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REPRODUCCIÓN ASISTIDA EN EL VACUNO DE LECHE
                        Obtención y Evaluación

                         J. De la Fuente
                INIA Reproducción Animal y
              Conservación Recursos Zoogenéticos
                          jfuente@inia.es


   Máster Interuni versitario en Zootecni a y Gestión Sostenible:
                 ganadería ecológica e integrada.

                Instituto de Estudios de Postgrado
                      Universidad de Córdoba                    Córdoba , Mayo 2009
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS



      SELECCIÓN DE DONANTES


         SUPEROVULACIÓN

          MANIPULACIÓN:
                 OBTENCIÓN
                EVALUACIÓN
                CONSERVACIÓN



          TRANSFERENCIA
OBTENCIÓN DE EMBRIONES

- Dilatador de cervix de acero inoxidable

- Catéteres de diferentes grosores:
         De 2 vías
         De 3 vías

- Sondas de obtención:
        De caucho
        De silicona
- Vainas sanitarias de IA

- Aislamiento de embri ones:
         Por decantación
         Por filtración


- Posterior traslado a placas Petri de plástico
- Manipulación embrionaria con di ferentes útiles de plástico o de vidrio

- Introducción en pajuelas de plástico para su congelación o TE
LOCALIZACION FISIOLOGIC A DE LOS EMBRIONES EN EL UTERO
ESQUEMA DE L A RECOLECCION: INTRODUCCI ON DEL PBS CON JERING A



                                     Bolsa con PBS


                                      Jeringa para
                                     Introducir PBS



         Válvula anti reflujo




                                      Conexión en     Y



   Filtro Em-Con
                         Jeringa
                          para     Sonda Rush o Foley
                           aire

                                                          Fuentes S. y De la Fuente J.
ESQUEMA DE LA RECOLECCION
              INTRODUCCION DEL PBS POR GRAVEDAD
                                             SONDA DE RECOLECCION
                          ANESTESIA         CON BALON DE SUJECCION
                          EPIDURAL

                                                     UTERO



       PBS PARA LA                             EMBRIONES
       RECOLECCION



                                          OVARIO



                             CERVIX
                            (Cuello del
              AIRE            Utero)



 FILTRO DE
RECOLECCION

                                                   Fuentes S. y De la Fuente J.
ELABORACIÓN DE MEDIOS
        MEDIO BASE (LAVADO)= PBS
pH = 7,3+0,4; OSMOLARIDAD = 285 - 300 miliosmoles/Kg .

 COMPOSICI ÓN (D-PBS) para colectas:
 1 L H 2O (Bidestilada) ó (Desionizada y Desmineralizada)

                                              gr/L
 ØClNa                              .8
 ØClK                             .. 0,200
 ØCl2Ca (2H2O)                     .. 0,1325
 ØPO4KH 2                        ... 0,200
 ØCl2 Mg (6H2O) ...                 . 0,100
 ØPO4Na 2H                          . 1,150
 ØPiruvato Na ......                .. 0,36
 ØGlucosa.....                       .. 1
 ØPenicilina / Estreptomicina.        .. 100ui/100mg
    o Sulfato de Kanamici na............... 25mg/li.
 ØOTROS: *Suero Fet al........         . 1-2%
            * ó BSA .                     0,2%
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS



      SELECCIÓN DE DONANTES


         SUPEROVULACIÓN

          MANIPULACIÓN:
                 OBTENCIÓN
                EVALUACIÓN
                CONSERVACIÓN



          TRANSFERENCIA
VALORACIÓN MORFOLÓGICA SEGÚN
      IETS: ESTADO DE DESARROLLO

    CO DIG O           ESTA DO           DIAS

       1            NO FERT ILIZADO
       2           DE 2 A 12 CELULAS     2-4

       3               M ORULA           5-6

       4         M ORULA COM PACTADA     6-7

       5        BLASTOCISTO TEM PRANO     7

       6             BLASTOCISTO         7-8

       7        BLASTOCISTO EXPANDIDO     8

       8       BLASTOCISTO ECLOSIONADO   8-10
6
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES:
OBTENCIÓN Y CLASIFICACIÓN DE EMBRIONES
CRONOLOGIA DEL DESARROLLO EMBRIONARIO
                                 1 DIA




2 DIA            3-4 DIA         5-6 DIA
        (2)                (2)             (3)

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  • 1. REPRODUCCIÓN ASISTIDA EN EL VACUNO DE LECHE Obtención y Evaluación J. De la Fuente INIA Reproducción Animal y Conservación Recursos Zoogenéticos jfuente@inia.es Máster Interuni versitario en Zootecni a y Gestión Sostenible: ganadería ecológica e integrada. Instituto de Estudios de Postgrado Universidad de Córdoba Córdoba , Mayo 2009
  • 2. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS SELECCIÓN DE DONANTES SUPEROVULACIÓN MANIPULACIÓN: OBTENCIÓN EVALUACIÓN CONSERVACIÓN TRANSFERENCIA
  • 3. OBTENCIÓN DE EMBRIONES - Dilatador de cervix de acero inoxidable - Catéteres de diferentes grosores: De 2 vías De 3 vías - Sondas de obtención: De caucho De silicona - Vainas sanitarias de IA - Aislamiento de embri ones: Por decantación Por filtración - Posterior traslado a placas Petri de plástico - Manipulación embrionaria con di ferentes útiles de plástico o de vidrio - Introducción en pajuelas de plástico para su congelación o TE
  • 4. LOCALIZACION FISIOLOGIC A DE LOS EMBRIONES EN EL UTERO
  • 5. ESQUEMA DE L A RECOLECCION: INTRODUCCI ON DEL PBS CON JERING A Bolsa con PBS Jeringa para Introducir PBS Válvula anti reflujo Conexión en Y Filtro Em-Con Jeringa para Sonda Rush o Foley aire Fuentes S. y De la Fuente J.
  • 6. ESQUEMA DE LA RECOLECCION INTRODUCCION DEL PBS POR GRAVEDAD SONDA DE RECOLECCION ANESTESIA CON BALON DE SUJECCION EPIDURAL UTERO PBS PARA LA EMBRIONES RECOLECCION OVARIO CERVIX (Cuello del AIRE Utero) FILTRO DE RECOLECCION Fuentes S. y De la Fuente J.
  • 7. ELABORACIÓN DE MEDIOS MEDIO BASE (LAVADO)= PBS pH = 7,3+0,4; OSMOLARIDAD = 285 - 300 miliosmoles/Kg . COMPOSICI ÓN (D-PBS) para colectas: 1 L H 2O (Bidestilada) ó (Desionizada y Desmineralizada) gr/L ØClNa .8 ØClK .. 0,200 ØCl2Ca (2H2O) .. 0,1325 ØPO4KH 2 ... 0,200 ØCl2 Mg (6H2O) ... . 0,100 ØPO4Na 2H . 1,150 ØPiruvato Na ...... .. 0,36 ØGlucosa..... .. 1 ØPenicilina / Estreptomicina. .. 100ui/100mg o Sulfato de Kanamici na............... 25mg/li. ØOTROS: *Suero Fet al........ . 1-2% * ó BSA . 0,2%
  • 8. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES BOVINOS SELECCIÓN DE DONANTES SUPEROVULACIÓN MANIPULACIÓN: OBTENCIÓN EVALUACIÓN CONSERVACIÓN TRANSFERENCIA
  • 9. VALORACIÓN MORFOLÓGICA SEGÚN IETS: ESTADO DE DESARROLLO CO DIG O ESTA DO DIAS 1 NO FERT ILIZADO 2 DE 2 A 12 CELULAS 2-4 3 M ORULA 5-6 4 M ORULA COM PACTADA 6-7 5 BLASTOCISTO TEM PRANO 7 6 BLASTOCISTO 7-8 7 BLASTOCISTO EXPANDIDO 8 8 BLASTOCISTO ECLOSIONADO 8-10 6
  • 10. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES: OBTENCIÓN Y CLASIFICACIÓN DE EMBRIONES
  • 11. CRONOLOGIA DEL DESARROLLO EMBRIONARIO 1 DIA 2 DIA 3-4 DIA 5-6 DIA (2) (2) (3)