proteínas de unión con actina

 Estas proteínas afectan el ensamble y desensamble de los
filamentos de actina, sus propiedades físicas, sus interacciones
entre sí y con otros organelos
Tropomodulina (capZ)
Timosina-β4




    Prolina
 (crecimiento)



                                   Cofilina
                             (despolimerización)
Proteínas de nucleación
Ensamblaje de los
filamentos de actina en
     redes/haces.




     Filamina: REDES
Filamentos de actina y
proteínas fijadoras de
     actina en una
    microvellosidad

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(12) citoesqueleto22

  • 1. Filamentos Intermedios Prof. Héctor A. Hurtazo
  • 2. mponentes del citoesqueleto: s o filamentos de actina (AF): “cables” actina filamentosa-FLEXIBLES de la membrana) filamentos de tubulina (MT): tubos des de tubulina polimerizada- RIGIDOS s, esqueleto axonal y huso miótico) rmedios (IF): compuestos de proteínas ada tipo celular o compartimento cleo, queratinas en epitelio, etc)- ndamio de estructuras como el núcleo) 8-9 10 24 Diámetro (nm):
  • 3. FILAMENTOS INTERMEDIOS Son fibras fuertes semejantes a las cuerdas que proporcionan fuerza mecánica a las células que se someten a la tensión física como a las neuronas, células musculares y epiteliales Se esparcen por el citoplasma y se conectan con los microtúbulos u otros filamentos intermedios por puentes delgados y frágiles (plectina)
  • 4.
  • 5. 264 BIOLOGÍA CELULAR Filamentos intermedios TABLA 6.1. Filamentos intermedios. Entre paréntesis figura un modelo de clasificación utilizado por algunos autores Nombre y tipo PM (kDa) Diámetro Tipos celulares Queratinas 8 nm Células epiteliales Ácidas (tipo I) 40-57 Básicas-neutras (tipo II) 53-67 Gliofilamentos (tipo III) 50 8 nm Astrocitos y algunas células tipo las de Schwann Desmina (tipo III) 53 10 nm Células musculares y asimiladas Vimentina (tipo III) 57 10 nm Células de origen mesodérmico Neurofilamentos (tipo IV) 10 nm Neuronas NF-L (PM bajo) 70 NF-M (PM medio) 150 NF-L (PM alto) 200 Filamentos menos comunes Periferina (tipo III) 57 10 nm Neuronas con axones en el sistema nervioso periférico Internexina α (tipo IV) 66 10 nm Neuronas del sistema nervioso periférico Nestina (tipo IV) 200 10 nm Neuronas embrionarias Láminas nucleares (tipo V) Redes Lámina nuclear de todas las células Lámina A 72 Lámina B1 65 Lámina B2 78 Lámina C 67
  • 6.
  • 7. Filamentos intermedios Microfotografía electrónica de los filamentos de láminas bajo la membrana nuclear
  • 8. Ensamble de los filamentos intermedios Se cree que la unidad básica es un tetrámero formado por 2 dímeros que se alinean lado a lado en forma intercalada con sus extremos N y C apuntando en direcciones contrarias (antiparalelas)
  • 9.
  • 10. NH2 Extremos no helicoidales COOH Porción helicoidal (42 nm) Monómero 48 nm 1.5 nm Dímero 3 nm Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros) Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento Figura 6.21. Modelo de estruc-
  • 11. Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros) 3 nm Subfilamento Tetrámero (disposición antiparalela de los dímeros) Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento Organización paralela y desfasada de los tetrámeros para formar el filamento .21. Modelo de estruc- amento intermedio. Cada Figura 6.21. Modelo de estruc- el filamento intermedio ro) contiene de filamento intermedio. Cada tura una porción unidad del filamento intermedio y unos extremos globu- (monómero) contiene una porción monómeros se entrela- helicoidal y unos extremos globu- meros, los cuales se aso- lares. Los monómeros se entrela- disposición en dímeros, los cuales se aso- zan antiparalela mar tetrámeros. Éstos se cian en disposición antiparalela a continuación de tetrámeros. Éstos se para formar otro Tetrámero Filamento subfilamentos. uno a continuación de otro unen Varios sub- Tetrámero Filamento (aproximadamente ocho) formando subfilamentos. Varios sub- en paralelo, aunque des- filamentos (aproximadamente ocho) medio tetrámero, paraparalelo, aunque des- se adosan en for- Filamento intermedio constituido por 8 tetrámeros lamentofasados medio tetrámero, para for- intermedio.
  • 13. Microfilamentos Consiste en una cadena simple de monómeros de actina La actina es una proteína de un peso molecular de 42 KDa, la cual es codificada por una familia de genes altamente conservada En vertebrados se encuentran las siguientes isoformas α-actina (células musculares) β-actina (células no musculares) γ-actina (células no musculares)
  • 14. Actina La actina es la proteína más abundante de las células eucariotas (10% peso celular en células musculares y el 1-5% de peso molecular en células no musculares) Esta conformada por monómeros de actina globular (actina G) y cuando se forman polimeros filamentosos se les denomina actina F Actina F es cadena lineal de actina G
  • 15. Monómero de actina G Hendidura de unión a ATP
  • 16. a-G” es actina ca (“globular”); la (-) Filamento de actina polimerizada tosa”) (actina F) ueden estar unidas En una unidad que ADP, pero la ATP TP tiende a consta de 28 Tienen arse y la actina- POLARIDAD subunidades (13 spolimerizarse (un y se designa de actina-ADP vueltas de hélice) extremo (-) estable que uno al que tiene tiene una longitud de -ATP). expuesto el 72 nm bolsillo de entos crecen unión a ATP más rápido (5-10 al medio. s) por el extremo or el (-). (+)
  • 17. Ensamblaje de los microfilamentos Los microfilamentos de una célula se acortan y alargan constantemente (formación y disolución) In vitro ocurre en 3 fases: Fase de nucleación Fase elongación Estado estacionario
  • 18. Fase de nucleación, se caracteriza por un periodo de latencia en la que la actina G se agrega para formar oligómeros cortos e inestables (3-5 subunidades) Fase de elongación, se alarga con rapidez para formar un filamento por el agregado de actina G en ambos extremos Estado estacionario, los monómeros de la actina G se intercambian con las subunidades de los extremos del filamento; pero no hay un cambio neto de la masa total
  • 19.
  • 20.
  • 22. Drogas estabilizadoras y desestabilizadoras Droga Organismos Efecto en el microfilamento Unión en los extremos (+) Citocalasina Mohos Despolimerización de los extremos (-) Unión en los extremos impidiendo su Faloidina Amanita phalloides despolimerización Unión a los monómeros libres, bloquea Trunculina Esponja la incorporación al polímero
  • 23. Miosinas Son proteínas motoras de células no musculares y musculares Participan en movimientos de transporte de vesículas, extensiones de membrana, movimiento de cromosomas Se han descrito al menos 17 tipos de miosinas
  • 24. Membrana plasmática Minimiosina Miosina I Extremo + Sentido del movimiento Extremo – A Deslizamiento de un filamento de actina accionado por minimiosina Extremo + Extremo – Minimiosina Filamento que permanece fijo Vesícula que se desplaza Sentido del movimiento B Deslizamiento (por minimiosina) de una vesícula sobre un filamento de actina Extremo – Sentido del movimiento Extremo + Filamento que se desplaza Filamento que permanece fijo Minimiosina Extremo + Extremo – C Deslizamiento (por minimiosina) de un filamento de actina sobre otro, como ocurre con la miosina II
  • 26.
  • 27. Miosina VI Se piensa que participa en la formación de vesículas cubiertas de clatrina y el movimiento de las vesículas sin cubierta a los endosomas tempranos
  • 28. Células pilosas de la cóclea Miosinas I, V, VI, VII y XV
  • 29. Mutaciones del gen para miosina VIIa En humanos las mutaciones de la miosina VIIa causa el síndrome de Usher tipo 1b (sordera y ceguera)
  • 30. Proteínas de unión con actina Los filamentos de actina se organizan en varios patrones (haces, redes delgadas, gelatinas tridimensionales compuestas) Esta organización depende de una variedad de proteínas denominadas proteínas de unión con actina Estas proteínas afectan el ensamble y desensamble de los filamentos de actina, sus propiedades físicas, sus interacciones entre sí y con otros organelos
  • 31. Tropomodulina (capZ) Timosina-β4 Prolina (crecimiento) Cofilina (despolimerización)
  • 33. Ensamblaje de los filamentos de actina en redes/haces. Filamina: REDES
  • 34. Filamentos de actina y proteínas fijadoras de actina en una microvellosidad