Univ. Fiorella Aline.
Replicación [Libro base: Robertis]
- Posee el modelosemiconservativo
Cadenamolde:laoriginal
Cadenahija:lacopia [se vanagregandolosnucleótidoslibresenel núcleosegúnlanecesidadde la
copia].Puede ser:
- Continua
- Discontinua
Grosor del ADN:2 nm
Cadena continua
Es la que se acerca a la horquilla
1 lugar:se rompenlospuentesde hidrogeno,esteprocesoesmediadoporlaenzimahelicasa,
despuésel DNA se desenrollaentre las2cadenas.
Las proteínasenlazantesacadenasSSB evitanque las cadenasse vuelvanaunir,estocrea múltiples
burbujasde replicaciónalolargo del DNA.Al extremode laburbujase ladenominahorquillade
replicación.
Una vez que lascadenasesténseparadas,laDNA polimerasapuedecomenzaraincluirunanueva
cadena.
DNA Polimerasa:nopone el primernucleótido,nopuede iniciarunanuevacadenasolamente puede
colocar nucleótidosenunacadenapreexistente,laDNA-primasacolocalosprimerosnucleótidosen
la nuevacadena,proporcionaunextremo3’libre ycuandose tiene ese extremolibre actualaDNA
polimerasa.El cebadoresARN.La DNA polimerasaconstruye endirección5’-3’
Un tipodiferente de DNA polimerasareemplazaal cebador[DNA- primasa] porDNA.
Se necesitaunsolocebador
ADN polimerasaIIIδañade los nucleótidos.
Cadena discontinua
Es la que se alejade la horquilla,yaque se sintetizade formaopuesta
1 lugar: RNA Primasa,adhiere al cebadorenel extremo3’,entonceslaDNA polimerasacomienzaa
sintetizarlanuevacadena[estose vuelvearepetir]
Tramos discontinuos=Fragmentosde Okazaki
Una DNA polimerasadiferente cambiael cebadorde RNA porDNA
En cada Fragmentode okazaki se necesitaunnuevocebador[100 fragmentosde okazaki =100
cebadores]
Univ. Fiorella Aline.
El fragmentode okazaki se formapor ADN pol III α [1500 bpen procariotasy 200 en eucariotas]
Ligación:ADN ligasa,enlace fosfodiester
TERMINACION=cuandolas burbujascolisionanunasconotras.
Proceso General
1 . ABRIR
Se desenrollael ADN cuandovienelaORC
ORC: buscael origende replicaciónARS yluegose le une,reclutaa otras proteínas:helicasa,SSB.
2. ARMAR EL CEBADOR
3. ELONGAR LA CADENA
DNA polimerasasintetizaendirección5’-->3’,solamenteenese sentidoyusalacadena 3’-->5’ para
aparear.
Ejemplo:
3’ TATAAT 5’
 DNA polimerasa
5’ ATATTAT 3’
DNA polimerasa
Una burbujatiene 2 horquillas,2continuasy2 discontinuas.
Replisoma
Formadapor:
 Dimerode ADN pol III
 Primosoma[helicasa,primasa]
 Topoisomerasas
- TipoI: ADN yARN [rompe unacadena]
- TipoII o girasa:solamente hayenel ADN [rompe las2 cadenas].Sufuncióneslarelajación
del superenrollamientodelante de lahorquilla.
 El repliconestodalaburbuja
 SSB y abrazaderaestándetrásde la horquila
 HelicasaytopoisomerasaIestándelante de lahorquilla
 Para que ocurra la replicaciónlaciclinaG1+Cdk2 =SPF,estooriginala replicación
 Replicaciondel ADN mitocondrial esunidireccional.
SecuenciaSar: hace que se sujete al eje de H1 cuandose formanlosbuclesolazos
Univ. Fiorella Aline.
Funcionesdel ORC:
 Es necesarioparala activaciónde la replicación
 Evitaque el ADN se redupliqueenfase G2
 Es la “directora”de las proteínasporque lasreclutaal iniciode la fase S para unirse después
a la ARS que estaenlosorígenesde replicación.
Función de la abrazadera:
 Impide el desprendimientode laenzimaperonosu deslizamiento
Construcciónde nucleosomas:
H3 Y H4: se liganentre si mediante laproteínaN1 y entregadasal ADN por el completoproteico
CAF-1
H2A Y H2B: se liganpor la nucleoplasmina,luegose juntanconlasdemásycompletanel octamero
Helicasa: gasta 2 ATP con cada par de basesque va rompiendo
Polimerasas del DNA
Son enzimasque catalizanlareacciónde replicación. Nose mueven.
PolimerasaI:
Catalizael crecimientode lacadenaendirección5’ --> 3’ [rellenaespaciosdejadosenlacadena
retrazaday sustituye al cebador.
ADN polimerasaβenambas cadenas.
PolimerasaII:
Posiblemente interviene enlareparacióndel ADN dañado.
PolimerasaIII:
 Cadenacontinua:poli δ
 Cadenadiscontinua:poli α
Replicacióndel ADN,síntesisde las2 cadenas,lamayor parte.

Replicacion del ADN.

  • 1.
    Univ. Fiorella Aline. Replicación[Libro base: Robertis] - Posee el modelosemiconservativo Cadenamolde:laoriginal Cadenahija:lacopia [se vanagregandolosnucleótidoslibresenel núcleosegúnlanecesidadde la copia].Puede ser: - Continua - Discontinua Grosor del ADN:2 nm Cadena continua Es la que se acerca a la horquilla 1 lugar:se rompenlospuentesde hidrogeno,esteprocesoesmediadoporlaenzimahelicasa, despuésel DNA se desenrollaentre las2cadenas. Las proteínasenlazantesacadenasSSB evitanque las cadenasse vuelvanaunir,estocrea múltiples burbujasde replicaciónalolargo del DNA.Al extremode laburbujase ladenominahorquillade replicación. Una vez que lascadenasesténseparadas,laDNA polimerasapuedecomenzaraincluirunanueva cadena. DNA Polimerasa:nopone el primernucleótido,nopuede iniciarunanuevacadenasolamente puede colocar nucleótidosenunacadenapreexistente,laDNA-primasacolocalosprimerosnucleótidosen la nuevacadena,proporcionaunextremo3’libre ycuandose tiene ese extremolibre actualaDNA polimerasa.El cebadoresARN.La DNA polimerasaconstruye endirección5’-3’ Un tipodiferente de DNA polimerasareemplazaal cebador[DNA- primasa] porDNA. Se necesitaunsolocebador ADN polimerasaIIIδañade los nucleótidos. Cadena discontinua Es la que se alejade la horquilla,yaque se sintetizade formaopuesta 1 lugar: RNA Primasa,adhiere al cebadorenel extremo3’,entonceslaDNA polimerasacomienzaa sintetizarlanuevacadena[estose vuelvearepetir] Tramos discontinuos=Fragmentosde Okazaki Una DNA polimerasadiferente cambiael cebadorde RNA porDNA En cada Fragmentode okazaki se necesitaunnuevocebador[100 fragmentosde okazaki =100 cebadores]
  • 2.
    Univ. Fiorella Aline. Elfragmentode okazaki se formapor ADN pol III α [1500 bpen procariotasy 200 en eucariotas] Ligación:ADN ligasa,enlace fosfodiester TERMINACION=cuandolas burbujascolisionanunasconotras. Proceso General 1 . ABRIR Se desenrollael ADN cuandovienelaORC ORC: buscael origende replicaciónARS yluegose le une,reclutaa otras proteínas:helicasa,SSB. 2. ARMAR EL CEBADOR 3. ELONGAR LA CADENA DNA polimerasasintetizaendirección5’-->3’,solamenteenese sentidoyusalacadena 3’-->5’ para aparear. Ejemplo: 3’ TATAAT 5’  DNA polimerasa 5’ ATATTAT 3’ DNA polimerasa Una burbujatiene 2 horquillas,2continuasy2 discontinuas. Replisoma Formadapor:  Dimerode ADN pol III  Primosoma[helicasa,primasa]  Topoisomerasas - TipoI: ADN yARN [rompe unacadena] - TipoII o girasa:solamente hayenel ADN [rompe las2 cadenas].Sufuncióneslarelajación del superenrollamientodelante de lahorquilla.  El repliconestodalaburbuja  SSB y abrazaderaestándetrásde la horquila  HelicasaytopoisomerasaIestándelante de lahorquilla  Para que ocurra la replicaciónlaciclinaG1+Cdk2 =SPF,estooriginala replicación  Replicaciondel ADN mitocondrial esunidireccional. SecuenciaSar: hace que se sujete al eje de H1 cuandose formanlosbuclesolazos
  • 3.
    Univ. Fiorella Aline. FuncionesdelORC:  Es necesarioparala activaciónde la replicación  Evitaque el ADN se redupliqueenfase G2  Es la “directora”de las proteínasporque lasreclutaal iniciode la fase S para unirse después a la ARS que estaenlosorígenesde replicación. Función de la abrazadera:  Impide el desprendimientode laenzimaperonosu deslizamiento Construcciónde nucleosomas: H3 Y H4: se liganentre si mediante laproteínaN1 y entregadasal ADN por el completoproteico CAF-1 H2A Y H2B: se liganpor la nucleoplasmina,luegose juntanconlasdemásycompletanel octamero Helicasa: gasta 2 ATP con cada par de basesque va rompiendo Polimerasas del DNA Son enzimasque catalizanlareacciónde replicación. Nose mueven. PolimerasaI: Catalizael crecimientode lacadenaendirección5’ --> 3’ [rellenaespaciosdejadosenlacadena retrazaday sustituye al cebador. ADN polimerasaβenambas cadenas. PolimerasaII: Posiblemente interviene enlareparacióndel ADN dañado. PolimerasaIII:  Cadenacontinua:poli δ  Cadenadiscontinua:poli α Replicacióndel ADN,síntesisde las2 cadenas,lamayor parte.