1. REPRODUCCIÓN ASISTIDA EN EL VACUNO DE LECHE
Obtención y Evaluación
J. De la Fuente
INIA Reproducción Animal y
Conservación Recursos Zoogenéticos
jfuente@inia.es
Máster Interuni versitario en Zootecni a y Gestión Sostenible:
ganadería ecológica e integrada.
Instituto de Estudios de Postgrado
Universidad de Córdoba Córdoba , Mayo 2009
2. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS
SELECCIÓN DE DONANTES
SUPEROVULACIÓN
MANIPULACIÓN:
OBTENCIÓN
EVALUACIÓN
CONSERVACIÓN
TRANSFERENCIA
3. OBTENCIÓN DE EMBRIONES
- Dilatador de cervix de acero inoxidable
- Catéteres de diferentes grosores:
De 2 vías
De 3 vías
- Sondas de obtención:
De caucho
De silicona
- Vainas sanitarias de IA
- Aislamiento de embri ones:
Por decantación
Por filtración
- Posterior traslado a placas Petri de plástico
- Manipulación embrionaria con di ferentes útiles de plástico o de vidrio
- Introducción en pajuelas de plástico para su congelación o TE
5. ESQUEMA DE L A RECOLECCION: INTRODUCCI ON DEL PBS CON JERING A
Bolsa con PBS
Jeringa para
Introducir PBS
Válvula anti reflujo
Conexión en Y
Filtro Em-Con
Jeringa
para Sonda Rush o Foley
aire
Fuentes S. y De la Fuente J.
6. ESQUEMA DE LA RECOLECCION
INTRODUCCION DEL PBS POR GRAVEDAD
SONDA DE RECOLECCION
ANESTESIA CON BALON DE SUJECCION
EPIDURAL
UTERO
PBS PARA LA EMBRIONES
RECOLECCION
OVARIO
CERVIX
(Cuello del
AIRE Utero)
FILTRO DE
RECOLECCION
Fuentes S. y De la Fuente J.
7. ELABORACIÓN DE MEDIOS
MEDIO BASE (LAVADO)= PBS
pH = 7,3+0,4; OSMOLARIDAD = 285 - 300 miliosmoles/Kg .
COMPOSICI ÓN (D-PBS) para colectas:
1 L H 2O (Bidestilada) ó (Desionizada y Desmineralizada)
gr/L
ØClNa .8
ØClK .. 0,200
ØCl2Ca (2H2O) .. 0,1325
ØPO4KH 2 ... 0,200
ØCl2 Mg (6H2O) ... . 0,100
ØPO4Na 2H . 1,150
ØPiruvato Na ...... .. 0,36
ØGlucosa..... .. 1
ØPenicilina / Estreptomicina. .. 100ui/100mg
o Sulfato de Kanamici na............... 25mg/li.
ØOTROS: *Suero Fet al........ . 1-2%
* ó BSA . 0,2%
8. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS
SELECCIÓN DE DONANTES
SUPEROVULACIÓN
MANIPULACIÓN:
OBTENCIÓN
EVALUACIÓN
CONSERVACIÓN
TRANSFERENCIA
9. VALORACIÓN MORFOLÓGICA SEGÚN
IETS: ESTADO DE DESARROLLO
CO DIG O ESTA DO DIAS
1 NO FERT ILIZADO
2 DE 2 A 12 CELULAS 2-4
3 M ORULA 5-6
4 M ORULA COM PACTADA 6-7
5 BLASTOCISTO TEM PRANO 7
6 BLASTOCISTO 7-8
7 BLASTOCISTO EXPANDIDO 8
8 BLASTOCISTO ECLOSIONADO 8-10
6