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*
*Medio de cultivo
selectivo y
diferencial
utilizado para el
aislamiento de
Salmonella spp. y
Shigella spp. a
partir de heces y
alimentos.
*En el medio de cultivo la proteosa peptona y el extracto de
levadura aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano.
*La lactosa, sacarosa y salicina son los hidratos de carbono
fermentables.
*Las sales biliares inhiben el desarrollo de la flora Gram
positiva, de algunos coliformes y de la mayoría de las cepas de
Pseudomonas spp.
*El azul de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores de
la fermentación de hidratos de carbono, mientras que el
citrato de hierro actua como indicador de la formación de SH2
a partir del tiosulfato debido a que se forma sulfuro de hierro,
compuesto de color negro.
*El cloruro de sodio mantiene
el balance osmótico y el agar
es el agente solidificante.
*El desarrollo de Shigella spp.
es adecuado debido a que la
inhibición de este
microorganismo por las sales
biliares está disminuida por
la adición de cantidades
relativamente elevadas de
proteosa peptona y de
hidratos de carbono así
como la baja toxicidad de
los indicadores presentes en
el medio de cultivo.
Componente Cantidad
Proteosa Peptona 12,0 g
Extracto de Levadura 3,0 g
Sales Biliares 9,0 g
Lactosa 12,0 g
Sacarosa 12,0 g
Salicina 2,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Tiosulfato de Sodio 5,0 g
Citrato de Hierro y Amonio 1,5 g
Azul de Bromotimol 0,065 g
Fucsina Acida 0,1 g
Agar 14,0 g
Agua 1000 mL
*Medio de cultivo color verde amarronado.
*Almacenamiento a 2-8°C
*Siembra directa, estriando la superficie del medio
de cultivo
*Incubación en aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18 a
24 horas.
*Se logra una mejor diferenciación entre especies
de Salmonella y Shigella al incubar las placas
durante 48 horas.
*Microorganismos fermentadores de lactosa:
Colonias amarillas o anaranjadas
*Microorganismos no fermentadores de lactosa:
Colonias del color del medio, verde-azuladas.
*Microorganismos productores de SH2 : Colonias con
centro negro.
a) Salmonella enteritidis: Colonias verde azuladas con o
sin centro negro.
b) Salmonella typhimurium: Colonias verde azuladas con
o sin centro negro.
c) Shigella flexneri: Colonias verdes elevadas húmedas.
d) Shigella sonnei: Colonias verdes elevadas húmedas.
e) Proteus mirabilis: Colonias verdes azuladas con o sin
centro negro.
f) Escherichia coli y Klebsiella Pneumoniae: Rosa salmón
rodeadas a veces por precipitado biliar.
g) Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis:
Inhibidos
*No autoclavar el medio de cultivo ya que el
calentamiento excesivo puede afectar la
composición del mismo.
*No es necesario esterilizar el medio de cultivo
debido al alto efecto inhibitorio del medio frente a
la flora Gram positiva.
*Las cepas de Proteus pueden no ser inhibidas y
crecer como colonias similares a especies de
Salmonella o Shigella. Por eso es necesario realizar
pruebas bioquímicas de identificación microbiana.
*
*
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  • 1. *
  • 2. *Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y Shigella spp. a partir de heces y alimentos.
  • 3. *En el medio de cultivo la proteosa peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano. *La lactosa, sacarosa y salicina son los hidratos de carbono fermentables. *Las sales biliares inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, de algunos coliformes y de la mayoría de las cepas de Pseudomonas spp. *El azul de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores de la fermentación de hidratos de carbono, mientras que el citrato de hierro actua como indicador de la formación de SH2 a partir del tiosulfato debido a que se forma sulfuro de hierro, compuesto de color negro.
  • 4. *El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. *El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibición de este microorganismo por las sales biliares está disminuida por la adición de cantidades relativamente elevadas de proteosa peptona y de hidratos de carbono así como la baja toxicidad de los indicadores presentes en el medio de cultivo.
  • 5. Componente Cantidad Proteosa Peptona 12,0 g Extracto de Levadura 3,0 g Sales Biliares 9,0 g Lactosa 12,0 g Sacarosa 12,0 g Salicina 2,0 g Cloruro de Sodio 5,0 g Tiosulfato de Sodio 5,0 g Citrato de Hierro y Amonio 1,5 g Azul de Bromotimol 0,065 g Fucsina Acida 0,1 g Agar 14,0 g Agua 1000 mL
  • 6. *Medio de cultivo color verde amarronado. *Almacenamiento a 2-8°C *Siembra directa, estriando la superficie del medio de cultivo *Incubación en aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18 a 24 horas. *Se logra una mejor diferenciación entre especies de Salmonella y Shigella al incubar las placas durante 48 horas.
  • 7. *Microorganismos fermentadores de lactosa: Colonias amarillas o anaranjadas
  • 8. *Microorganismos no fermentadores de lactosa: Colonias del color del medio, verde-azuladas.
  • 9. *Microorganismos productores de SH2 : Colonias con centro negro.
  • 10. a) Salmonella enteritidis: Colonias verde azuladas con o sin centro negro. b) Salmonella typhimurium: Colonias verde azuladas con o sin centro negro. c) Shigella flexneri: Colonias verdes elevadas húmedas. d) Shigella sonnei: Colonias verdes elevadas húmedas. e) Proteus mirabilis: Colonias verdes azuladas con o sin centro negro. f) Escherichia coli y Klebsiella Pneumoniae: Rosa salmón rodeadas a veces por precipitado biliar. g) Staphylococcus aureus y Enterococcus faecalis: Inhibidos
  • 11. *No autoclavar el medio de cultivo ya que el calentamiento excesivo puede afectar la composición del mismo. *No es necesario esterilizar el medio de cultivo debido al alto efecto inhibitorio del medio frente a la flora Gram positiva. *Las cepas de Proteus pueden no ser inhibidas y crecer como colonias similares a especies de Salmonella o Shigella. Por eso es necesario realizar pruebas bioquímicas de identificación microbiana.
  • 12. *