La fotosíntesis convierte la energía solar en energía química mediante la clorofila en los cloroplastos. La cromatografía en papel separa los pigmentos de una mezcla según su solubilidad, masa molecular y puentes de hidrógeno, calculando el valor Rf para cada pigmento. El espectrofotómetro cuantifica el cambio de color en muestras como los cloroplastos al medir la luz absorbida, determinando una baja transmitancia si el DPIP está oxidado pero alta transmitancia e incolora si el

1. Francheska Camilo González
Junio/2013
Laboratorio 4: Pigmentos Vegetales y la Fotosíntesis
Mediante la fotosíntesis, las plantas convierten la energía solar en energía química, almacenando
esta en azucares y otros compuestos químicos orgánicos, y para este proceso es fundamental la
molécula de clorofila, pues esta es un pigmento fotosintético primario en cloroplastos.
4-1 Pigmento Vegetal, Cromatografía
La cromatografía en papel es una técnica utilizada para separación de moléculas que componen
una mezcla, y las moléculas o pigmentos tienden a migrar hacia la parte superior del papel, a
partir de la solubilidad, la masa molecular y los puentes de hidrogeno.
Figure: Key Concepts I: Plant Pigment Chromatography
Source: Pearson Education, Inc.
www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/concepts1.html, Accessed: 6/26/13

2. Diseño experimental I
En la cromatografía de papel, los pigmentos son disueltos con un disolvente, que va a depender
del tipo de mezcla en la cual deseamos separar los pigmentos o componentes, pues en la tinta el
disolvente será agua, pero para separa pigmentos vegetales como los que componen a los
cloroplastos, es necesario utilizar un disolvente orgánico que podría ser una mezcla compuesta
de éter y acetona.
Figure: Design of the Experiment I
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/design1.html, Accessed: 6/26/13

3. Análisis de resultados I: Evidencia
La migración de un pigmento con respecto a la migración del disolvente esta expresada como
una constante (Rf) y se puede calcular mediante la fórmula:
Rf = (distancia recorrida por pigmento del compuesto) / (distancia recorrida por el disolvente)
Ejemplo:
Calcular el valor (Rf) para el pigmento verde en el Cromatograma de tinta negra.
Rf = (3cm) / (10cm) = 0.3 cm
Figure: Analysis of Results I
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/analysis1.html, Accessed: 6/26/13

4. Quiz: Evidencia

5. Figure: Lab Quiz I
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/quiz1.html, Accessed: 6/26/13

6. 4-2 Fotosíntesis
Mediante la fotosíntesis se captura energía de la luz solar en organismos con clorofila (ej:
plantas) para convertir esta en energía química, cuando los electrones con alto nivel energético
proceden a reducir compuestos en la membrana de tilacoides, produciendo de esta forma enlaces
químicos de NADPH y ATP.
DPIP como aceptor de electrones
Al medir la velocidad de los electrones cuando la luz golpea la clorofila, se obtiene que ocurra
una reducción DPIP. También que ocurre un cambio de color azul a incoloro a medida que se
aceptan los electrones. Este cambio de color se comparara utilizando un espectrofotómetro que
indicara la tasa de velocidades en reacciones de luz a causa de la fotosíntesis bajo distintas
condiciones.
El espectrofotómetro
El espectrofotómetro es un instrumento que cuantifica el cambio de color en una muestra a partir
de un análisis de la cantidad de energía de luz absorbida o transmitida (en longitud de onda) por
la muestra.

7. Figure: The Spectrophotometer
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/spectro.html, Accessed: 6/26/13

8. Diseño experimental II
En el experimento se utilizara un tubo (blanco) para la calibración de la maquina y este
contendrá todas las soluciones excepto el DPIP. Todos los demás tubos serán experimental y su
contenido puede ser cloroplastos cocidos o sin hervir. Entonces al medir la velocidad de los
electronos cuando la luz golpea la clorofila, se obtendrá un porcentaje bajo de luz transmitida si
el DPIP está en estado oxidado, pero si los electrones de la clorofila fueron excitados se
observara una reducción de DPIP y una muestra incolora por que el porcentaje de transmitancia
obtenido es alto. Luego medir el porcentaje de transmitancia a 605nm de longitud de onda
utilizando un espectrofotómetro.
Figure: Design of the Experiment II
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/design2.html, Accessed: 6/26/13

9. Quiz: Evidencia

13. Figure: Lab Quiz II
Source: Pearson Education, Inc.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/quiz2.html, Accessed: 6/26/13

14. Resumen
La fotosíntesis es un mecanismo en el cual las pantas convierten la energía de luz solar a energía
química. Para llevar a cabo este proceso es necesaria la clorofila, pues este es un pigmento
fotosintético primario en cloroplastos. Mediante la cromatografía en papel se pueden separar
moléculas que componen una mezcla y determinar el valor (Rf) para cada pigmento que migro
hacia la parte superior del papel a partir de características en la solubilidad, masa molecular y
puentes de hidrógenos. Utilizando un instrumento como el espectrofotómetro se puede
cuantificar el cambio de color en muestras que poseen clorofila (ej: cloroplastos), para analizar la
cantidad de energía de luz absorbida o transmitida por dichas muestras, y se concluye que si el
DPIP está oxidado, la transmitancia obtenida será baja, pero que si hubo una reducción de DPIP
se obtendrá una transmitancia alta y una muestra incolora.

15. References:
Knapp, T. Plant Pigments and Photosynthesis. Available: June 26, 2013.
http://www.phschool.com/science/biology_place/labbench/lab4/intro.html