2. UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA
PROFESIONAL DE MEDICINAHUMANA
“Dr.WilfredoErwinGardini Tuesta”
ACREDITADA POR SINEACE
RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV
SEDE:LIMA; LOCAL: SAN BORJA
DOCENTES : SAEZ FLORES, GLORIA
SAMILLAN ORTIZ DENNYS
ARANGUREN SANDOVAL YUDY
Aislamiento y estudio de virus
3. Competencia:
• Al concluir la práctica el alumno es capaz de valorar la
importancia de los métodos virológicos como en el aislamiento
de virus en huevos embrionados, animales de experimentación,
cultivos celulares y cortes histológicos.
4. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO
VIROLÓGICO
✔ Los virus son los parásitos más pequeños, en general miden entre
0,02 y 0,3 μm, aunque recientemente se han descubierto varios virus
grandes de hasta 1 μm de longitud (megavirus, pandoravirus).
✔ Los virus dependen completamente de las células donde habitan
(bacterianas, vegetales o animales) para reproducirse.
✔ Los virus tienen una cubierta externa de proteínas y a veces lípidos,
un núcleo de RNA o DNA y, a veces, enzimas necesarias para los
primeros pasos de la replicación viral.
5. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO
VIROLÓGICO
✔ Los virus son los parásitos más pequeños, en general miden entre
0,02 y 0,3 μm, aunque recientemente se han descubierto varios virus
grandes de hasta 1 μm de longitud (megavirus, pandoravirus).
✔ Los virus dependen completamente de las células donde habitan
(bacterianas, vegetales o animales) para reproducirse.
✔ Los virus tienen una cubierta externa de proteínas y a veces lípidos,
un núcleo de RNA o DNA y, a veces, enzimas necesarias para los
primeros pasos de la replicación viral.
6. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO
VIROLÓGICO
Se emplean métodos directos para el diagnóstico de los virus, y dado que estos solo se replican en el interior de las
células vivas, para su cultivo in Vitro es necesario el empleo de métodos especiales en el laboratorio de virología,
tales como:
1.- Cultivos tisulares de humanos o animales. La mayoría de los virus pueden multiplicarse en cultivo de
células apropiadas.
2.- Embriones de pollo (membrana corioalantoidea, cavidad amniótica, cavidad alantoidea y saco vitelino).
3.- Animales de laboratorio (ratones lactantes, Hámsters, monos)
4.- Serología o demostración de anticuerpos frente al virus.
5.- Demostración directa del virus o de antígenos víricos a partir de frotis de las lesiones.
6.- Detección del ácido núcleico
7. METODOS DE DIAGNOSTICO VIROLÓGICO:
A. USO DE LOS HUEVOS EMBRIONADOS PARA LA PROPAGACION DE LOS
VIRUS.
• Muchos de los virus patógenas para el hombre y los animales pueden propagarse en las
células vivas de las membranas extraembrionarias o en el propio embrión de huevos
embrionados de gallina.
• Estas técnicas fueron introducidas por Footdpasture y col., en 1931, y desde entonces
están siendo ampliamente usadas.
• Las vías de inoculación y la edad del embrión a usar dependen del agente viral que va a
ser inoculado.
MARCO TEORICO:
8.
9. El embrión y sus membranas ayudan a
proveer la diversidad de células necesarias
para el cultivo de diferentes tipos de virus,
depende sobre todo de varias condiciones:
1.- Vía de inoculación
2.- Edad del embrión
3.- Periodo de tiempo de incubación
4.- Volumen y dilución del inóculo utilizado
5.- Temperatura de incubación
6.- El estado inmune de la parvada por el
cual los embriones son obtenidos
10.
11.
12. IMPORTANCIA DE LA INOCULACION POR LAS
DIFERENTES VIAS
• Saco vitelino: es utilizada para el aislamiento
y propagación del virus de encefalomielitis
aviar.
• Cavidad alantoidea: La inoculación de
embriones en saco alantoideo es utilizada
para el aislamiento y propagación de los
Paramyxovirus, Myxovirus y Coronavirus.
• Membrana corioalantoidea (MCA): La
inoculación de embriones en MCA es utilizada
para el aislamiento y pases de Poxvirus y
virus Herpes.
• Saco amniótico: La inoculación de embriones
en saco amniótico es utilizada para el
aislamiento inicial de los Myxovirus.
14. Ovoscopeo:
• El ovoscopeo consiste en revisar los huevos embrionados contra una
fuente de luz intensa en un ovoscopio, de esta manera mostrara el
embrión, las membranas asociadas y las cavidades del embrión se
observan fácilmente.
15.
16. B.-INOCULACIÓN EN RATONES LACTANTES:
Se utilizaran ratones lactantes y las vías de inoculación serán: Intraperitoneal, Intracraneal,
Subcutánea y Nasal.
C.- OBSERVACIÓN DE LÁMINAS COLOREADAS:
Observar la presencia de cuerpos anormales intracelulares denominados cuerpos de inclusión (Efecto citopatico). Estas
estructuras pueden encontrarse en el núcleo o en el citoplasma y su localización es específica de la enfermedad viral. Se
considera estos cuerpos de inclusión (efecto citopatico) como conglomerados de virus asociados a productos de reacción
de la célula infectada.
17. OBSERVACIÓN DE LÁMINAS:
1. Cultivo de células normales, coloreadas con Hematoxilina eosina (HE),
no se tiñe de rosado el citoplasma.
2. Corte histológico de cerebro. Coloración HE. Observar inclusiones
eosinofilas intracitoplasmáticas denominadas corpúsculos de negri.
EFECTOS CITOPATOLOGICOS
CUERPOS DE INCLUSION
