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CRECIMIENTO,
NUTRICIÓN Y
METABOLISMO
BACTERIANO
Introducción
 ¿Qué utilidad tiene conocer las condiciones
que un microorganismos requiere para crecer?
# Obtenerlo en el laboratorio Cultivo
# Combatirlo o
evitar su proliferación
Introducción
 80 % de agua
 20 % de peso seco:
 Proteínas
 Ácidos Nucleicos
 Polisacáridos
 Lípidos
 Peptidoglucano
 Otros compuestos de peso molecular mas bajo
Introducción
Biosíntesis: Ingreso de substancias para transformarse
en compuestos estructurales
Nutrientes
 Substancias necesarias para
asegurar supervivencia.
 Proveen energía y elementos
necesarios para síntesis de
estructuras celulares.
 Ingreso por absorción.
 Viabilidad: capacidad de
reproducción.
Nutrientes esenciales o Básicos
 Asimilables por simple difusión o por
transporte activo
 Agua
 Fuentes de Carbono
 Compuestos de nitrógeno
 Fósforo (fosfatos inorgánicos)
Otros nutrientes
 Iones potasio
 Iones Magnesio
 Factores de Crecimiento u orgánicos
 Vitaminas
 Aminoácidos
 Oligoelementos
 Hierro
 Cobre
 Cobalto
Factores Estimulantes
 Influyen en el proceso de crecimiento.
 No son imprescindibles.
 En presencia de factores estimulantes crecen
mas rápido y mejor.
Categorías Nutritivas
 Fuente de Carbono
 Carbono inorgánico: dióxido de carbono
autótrofas o litótrofas
 Carbono orgánico: Heterótrofas u organótrofas
 Fuente de Energía
 Fotótrofas
 Quimiótrofas: energía suministrada por ATP
Categorías Nutritivas
Categorías Nutritivas
Crecimiento Bacteriano
 Aumento de número
(no de tamaño)
 Multiplicación
bacteriana: fisión
simple o binaria
 Elongación
 Auto duplicación de ADN
cromosómico
 Tabicado central
 Invaginación membrana
celular
 Síntesis de pared
Tiempo de generación
 Tiempo necesario para la duplicación celular
 Distintiva de cada especie
 Puede influirse por factores estimulantes
 Varían de 20 minutos (Escherichia coli) hasta
24 horas
Curva de Crecimiento
Bacteriano
•Bacteria en medio
adecuado
•Gráfico de coordenadas:
número de bacterias
(logaritmo) versus lapso de
tiempo.
•Distinta para cada bacteria
•En todas se identifican
cuatro etapas
Fase de Latencia
 El número de microorganismos no varía
 Adaptación al medio, producción de enzimas
 Tiempo variable: entre una hora a días.
 Tamaño relativo aumentado por división
Fase exponencial o de crecimiento
logarítmico
 Relación casi lineal entre el
tiempo y el número de
elementos.
 Actividad metabólica
incrementada
 Depende del tiempo de
generación de cada bacteria
 Los antimicrobianos son mas
activos
 Puede haber variaciones entre el
crecimiento in vitro e in vivo.
Fase Estacionaria
 En determinado punto el crecimiento disminuye
 La población no aumenta
 Células nuevas reemplazan a las células muertas
 Actividad metabólica mas lenta
 Células en animación suspendida
 Producción de metabolitos secundarios
 Antibioticos
 Toxinas
 Fase de Esporogenesis para las especies
productoras de esporas
Fase de declinación o muerte
 Recuento de células disminuye sensiblemente
 El numero de células muertas supera al
número de células vivas
 Acumulación de productos tóxicos
 Disminución de nutrientes
 Aparición rápida : autolimitar diseminación
infecciones
Técnicas para determinar el
número y viabilidad de las células
 Contar al microscopio el
número de células en un
volumen conocido
 Establecer el número de
células por turbidimetria
 Recuento de elementos
viables por cultivo (Unidad
Formadora de Colonias o
UFC)
Efecto de la Temperatura
 Temperatura mínima de crecimiento
 Temperatura óptima de crecimiento
 Temperatura máxima de crecimiento
Sicrófilos
 Requieren bajas temperaturas
 15 – 20 ºC
 La mínima puede ser muy baja
 Bacterias en el fondo del mar y en los polos
Mesófilos
 Rango de temperaturas: 25 – 40 ºC
 Temperatura óptima: 37 ºC ± 1 ºC
 Agentes que afectan al hombre y los animales
Termófilos
 Toleran altas temperaturas
 Temperatura óptima: 55 ºC
 Temperatura máxima: 80 ºC o mas.
Condiciones de pH
 pH : Potencial Hidrógeno. Va desde 0 a 14.
 pH < 6,5 ácido
 pH > 7,5 básico o alcalino
 pH 6,5 – 7,5 neutro Mas adecuado para
crecimiento bacteriano
 Bacterias que crecen hasta pH 4 Acidófilas
(Por ejemplo: Lactobacillus)
 Vibrio cholerae : medio alcalino
Presión Osmótica
 Los solutos (sales y azúcares) disueltos se
desplazan a zonas de menor concentración.
El agua se desplaza a zonas de mayor
concentración de solutos
 Una presión osmótica alta causa pérdida de
agua y plasmólisis de la célula
 Halófilas: bacterias que toleran altas
concentraciones salinas
 Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 % de
sales
Condiciones atmósféricas
 Potencial de óxido-reducción o Redox (Eh)
 Respiración bacteriana : reacciones de óxido-
reducción, en cadena
 El aceptor final de electrones o hidrogeniones
es variable
Aerobios
 Requieren oxígeno, aceptor final de hidrógeno
 Formación de H2O y CO2
 Producción de enzima Catalasa :
desdoblamiento del Peróxido de hidrógeno
(H2O2) en H2O y oxígeno
 Prueba de Catalasa para diferenciar
microroganismos (Staphylococcus de
Streptococcus)
Anaerobios
 Viven en ausencia de oxígeno atmosférico
 Aceptor final de hidrógeno : compuesto
inorgánico (NO3 o SO4)
 Fermentación: la fuente de carbono provee
energía, el donador de hidrógeno y el aceptor
final (un compuesto orgánico como ácidos o
alcoholes)
 Muy frecuente en microorganismos orales
Anaerobios
 Anaerobios obligados: no utilizan O2
 Anaerobios moderados: toleran de un 2 a un
8 % de O2
 Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un
tiempo en presencia de O2
 Anaerobios facultativos: aceptan
indistintintamente una situación u otra
Microaerófilos
 Requieren bajas concentraciones de O2 para
crecer
 Utilizan el O2 como fuente de energía pero a
concentraciones < 15 %
 Susceptibles a radicales superóxido
 Enzima Superóxido Dismutasa (SOD) :
transforma radicales superóxido en H2O2
 Capnofilas: desarrollan mejor con
concentraciones de CO2 elevadas
 La cavidad oral presenta todas estas variantes
 Las especies capnófilas aumentan en personas
con alteraciones periodontales
Control de Microorganismos
 Muchos factores estimulantes del desarrollo
bacteriano se usan para preservar alimentos:
 Baja temperatura
 Salmueras
 Dulces
 Salados
 Ahumados
Metabolismo Bacteriano
 Conjunto de reacciones o transformaciones
quimicas que tienen lugar en un
microorganismo para mantener su viabilidad
 Procesos o reacciones Catabólicas
 Degradan nutrientes
 Liberan energía
 Procesos o reacciones Anabólicas
 Tienden a unir moléculas
 Reacciones de síntesis que consumen energía
Enzimas
 Catalizadores orgánicos que aceleran las
reacciones químicas por su presencia,
controlados geneticamente
 Actúan sobre un sustrato
 Reciben su nombre por el sustrato sobre el
que actúan (Lipasa = actúa sobre lípidos)
 Enzimas de la respiración : deshidrogenasas
y oxidasas
 Proteínas de gran tamaño
 Proteínas mas fracción no proteica (cofactor)
Enzima
 Holoenzima: proteína (apoenzima) mas
cofactor
 Coenzima : el cofactor es ion metalico o
molecula orgánica compleja
 Grupo prostetico: cofactor unido fuertemente a
apoenzima
 Constitutivas: preformadas en la célula
 Inducibles o adaptativas: se forma en
condiciones ambientales especiales o en
presencia de sustratos apropiados
Enzimas
Enzimas
 Exoenzimas de tipo hidrolítico: unión de agua
a macromoléculas, unidades pequeñas
(bloques estructurales.
 Facilitan penetración pasiva, facilitada o
activa a través de pared y membrana
 Para ingreso activo: actividad de permeasas
Enzimas
 Endoenzimas: biosintesis para formar
macromoléculas (Anabolismo)
 Mecanismos de Represión
 Vías anfibólicas: los productos generados en la
degradación de un elemento se aprovechan en la
síntesis de otros
Vías metabólicas mas
conocidas
 Glucólisis
Como consecuencia del metabolismo hay producción de
toxinas, vitaminas, antibióticos, compuestos de interés industrial
(alcoholes)
Vías metabólicas mas
conocidas
Medios de Cultivo
 Substancias nutritivas que permiten el desarrollo
de microorganismos en el laboratorio
 Cultivo: brindar condiciones óptimas de
crecimiento
 Fáciles de preparar
 Baratos
 Permitir el desarrollo de gran variedad de
gérmenes
 Aportar nutrientes adecuados (aminoacidos,
nucleótidos, factores de crecimiento, glucosa,
iones inorganicos)
Medios de Cultivo
 Optimo contenido de H2O y correcto pH
 Requerimientos de O2
 Estéril, evitar contaminaciones
 Incubación: temperatura óptima en estufas
Clasificación de los medios de
cultivo
 Naturales: solo usados para
enriquecer medios (leche, suero,
papa)
 Artificiales se preparan en el
laboratorio
 Líquidos: caldos
 Sólidos: caldos adicionados de
substancias capaces de solidificar (Agar-
agar)
 Medios Complejos: extractos de carne,
levadura, peptonas.
 Medios Enriquecidos: agregado de
Clasificación de los medios de
cultivo
 Medios selectivos: permiten crecer un solo
tipo de microorganismo (substancias
inhibidoras)
 Medios diferenciales o indicadores: evidencia
alguna actividad metabólica por cambio de
estado o color propia de un tipo determinado
de microorganismo
 Medios de Transporte: traslado de muestras
biológicas manteniendo las bacterias viables
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  • 2. Introducción  ¿Qué utilidad tiene conocer las condiciones que un microorganismos requiere para crecer? # Obtenerlo en el laboratorio Cultivo # Combatirlo o evitar su proliferación
  • 3. Introducción  80 % de agua  20 % de peso seco:  Proteínas  Ácidos Nucleicos  Polisacáridos  Lípidos  Peptidoglucano  Otros compuestos de peso molecular mas bajo
  • 4. Introducción Biosíntesis: Ingreso de substancias para transformarse en compuestos estructurales
  • 5. Nutrientes  Substancias necesarias para asegurar supervivencia.  Proveen energía y elementos necesarios para síntesis de estructuras celulares.  Ingreso por absorción.  Viabilidad: capacidad de reproducción.
  • 6. Nutrientes esenciales o Básicos  Asimilables por simple difusión o por transporte activo  Agua  Fuentes de Carbono  Compuestos de nitrógeno  Fósforo (fosfatos inorgánicos)
  • 7. Otros nutrientes  Iones potasio  Iones Magnesio  Factores de Crecimiento u orgánicos  Vitaminas  Aminoácidos  Oligoelementos  Hierro  Cobre  Cobalto
  • 8. Factores Estimulantes  Influyen en el proceso de crecimiento.  No son imprescindibles.  En presencia de factores estimulantes crecen mas rápido y mejor.
  • 9. Categorías Nutritivas  Fuente de Carbono  Carbono inorgánico: dióxido de carbono autótrofas o litótrofas  Carbono orgánico: Heterótrofas u organótrofas  Fuente de Energía  Fotótrofas  Quimiótrofas: energía suministrada por ATP
  • 12. Crecimiento Bacteriano  Aumento de número (no de tamaño)  Multiplicación bacteriana: fisión simple o binaria  Elongación  Auto duplicación de ADN cromosómico  Tabicado central  Invaginación membrana celular  Síntesis de pared
  • 13. Tiempo de generación  Tiempo necesario para la duplicación celular  Distintiva de cada especie  Puede influirse por factores estimulantes  Varían de 20 minutos (Escherichia coli) hasta 24 horas
  • 14. Curva de Crecimiento Bacteriano •Bacteria en medio adecuado •Gráfico de coordenadas: número de bacterias (logaritmo) versus lapso de tiempo. •Distinta para cada bacteria •En todas se identifican cuatro etapas
  • 15. Fase de Latencia  El número de microorganismos no varía  Adaptación al medio, producción de enzimas  Tiempo variable: entre una hora a días.  Tamaño relativo aumentado por división
  • 16. Fase exponencial o de crecimiento logarítmico  Relación casi lineal entre el tiempo y el número de elementos.  Actividad metabólica incrementada  Depende del tiempo de generación de cada bacteria  Los antimicrobianos son mas activos  Puede haber variaciones entre el crecimiento in vitro e in vivo.
  • 17. Fase Estacionaria  En determinado punto el crecimiento disminuye  La población no aumenta  Células nuevas reemplazan a las células muertas  Actividad metabólica mas lenta  Células en animación suspendida  Producción de metabolitos secundarios  Antibioticos  Toxinas  Fase de Esporogenesis para las especies productoras de esporas
  • 18. Fase de declinación o muerte  Recuento de células disminuye sensiblemente  El numero de células muertas supera al número de células vivas  Acumulación de productos tóxicos  Disminución de nutrientes  Aparición rápida : autolimitar diseminación infecciones
  • 19. Técnicas para determinar el número y viabilidad de las células  Contar al microscopio el número de células en un volumen conocido  Establecer el número de células por turbidimetria  Recuento de elementos viables por cultivo (Unidad Formadora de Colonias o UFC)
  • 20. Efecto de la Temperatura  Temperatura mínima de crecimiento  Temperatura óptima de crecimiento  Temperatura máxima de crecimiento
  • 21. Sicrófilos  Requieren bajas temperaturas  15 – 20 ºC  La mínima puede ser muy baja  Bacterias en el fondo del mar y en los polos
  • 22. Mesófilos  Rango de temperaturas: 25 – 40 ºC  Temperatura óptima: 37 ºC ± 1 ºC  Agentes que afectan al hombre y los animales
  • 23. Termófilos  Toleran altas temperaturas  Temperatura óptima: 55 ºC  Temperatura máxima: 80 ºC o mas.
  • 24. Condiciones de pH  pH : Potencial Hidrógeno. Va desde 0 a 14.  pH < 6,5 ácido  pH > 7,5 básico o alcalino  pH 6,5 – 7,5 neutro Mas adecuado para crecimiento bacteriano  Bacterias que crecen hasta pH 4 Acidófilas (Por ejemplo: Lactobacillus)  Vibrio cholerae : medio alcalino
  • 25. Presión Osmótica  Los solutos (sales y azúcares) disueltos se desplazan a zonas de menor concentración. El agua se desplaza a zonas de mayor concentración de solutos  Una presión osmótica alta causa pérdida de agua y plasmólisis de la célula  Halófilas: bacterias que toleran altas concentraciones salinas  Halófilas facultativas : toleran hasta un 2 % de sales
  • 26. Condiciones atmósféricas  Potencial de óxido-reducción o Redox (Eh)  Respiración bacteriana : reacciones de óxido- reducción, en cadena  El aceptor final de electrones o hidrogeniones es variable
  • 27. Aerobios  Requieren oxígeno, aceptor final de hidrógeno  Formación de H2O y CO2  Producción de enzima Catalasa : desdoblamiento del Peróxido de hidrógeno (H2O2) en H2O y oxígeno  Prueba de Catalasa para diferenciar microroganismos (Staphylococcus de Streptococcus)
  • 28. Anaerobios  Viven en ausencia de oxígeno atmosférico  Aceptor final de hidrógeno : compuesto inorgánico (NO3 o SO4)  Fermentación: la fuente de carbono provee energía, el donador de hidrógeno y el aceptor final (un compuesto orgánico como ácidos o alcoholes)  Muy frecuente en microorganismos orales
  • 29. Anaerobios  Anaerobios obligados: no utilizan O2  Anaerobios moderados: toleran de un 2 a un 8 % de O2  Anaerobios aerotolerantes: sobreviven un tiempo en presencia de O2  Anaerobios facultativos: aceptan indistintintamente una situación u otra
  • 30. Microaerófilos  Requieren bajas concentraciones de O2 para crecer  Utilizan el O2 como fuente de energía pero a concentraciones < 15 %  Susceptibles a radicales superóxido  Enzima Superóxido Dismutasa (SOD) : transforma radicales superóxido en H2O2  Capnofilas: desarrollan mejor con concentraciones de CO2 elevadas  La cavidad oral presenta todas estas variantes  Las especies capnófilas aumentan en personas con alteraciones periodontales
  • 31. Control de Microorganismos  Muchos factores estimulantes del desarrollo bacteriano se usan para preservar alimentos:  Baja temperatura  Salmueras  Dulces  Salados  Ahumados
  • 32. Metabolismo Bacteriano  Conjunto de reacciones o transformaciones quimicas que tienen lugar en un microorganismo para mantener su viabilidad  Procesos o reacciones Catabólicas  Degradan nutrientes  Liberan energía  Procesos o reacciones Anabólicas  Tienden a unir moléculas  Reacciones de síntesis que consumen energía
  • 33. Enzimas  Catalizadores orgánicos que aceleran las reacciones químicas por su presencia, controlados geneticamente  Actúan sobre un sustrato  Reciben su nombre por el sustrato sobre el que actúan (Lipasa = actúa sobre lípidos)  Enzimas de la respiración : deshidrogenasas y oxidasas  Proteínas de gran tamaño  Proteínas mas fracción no proteica (cofactor)
  • 34. Enzima  Holoenzima: proteína (apoenzima) mas cofactor  Coenzima : el cofactor es ion metalico o molecula orgánica compleja  Grupo prostetico: cofactor unido fuertemente a apoenzima  Constitutivas: preformadas en la célula  Inducibles o adaptativas: se forma en condiciones ambientales especiales o en presencia de sustratos apropiados
  • 36. Enzimas  Exoenzimas de tipo hidrolítico: unión de agua a macromoléculas, unidades pequeñas (bloques estructurales.  Facilitan penetración pasiva, facilitada o activa a través de pared y membrana  Para ingreso activo: actividad de permeasas
  • 37. Enzimas  Endoenzimas: biosintesis para formar macromoléculas (Anabolismo)  Mecanismos de Represión  Vías anfibólicas: los productos generados en la degradación de un elemento se aprovechan en la síntesis de otros
  • 38. Vías metabólicas mas conocidas  Glucólisis Como consecuencia del metabolismo hay producción de toxinas, vitaminas, antibióticos, compuestos de interés industrial (alcoholes)
  • 40. Medios de Cultivo  Substancias nutritivas que permiten el desarrollo de microorganismos en el laboratorio  Cultivo: brindar condiciones óptimas de crecimiento  Fáciles de preparar  Baratos  Permitir el desarrollo de gran variedad de gérmenes  Aportar nutrientes adecuados (aminoacidos, nucleótidos, factores de crecimiento, glucosa, iones inorganicos)
  • 41. Medios de Cultivo  Optimo contenido de H2O y correcto pH  Requerimientos de O2  Estéril, evitar contaminaciones  Incubación: temperatura óptima en estufas
  • 42. Clasificación de los medios de cultivo  Naturales: solo usados para enriquecer medios (leche, suero, papa)  Artificiales se preparan en el laboratorio  Líquidos: caldos  Sólidos: caldos adicionados de substancias capaces de solidificar (Agar- agar)  Medios Complejos: extractos de carne, levadura, peptonas.  Medios Enriquecidos: agregado de
  • 43. Clasificación de los medios de cultivo  Medios selectivos: permiten crecer un solo tipo de microorganismo (substancias inhibidoras)  Medios diferenciales o indicadores: evidencia alguna actividad metabólica por cambio de estado o color propia de un tipo determinado de microorganismo  Medios de Transporte: traslado de muestras biológicas manteniendo las bacterias viables