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![II. Componentes – activadores solubles y
estimuladores
- Factores del complemento
- Citoquinas
- Respuesta innata y fase aguda (Interferones, interleucinas, factor de necrosis
tumoral)
- Crecimiento y diferenciación celular (interleucinas y factores estimulantes de
colonias-GM-CSF)
- Respuesta adaptativa TH1 y TH17 (Interferones, interleucinas, factor de
necrosis tumoral-TNF)
- Respuesta adaptativa TH2 (interleucinas)
- Respuesta regulatoria (Factor de crecimiento transformante TGF-B)
- Quimiocionas* – quimiotaxis
- ALFA
- BETA
For each of the cytokines know STAT (source [cell], trigger, action, target [receptor and cell]), and for the response, TICTOC
(trigger, inducer, cells [producer and responder], time course, outcome, cytokines). FDAB / DICTRC](https://image.slidesharecdn.com/microbiologai2024parciali-250701222902-105789e8/85/MICROBIOLOGIA-BASICAI_2024_PARCIAL_I-pdf-43-320.jpg)
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MICROBIOLOGÍA BASICAI_2024_PARCIAL_I.pdf
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- 2. I. Historia 1684 18401910 1935 1946 Actualidad 1773 1870-80 1928 1943 Criterios de causalidad de Henle
- 3. ARTRÓPODOS HELMINTOS PROTOZOARIOSHONGOS BACTERIAS VIRUS PRIONES
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- 5. II. Clasificación –Virus - Diámetro de 18 a 600 nm - Genoma de ADN y ARN - Capside proteica, con/sin envoltura - Parásitos obligados - Manifestaciones clínicas ➝ célula infectada, respuesta inmune - 2000 especies descritas - Ciclos líticos y lisogénicos - Cuadros clínicos agudos, crónicos y promotores de cáncer - Diagnóstico ➝ sintomatología clásica, cultivo celular, detección antígenos, molecular - Tratamientos avanzados Influenza Ebola VIH Papiloma
- 6. II. Clasificación –Bacterias - Procariotas unicelulares - Organelos - Reproducción - Pared celular – Gram – M. tuberculosis – intracelulares - Clasificación preliminar y definitiva - Ubicuas - Relaciones parasitarias humano – bacteria - Diagnóstico rápido y barato ➝ influencia sobre SI, metabolismo, comportamiento - Tratamientos ➝ transplante fecal ➝ C. difficile - Resistencia a antibióticos
- 7. II. Clasificación –Hongos - Eucariotas - Organelos - Unicelulares – importancia médica – levaduras, mohos - Reproducción - Hongos dismórficos ➝ Histoplasma, Blastomyces y Coccidiodes - Desde infecciones de piel, neumonias, deformaciones hasta sepsis - SI deficiente - Tratamiento ➝ largo y tóxico - Resistencia a antifúngicos
- 8. II. Clasificación –Protozoos y Helmintos - Eucariotas - Unicelulares y multicelulares - Diámetros de 4 a 5 𝜇m hasta 10 metros de largo - Artrópodos de interés médico – microbios - Ciclos de vida complejos con estados de desarrollo en humanos y vectores - Diagnóstico a través de síntomas, historia del paciente y detección del agente - Tratamiento para algunos
- 9. • Filo Artropoda– subfilo Myriapoda, Crustacea, Chelicerata y Hexapoda • Vectores, hospedadores intermedios o parásitos verdaderos II. Clasificación – Artrópodos
- 10. III. Clínica ydiagnóstico - Laboratorios – muestras viables? - Patógenos – oportunistas - Infecciones exógenas y endógenas - 1 organismo – una enfermedad - 1 organismo – varias enfermedades - Varios organismos – misma enfermedad Staphylococcus aureus Virus de la influenza Neisseria gonorrhoeae Helicobacter pylori Lactobacillus sp. Clostridium tetani
- 11. III. Clínica ydiagnóstico El conocimiento de las características epidemiológicas del microorganismo ayuda a determinar el potencial de exposición y si es un riesgo de infección: - medios de propagación - vectores - distribución geográfica - infecciones estacionales Murray, 2021
- 12. IV. Microbioma humano -Proyecto microbioma humano 2007 - Nariz, boca, piel, intestino y vagina de voluntarios humanos - Genes del RNA ribosomal 16S - Más diverso intestino / menos vagina Distribución topográfica de bacterias en diferentes sitios de la piel y sus microambientes Murray, 2021
- 13. Microbiota Flora normal Microbioma Microbioma central Microbiomasecundario Redundancia funcional Diversidad taxonómica Proteómica Metabolómica Prebiótico Probiótico Las variaciones del microbioma entre personas sanas puede existir, siempre que las funciones necesarias sean satisfechas IV. Microbioma humano
- 14. Escherichia coli Bactericinas Salmonella Metabolismo: Carbohidratos complejos (Celulosa,pectina, xilano) Bacteroidetes y Firmicutes IV. Microbioma humano – funciones Murray, 2021
- 15. IV. Microbioma humano– disbiosis - Colitis asociada a antibióticos / C. dificile - Colitis ulcerativa - Obesidad / diabetes tipo II - Enfermedad celiaca - Vaginitis Murray, 2021
- 16. - Proteómica - Metabolómica -”repopoblando” - Probióticos - Prebióticos IV. Microbioma humano – Diagnóstico y tratamiento de disbiosis
- 17. V. Bioseguridad ESTERILIZACIÓN DESINFECCIÓNASEPSIA Métodos físicos Alto nivel Alcoholes 70 – 90% Calor bajo presión Calor húmedo Yodóforos Filtración (0,22 – 0,45 𝜇m) Peróxido de hidrógeno Clorhexidina Radiación ultravioleta Paraclorometaxilenol Radiación ionizante Medio Nivel Triclosan Métodos vaporizantes Etanol Óxido de etileno Isopropanol Peróxido de hidrógeno* (gas plasmático) Métodos químicos Bajo nivel Ácido peracético Amonio cuaternario Glutaraldeído Fenoles
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- 19. TEMA II Principios deldiágnóstico de laboratorio
- 21. I. Microscopía TIPO DEMICROSCOPÍA FUNDAMENTO MAGNIFICACIÓN DE IMAGEN LIMITACIONES Campo claro Fuente de luz Condensador para enfocar la luz en el espécimen Se visualiza por transiluminación Dos lentes para magnificar la imagen del espécimen: oculares (10-15 de aumento) y objetivos (10, 40, 100 de aumentos) Poder de resolución solo para bacterias (0,2 𝜇m) Se debe utilizar tintes Campo oscuro Similar a campo claro pero con un condensador especial que rodea la muestra Similar al campo claro Poder de resolución de hasta 0,02 𝜇m La luz pasa alrededor de los organismos en lugar de atravesarlos, no estructuras internas Contraste Similar a campo claro con condensador con anillos anulares que permite ver estructuras internas dependiendo de su densidad Imágenes tridimensionales Costo
- 22. I. Microscopía TIPO DEMICROSCOPÍA FUNDAMENTO MAGNIFICACIÓN DE IMAGEN LIMITACIONES Fluorescencia Fluorocromos que absorben luz ultravioleta o luz azul y emiten energía a una longitud de onda visible. Lentes de campo claro Especímenes brillantes magnificados a color contra un fondo negro Tinción obligada de especímenes Costo Tintes peligrosos Electrónica Bobinas magnéticas, dirigen el haz de luz por un filamento de tungsteno a través de la muestra hacia una pantalla Longitud de onda corta resolución y ampliación óptimas Transmisión y barrido Tinción con iones metálicos para crear contraste dejan ver especímenes tridimensionales Costo Manejo Investigación
- 23.
- 24. II. Métodos deexaminación MÉTODO PRINCIPIO APLICACIONES EXAMINACIÓN DIRECTA Fresco Observación preliminar con o sin suero fisiológico Detección de huevos y larvas de helmintos. Microscopios de campo claro, oscuro y de contraste KOH 10% KOH 40% / azul de lactofenol Disuelve material proteico concomitante Facilita la detección de hongos levaduriformes y mohos Tinta china Modificación de KOH con adición de tinta como contrastante que es excluido por los polisacáridos de las levaduras y se forma un halo que las rodea Identificación de Cryptococcus sp. en fluidos corporales y cerebrales Yodo Lugol Añadido a preparaciones húmedas crea un contraste para observar estructuras internas parasitarias Facilita la diferenciación entre amebas y glóbulos blancos del hospedador
- 25. II. Métodos deexaminación MÉTODO PRINCIPIO APLICACIONES TINCIONES DIFERENCIALES Tinción Gram Fijación Cristal violeta Lugol Alcohol acetona Base para la mayor clasificación bacteriana ya que diferencia entre bacterias Gram negativas y Gram positivas. Grado de tinción Hematoxilina de hierro Preparación en seco Fijación Hematoxilina Enjuague con agua Alcohol 95% - xileno Detección de protozoos fecales Tinción de azul de toluidina O En muestras respiratorias Se tiñen de azul rojizo a violeta oscuro sobre un fondo azul claro Poco específica Detección de Pneumocystis sp.
- 26. II. Métodos deexaminación MÉTODO PRINCIPIO APLICACIONES TINCIONES DIFERENCIALES Tinción tricrómica Modificación de la tinción Hematoxilina de hierro Citoplasmas de color verde azulado a violeta con núcleos y cuerpos de inclusión rojos o rojo violáceo, el fondo de la muestra es verde Facilita la detección e identificación de quistes y trofozoítos de protozoos Tinción de Wright-Giemsa Tinción policromática células de color naranja a rosa o azul a púrpura; los trofozoitos protozoarios tienen un núcleo rojo y un citoplasma de color azul grisáceo; las levaduras intracelulares y los cuerpos de inclusión suelen teñirse de azul; rickettsias, clamidias y Pneumocystis sp. mancha violeta Detección de parásitos sanguíneos, cuerpos de inclusión virales y de Clamydia, y Borrelia, Toxoplasma, Pneumocystis y Rickettsia sp
- 27. II. Métodos deexaminación MÉTODO PRINCIPIO APLICACIONES TINCIONES ÁCIDO RESISTENTES Tinción Ziehl-Neelsen Carbolfucsina – calor Ácido-álcali Azul de metileno Los organismos aparecen rojos sobre un fondo azul claro Identificación de micobacterias y otros organismos ácido resistentes TINCIÓN FLUORESCENTE Naranja de acridina El tinte se intercala en el ácido nucleico; pH neutro: las bacterias, los hongos y el material celular color naranja rojizo; pH ácido: las bacterias y los hongos permanecen de color naranja rojizo, material de fondo de amarillo verdoso. Utilizado para la detección de bacterias y hongos en muestras clínicas
- 28. II. Métodos deexaminación MÉTODO PRINCIPIO APLICACIONES TINCIÓN FLUORESCENTE Tinción blanca de calcofluor El tinte se adhiere a la celulosa o quitina de la pared celular Modificación de la examinación directa con KOH Usado para detectar hongos Fluorescencia directa con anticuerpos Anticuerpos unidos a moléculas fluorescentes Especificidad y sensibilidad en función del número de organismos y calidad de anticuerpos Streptococcus pyogenes, Bordetella, Francisella, Legionella, Chlamydia, Pneumocystis, Cryptosporidium, Giardia, influenza virus, herpes simplex virus
- 29. II. Métodos deexaminación
- 30. III. Cultivos invitro - Generalidades - Medios enriquecidos - Medios selectivos - Medios diferenciales - Medios especializados - Cultivo celular Sangre Chocolate Muller-Hinton Manitol MacConkey XLD
- 31. IV. Diagnóstico molecular– PCR Murray, 2021
- 32. IV. Diagnóstico molecular– PCR Murray, 2021
- 33. IV. Diagnóstico molecular– PCR Murray, 2021
- 34. IV. Diagnóstico molecular– TMA Murray, 2021 ResearchGate, 2024
- 35. IV. Diagnóstico molecular– TMA Murray, 2021
- 36. IV. Diagnóstico molecular– SDA – LAMP Murray, 2021
- 37. IV. Diagnóstico molecular– MALDI-TOF Murray, 2021
- 38.
- 39. V. Diagnóstico serológico -Anticuerpos - Monoclonales - Policlonales - Antígenos - Epítopos - Métodos directos - Métodos indirectos - Métodos serológicos - Ej. Aglutinación latex Murray, 2021
- 40. TÉCNICA PROPÓSITO EJEMPLOS Inmunodifusión https://www.youtube.com/watch?v=U 5fYBFgOJAE Detectary comparar antígenos y anticuerpos Antígenos de hongos: Histoplasma, Blastomyces, y coccidioidomycoses Inmunofluorescencia Inmunoensayo enzimático (EIA) Detección y localización de antígeno Antígenos virales en biopsias: rabia, herpes virus Citometría de flujo por Inmunofluorescencia Análisis de poblaciones celulares positivas para antígenos Inmunofenotipificación ELISA Cuantificación de antígenos o anticuerpos Antígeno viral: rotavitus Anticuerpo viral: anti-HIV Western blot Detección de antígenos o anticuerpos Confirmación de positividad de anti- HIV Fijación del complemento Cuantificar la titulación de anticuerpos específicos Anticuerpos contra hongos y virus Inhibición de la hemaglutinación Titulación de anticuerpos antivirales; serotipo de cepa de virus Influenza Aglutinación látex Detección de antígenos o anticuerpos Factor reumatoide; antígenos fúngicos; antígenos estreptocócicos V. Diagnóstico serológico
- 41.
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- 43. II. Componentes –activadores solubles y estimuladores - Factores del complemento - Citoquinas - Respuesta innata y fase aguda (Interferones, interleucinas, factor de necrosis tumoral) - Crecimiento y diferenciación celular (interleucinas y factores estimulantes de colonias-GM-CSF) - Respuesta adaptativa TH1 y TH17 (Interferones, interleucinas, factor de necrosis tumoral-TNF) - Respuesta adaptativa TH2 (interleucinas) - Respuesta regulatoria (Factor de crecimiento transformante TGF-B) - Quimiocionas* – quimiotaxis - ALFA - BETA For each of the cytokines know STAT (source [cell], trigger, action, target [receptor and cell]), and for the response, TICTOC (trigger, inducer, cells [producer and responder], time course, outcome, cytokines). FDAB / DICTRC
- 45. II. Componentes –importantes PRINCIPALES CÉLULAS PRODUCTORAS DE CITOQUINAS Respuesta innata (Fase aguda) Células dendríticas, macrógafos: IL-1, TNF-α, IL-6, IL-12, IL-18, IL-23,GM-CSF, INF-γ, INF-β, quimiocinas Respuesta adaptativa: células T helper (CD4, CD8) Células TH0: IL-2, IL-4 Células TH1: IL-2, IFN-γ, TNF-α, TNF-β, IL-3, GM-CSF Células TH2: IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-3, IL-9, IL-13, GM-CSF, TNF-α Células TH17: IL17, IL21, IL22, GM-CSF, TNF-α Células reguladoras: TGF-β and IL-10
- 46. III. Células dela respuesta inmune For each of the cells know CARP: cell-surface markers (e.g., CD4, TCR, etc.), actions (kill, suppress, activate, etc.), role (type of response), and products (cytokines, antibody, etc.) MARP Murray, 2021 Hematopoyesis Célula madre hematopoyética Multipotente Órganos linfoides primarios Origen y diferenciación completa - Medula ósea - Timo Órganos linfoides secundarios Residencia y respuesta - Ganglios linfáticos - Bazo - Piel - Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT) - GALT - BALT
- 47.
- 48. III. Células dela respuesta inmune - Leucocitos polimorfonucleares - Fagocitos mononucleares - Linfocitos
- 49. No posee mitocondria Efectivocontra parásitos No fagocitan Se diferencian en macrófagos y células dendríticas Linfocitos T helper Inmunoglobulinas CD4 IgE
- 50.
- 51.
- 52. IV. Respuesta inmunepara agentes infecciosos Murray, 2021
- 53. IV. Respuesta inmunepara agentes infecciosos – Bacterias
- 54. IV. Respuesta inmunepara agentes infecciosos – Virus
- 55. IV. Respuesta inmunepara agentes infecciosos – Parásitos
- 56. IV. Respuesta inmunepara agentes infecciosos – Hipersensibilidad I II III IV
- 57.
- 58. I. Clasificación yestructura - Microscópica y macroscópica - Metabólica - Antígenos - Genotipo Murray, 2021
- 59. I. Clasificación yestructura
- 60. I. Clasificación yestructura Murray, 2021
- 61. I. Clasificación yestructura Estructura de membrana bacteriana Estructura Composición química Funciones MEMBRANA PLASMÁTICA Fosfolípidos, proteínas y enzimas Contención, generación de energía, potencial del membrana y transporte PARED CELULAR Bacterias Gram-positivas Peptidoglicano Múltiples capas de cadenas de glicano de GlcNAc y MurNAc entrecruzadas por un puente peptídico Forma y estructura celular, protección del ambiente y el complemento del hospedador Ácido teicoico Fosfato de poliribitol o fosfato de glicerol entrecruzado con peptidoglicano Fortalece la pared celular; secuestro de iones de calcio Ácido lipoteicoico Ácido teicoico ligado a lípidos Activador de protecciones innatas del huésped Proteínas Unido al peptidoglicano o al ácido teicoico Evasión del sistema inmune, adhesión, etc.
- 62. I. Clasificación yestructura Estructura de membrana bacteriana Estructura Composición química Funciones PARED CELULAR Bacterias Gram-negativas Peptidoglicano Versión más delgada de la que se encuentra en las bacterias grampositivas Forma y estructura celular Espacio periplasmático Proteínas y lipoproteínas Enzimas encargadas de transporte, degradación y síntesis Membrana externa Fosfolípidos, LPS, proteínas, enzimas Forma y estructura celular, protección del ambiente hospedador Proteínas Canal de porinas Secretoras (I-V) Lipoproteína Permeabilidad de pequeñas moléculas hidrofílicas; restringe algunos antibióticos Penetra y transporta proteínas a través de las membranas, incluidos factores de virulencia Enlaza la membrana externa al peptidoglicano LPS (lipopolisacárido) Lípido A, polisacárido central, antígeno O Estructura de membrana exterior; Protección de barrera, potente activador de respuestas innatas del huésped Fosfolípidos Ácidos grasos saturados Estructura
- 63. I. Clasificación yestructura Estructura de membrana bacteriana Estructura Composición química Funciones CÁPSULA Polisacáridos o polipéptidos (Anthrax) Actividad antifagocítica BIOFILM Polisacáridos Protección de la colonia frente al medio, antimicrobiano, activa respuesta inmunitaria PILI Pilin, adhesinas adhesión Adherencia, pili sexual FLAGELO Motor de proteínas, flagelinas Movimiento, quimiotaxis PROTEÍNAS Proteína M (estreptocócica) Evasión inmune, adhesión, enzimáticas, etc
- 64. I. Clasificación yestructura Murray, 2021
- 66. I. Clasificación yestructura Penicilinas Vancomicin a Bacitracina Murray, 2021
- 67.
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- 69. IV. Mecanismos detransferencia genética - Plásmidos - episomas - Bacteriófagos - Lambda - Transposones - islas de patogenicidad - Genotipo
- 71. V. Mecanismos depatogenicidad at https://www.biointeractive.org/classroom-resources/how- pathogenic-e-coli-infection-begins and https://www.biointeractive.org/classroom-resources/how- salmonella-infection-begins.)
- 76. VI. Agentes antibacterianos -Espectro antibacterial - Antibiótico bacteriostático - Antibiótico bactericida - Concentración mínima inhibitoria - Concentración mínima bactericida - Combinación antibiótica - Sinergismo antibiótico - Antagonismo antibiótico - Β-Lactamasas
- 77.
- 78. Antibiótico Espectro/ Bactericida/ bacteriostático Componentes básicos/absorción Mecanismos de acción Resistencia/ Tipos Ejemplos/ Sinergia GlicopéptidosVancomicina Lipopéptidos Daptomicina Polipéptidos Bacitracina Polimm Aminoglucósidos Tetraciclinas Gliciclinas Oxazolidinonas Cloranfenicol Macrólidos Clindamicina Estreptograminas Quinolonas Rifampicina/ Rifabutin Metronidazol