Micro

1. MEDIOS DE
CULTIVO

2. GENERALIDADES
El crecimiento de
microorganismos en
sustancias alimenticias
artificiales es una de las
técnicas más importantes
usadas en el laboratorio.

3. GENERALIDADES

4. GENERALIDADES

5. MEDIO DE CULTIVO
• Conjunto de micronutrientes,
macronutrientes y factores de
crecimiento.
• Se crean condiciones
desarrollo y
de manera
adecuadas de
reproducción
artificial.

6. MEDIOS DE CULTIVO
Es un sustrato o
solución de nutrientes
en los que crece y se
multiplican los
microorganismos en el
laboratorio, con el
objeto de aislar
diferentes especies
bacterianas, con el
fin de identificarlas
y realizar estudios
complementarios.

7. • Para su óptimo crecimiento es necesario dar condiciones ambientales
adecuadas para su desarrollo en medios artificiales.
• Estas son: temperatura, humedad, etc.
• Condiciones del medio de cultivo: componentes (macronutrientes y
micronutrientes), reguladores de crecimiento, pH, etc.

8. • Las características más importantes de los microorganismos a ser
consideradas al momento de preparar un medio de cultivo son:
 Tipo trófico: autótrofos, heterótrofos, quimiotrofos, fotótrofos.
 Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios facultativos,
aerotolerantes
 Temperatura: psicrófilos, psicrótrofos, mesófilos y termófilos.
 pH: acidófilos, neutrófilos, alcalófilos.
 Presión: barófilos, barotolerantes, barófilos extremos

9. COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
• FUENTE DE NITRÓGENO
Es metabolizado para
proveer proteínas, ácidos
nucleicos y polímeros de
pared.
Algunos
microorganismos
puedenincorporar
nitrógeno aminoácidos, bases
purínicas o pirimidínicas.
• FUENTE DE CARBONO:
 Pueden ser CO2 o
compuestos carbonados
orgánicos.
 Se utilizan en la construcción
de innumerables moléculas
necesarias para la
célula.
 Los hidratos de carbono se
consideran fuente de
carbono y energía.

10. COMPOSICIÓN QUÍMICA - MACROELEMENTOS
• FUENTE DE FÓSFORO • FUENTE DE AZUFRE
 Se agrega fosfatos de sodio o  Se adiciona como metionina
El fósforo se incorpora a ácidos  En la célula se incorpora a
nucleicos, fosfolípidos, polímeros aminoácidos y diferentes
de membrana, ATP, y sustancias coenzimas.
de reserva.

11. COMPOSICIÓN QUÍMICA – FACTORES DE
CRECIMIENTO
• Son compuestos orgánicos requeridos en muy bajas concentraciones.
• No pueden ser sintetizados por la propia célula.
• Deben ser agregados al medio de cultivo
• Pueden ser aportados en forma de:
 Extracto de carne
 Extracto de levadura
 Extracto de malta

12. AGENTE SOLIDIFICANTE- AGAR
• Su uso es opcional y el más usado es el agar.
• Se le adiciona en diferentes
concentraciones.
 1.5 – 2,5 % en medios sólidos
 0.4 – 0.8% en medios semisólidos
 3% en medios de consistencia firme

13. COMPOSICIÓN QUÍMICA – AGUA
• Representa del 80-90% del peso total de una
célula.
• Es fundamental para la realización de todos los
procesos metabólicos, funciones enzimáticas ….
• Los medios de cultivo se preparan en el
laboratorio con agua destilada.

14. CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Consistencia Origen Composición Utilización

15. POR SU CONSISTENCIA O ESTADO FÍSICO
MEDIOS LÍQUIDOS
Contienen nutrientes a los cuales se les
adicionan sustancias con la capacidad
de mantener estables un pH
• USO:
diluciones
homogenizar mezclas
enriquecer cultivos
rehidratar cepas liofilizadas
Caldo nutritivo
Caldo peptona

16. MEDIOS SÓLIDOS
Se obtienen agregando agar (sustancia
de tipo polisacárido que se obtiene de
algas marinas) a un medio liquido
determinado. Se le añade 2% de agar
o gelatina
USO:
• Facilita obtener colonias
bacterianas aisladas.
• Pueden utilizarse para diferentes
fines, los más importantes son:
agar comercial para la industria
alimenticia, agar bacteriológico,
agares purificados y agarosa,
utilizada para electroforesis en gel.
POR SU CONSISTENCIA
O ESTADO FÍSICO

17. MEDIOS SEMISÓLIDOS
• Consistencia leve o gelatinosa.
• Medio líquido al que se adiciona agar
(0.4 a 0.8%).
• USO:
 Para determinar la movilidad de los
microorganismos microaerófilos.
 Permite conservar cepas bacterianas
POR SU CONSISTENCIA O ESTADO FÍSICO

18. SEGÚN SU ORIGEN
NATURALES O QUÍMICAMENTE NO DEFINIDOS
Son medios preparados a partir de sustancias naturales de origen animal
o vegetal como extractos de tejidos o infusiones y cuya composición
química no se conoce.
Por ejemplo:
• Suero
• Leche
• Papa

19. SEGÚN SU ORIGEN
SINTÉTICOS
Son los medios que contienen una composición química definida
cualitativa y cuantitativa. Se utiliza para obtener resultados
reproducibles.
Las sustancias químicas conocidas y disueltas en agua destilada en
proporciones determinadas

20. SEGÚN SU ORIGEN
SEMISINTÉTICOS
Son los medios a los que se les añaden factores de crecimiento bajo una
forma de extracto orgánico complejo.
La variedad de factores de crecimiento exigidos para ciertos
microorganismos hace que la elaboración de un medio sintético para el
desarrollo de los mismos sean imposible o demasiado costoso.
Ciertos microorganismos no crecen en ningún medio por muy
enriquecido que este se encuentre, solamente crecen en células vivas
con características determinadas.
Ejemplo: Virus, Chlamydias, Rickettsias,etc.

21. POR SU COMPOSICIÓN
Está clasificación es similar a la clasificación según su origen
Pueden ser:
Químicamente definidos
• Se conoce la cantidad exacta de cada uno
de los compuestos que hay en el medio.
Complejos
• Se realizan a partir de extractos naturales
como por ejemplo el extracto de sangre.

22. UTILIZACIÓN/FUNCIÓN
MEDIO COMÚN/
GENERAL
Contiene los nutrientes mínimos necesarios para el
desarrollo de bacterias poco exigentes o todo tipo de
microorganismos: caldo común, caldo carne, etc.
El medio más conocido de este grupo es el agar
nutritivo o agar común, que resulta de la adición de
agar al caldo nutritivo. Otros representantes de este
grupo son el agar triplicase de soja, el agar Columbia,
etc.

23. UTILIZACIÓN/FUNCIÓN
MEDIO DE
ENRIQUECIMIENTO
Incorporan una serie de
factores indispensables para el
crecimiento de microorganismos
exigentes.
Se utiliza para conseguir que
proliferen la máxima variedad de
microorganismos posibles.
Este enriquecimiento se hace por
adición de sangre u otros
productos biológicos (sangre,
suero, leche, huevo, bilis, etc.) que
aportan dichos factores.
Añadir
suplementos
artificiales a
los medios
para producir
enriquecimie
nto ejemplo:
Polivitex
Isovitalex

24. Se le agrega una
sustancia que
aumenta el poder
nutritivo.
Aporta algún factor
de crecimiento
necesario para el
microorganismo que
el medio no lo posea.
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN
MEDIO DE
ENRIQUECIMIENTO

25. Favorece el crecimiento de un
grupo de microorganismos e
inhiben el crecimiento de
otros.
Útiles en muestras mixtas.
Al medio se le adiciona
sustancias inhibitorias
como antibióticos o
ciertos colorantes.
MEDIO SELECTIVO
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN

26. MEDIO SELECTIVO
Tipo de medio con
algunos elementos
o nutrientes
específicos
La función de este
tipo de medio es
que crezca n solo
un tipo
determinado de
microorganismos
Ejemplo
Si necesitamos que
crezca una especie
que es resistente a
un antibiótico
como ampicilina,
se puede añadir
este antibiótico
para impedir que
crezcan otros
microorganismos
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN

27. MEDIO SELECTIVO
EJEMPLO
El agar
MacConkey que
contiene cristal
violeta
Ejemplo
Medio Thayer-
Martin medio
selectivo para
Neissar, ya que
posee
antibióticos como
la vancomicina,
colistina y
nistatina.
Ejemplo
Caldo lactosado
bilis verde
brillante en
donde la bilis
inhibe el
crecimiento de
bacterias gram
positivas
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN

28. MEDIO DIFERENCIAL
Permite diferenciar
bioquímicamente a las
bacterias por su actividad
metabólica.
A estos medios se le
adiciona sustancias para
que solo crezcan ciertas
bacterias.
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN
Se observa en el microscopio
ciertas propiedades de
crecimiento que ayudan a
diferenciar sus colonias de otras
especies diferentes
Shigella tiene lactosa y un indicador de pH que
ar las colonias de bacterias fermentadoras de este

29. Agar Sangre, diferencia
variedades de Streptococcus
pyogenes en Streptococcus
betahemolíticos de
Streptococcus alfa
hemolítico y gama
hemolítica
MEDIO DIFERENCIAL
Agar eosina Azul de metileno (EMB)
de colonias de Enterobacter
aerogenes (color rosado,
consistencia mucosa y crecimiento
abundante)
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN

30. MEDIO DIFERENCIAL
Agar eosina Azul de metileno (EMB),
diferencia E.coli (color verde
metálico brillante).
El medio Mac Conkey es un medio diferencial
porque permite distinguir los microorganismos
que fermentan la lactosa de aquellos que no lo
hacen.
POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN

31. POR SU UTILIZACIÓN O FUNCIÓN
MEDIO SELECTIVO
DIFERENCIAL
Contiene sustancias
inhibidoras y sustancias
diferenciales.
El medio Sal Manitol
para Staphylococcus

32. POR SU UTILIZACIÓN O
FUNCIÓN
Aseguran la viabilidad de la bacteria
sin multiplicación significativa de los
microorganismos desde el momento
de su extracción su posterior
estudio.
Los medios de transporte más
utilizados son los de Stuart, Amies y
Carey-Blair.
Se utiliza cuando la muestra es
enviada de un laboratorio a
otro.
Medio líquido o semisólido.
Contiene agua y amortiguador
del pH
MEDIO DE
TRANSPORTE

33. EJEMPLOS DE
MEDIOS DE
CULTIVO --
REACCIONES

34. MEDIO SIM
PRUEBA DEL INDOL
MOTILIDAD
Movilidad positiva Movilidad negativa

35. MEDIO SIM
FORMACIÓN DE H2S
Formación de ácido sulfúrico positivo Formación de ácido sulfúrico negativo

36. Agar Simmons Citrate

37. Agar T.S.I (TRIPLE SUGAR IRON AGAR)
Agar Hierro y triple azúcar