2. Introducción
¿Qué utilidad tiene conocer las condiciones
que un microorganismos requiere para crecer?
# Obtenerlo en el laboratorio Cultivo
# Combatirlo o
evitar su proliferación
3. Introducción
80 % de agua
20 % de peso seco:
Proteínas
Ácidos Nucleicos
Polisacáridos
Lípidos
Peptidoglucano
Otros compuestos de peso molecular mas bajo
5. Nutrientes
Substancias necesarias para
asegurar supervivencia.
Proveen energía y elementos
necesarios para síntesis de
estructuras celulares.
Ingreso por absorción.
Viabilidad: capacidad de
reproducción.
6. Nutrientes esenciales o Básicos
Asimilables por simple difusión o por
transporte activo
Agua
Fuentes de Carbono
Compuestos de nitrógeno
Fósforo (fosfatos inorgánicos)
7. Otros nutrientes
Iones potasio
Iones Magnesio
Factores de Crecimiento u orgánicos
Vitaminas
Aminoácidos
Oligoelementos
Hierro
Cobre
Cobalto
8. Factores Estimulantes
Influyen en el proceso de crecimiento.
No son imprescindibles.
En presencia de factores estimulantes crecen
mas rápido y mejor.
9. Categorías Nutritivas
Fuente de Carbono
Carbono inorgánico: dióxido de carbono
autótrofas o litótrofas
Carbono orgánico: Heterótrofas u organótrofas
Fuente de Energía
Fotótrofas
Quimiótrofas: energía suministrada por ATP
12. Crecimiento Bacteriano
Aumento de número
(no de tamaño)
Multiplicación
bacteriana: fisión
simple o binaria
Elongación
Auto duplicación de ADN
cromosómico
Tabicado central
Invaginación membrana
celular
Síntesis de pared
13. Tiempo de generación
Tiempo necesario para la duplicación celular
Distintiva de cada especie
Puede influirse por factores estimulantes
Varían de 20 minutos (Escherichia coli) hasta
24 horas
14. Curva de Crecimiento
Bacteriano
•Bacteria en medio
adecuado
•Gráfico de coordenadas:
número de bacterias
(logaritmo) versus lapso de
tiempo.
•Distinta para cada bacteria
•En todas se identifican
cuatro etapas
15. Fase de Latencia
El número de microorganismos no varía
Adaptación al medio, producción de enzimas
Tiempo variable: entre una hora a días.
Tamaño relativo aumentado por división
16. Fase exponencial o de crecimiento
logarítmico
Relación casi lineal entre el
tiempo y el número de
elementos.
Actividad metabólica
incrementada
Depende del tiempo de
generación de cada bacteria
Los antimicrobianos son mas
activos
Puede haber variaciones entre el
crecimiento in vitro e in vivo.
17. Fase Estacionaria
En determinado punto el crecimiento disminuye
La población no aumenta
Células nuevas reemplazan a las células muertas
Actividad metabólica mas lenta
Células en animación suspendida
Producción de metabolitos secundarios
Antibioticos
Toxinas
Fase de Esporogenesis para las especies
productoras de esporas
18. Fase de declinación o muerte
Recuento de células disminuye sensiblemente
El numero de células muertas supera al
número de células vivas
Acumulación de productos tóxicos
Disminución de nutrientes
Aparición rápida : autolimitar diseminación
infecciones
19. Técnicas para determinar el
número y viabilidad de las células
Contar al microscopio el
número de células en un
volumen conocido
Establecer el número de
células por turbidimetria
Recuento de elementos
viables por cultivo (Unidad
Formadora de Colonias o
UFC)
20. Efecto de la Temperatura
Temperatura mínima de crecimiento
Temperatura óptima de crecimiento
Temperatura máxima de crecimiento
21. Sicrófilos
Requieren bajas temperaturas
15 – 20 ºC
La mínima puede ser muy baja
Bacterias en el fondo del mar y en los polos
22. Mesófilos
Rango de temperaturas: 25 – 40 ºC
Temperatura óptima: 37 ºC ± 1 ºC
Agentes que afectan al hombre y los animales
24. Condiciones de pH
pH : Potencial Hidrógeno. Va desde 0 a 14.
pH < 6,5 ácido
pH > 7,5 básico o alcalino
pH 6,5 – 7,5 neutro Mas adecuado para
crecimiento bacteriano
Bacterias que crecen hasta pH 4 Acidófilas
(Por ejemplo: Lactobacillus)
Vibrio cholerae : medio alcalino
25. Presión Osmótica
Los solutos (sales y azúcares) disueltos se
desplazan a zonas de menor concentración.
El agua se desplaza a zonas de mayor
concentración de solutos
Una presión osmótica alta causa pérdida de
agua y plasmólisis de la célula
Halófilas: bacterias que toleran altas
concentraciones salinas
Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 % de
sales
26. Condiciones atmósféricas
Potencial de óxido-reducción o Redox (Eh)
Respiración bacteriana : reacciones de óxido-
reducción, en cadena
El aceptor final de electrones o hidrogeniones
es variable
27. Aerobios
Requieren oxígeno, aceptor final de hidrógeno
Formación de H2O y CO2
Producción de enzima Catalasa :
desdoblamiento del Peróxido de hidrógeno
(H2O2) en H2O y oxígeno
Prueba de Catalasa para diferenciar
microroganismos (Staphylococcus de
Streptococcus)
28. Anaerobios
Viven en ausencia de oxígeno atmosférico
Aceptor final de hidrógeno : compuesto
inorgánico (NO3 o SO4)
Fermentación: la fuente de carbono provee
energía, el donador de hidrógeno y el aceptor
final (un compuesto orgánico como ácidos o
alcoholes)
Muy frecuente en microorganismos orales
29. Anaerobios
Anaerobios obligados: no utilizan O2
Anaerobios moderados: toleran de un 2 a un
8 % de O2
Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un
tiempo en presencia de O2
Anaerobios facultativos: aceptan
indistintintamente una situación u otra
30. Microaerófilos
Requieren bajas concentraciones de O2 para
crecer
Utilizan el O2 como fuente de energía pero a
concentraciones < 15 %
Susceptibles a radicales superóxido
Enzima Superóxido Dismutasa (SOD) :
transforma radicales superóxido en H2O2
Capnofilas: desarrollan mejor con
concentraciones de CO2 elevadas
La cavidad oral presenta todas estas variantes
Las especies capnófilas aumentan en personas
con alteraciones periodontales
31. Control de Microorganismos
Muchos factores estimulantes del desarrollo
bacteriano se usan para preservar alimentos:
Baja temperatura
Salmueras
Dulces
Salados
Ahumados
32. Metabolismo Bacteriano
Conjunto de reacciones o transformaciones
quimicas que tienen lugar en un
microorganismo para mantener su viabilidad
Procesos o reacciones Catabólicas
Degradan nutrientes
Liberan energía
Procesos o reacciones Anabólicas
Tienden a unir moléculas
Reacciones de síntesis que consumen energía
33. Enzimas
Catalizadores orgánicos que aceleran las
reacciones químicas por su presencia,
controlados geneticamente
Actúan sobre un sustrato
Reciben su nombre por el sustrato sobre el
que actúan (Lipasa = actúa sobre lípidos)
Enzimas de la respiración : deshidrogenasas
y oxidasas
Proteínas de gran tamaño
Proteínas mas fracción no proteica (cofactor)
34. Enzima
Holoenzima: proteína (apoenzima) mas
cofactor
Coenzima : el cofactor es ion metalico o
molecula orgánica compleja
Grupo prostetico: cofactor unido fuertemente a
apoenzima
Constitutivas: preformadas en la célula
Inducibles o adaptativas: se forma en
condiciones ambientales especiales o en
presencia de sustratos apropiados
36. Enzimas
Exoenzimas de tipo hidrolítico: unión de agua
a macromoléculas, unidades pequeñas
(bloques estructurales.
Facilitan penetración pasiva, facilitada o
activa a través de pared y membrana
Para ingreso activo: actividad de permeasas
37. Enzimas
Endoenzimas: biosintesis para formar
macromoléculas (Anabolismo)
Mecanismos de Represión
Vías anfibólicas: los productos generados en la
degradación de un elemento se aprovechan en la
síntesis de otros
38. Vías metabólicas mas
conocidas
Glucólisis
Como consecuencia del metabolismo hay producción de
toxinas, vitaminas, antibióticos, compuestos de interés industrial
(alcoholes)
40. Medios de Cultivo
Substancias nutritivas que permiten el desarrollo
de microorganismos en el laboratorio
Cultivo: brindar condiciones óptimas de
crecimiento
Fáciles de preparar
Baratos
Permitir el desarrollo de gran variedad de
gérmenes
Aportar nutrientes adecuados (aminoacidos,
nucleótidos, factores de crecimiento, glucosa,
iones inorganicos)
41. Medios de Cultivo
Optimo contenido de H2O y correcto pH
Requerimientos de O2
Estéril, evitar contaminaciones
Incubación: temperatura óptima en estufas
42. Clasificación de los medios de
cultivo
Naturales: solo usados para
enriquecer medios (leche, suero,
papa)
Artificiales se preparan en el
laboratorio
Líquidos: caldos
Sólidos: caldos adicionados de
substancias capaces de solidificar (Agar-
agar)
Medios Complejos: extractos de carne,
levadura, peptonas.
Medios Enriquecidos: agregado de
43. Clasificación de los medios de
cultivo
Medios selectivos: permiten crecer un solo
tipo de microorganismo (substancias
inhibidoras)
Medios diferenciales o indicadores: evidencia
alguna actividad metabólica por cambio de
estado o color propia de un tipo determinado
de microorganismo
Medios de Transporte: traslado de muestras
biológicas manteniendo las bacterias viables