1. F. TECNOLOGÍA MÉDICA F. TECNOLOGÍA MÉDICA .
ESCUELA PROFESIONAL
LABORATORIO Y ANAT.PATOLÓGICA
CENTRIFUGAS
Autor: Jara Gómez,
Zarela Zinda
Año: 1ro
2010
ÍNDICE
Introducción
Contenido
1. Definición de Centrifuga
2. Fuerza Centrifuga
3. Tipos de Centrifugas
3.1 Centrifuga de Microhematocrito
4. Usos de la Centrifuga
5. Partes de la Centrifuga
6. Rotores
6.1 Tipos de Rotores
6.2 Tipos de Separaciones
7. Calibración de la Centrifuga
8. Precauciones y Cuidados
Conclusiones
Bibliografía
Anexos
Glosario
Fotos
FACULTAD TECNOLOGÍA MÉDICA
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INTRODUCCIÓN
Este presente trabajo nos informara detalladamente
y de muy practica manera todo lo que se refiere a
centrifugas, sus tipos, utilidades que se le da. Hasta
veremos los rotores, clases o tipos y para que se
utilizan y como están vinculados con las centrifugas.
La centrifugación es una de las técnicas de
investigación más
importantes y de mayor
aplicación en bioquímica,
biología celular y molecular y
en medicina. Es un método
por el cual se pueden separar
sólidos de líquidos de
diferente densidad mediante
una centrifugadora, la cual
imprime a la mezcla un movimiento rotatorio con
una fuerza mayor que la de la gravedad,
provocando la sedimentación de los sólidos o de las
partículas de mayor densidad. Este es uno de los
principios en los que la densidad: Todas lículas, por
posa, sectadas por cualquier y una extensa
variedad de técnicas derivadas de esta. Donde la
fuerza es mayor a la gravedad.
Fundamento teórico
El objetivo de la centrifugación es separar partículas
de diferentes características. Para ello, se aplica un
fuerte campo centrífugo, con lo cual las partículas
tenderán a desplazarse a través del medio en el que
se encuentren con la aceleración G.
Tipos de centrifugación
Centrifugación diferencial: diferencia en la
densidad de las moléculas. Esta diferencia
debe ser grande pervada al centrifugar: Las
partículas que posean densidades similares
sedimentaraíficoiza como centrifugación
preparativa para separar ponentes en la
mezcla (por ejemplo, para separar
mitocondrias de núcleos y membrana) útil
para separar moléculas.
Centrifugación Isopícnica: También llamada
centrifugación Zonal. Las partículas se separan
al usar medios de diferente densidad.
Ultracentrifugación: Permite estudiar las
características de sedimentación de
estructuras subcelulares (lisosomas, ribosomas
y microsomas) y biomoléculas. Utiliza rotores
(fijos o de columpio) y sistemas de monitoreo.
Existen diferentes maneras de monitorear la
sede las partículas en la ultracentrifugación.
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Procesos de Centrifugación
La centrifugación preparativa. Cuyo objeto es aislar
partículas específicas. Dentro de la centrifugación
preparativa hay dos métodos esenciales de
separación: la centrifugación diferencial y la
centrifugación en gradiente de densidad (zonal e
isopícnica).
La centrifugación analítica. Con la que se pretenden
estimar propiedades físicas de alguna partícula en
concreto: sus propiedades hidrodinámicas.
1. DEFINICIÓN:
Una centrífuga es una máquina que pone en
rotación una muestra para separar por fuerza
centrífuga sus componentes
o fases (generalmente una
sólida y una líquida), en
función de su densidad.
Existen diversos tipos de
centrífugas, comúnmente
para objetivos específicos.
Una aplicación típica
consiste en acelerar el
proceso de sedimentación, dividiendo el plasma y el
suero en un proceso de análisis de laboratorio.
También se utiliza para determinar el grupo
sanguíneo mediante una toma de muestra capilar.
En este caso la máquina utilizada se denomina
microcentrífuga.
Otra aplicación de las centrífugas es la elaboración
de aceite de oliva. En ella las aceitunas una vez
molidas y batidas se introducen en una centrífuga
horizontal en la que se separa el aceite que es la
fracción menos pesada del resto de componentes
de la aceituna; agua, hueso, pulpa etc.
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LOS PRINCIPALES PARÁMETROS SON:
- La velocidad
- La aceleración
- La desaceleración, y el frenaje.
- La temperatura para el sistema de refrigeración.
2.FUERZA CENTRIFUGA:
Fuerza centrífuga es la que tiende a alejar los objetos
del centro de rotación del eje mediante la
velocidad tangencial, perpendicular al radio, en un
movimiento circular.
La fuerza centrífuga es una de las fuerzas
ficticias que parecen actuar sobre un objeto
cuando su movimiento se describe según un
sistema de referencia en rotación.
La fuerza centrífuga es producto de la
reacción ejercida por un objeto que describe
un recorrido circular sobre el objeto que causa
ese movimiento curvo, según la tercera Ley de
Newton. En realidad es sólo el efecto de la
inercia en un movimiento circular, no es
causada por la interacción de otro cuerpo
físico.
La fuerza centrífuga surge cuando analizamos el
movimiento de un objeto desde un sistema de
referencia no inercial, o acelerado, que describe un
movimiento circular uniforme.
La fuerza centrífuga será el producto de la masa por
la aceleración centrífuga, en un sistema de
referencia no inercial.
3. TIPOS DE CENTRIFUGAS:
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1. Centrífugas de baja velocidad, de sobremesa
o clínicas.
Pequeño tamaño.
Sin refrigeración.
Máxima
velocidad: 5000
rpm.
Útil para
partículas
grandes.
2. Micrófugas: variante de las anteriores.
Velocidades
altas: más de 10000
rpm y tubos cortos.
Volúmenes
muy pequeños.
Útiles en
Biología Molecular.
3. Ultracentrífugas.
Velocidad: a partir de 50000 rpm.
Presentan sistemas auxiliares: sistemas de
refrigeración, sistemas de alto vacío.
Hay dos 2 tipos:
Analíticas: Obtención de datos precisos de
propiedades de sedimentación (s, PM).
Preparativas: Aislamiento de partículas de bajo S
(microsomas, virus, macromoléculas).
3.1 Centrifuga para Microhematocrito:
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Parámetros a medir
Velocidad
Tiempo
Calibración
Funcional,
Hematocrito
4. USOS:
Son muy útiles para precipitar células y
moléculas.
Este aparato somete
la muestra a fuerzas
de aceleración.
Obligan a las
moléculas a
concentrarse en el
fondo del envase
utilizado.
Dentro del mismo tubo, se van separando
distintas moléculas a distintos niveles o fases
dentro del tubo.
Con ayuda de jeringas, se puede perforar la
pared del tubo y extraer del mismo sólo
aquella fase donde se encuentren las
moléculas de interés.
Entre las centrífugas que usaremos está la
centrífuga refrigerada que nos va a permitir
separar células de los medios de cultivo.
El rotor de esta centrifuga puede sostener
tubos de 50 ml, pero puede ser intercambiado
por rotores que sostienen botellas de cultivo.
7. F. TECNOLOGÍA MÉDICA F. TECNOLOGÍA MÉDICA .
5. PARTES DE LA CENTRIFUGA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1. Tapadera
2. Rotor
3. Base
4. Tacómetro
5. Control de Velocidad
6. Control de Tiempo
7. Botones: Empezar, abrir y parar
8. Interruptor de encendido
Tapadera:
Impide el acceso a la muestras mientras estas están
en movimiento. Funcionan de forma automática,
por lo que no se pueden abrir mientras la centrifuga
está en funcionamiento.
Base:
Está construida generalmente de materiales
pesados, y con sistemas de fijación a las superficies,
de modo que brinda estabilidad al equipo.
Generalmente aquí están ubicados los controles.
Tacómetro:
Muestra la velocidad a la que gira el rotor, es decir
la velocidad de centrifugación (en revoluciones por
minuto, RPM)
Control de Tiempo:
Permite controlar el tiempo de centrifugación.
Generalmente también permite visualizar el tiempo
transcurrido o pendiente para que finalice un
proceso seleccionado.
Interruptor de Encendido:
Permite controlar el suministro de energía al equipo,
a modo de encenderlo, apagarlo, y generalmente
incluye selección de modo de operación.
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6. ROTORES
6.1 Tipos de Rotores
Se tres tipos de rotores en las
centrífugas:
- Rotores flotantes.
- Rotores de ángulo fijo o
angulares.
-Rotores verticales.
Cada tipo de rotor es
adecuado para un tipo
determinado de separación.
6.1.1 Rotores Flotantes
En este tipo de rotor, los tubos que se utilizan
para centrifugar están unidos al brazo del rotor
por su parte superior.
Durante la centrifugación, debido a la fuerza
centrífuga, los tubos pierden la verticalidad y
se sitúan perpendiculares al eje de rotación.
6.1.2 Rotores de ángulo fijo o angulares
En este tipo de rotores la centrifugación se
lleva a cabo siempre en un ángulo fijo
respecto al eje de rotación.
6.1.3 Rotores verticales
En los rotores verticales, se sostienen los rotores
en forma vertical durante la rotación.
Este tipo de rotor no resulta adecuado para
peletizar sino que es es más eficiente para
separaciones isopícnicas (en base a la
densidad) debido la corta longitud de
trayectoria.
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6.2 Tipos de Separaciones
Continuación se muestran unos diagramas de
la estructura de cada rotor y esquemas que
indican cómo sucede la sedimentación con
cada rotor.
Tanto en centrifugación diferencial como en
centrifugación en gradiente de densidad.
7. CALIBRACIÓN DE LA CENTRIFUGA
1. Control de la Velocidad, con el taquímetro que
mide las RPM. Si la velocidad no es buena se regula
con los potenciómetros que se encuentran dentro
de la tarjeta de control (ojo pueden ser muchas, por
ejemplo el caso de Biovue, que tiene dos
potenciómetros juntados en la tarjeta frontal para
dos velocidades). Antes de medir las rpm tienes que
dejar que la centrifuga gira 30 segundos para que
coja buena velocidad.
2. Control del Minutero o Temporarizador, para mas
seguridad tienes que mirar con un cronometro o tu
reloj de mano.
3. Control del Rotor, el rotor es un eje en el centro de
la centrifuga, con un sistema de tuercas que es el
que se gira gracias al motor, y lleva el porta tubos. El
rotor de la centrifuga tiene que girar en el sentido
adecuado, (sentido de la aguja de reloj), tiene que
estar bien recto sin inclinarse a ninguna parte.
Porque si está inclinado, puedes romper los tubos.
4. Control del Sensor de Desequilibrio o las
Vibraciones, en este caso la centrifuga no tiene que
vibrar mucho, puedes poner los tubos dentro pero
con uno que tiene más peso que los otros así la
centrifuga vibrara y encontrara un desequilibrio
donde tendrá que pararse. Por eso es importante
que todos los tubos en la centrifuga tengan el mismo
peso, tamaño y la misma forma sin más ni menos.
5. Control de Seguridad de la Abertura de la Puerta,
la puerta de la centrifuga no tiene que abrirse
cuando está en marcha, ni se pone en marcha
cuando la puerta está abierta. es de suma
importancia por que dentro de la cámara de la
centrifuga hay un alto nivel de velocidad (RPM), que
oscila entre 4000 a 6400 rpm. En centrifuga de orden
normal, y el trabajo rutinario es de 4000 a 12000 rpm.
y un vacío que va de 0 a -700 mmHg. si se intenta
abrir, tiene que pararse, gracias a esta velocidad y
el vacío encontramos la separación de los
componentes de la sangre.
6. Limpieza General.
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8. PRECAUCIONES Y CUIDADOS
Tener cuidado de no tocar un rotor que esté
girando si existe un fallo interno, ni trabajar
sobre el equipo con la tapa abierta. Nunca
intentar parar el movimiento de un rotor con
las manos o con un instrumento o herramienta
El operador puede dañarse mientras intenta
disminuir o parar la velocidad del rotor. Por
este motivo, la tapa del equipo no deberá
nunca ser abierta mientras el rotor está
girando. Si existe una tapa de protección
interna, usarla.
También existen riesgos cuando la centrífuga
no esté funcionando; por ejemplo, cristales
rotos, posiblemente contaminados con
sangre, que pueden ser encontrados dentro
de la centrífuga durante la limpieza o la
inspección y mantenimiento preventivo.
Se debe cuidar que estén presentes las
instrucciones de uso y mantenimiento, realizar
la instalación y el montaje con las debidas
medidas que garanticen la seguridad. Como
mínimo las unidades deberían tener una tapa
con seguro que prevenga a la centrífuga de
ser abierta en el caso de un fallo mientras el
rotor está dando vueltas.
Es preferible, que todas las centrífugas tengan
una seguridad de bloqueo, la cual permite a
la tapa ser abierta sólo después que el rotor
haya parado o alcanzado una velocidad muy
baja.
Limpiar y mantener adecuadamente todas las
centrífugas. (Nota: contactar con el
fabricante para que suministre la guía de este
proceso, si el manual del operador no
especifica la forma de limpieza y los agentes
de desinfección debido a que el uso continuo
de algunas soluciones comunes de
desinfección (ej: 10% de hipoclorito de sodio)
pueden dañar el rotor y otros componentes
de la centrífuga
Si se usa un rotor con cubetas de balanceo,
asegurarse que los tubos están colocados de
acuerdo con las instrucciones del fabricante;
los tubos largos (ej: 100 mm) colocados en los
alojamientos internos más próximos al eje del
rotor probablemente se romperán cuando el
rotor haga que se balanceen las cubetas
debido a la fuerza centrífuga.
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CONCLUSIONES
Una centrífuga es una máquina que pone en
rotación una muestra para separar por fuerza
centrífuga sus componentes o fases
(generalmente una sólida y una líquida), en
función de su densidad.
Los rotores pueden descolocarse o fallar,
posiblemente por la pérdida de una tuerca de
sujeción o el emplazamiento de un tubo
desequilibrado; el fallo del rotor o de algún
tubo puede resultar sobre el operador en una
exposición a riesgos físicos o infecciosos.
Muchas centrifugas modernas disponen de
dispositivos para detectar el equilibrio del eje
del rotor, por tanto, al ser otro elemento de
seguridad, será bueno disponer, si es posible,
de este tipo de centrifugas.
Los tubos utilizados pueden romperse, la rotura
es más probable que ocurra si las instrucciones
del fabricante no son seguidas, tales como el
uso de tubos de tamaño no correcto y la no
utilización de amortiguadores.
BIBLIOGRAFÍA
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http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/
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http://www.simes-
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MANUAL PARA MANTENIMIENTO DE EQIPOS DE
LABORATORIO- Area de tecnología y
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http://personales.ya.com/garisoler/vespinos/i
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Principios de Análisis Instrumental – 5ta edición
Skoog, Holler, Nieman
www.Wikipedia.com⁄centrifugacion
CENTRIFUGACION
http://www.medicentro.com.co/Laboratorio.htm
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ANEXOS
Glosario
Aceleración G: Las fuerzas G no son una
medida de fuerza sino una medida intuitiva de
aceleración. Está basada en la aceleración
que produciría la gravedad terrestre en un
objeto cualquiera en condiciones ideales (sin
atmósfera u otro rozamiento). Una aceleración
de 1G es generalmente considerado como
igual a la gravedad estándar, que es de
9.80665 metros por segundo cuadrado (m/s2).
Calibración: Es el procedimiento metrológico
que permite determinar con suficiente
exactitud cuál es el valor de los errores de los
instrumentos de medición.
Hematocrito: Es el porcentaje del volumen
de la sangre que ocupa la fracción de los
glóbulos rojos. Las cifras normales de
hematocrito en personas oscilan entre:
Hombres: de 40.7 a 50.3 % Mujeres: de 36.1 a
44.3
Microsoma: Término ideado por el
bioquímico francés A. Claude para designar
uno de los productos de la ultra
centrifugación de hígado triturado.
En la actualidad el microsoma tiene un
sentido mucho más amplio, que no
corresponde a una estructura celular
definida, y esta formada por porciones de
organelas como las membranas
mitocondriales, las del aparato de Golgi
(excretor) y del citoplasma, además de otras
partículas.
Rotores: El motor se compone de varias
partes, la parte central se le llama ROTOR,
ésta la mayoría de las veces es la parte que
gira, pero puede q no siempre sea así. El
ESTATOR es la otra parte, y generalmente es
la parte que no gira, la exterior.
Sedimentación: Es el proceso por el cual el
material sólido, transportado por una
corriente de agua, se deposita en el fondo
del río, embalse, canal artificial, o dispositivo
construido especialmente para tal fin. Toda
corriente de agua, caracterizada por su
caudal, tirante de agua, velocidad y forma
de la sección tiene una capacidad de
transportar material sólido en suspensión.
13. F. TECNOLOGÍA MÉDICA F. TECNOLOGÍA MÉDICA .
Fotos
Centrifuga de mesa para tubo Eppendorf
Centrifuga de mesa para tubos de ensayo
Mesa ultracentrifuga
Enorme centrifuga
14. F. TECNOLOGÍA MÉDICA F. TECNOLOGÍA MÉDICA .
Decanter centrifugar (esquema)
Proceso de Centrifugación
Centrifugación Diferencial